СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ЖИДКОЙ И ЛИОФИЛИЗИРОВАННОЙ ФОРМ ТЕСТ-РЕАКТИВА СOWTEST® Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

Erlan S. Medetov, postgraduate. Federal Research Centre of Biological Systems and Agrotechnologies of the Russian Academy of Sciences. 29, January 9 St., Orenburg, 460000, Russia, Erlanmedetov29@mail.ru

Timur B. Aldyarov, postgraduate. Federal Research Centre of Biological Systems and Agrotechnologies of the

Russian Academy of Sciences. 29, January 9 St., Orenburg, 460000, Russia, Aldyyarov97@mail.ru

-♦-

Научная статья УДК 619:618

Сравнительная оценка жидкой и лиофилизированной форм тест-реактива ^WTEST®

Ильгизар Исмаилович Богданов, Марина Анатольевна Богданова,

Светлана Николаевна Хохлова, Екатерина Максимовна Зотова

Ульяновский государственный аграрный университет

Аннотация. В статье представлены результаты сравнения иммунологического экспресс-теста на стельность и бесплодие коров COWTEST® в жидкой и лиофилизированной (сухой) формах. Учитывали такие показатели, как проведение анализа (постановка пробы, время реакции), срок проведения диагностики, условия и сроки хранения, транспортировка. Выявили простоту в исполнении, достоверность, диагностическую точность и высокую воспроизводимость результатов анализа. Жидкая форма тест-реактива -менее затратная в изготовлении, проста и удобна в применении, но имеет небольшой срок хранения (12 мес.) и плохую транспортировку. Сухая форма сохраняет на длительное время все свои первичные характеристики и диагностическую эффективность, но технология изготовления энергозатратна и требует дополнительного времени.

Ключевые слова: стельность, бесплодие, диагностика, хорионический гонадотропин, крупный рогатый скот.

Для цитирования: Сравнительная оценка жидкой и лиофилизированной форм тест-реактива COW-TEST® / И.И. Богданов, М.А. Богданова, С.Н. Хохлова [и др.] // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. 2021. № 6 (92). С. 221 -224.

Original article

Comparative evaluation of the liquid and lyophilized forms of the test reagent ^WTEST®

Ilgizar I. Bogdanov, Marina A. Bogdanova, Svetlana N. Khokhlova, Ekaterina M. Zotova

Ulyanovsk State Agrarian University

Abstract. The article presents the results of comparison of the immunological express test for pregnancy and infertility of cows COWTEST® in liquid and lyophilized (dry) forms. We took into account such indicators as the analysis (sample setting, reaction time), the period of diagnostics, storage conditions and periods, transportation. Revealed simplicity in execution, reliability, diagnostic accuracy and high reproducibility of the analysis results. The liquid form of the test reagent is less expensive to manufacture, simple and convenient to use, but has a short shelf life (12 months) and poor transportation. The dry form retains for a long time all its primary characteristics and diagnostic efficiency, but the manufacturing technology is energy-consuming and requires additional time.

Keywords: pregnancy, infertility, diagnostics, chorionic gonadotropin, cattle.

For citation: Comparative evaluation of the liquid and lyophilized forms of the test reagent COWTEST® / I.I. Bogdanov, M.A. Bogdanova, S.N. Khokhlova et al. Izvestia Orenburg State Agrarian University. 2021; 92(6): 221 -224. (In Russ.).

Для диагностики различных физиологических и патологических состояний широко используют лабораторную диагностику, именно она является важнейшим направлением в работе практикующего врача. На протяжении последних лет наблюдается усовершенствование методов и технологий лабораторной диагностики, что делает её более достоверной, не требующей длительных временных и финансовых затрат

[1 - 3].

В работе ветеринарного врача часто возникают вопросы при постановке диагноза на беремен-

ность и бесплодие самок сельскохозяйственных животных. В таких случаях лабораторные методы позволяют определять количественное или качественное содержание гормонов - регуляторов репродуктивной функции в биологических жидкостях (кровь, моча, молоко, амниотическая жидкость и т.п.) [4, 5]. Исследования основаны на периодическом повышении прогестерона в организме беременной самки в течение полового цикла [6 - 8]. Следует отметить, что такие методы, как радиоиммунологический (РИА) и иммуноферментный (ИФА), не получили широко-

го распространения, это связано со сложностью их выполнения:

- по результатам исследований многих учёных [7], оптимальное повышение концентрации прогестерона в сыворотке крови, молоке регистрируют только на 21-е сут. после осеменения. Средняя диагностическая точность составляет 91 %;

- требует наличия специализированной лаборатории, методик по анализу результатов исследований;

- требует использования радиоактивных изотопов (РИА) в качестве индикатора, что представляет опасность для окружающей среды и нуждается в специальном разрешении.

Всё вышеперечисленное привело к поиску более простых и надёжных методов. Постепенно диагностические средства выходят из стен лабораторий и успешно используются как специалистами, так и владельцами животных.

На базе ФГБОУ ВО «Ульяновский ГАУ», ООО «НТЦ «ПромТехЭнерго», ООО «НТЦ «Биотек» разработаны технология и алгоритм применения одностадийного иммунологического экспресс-теста для качественного определения беременности и бесплодия коров - COWTEST® [9 - 11]. Тест основан на наличии или отсутствии в моче хориогонического гонадотропина. Получены данные о его диагностической эффективности. Новизна полученных данных подтверждена патентами на изобретение [12, 13].

Цель и задачи нашей работы: рассмотреть жидкую и сухую формы тест-препарата в сравнительном аспекте; определить преимущества представленных форм.

Материал и методы. Диагностический препарат COWTEST® разработан и был испытан в разных модификациях, а именно в жидкой форме в соответствии с ТУ 9388-002-87749850-2012 и в сухой форме - ТУ 9388-003-87749850-2015. В качестве биоматериала использовалась моча от стельных и бесплодных коров. В одном флаконе содержится одна доза [11].

1. Общая характеристика жидкого экспресс-теста COWTEST® (рис. 1 А): раствор оранжевого цвета, возможно наличие осадка серого цвета, расфасован по 2 мл в стерильные пробирки объёмом 15 мл.

Методика постановки пробы: 12 пробирок с тест-реактивом хорошо встряхнули до полного растворения осадка. В каждую из них внесли мочу от исследуемых коров в количестве 5 - 10 мл, хорошо перемешали.

2. Общая характеристика лиофилизирова-ной (сухой) формы экспресс-теста COWTEST® (рис. 1 Б): сухая масса светло-оранжевого цвета, расфасована по 2 мл в стерильные флаконы объёмом 15 мл.

Методика постановки пробы: в 12 пробирок с лиофилизированной (сухой) формой иммуноло-

гического теста для диагностики беременности и бесплодия коров вносили мочу от исследуемой коровы. Флакон встряхивали до полного растворения осадка, до гомогенной консистенции [14, 15].

Оценивали реакцию визуально. Реакцию считают положительной (корова стельная) в том случае, если содержимое пробирки окрашивается в фиолетовый цвет, с последующим выпадением обильного осадка сиреневого или фиолетового цвета с просветлением надосадочной жидкости.

Реакцию считают отрицательной (корова бесплодная), если содержимое пробирки сохраняет изначальный оранжевый цвет и однородную консистенцию.

Результаты исследования. В результате проведённой диагностики мы получили следующие данные: при исследовании 12 проб мочи коров экспресс-тестом COWTEST® в жидкой и лио-филизированной (сухой) формах в течение 15 мин. содержимое 10 проб окрасилось в бурый цвет, 2 пробы сохранили изначальный вид, т.е. моча не окрасилась, сохранила однородность, оранжевый цвет (рис. 2).

Через 60 мин. была проведена читка реакции:

а) положительная проба: содержимое 10 пробирок окрашено в тёмно-фиолетовый цвет, выпадение обильного осадка в экспресс-диагностикуме как жидкой, так и сухой форм;

б) отрицательная реакция: образцы мочи в 2 пробирках сохранили изначальный цвет и консистенцию (рис. 3).

Сравнивая результаты исследования, представленные в таблице 1, можно утверждать: при проведении диагностических исследований на наличие беременности или бесплодия у коров в пробах мочи с применением экспресс-теста COWTEST® в жидкой и сухой формах существенных отличий не наблюдалось. Качество реакции было одинаковое, анализ прост в исполнении и имеет высокую диагностическую точность.

А

Б

ф

Г

Рис. 1 - Экспресс-тест COWTEST®:

А - жидкая форма; Б - сухая форма

Рис. 2 - Пробы мочи в течение 15 мин.:

1, 3, 4 - пробы с реактивом COWTEST® в жидкой форме; 2, 4, 6 - пробы с реактивом COWTEST® в сухой форме. Пробирки 1, 2, 5, 6 - положительные пробы; 3, 4 -отрицательные пробы

1. Сравнительная оценка жидкой и сухой (ли

Рис. 3 - Пробы мочи в течение 60 мин.:

1, 3, 4 - пробы с реактивом COWTEST® в жидкой форме; 2, 4, 6 - пробы с реактивом COWTEST® в сухой форме. Пробирки 1, 2, 5, 6 - положительные пробы; 3, 4 -отрицательные пробы

шзированой) форм тест-реактива СOWTEST ®

Показатель Форма тест-реактива

жидкая сухая

Постановка пробы Хорошо смешивается с мочой Хорошо смешивается с мочой

Время реакции В течение 60 мин. В течение 60 мин.

Срок проведения диагностики На ранних сроках стельности На ранних сроках стельности

Диагностическая точность 100 % 100 %

Срок хранения 1 год 3 года

Условия хранения Соблюдение температурного режима от +2 °С до +8 °С. Соблюдение температурного режима от +2 °С до +8 °С, допускается хранение при температуре до +25 °С

Транспортировка Потери первичных характеристик, может пролиться, испариться Сохранение первичных характеристик

Выводы. Рассматривая одностадийный иммунологический экспресс-тест для качественного определения беременности и бесплодия коров COWTEST® в жидкой и лиофилизированой (сухой) формах в сравнительном аспекте, мы выявили как преимущества, так и недостатки:

1. Жидкая форма менее затратная в изготовлении, проста и удобна в применении, но имеет недолгий срок хранения (12 мес.) и плохую транспортировку.

2. Сухая форма сохраняет на длительное время все свои первичные характеристики и диагностическую эффективность, но технология её изготовления энергозатратна и требует дополнительного времени.

Литература

1. Жданова И.Н. Комплексный метод лечения акушерской патологии у коров // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. 2020. № 3 (83). С. 230 - 233.

2. Пойманов М.А., Шарафутдинова Е.Б., Жуков А.П. Метаболический статус стельных коров при разных способах воспроизводства // Известия Оренбургского

государственного аграрного университета. 2021. № 2 (88). С. 220 - 224.

3. Родин И.А., Чекрышева В.В. Результаты соче-танного применения Роксацина-М и Мастикорта Фито в гинекологической практике у коров // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. 2020. № 5 (85). С. 161 - 164

4. Хорионический гонадотропин как индикатор беременности коров / И.И. Богданов, М.А. Богданова, Д.А. Васильев [и др.] // Вестник Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии. 2011. № 3 (15). С. 68 - 73.

5. Теория и практика воспроизведения животных / К. Братанов, Х. Бальбеж, З. Вежник [и др.]. М.: Колос, 1984. 272 с.

6. Ранняя диагностика методом ИФА / Г.Н. Бурдов, Е.И. Марасинская, С.А. Селезнев [и др.] // Ветерианрный врач. 2001. № 3. С. 30 - 31.

7. Преображенский О.П. Современные методы диагностики и бесплодия животных // Ветеринария. 2003. № 7. С. 32 - 33.

8. Ранняя диагностика стельности коров голштин-ской породы с помощью иммуноферментного анализа на основе белков, ассоциированных со стельностью / А.А. Жерносенко, А.В. Машнин, К.И. Петров [и др.] // Молочное и мясное скотоводство. 2016. № 1. С. 29 - 31.

9. Богданова М.А., Багманов М.А., Богданов И.И. Иммунологический метод диагностики стельности коров // Фундаментальные и прикладные проблемы повышения продуктивности сельскохозяйственных животных в изменившихся условиях системы хозяйствования и экологии: матер. междунар. науч.-практич. конф. Ульяновск, 2005. С. 149 - 152.

10. Богданова М.А. Багманов М.А., Богданов И.И. Результаты испытания нового метода диагностики стельности // Ветеринарная патология. 2007. № 3 (22). С. 39 - 41.

11. Богданов И.И., Богданова М.А., Фомин А.Н. Иммунологический экспресс-тест на беременность и бесплодие коров // Вестник ветеринарии. 2011. № 4 (59). С. 11 - 12.

12. Пат. на изобретение RU 2298791 С2. Метод иммунологической диагностики беременности и бесплодия коров и тёлок / М.А. Багманов, М.А. Богданова, И.И. Богданов, В.И. Курдюмов; № 2005106491/15; заявл. 09.03.2005; опубл. 10.05.2007.

13. Пат. на изобретение RU 2662926 С1 Способ получения лиофилизированного препарата для иммунологической диагностики беременности и бесплодия коров и тёлок / И.И. Богданов, М.А. Богданова, Д.Н. Хлынов, А.Н. Фомин; № 2017117824; заявл. 22.05.2017; опубл. 31.07.2018.

14. Хлынов Д.Н., Богданов И.И., Богданова М.А. Подбор метода лиофильной сушки биопрепарата для диагностики беременности и бесплодия домашнего скота // Аграрная наука и образование на современном этапе развития: опыт, проблемы и пути их решения: матер. V Междунар. науч.-практич. конф. / Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия; гл. ред. А.В. Дозоров; отв. ред. В.А. Исайчев, И.И. Богданов. Ульяновск, 2013. С. 200 -202.

15. Результаты производственных испытаний лиофи-лизированного биопрепарата для определения беременности и бесплодия коров / Д.Н. Хлынов, И.И. Богданов, М.А. Богданова [и др.] // Зоотехния. 2014. № 10. С. 29 - 31.

Ильгизар Исмаилович Богданов, кандидат ветеринарных наук, доцент. ФГБОУ ВО «Ульяновский государственный аграрный университет имени П.А. Столыпина». Россия, 432017, г. Ульяновск, бульвар Новый Венец, 1, nir-ulgau@yandex.ru

Марина Анатольевна Богданова, кандидат биологических наук, доцент. ФГБОУ ВО «Ульяновский государственный аграрный университет имени П.А. Столыпина». Россия, 432017, г. Ульяновск, бульвар Новый Венец, 1, bm2474@mail.ru

Светлана Николаевна Хохлова, кандидат биологических наук, доцент. ФГБОУ ВО «Ульяновский государственный аграрный университет имени П.А. Столыпина». Россия, 432017, г. Ульяновск, бульвар Новый Венец 1, xoxlova_cveta@mail.ru

Екатерина Максимовна Зотова, соискатель. ФГБОУ ВО «Ульяновский государственный аграрный университет имени П.А. Столыпина». Россия, 432017, г. Ульяновск, бульвар Новый Венец, 1, orangehorse@yandex.ru

Ilgizar I. Bogdanov, Candidate of Veterinary Sciences, Associate Professor, Ulyanovsk State Agrarian University named after P.A. Stolypin. 1, Novy Venets Ave., Ulyanovsk, 432017, Russia, nir-ulgau@yandex.ru

Marina A. Bogdanova, Candidate of Вю^у, Associate Professor. Ulyanovsk State Agrarian University named after P.A. Stolypin. 1, Novy Venets Ave., Ulyanovsk, 432017, Russia, bm2474@mail.ru

Svetlana N. Khokhlova, Candidate of Вю^у, Associate Professor. Ulyanovsk State Agrarian University named after P.A. Stolypin. 1, Novy Venets Ave., Ulyanovsk, 432017, Russia, xoxlova_cveta@mail.ru

Ekaterina М. Zotova, research worker. Ulyanovsk State Agrarian University named after P.A. Stolypin. 1, Novy

Venets Ave., Ulyanovsk, 432017, orangehorse@yandex.ru

-♦-

Научная статья

УДК 636.12: 591.471.32

doi: 10.37670/2073-0853-2021-92-6-224-227

Синдром сближения остистых отростков у спортивных лошадей

Мария Евгеньевна Обухова1, Анна Сергеевна Гусева2, Эльмира Кадычулаевна Гасангусейнова3,

Евгения Сергеевна Латынина1

1 Российский государственный аграрный университет - МСХА имени К.А. Тимирязева

2 Конно-спортивная база ЦСКА

3 Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии - МВА имени

К.И. Скрябина

Аннотация. В статье показаны особенности распространения синдрома сближения остистых отростков у лошадей разных пород и возраста. Рассмотрен вопрос о наличии у лошадей с данным синдромом болевой реакции в области спины. Вынесено предположение о зависимости степени болевых проявлений от степени развития мышц области спины и поясницы, а также от степени проявления самого синдрома сближения остистых отростков. Установлено, что синдром сближения остистых отростков встречается у животных любой породы и возраста, но наиболее предрасположены к нему лошади спортивных помесей (33,4 %) в возрасте 6 лет и старше. Болевой синдром не носит строго специфичного характера и может проявляться как на начальной стадии при небольшой степени поражения в области остистых отростков, так и отсутствовать. Уменьшению болевого синдрома может способствовать хорошо развитая мускулатура спины у лошадей с небольшой степенью сближения остистых отростков.