CC BY
16УДК.619:616.98:579.873.21
сравнительное изучение симультанной пробы с разными аллергенами
1М.О.Баратов - кандидат ветеринарных наук, зав. лабораторией туберкулеза;
2О.П.Сакидибиров - кандидат ветеринарных наук, доцент.
1ФГБНУ«Прикаспийский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт», г.Махачкала (367000, Дагестан, Махачкала, ул.Дахаева,88; тел. +7 (722) 68-27-01, e-mail: pznivi@bk.ru).
2ФГБОУ ВО «Дагестанский государственный аграрный университет имени М.М.Джамбулатова», г.Махачкала (367032, г.Махачкала, ул.М.Гаджиева, 180, e-mail: daggau@list.ru).
Неспецифические реакции на туберкулин имеют широкое распространение. Для их дифференциации предложены множество методов, из которых наибольшее признание получил метод симультанной пробы. Однако в доступной литературе очень мало данных по сравнительному изучению пробы с разными аллергенами. В настоящей работе проведен сравнительный анализ симультанной пробы с ППД-туберкулином для млекопитающих и КАМ, с ППД-туберкулином для млекопитающих и ППД-туберкулином для птиц. Опыты проведены на 3782 реагирующих на туберкулин животных (коровы и нетели) в девяти благополучных по туберкулезу хозяйствах во всех природно-климатических зонах республики. По результатам проведенных исследований, в горной зоне в двух хозяйствах достоверность реакции в большей степени была выражена на КАМ, в одном хозяйстве результаты остались неопределенными. В предгорной зоне в одном хозяйстве результаты остались неопределенными в двух реагировали большем увеличением кожной складки на туберкулин для птиц. В равнинной зоне во всех трех хозяйствах реакция была в большей степени выражена на туберкулин для птиц. Таким образом, в хозяйствах, горной зоны, где причиной сенсибилизации у животных выступают представители 4 группы атипичных мико-бактерии, диагностическая значимость симультанной пробы с КАМ выше. В предгорной и равнинной зонах как из объектов внешней среды, так и биоматериала в основном изолируются представители 3 группы атипичных микобактерии, чем и объясняется значимость пробы с ППД-туберкулином для птиц.
клюЧЕВЫЕ СЛоВА: ппД-туберкулин, кам, симультанная проба, неспецифические реакции, дифференциация, атипичные микобактерии.
Проблема туберкулёза продолжает оставаться одной из важнейших в ветеринарной медицине. Основой профилактических и оздоровительных мероприятий при туберкулезе была и остаётся диагностика, с применением ППД-туберкулина для млекопитающих. Одной из основных проблем при этом остаются неспецифические реакции на туберкулин, актуальность которых увеличивается из года в год. Предложены разные методы дифференциации неспецифических реакций. В странах Европейского союза применяют симультанную пробу с туберкулинами для млекопитающих и для птиц. В нашей стране нет единого мнения о диагностической ценности туберкулинов [2.3].
Так, по мнению Н.П.Овдиенко (1990), симультанная проба с ППД-туберкулином для млекопитающих и для птиц показывает диагностическую значимость в хозяйствах, где причиной сенсибилизации макроорганизма выступают микобактерии птичьего вида, а в стадах, где установлена сенсибилизация животных атипичными микобактериями - КАМ [4.7].
Найманов А.Х с соав., считают, что в благополучных по туберкулезу хозяйствах, где установлена сенсибилизация животных атипичными микобактериями,
симультанная проба с ППД-туберкулином для млекопитающих и КАМ обладает большей диагностической значимостью, чем проба с туберкулином для млекопитающих и для птиц [6].
Хорошо зарекомендовала себя, по мнению О.В. Мартма, симультанная проба с туберкулином для млекопитающих и для птиц, в благополучных по туберкулезу хозяйствах [4].
В условиях республики Саха (Якутия), по данным Г.Г.Спиридоновой, проба с туберкулинами для млекопитающих и для птиц обладает хорошими дифференцирующими свойствами, чем с туберкулином для млекопитающих и КАМ [8].
В соответствии с новым наставлением, утвержденным в 2002 году, в России для дифференциации неспецифических реакций применяется симультанная проба с туберкулинами для млекопитающих, для птиц и КАМ.
Следует сказать, что проблема неспецифических реакций особо актуальны в благополучных, а также оз-доравливаемых хозяйствах.
В республике Дагестан проявление неспецифических реакций в благополучных хозяйствах отмечается
не зависимо от вертикальной зональности, но с заметным увеличением количества реагирующих в равнинной зоне - 3,79%, против - 2,64% в предгорной и 1,98% - в горной зонах [1].
Оставаясь одной из основных проблем при диагностике туберкулеза, указанные реакции, представляют серьезную угрозу и создают большие проблемы в реализации комплекса мероприятий по профилактике и ликвидации туберкулеза, в связи, с чем возникает настоятельная необходимость применять целый комплекс методов для их дифференциации [4].
С учетом изложенного, актуально изыскание наиболее действенных методов и схем, для дифференциации неспецифических реакций на туберкулин как в общественном, так и в частном секторе, что в конечном итоге позволить значительно сократить неоправданный убой здоровых животных и снизить размеры экономического ущерба.
Цель исследований - определение диагностической ценности симультанной пробы с ППД-тубер-кулином для млекопитающих и КАМ, с ППД-туберку-лином для млекопитающих и ППД-туберкулином для птиц в благополучных по туберкулезу хозяйствах КРС в республике Дагестан.
Материалы и методы. Аллергические исследования проводили в соответствии с «Наставлениями по проведению симультанной аллергической пробы с применением ППД-туберкулина для млекопитающих, ППД-туберкулина для птиц и комплексного аллергена из атипичных микобактерии (КАМ) при диагностике туберкулеза у животных».
Туберкулин вводили внутрикожно с помощью безыгольного инъектора на бесшерстный участок средней трети шеи справа и слева. Учет и оценку реакции поводили через 72 часа. Реагирующими считали животных с утолщением кожной складки на 3 мм и более.
Диагностическую ценность аллергенов изучали на животных, где систематически при плановых исследованиях выявлялись реагирующие на туберкулин животные, однако последующими исследованиями туберкулез не подтверждался.
Исследование провели в девяти благополучных по туберкулезу хозяйствах во всех природно-климатических зонах (по 3 хозяйства в зоне), где причиной сенсибилизации выступали атипичные микобактерии. В горной зоне (СПК «Рассвет», СПК «Чапаева», СПК «Ру-гуджинский»); в предгорной зоне (СПК «Шуринский», СПК «Уллубий», КФХ «Казбековский»); и в равнинной зоне (СПК «Каспий», КФХ «Сулак», СПК «Львовский»).
Исследование проводили симультанно с ППД-ту-беркулином для млекопитающих и КАМ, через 45-50 дней пробу повторяли с ППД-туберкулином для млекопитающих и ППД-туберкулином для птиц. Всего
исследовано 3782 головы крупного рогатого скота (коровы и нетели).
Результаты исследований. В СПК «Рассвет» при исследовании в симультанной пробе с ППД-ту-беркулином для млекопитающих и КАМ, 116 голов КРС, выявлено 22 (18,10%) реагирующих на туберкулин животных, из которых с большей интенсивностью реакции на ППД-туберкулин для млекопитающих, (со знаком «+») - 3, с меньшей реакцией (со знаком «-») - 18, с одинаковой реакцией (со знаком «=») - 1. Достоверность реакции в большей степени выражена на КАМ.
При вторичном исследовании 115 животных симультанной пробой с ППД-туберкулином для млекопитающих и ППД-туберкулином для птиц, выявлено 23 (19,82%) реагирующих животных. Из них со знаком «+» - 9, со знаком «-» - 12, со знаком «=» - 2 головы Результаты симультанной пробы остались неопределенными.
В СПК «Чапаева» исследовали 185, выявлено 36 (19,45%) реагирующих на туберкулин животных. Из них со знаком «+» - 13, со знаком «-» - 19, со знаком «=» - 4. Результаты симультанной пробы с КАМ остались неопределенными.
При повторном исследовании 185 голов, выявлено 35 (18,91%) из них реагирующих со знаком «+» - 18, со знаком «-» - 16, и со знаком «=» - 1 коров. Результаты остались неопределенными.
В СПК «Ругуджинский» исследовали 265 животных. В симультанной пробе с КАМ выявлено 32 (12,07%) реагирующих, со знаком «+» - 5, со знаком «-» - 24, со знаком «=» - 2 голов. Реакция в большей степени выражена на КАМ.
При исследовании пробой с ППД-туберкулином для млекопитающих и для птиц выявлено 36 (13,58%) реагирующих, из них положительно со знаком «+» -7, отрицательно со знаком «-» - 21, со знаком «=» - 8 голов. Результаты симультанной пробы остались неопределенными.
В предгорной зоне в СПК «Шуринский» исследовали 198 голов, выявили реагирующих 42 (21,21%). Из них со знаком «+» - 15, со знаком «-» - 23, со знаком «=» - 4 животных. Результаты остались неопределенными.
При повторном исследовании 197 коров с тубер-кулинами для млекопитающих и для птиц выявили 44 (22,22%) реагирующих, из них со знаком «+» - 9, со знаком «-» - 24, со знаком «=» - 11. Результаты остались неопределенными.
В СПК «Уллубий» было исследовано 215 коров, выявили 38 (17,67%) реагирующих. Положительно, со знаком «+» - 6, со знаком «-» - 20, со знаком «=» - 12. Результаты остались неопределенными.
При исследовании с туберкулинами для млекопитающих и для птиц выявили 40 (18,60%) реагирующих. Их них со знаком «+» - 5, со знаком «-» - 29, со знаком «=» - 6. Достоверность реакции выражена в большей степени на ППД-туберкулин для птиц.
В КФХ «Казбековский» исследовали 198 коров, выявили реагирующих 39 (19,69%) животных. Из них (на ППД-туберкулин) со знаком «+» - 7 голов, (на КАМ) со знаком «-» - 22, «одинаково» со знаком «=» - 10. Результаты остались неопределенными.
При повторном исследовании 196 голов, выявлено 40 (20,40%) реагирующих. Из них (на ППД-туберкулин для млекопитающих) со знаком «+» - 5, (на ППД-тубер-кулин для птиц) со знаком «-» - 29, и со знаком «=» - 6 голов. Реакция достоверно выражена на ППД-туберку-лин для птиц.
В равнинной зоне в СПК «Каспий», исследовали 256 голов, выявили реагирующих 67 (26,16%). Из них со знаком «+» - 14, со знаком «-» - 33, со знаком «=»
- 20. Результаты симультанной пробы с ППД-туберку-лином для млекопитающих и КАМ остались неопределенными.
При повторном исследовании 251 головы, выявили 64 (25,49%) реагирующих, из них со знаком «+» - 7, со знаком «-» - 48, со знаком «=» - 9. Таким образом, реакция достоверно выражена на ППД-туберкулин для птиц.
В КФХ «Сулак» исследовали 184 животных, выявили 54 (29,34%) реагирующих. Из них на ППД туберкулин для млекопитающих - 12, на КАМ - 29, одинаково
- 13 голов. Результаты остались неопределенными.
При вторичном исследовании 182 голов, выявили 52 (28.57%) реагирующих. На ППД-туберкулин для млекопитающих - 9, на ППД-туберкулин для птиц - 38, одинаково - 5. Достоверность реакции выражена в большей степени на ППД-туберкулин для птиц.
В СПК «Львовский» исследовали 278 голов, выявили 72 (25,89%) реагирующих. Из них со знаком «+»
- 14, со знаком «-» - 38, со знаком «=» - 20. Результаты остались неопределенными.
При исследовании с туберкулинами для млекопитающих и для птиц, выявили 75 (26,97%) реагирующих. Из них со знаком «+» - 11 со знаком «-» - 52, со знаком «=» - 12 голов. Реакция выражена достоверно на ППД туберкулин для птиц.
Полученные результаты исследований показывают, что в благополучных по туберкулезу хозяйствах горной зоны, где от реагирующих на туберкулин животных в основном изолируются атипичные микобактерии IV гр. (M.phlei, M.smegmatis, M.fortuitum) в 73,4%, и II гр. (M. scrofulaceum) - 3,1%, большей диагностической значимостью и дифференцирующими свойствами обладает симультанная проба с ППД-ту-
беркулином для млекопитающих и КАМ.
В хозяйствах предгорной и равнинной зонах, где из объектов внешней среды, а также из биоматериала в основном изолируются представители III группы атипичных микобакетрий (M.avium intracellulare) -64,7%, IV группы (M.smegmatis, M.fortuitum) - 19,8%, и в незначительных количествах - представители II группы (M.scrofulaceum) - 3,8%, диагностическая значимость симультанной пробы с ППД-туберкули-ном для млекопитающих и ППД-туберкулином для птиц, выше.
Следует отметить, что на территории предгорной и равнинной зон республики расположены многочисленные птицеводческие комплексы, принадлежащие частным и коллективным хозяйствам. На наш взгляд, такое соседство выступает основной причиной, способствующей постоянной циркуляции комплекса M.avium intracellulare как в объектах внешней среды, так и в организме животных.
заключение. Реакции на туберкулин у животных в благополучных хозяйствах выявляются независимо от вертикальной зональности. Из общего числа исследованных животных (3782), количество реагирующих составило 811 (21,44%) в том числе: в горной зоне -16,26%, предгорной -19,98% и равнинной - 26,87%.
В хозяйствах горной зоны, где сенсибилизация животных обусловлена в основном представителями IV-гр. атипичных микобактерий, симультанная проба с ППД-туберкулином для млекопитающих и КАМ, намного превосходит по чувствительности и диагностической значимости пробу с ППД-туберкулином для млекопитающих и ППД-туберкулином для птиц. В горной зоне исследовано 1131 животное, реагировало 184 (16,26%). Из них на ППД-туберкулин для млекопитающих 55 (29,9%), на КАМ 61 (33,15%), на ППД-туберкулин для птиц - 49 (26,63%), на оба аллергена - 18 (9,78) голов.
В предгорной зоне исследовано 1216 голов, выявлено реагирующих 243 (19,98%), в том числе на ППД-туберкулин для млекопитающих - 57(23,45%), на КАМ - 65 (26,74%), на ППД-туберкулин для птиц - 82 (33,74%), на оба аллергена - 49 (20.16%).
В хозяйствах равнинной зоны исследовано 1429 животных, выявлено реагирующих 384 (26,87%). Из них на ППД-туберкулин для млекопитающих 67 (14,44%), на КАМ - 90 (23,43%), на ППД-туберкулин для птиц - 138 (35,93), одинаково на оба аллергена -79 (20,57%).
Результаты остались неопределенными, в горной зоне в одном хозяйстве с КАМом, в трех хозяйствах с ППД-туберкулином для птиц. В предгорной зоне в трех с КАМом, и в одном с туберкулином для птиц, и в трех хозяйствах с КАМом в равнинной зоне.
Литература
1. Баратов, М.О. Эпизоотические особенности и усовершенствование методов диагностики туберкулеза крупного рогатого скота в условиях Дагестана: автореф. дис ... канд. вет. наук / М.О.Баратов. - Ставрополь, 2016.
- 195 с.
2. Методические наставления по проведению исследований при микобактериозах животных / М.М.Гулюкин, А.Х.Найманов, Н.П.Овдиенко [и др.]; ГНУ ВНИИЭВ им. Я.Р.Коваленко. - М., 2012. - 85 с.
3. Донченко, А.С. Диагностика туберкулеза КРС / А.С.Донченко, Н.П.Овдиенко, Н.А.Донченко. - Новосибирск: Изд-во «Цэрис», 2004. - 306 с.
4. Ионина, С.В. Взаимосвязь циркуляции атипичных микобактерий туберкулёза во внешней среде с проявлением туберкулиновых реакций у сельскохозяйственных животных / С.В.Ионина, Н.А.Донченко, А.С.Донченко // Инновации и продовольственная безопасность. - 2016. - № 1 (11). - С. 41-44.
5. Мартма, О.В. Парааллергические реакции на туберкулин и их дифференциация / О.В.Мартма, К.К.Тяхнас // Ветеринария. - 1978. - № 4. - С. 35-38.
6. Найманов, А.Х. Аллергическая диагностика микобактериальных инфекций крупного рогатого скота: автореф. дис. ... д-ра вет. наук / А.Х.Найманов. - М., 1993. - 29 с.
7. Овдиенко, Н.П. Эпизоотология и диагностика туберкулеза крупного рогатого скота в условиях интенсификации животноводства: автореф. дис. ... д-ра вет. наук / Н.П.Овдиенко. - М., 1990. - 49 с.
8. Спиридонова, Г.Г. Значение некоторых диагностических тестов в дифференциации туберкулиновых реакций / Г.Г.Спиридонова // Научное обеспечение ветеринарных проблем в животноводстве. - Новосибирск, 1999.
- С. 273-275.
comparative study of simultaneous test with
DIFFERENT ALLERGENs
1Baratov M.O. - Candidate of Veterinary Sciences; 2Sakidibirov O.P. - Candidate of Veterinary Sciences.
1Caspian Zonal Research Veterinary Institute, Makhachkala (e-mail: pznivi@bk.ru).
2Dagestan State Agrarian University named after M.M.Dzhambulatov, Makhachkala (e-mail: daggau@list.ru).
Nonspecific reactions to tuberculin are widespread. For their differentiation, a number of methods have been proposed, of which the method of simultaneous assay has received the greatest recognition. However, in the available literature there is very little data on the comparative study of the sample with different allergens. In the present work, a comparative analysis of the simultaneous test with PPD-tuberculin for mammals and KAM, with PPD-tuberculin for mammals and PPD for tuberculin for birds was carried out. Experiments were carried out using 3782 animals (cows and heifers) which responded to tuberculin in nine tuberculosis-free farms in all natural and climatic zones of the republic. The studies showed that in two highland farms the reliability of the reaction was more expressed in CAM, in one farm the results remained uncertain. In the foothill farm the results remained undefined in 2 positively reacted animals with a larger throbbing in the skin fold on tuberculin for birds. In the three fiat farms, the reaction was more pronounced with tuberculin for birds. Thus, in the mountain farms where representatives of the 4 group of atypical mycobacteria caused the animal sensitization, the diagnostic significance of the simultaneous test with CAM was higher. In foothill and fiat areas the isolates of 3 groups of atypical mycobacteria were mainly isolated in the environment and biomaterial, that explains the significance of the test with PPD-tuberculin for birds.
KEYWoRDs: ppD-tuberculin, OAM, simultaneous test, nonspecific reactions, differentiation, atypical mycobacteria.
References
1. Baratov, M.O. Epizooticheskie osobennosti i usovershenstvovanie metodov diagnostiki tuberkuleza krupnogo rogatogo skota v usloviyah Dagestana.[Epizootic features and improvement of methods for bovine tuberculosis detection in Dagestan]: Abstract from thesis for Candidate of Veterinary Medicine / M.O.Baratov. - Stavropol, 2016. - 195 p.
2. Gulyukin, M. M. Metodicheskie nastavleniya po provedeniyu issledovanij pri mikobakteriozah zhivotnyh [ Methodical instructions for conducting studies in animal mycobacteriosis]. / A.H.Najmanov, N.P.Ovdienko, V.A.Vedernikov [et al.]; Ya.R.Kovalenko All-Russian Research Institute of Experimental Vterinary. - Moscow, 2012. - 85 p.
