ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ ■
И.Е. Филиппова, Н.Б. Колесникова, Л.П. Осипова, В.А. Громова
Кемеровская государственная медицинская академия, Кемеровский областной перинатальный центр, г. Кемерово
СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ МИКРОФЛОРЫ РОЖЕНИЦ И НОВОРОЖДЕННЫХ ДЕТЕЙ Г. КЕМЕРОВО
Изучена микрофлора влагалища у 80 рожениц и проведено сравнительное исследование микробиоценозов 31 пары мать - новорожденный в 1-е сутки после рождения. Установлено, что микрофлоре влагалища рожениц и аутофлоре кожи и глаз новорожденных присущи региональные особенности.
Ключевые слова: микрофлора, роженицы, новорожденные.
Microflora of vagina among 80 parturients is studied and comparative research on microbioc-tnoses of 31 pairs mother - newborns within 24 hours afthe delivery is conducted. It is established that regional specialties inhere in microflora of vagina of parturients and autoflora of skin and eyes of 1-day old infants.
Key words: microflora, parturients, newborn infants.
К настоящему времени сложились определенные научные представления о человеческом организме, как об экологической нише для множества разнообразных микробов. Характер микрофлоры закладывается в период новорожденности, когда происходит первичная колонизация организма бактериями. После рождения ребенка качественный и количественный состав аутомиклофлоры во многом определяется характером микрофлоры матери [1, 2]. Вместе с тем, в процессе роста новорожденный испытывает доминирующее влияние экзогенных факторов, индивидуальных для каждого географического региона. К таким факторам, в частности, относятся экопатогены, характер питания, геохимическое неблагополучие территорий [3, 4, 5]. Каждая из перечисленных групп вносит свой вклад в процесс формирования аутомикрофло-ры новорожденных детей и придает ей региональные особенности.
Ведущее место в изучении качественного и количественного состава микрофлоры разнообразных биотопов человеческого организма занимает бактериологический метод. Однако нельзя умалять достоинства такого не менее ценного метода, как микроскопия. По мнению ряда авторов, метод микроскопии окрашенных по Граму мазков вагинального секрета и отпечатков с кожи дает возможность получить интегральную оценку микроценоза обследуемых биотопов [6, 7].
Цель данной работы заключалась в бактериос-копическом изучении особенностей микробиоценоза влагалища рожениц, а также аутофлоры кожи и глаз у новорожденных детей г. Кемерово.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Обследование проводили на базе родильного дома № 5 областного перинатального центра г. Кемерово. Было обследовано 80 рожениц и 31 клинически здоровый доношенный новорожденный в 1-е сутки после рождения.
Миклофлору влагалища рожениц, кожи и слизистых у новорожденных детей оценивали с помощью микроскопического метода исследования. У женщин перед родами исследовали вагинальное отделяемое, взятое стерильным ватным тампоном из заднего свода влагалища. У новорожденных детей изучали микрофлору различных биотопов (ло-кусов) — глаз, кожи, наружного слухового канала (НСК) и подмышечных впадин. Детей обследовали сразу после рождения (в первые сутки).
Содержимое глаз и НСК отбирали стерильными ватными тампонами. Нативные материалы, полученные от женщин и новорожденных, наносили на предметные стерильные стекла. Для изучения микробного пейзажа кожи подмышечной области использовали метод мазков-отпечатков [8].
После подсушивания на воздухе и фиксации в смеси Никифорова препараты окрашивали по Гра-му в модификации Синева [9].
РЕЗУЛЬТАТЫ
Была изучена микрофлора влагалища у 80 рожениц. Данные микроскопического исследования представлены в таблице.
Анализ результатов позволил установить, что микробный пейзаж вагинального биотопа представ-
с/^тьи^^ВсТ^узбассе №3(18) 2004
■ СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ МИКРОФЛОРЫ РОЖЕНИЦ И НОВОРОЖДЕННЫХ ДЕТЕЙ Г. КЕМЕРОВО_
Таблица
Микрофлора влагалища рожениц (п = 80)
Частота обнаружения Микроорганизмы _микробов
абс %
Грам+ палочки, 70 87,5
морфологически сходные с:
Lactobacillus 39 48,8
Bifidobacterium 13 16,3
Corynebacterium* 2 2,5
Прочие грам+ палочки 16 20,0
Грамположительные кокки, 57 71,3
из них:
Staphylococcus 12 15,0
Micrococcus 12 15,0
Streptococcus 33 41,6
Грамотрицательные палочки 11 13,8
Грамвариабельные микробы, 38 47,5
из них:
палочки 29 36,3
кокки 9 11,3
Дрожжеподобные грибы 22 27,5
Примечание: * - в том числе и коринеформные бактерии
лен широким спектром морфотипов. Доминирующее положение занимали грамположительные палочки и кокки, частота выявления которых составила 87,5 % и 71,3 %, соответственно.
Ведущее место среди грамположительных палочек занимали лактобациллы (48,8 %), на втором месте — бифидобактерии (16,3 %), значительно реже обнаруживались коринебактерии (2,5 %). В 20 % случаев, при распознавании в мазках грампо-ложительных палочек, интерпретация результатов вызывала затруднение.
Помимо грамположительных палочек, в вагинальном секрете с высокой частотой встречались грамположительные кокки (71,3 %). В эту группу входили стрептококки, микрококки и стафилококки, которые обнаруживали в 41,3 %, 15 % и 15 %, соответственно.
Грамвариабельная микрофлора обнаруживалась в 47,5 % случаев и была представлена преимущественно палочками (36,3 %). Дрожжеподобные грибы и грамотрицательные палочки встречались значительно реже (27,5 % и 13,8 %, соответственно).
Учитывая выявленный нами широкий спектр бактерий вагинального биотопа у рожениц, а также общепризнанное мнение о преемственности микрофлоры матери и новорожденного, мы провели парные исследования. Была обследована 31 пара мать — новорожденный.
В целом микроскопическое исследование микробного пейзажа вагинального биотопа рожениц и локусов у новорожденных позволило получить сходные результаты. Как правило, обнаруженные у рожениц морфотипы бактерий имели представительство в составе микрофлоры новорожденных детей. Так, лактобациллы, стрептококки, микрококки и дрожжеподобные грибы были выявлены у детей, независимо от изучаемого биотопа. Осталь-
ные представители вагинальной флоры у рожениц участвовали в колонизации новорожденных избирательно. Бифидобактерии обнаруживали только в составе аутофлоры глаз. Кожа НСК и подмышечных впадин данным морфотипом не была колонизирована.
Обращает на себя внимание довольно редкая колонизация коринебактериями кожи новорожденных в 1-е сутки. Коринебактерии встречались преимущественно только в составе микрофлоры НСК и глаз.
Сопоставление микрофлоры влагалища матери с аутофлорой новорожденного позволило выявить совпадение морфотипов бактерий, не превышающее 35,5 %. Чаще всего в обследуемых парах регистрировали совпадение в составе микрофлоры при обнаружении лактобацилл и стрептококков. Так, частота обнаружения лактобацилл у матерей и новорожденных совпадала в 35,5 %, 25,8 % и 19,3 % при обследовании глаз, кожи НСК и подмышек, соответственно.
Изучение частоты колонизации стрептококками в обследуемых парах продемонстрировало сходные результаты в 25 % случаев, независимо от исследуемого биотопа новорожденного.
Частота совпадений при обнаружении микрококков у матерей и новорожденных не превышала 3,3 %, 6,5 % и 3,5 % при обследовании глаз, кожи НСК и подмышек, соответственно.
Только в 6,5% и 3,3% источником дрожжепо-добных грибов на коже и слизистой глаз новорожденных в 1-е сутки могли быть матери. При обнаружении каринебактерий были получены сходные результаты.
Обнаружение бифидобактерий в составе микрофлоры глаз новорожденных в 1-е сутки совпадало с присутствием этого морфотипа у матери в единичных случаях (3,3 %). При выявлении бифидобактерий на коже новорожденных, совпадающих случаев не найдено.
Определенный интерес представляли те случаи, когда микроорганизмы обнаруживали только в составе микрофлоры новорожденных детей. В вагинальной микрофлоре эти бактерии методом микроскопии не были найдены. Так, при исследовании микрофлоры глаз, кожи НСК и подмышек у детей в 1-е сутки был обнаружен стафилококк в 35 %, 38 % и 32 % случаев, соответственно.
Стрептококки колонизировали глаза, кожу НСК и подмышек у 26 %, 26 % и 35 % обследованных детей, соответственно.
Частота колонизации кожи микрококками в 1-е сутки жизни новорожденного достигала, в среднем, 33,8 %.
Однако ни в одном из описанных случаев в составе микробиоценоза влагалища матери представителей грамположительных кокков не обнаружено.
Колонизация грамотрицательными палочками кожи НСК и подмышек в 1-е сутки наблюдалась у 26 % и 38 % детей, соответственно. Следует отметить, что для этих случаев характерно массивное
ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ ■
обсеменение биотопов данным морфотипом (> 1000 микробных клеток в поле зрения) [7]. У матерей этих новорожденных грамотрицательные палочки ни в одном случае не обнаружены.
ОБСУЖДЕНИЕ
Анализ результатов исследования микробного пейзажа влагалища рожениц позволил установить, что полученные данные лишь отчасти подтверждают общепринятое мнение о том, что к сроку родов снижается уровень обсеменения родовых путей условно-патогенной микрофлорой, на фоне максимального доминирования лактобацилл, и ребенок рождается в условиях преобладания ацидофильных бактерий [10, 11].
Напротив, в наших исследованиях выявлена низкая частота обнаружения лактобацилл в вагинальных мазках (48,8 %), по сравнению с ранее опубликованными данными об обнаружении указанного морфотипа во влагалище беременных и здоровых женщин репродуктивного возраста в 96 % и 100 % случаев, соответственно [7, 12].
По данным Бочкова И.А. и соавт., бифидобак-терии не могут рассматриваться как микроорганизмы, аутохтонные для слизистой влагалища, поэтому частота выделения этих бактерий у рожениц не превышала 7,2 % [13]. Наши исследования показали, что бифидобактерии обнаруживали у женщин в 2 раза чаще.
Обращает на себя внимание выявленная нами частая колонизация влагалища рожениц стрептококками (41,3 %) и грамвариабельными палочками (36,3 %). Вместе с тем, в доступной литературе мы не встретили сходных результатов. Очевидно, высокая частота обнаружения стрептококков и грам-вариабельных палочек на фоне редкого присутствия лактобацилл может рассматриваться как одна из региональных особенностей вагинальной микрофлоры рожениц.
Существенный интерес представляли результаты, полученные при сопоставлении состава микроценоза влагалищного биотопа матери с микрофлорой различных локусов новорожденного (парные обследования). Полученные данные позволяют сделать заключение о преемственности в составе микрофлоры матери и ребенка. Однако частота совпадающих результатов не превышала 35,5 %, что не до конца согласуется с наблюдениями ряда исследователей о том, что мать новорожденного ребенка является основным источником его микробной колонизации [1, 11]. Действительно, чаще всего матери являлись источником колонизации глаз и кожи новорожденного лактобациллами и стрептококками.
С другой стороны, полученные данные свидетельствуют о частой и обильной колонизации грам-положительными кокками глаз, кожи НСК и подмышек новорожденных детей, матери которых не являлись источниками этих морфотипов. Помимо упомянутых бактерий, также обильно и часто, ко-
жу НСК и подмышек у детей в 1-е сутки колонизировали грамотрицательные палочки. Вместе с тем, в составе вагинальной микрофлоры матери ни в одном из представленных случаев эти микробы не обнаружены.
Анализ полученных результатов позволил установить, что кожа и глаза новорожденных в 1-е сутки активно колонизируются микроорганизмами, источником которых могут являться не только родовые пути. В целом, установленные нами факты согласуются с наблюдениями группы авторов о том, что микробная колонизация новорожденных происходит немедленно после рождения, в результате заноса с тела матери и от окружающих людей [8, 14]. Однако в литературе данных об активной колонизации кожи и глаз новорожденных грампо-ложительными кокками и грамотрицательными палочками нами не найдено. Следовательно, полученные результаты отражают особенности состава аутомикрофлоры новорожденных детей Западно-Сибирского региона на начальном этапе ее формирования.
Таким образом, полученные результаты позволили выявить ряд региональных особенностей в составе микрофлоры влагалища рожениц, а также кожи и глаз новорожденных детей 1-х суток жизни.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
1. Микрофлора влагалища рожениц представлена преимущественно грампололожительными палочками, стрептококками и грамвариабельными палочками, однако, лактобациллы не являются преобладающим морфотипом в составе вагинального биотопа.
2. У новорожденных детей кожа и глаза в 1-е сутки жизни колонизируются преимущественно лактобациллами, грамположительными кокками и грамотрицательными палочками.
3. Формирование аутомикрофлоры новорожденного характеризуется невысокой частотой совпадения с составом вагинальной микрофлоры матери.
4. В составе микробиоценоза кожи и глаз новорожденных детей 1-х суток жизни обнаружены морфотипы бактерий, не имеющие представительства в микробном пейзаже влагалища матерей.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Клинико-бактериологическая и иммунологическая характеристика здоровых новорожденных и их матерей /Р.С. Черкасская, Т.В. Павлова, К.А. Сотникова и др. //Педиатрия. - 1990. - № 4. -С. 21-25.
2. Бочков, И.А. Бактериальная колонизация и сукцессия у новорожденных детей в аспекте проблемы госпитальных инфекций /И.А. Бочков, Н.М. Овчарова //Ж. микробиол., иммун., виру-сол. - 1991. - №и8. - С. 71-74.
3. Сивочалова, О.В. Иммунологические показатели влияния техногенных нагрузок окружающей среды на здоровье беременных
с/^тьи^пяв^^бассе №3(18) 2004
■ СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ МИКРОФЛОРЫ РОЖЕНИЦ И НОВОРОЖДЕННЫХ ДЕТЕЙ Г. КЕМЕРОВО_
женщин и детей первого года жизни /О.В. Сивочалова, Л.А. Дуе-ва, Г.В. Голованева //Ж. акуш. и жен. болезней. - 2003. - Т. LII, вып. 2. - С. 72-76.
4. Щеплягина, Л.А. Закономерности формирования роста и развития здорового ребенка /Л.А. Щеплягина //Рос. педиат. ж. -2003. - № 6. - С . 4-9.
5. Несвижский, Ю.В. Изучение изменчивости кишечного микробиоценоза человека в норме и при патологии /Ю.В. Несвижский //Вестн. РАМН. - 2003. - № 1 - С. 49-53.
6. Факторы риска развития урогенитальной инфекции у женщин /Г.В. Гриненко, К.В. Шалепо, Е.В. Шипицина и др. // Ж. акуш. и жен. болезней. - 2003. - Т. Ы1, вып. 2. - С. 95-100.
7. Оценка чувствительности и специфичности ускоренных методов диагностики бактериального вагиноза /А.Г. Анкирская, В.В. Муравьева, Т.Э. Акопян и др. //Клин. лаб. диагн. - 1997. - № 7. -С. 41-45.
8. Нобл, У.К. Микробиология кожи человека /У.К. Нобл. - М., 1986. -496 с.
9. Лабинская, А.С. Микробиология с техникой микробиологических исследований /А.С. Лабинская. - М.,1978. - 394 с.
10. Goplerud, C.P. Aerobic and anaerobic flora of the cervix during pregnancy and the puerperium /C.P. Goplerud, M.J. Ohm, R.P. Galask //Am. J. Obst. and Gyn. - 1976. - Vol. 126, № 7. - P. 856-865.
11. Иммунологические препараты и перспективы их применения в инфектологии /Под. ред. Г.Г. Онищенко, В.А. Алешкина, В.А. Афанасьева и др. - М., 2002. - 608 с.
12. Микроэкология влагалища. Коррекция микрофлоры при вагинальных дисбактериозах: Уч. пособие / В.М. Коршунов, Н.Н. Володин, Б.А. Ефимов и др. - М., 1999. - 80 с.
13. Колонизационная резистентность симбионтов микрофлоры влагалища рожениц /И.А. Бочков, М. Крави, А.М. Лянная и др. //Эпидемиол. и инф. болезни. - 1997. - № 5. - С. 39-42.
14. Бочков, И.А. Микробная колонизация кожи новорожденных детей при совместном пребывании с матерью в родильных домах /И.А. Бочков, М. Крави, М.С. Шевчук //Ж. микробиол., иммун., вирусол. - 1991. - № 2. - С. 14-17.
ч^ ч^
4-я Международная конференция "КЛИНИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ" 20-22 октября 2004 года
г. Москва, Дом ученых, РАМН - тел. 298-21-52
Департамент госконтроля качества лекарственных средств и медицинской техники МЗ РФ -т/ф 973-18-67
Региональный общественный благотворительный фонд поддержки здравоохранения "Здоровье" - тел. 249-86-01, 249-45-56
Всероссийская научно-практическая конференция "ПРОБЛЕМЫ РИСКА ЗДОРОВЬЮ НАСЕЛЕНИЯ РОССИИ ОТ ВОЗДЕЙСТВИЯ ФАКТОРОВ ВНЕШНЕЙ СРЕДЫ" 21-22 октября 2004 года
г. Москва, ГУ НИИ экологии человека и гигиены окружающей среды им. А.Н. Сысина РАМН -
тел. 246-05-18, 246-35-94; факс 245-03-14, 247-04-28
Департамент Госсанэпиднадзора МЗ РФ - тел. 973-13-95, факс 973-15-49
Конференция
"НОВЫЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ НАПРАВЛЕНИЯ РАЗВИТИЯ ЭНДОВАСКУЛЯРНОЙ ХИУРГИИ В ЛЕЧЕНИИ ВРОЖДЕННОЙ И ПРИОБРЕТЕННОЙ ПАТОЛОГИИ СЕРДЦА И СОСУДОВ"
22 октября 2004 года
г. Москва, НЦССХ им. А.Н. Бакулева РАМН - тел. 414-77-34, факс 414-76-68
Итоговая (ежегодная) научно-практическая конференция ГУ НИИ медицинских проблем Севера СО РАМН "ВОПРОСЫ СОХРАНЕНИЯ И РАЗВИТИЯ ЗДОРОВЬЯ НАСЕЛЕНИЯ СЕВЕРА И СИБИРИ"
Октябрь 2004 года
г. Красноярск, ГУ НИИ медицинских проблем Севера СО РАМН -т/ф (3912) 23-19-63; е-та1!:г1трп@5сп.ги