CC BY
15тему //Токсикологический вестник, 1998. — № 6. — С. 9-15.
9. Ильин В.Б. Тяжелые металлы в системе почва-растение. — Новосибирск: Наука. Сиб.отд., 1991. — 148 с.
10. Осипов А.Н., Рязанов И.А., Сыпин В.Д. Изменения структурно-функциональных показателей клеток системы крови мышей при длительном воздействии свинца и кадмия //Токсикологический вестник, 2001. — № 5. — С. 2-5.
11. СанПиН 2.1.4.1074-01.Питьевая вода и водоснабжение населенных мест. Гигиенические требования к качеству воды централизованных систем питьевого водоснабжения. Контроль качества. — М: Минздрав России, 2002. — С. 15-17.
12. Шеина Н.И., Буданова Е.В. Оценка микроэкологического дисбаланса кишечника животных при воздействии промышленных микроорганизмов в токсиколого-гигиенических исследованиях// Токсикологический вестник, 2005. - № 5. - С. 2327.
13. Фролов Ю.П. Математические методы в биологии. ЭВМ и программирование. - Самара: Изд-во СамГУ, 1996. - 265 с.
14. Silver S, Phung Le T. Bacterial heavy metal resistance: new surprises//Annu. Rev. Microbiol., 1996. - V. 50. - P. 753-789.
15. Telisman S., Cvitkovic P., Jurasovic J. et al. // Environmental Health Perspectives, 2000. - V. 108 (1). - P. 45-50.
Материал поступил в редакцию 25.10.06.
Ye.A.Belozerova, N.I.Potaturkina-Nesterova, Ye.S.Klimov
INFLUENCE OF LONG INFLOW OF COPPER, ZINC AND LEAD SALTS ON MICROECOLOGICAL STATE
OF THE LARGE INTESTINE IN EXPERIMENT
Institute of Medicine, Ecology and Physical Culture, Ulyanovsk State Universty
Studies were carried out on microbiocenosis of the large intestine erythrocyte, sedimentation rate (ESR) in blood of white mice long exposed to copper ions (10 mg Cu2+/), zinc (50 mg Zn2+/l) and lead (0.3 mg Pb2+/l) respectively with drinking water within 90 days. Dysbiotic changes in microflora of the large intestine and some other physiological disturbances were found out in all three groups of animals. It was shown that a chronic intoxication by copper ions is followed up by alterations of the blood picture such as hemolysis of erythrocytes, increase of ESR. The magnitudes of indicators under investigation in the group of mice which took up lead with drinking water approximated to control magnitudes by the 90th day.
УДК 615.917'551.1
Е.В.Бубенкова
СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ТОКСИЧНОСТИ НЕКОТОРЫХ ПРОИЗВОДНЫХ АНИЛИНА
ОАО НИИ «Ярсинтез», Ярославль
Проведено сравнительное токсикологическое исследование 5-ти производных анилина. Рекомендованы гигиенические нормативы для воздуха рабочей зоны.
Ключевые слова: производные анилина и п-толуидина, токсичность.
Введение. В настоящее время различные производные анилина нашли широкое применение в промышленности. Достаточно перспективными среди них являются метиланилины (толуиди-ны). Особенно актуально использование некоторых производных этих соединений в органическом синтезе в качестве ускорителей реакции полимеризации аминного типа. Несмотря на достаточно хорошо изученную токсичность анилина и п-толуидина [1—6] сведения о токсических свойствах данных производных отсутствуют.
Цель исследования состояла в изучении токсичности новых производных анилина, выявлении закономерностей токсического действия в ряду структурно близких соединений этого типа и разработки рекомендаций по нормированию в воздухе рабочей зоны.
Материалы и методы исследования. Объектом исследования послужили 5 производных анилина: фениламиноэтанол (ФАЭ), фениламино-диэтанол (ФАДЭ), дигидроксиэтил-п-толуидин (ДГЭПТ), дигидроксипропил-п-толуидин
Таблица 1.
Физико-химические свойства свойства исследуемых производных анилина
Вещество Эмпирическая формула Структурная формула Агрегатное состояние Молекулярная масса Ткип., С Тпл., °С
ОН /
ФАЭ c8huo жидкость 137,18 280
он /
ФАДЭ Qoh15no2 он твердое вещество 181,23 59
он /
ДГЭПТ cuh17no2 он твердое вещество 195,26 41
у—он
ДГППТ C1A1NO2 ^—он твердое вещество 223,32 75
ДМПТ c9h13n Н!С ^ \Н) жидкость 135,21 211
(ДГППТ) и диметил-п-толуидин (ДМПТ). Исследуемые вещества являются вторичными или третичными ароматическими аминами содержат в радикалах (кроме ДМПТ) одну или две гидроксильные группы.
Физико-химические свойства исследуемых соединений представлены в табл. 1.
Эксперимент проводили на беспородных крысах-самцах массой 200—250 г, белых мышах-самцах массой 20—25 г, морских свинках массой 400-450 г и кроликах массой 2300-2800 г. Животных содержали в стандартных условиях вивария со свободным доступом к воде и пище.
Острую токсичность веществ определяли путем внутрижелудочного введения исследуемых
веществ крысам и мышам. Для оценки кожно-резорбтивного действия использовали методику Александрова.
Исследование местно-раздражающего и сенсибилизирующего действия проводили на морских свинках. Ингаляционную затравку осуществляли статическим методом на самцах белых мышей при экспозиции 2 часа.
Оценку кумулятивного действия проводили на белых крысах по схеме Ю.С.Кагана и В.В.Станкевича и по схеме Лима и соавт.
Содержание в крови гемоглобина определяли с помощью гемоглобинометра ГФ-3, лейкоциты и эритроциты подсчитывали в камере Горяева. Содержание хлоридов в моче определяли титро-
Таблица 2
Параметры токсичности и опасности ФАЭ, ФАДЭ, ДМПТ, ДГЭПТ и ДГППТ
Параметр Производные анилина
ФАЭ ФАДЭ ДГЭПТ ДГППТ ДМПТ
DL50, мг/кг, в/ж: крысы-самцы мыши-самцы 2830 634 4112 1000 970 650 700 980 139
Коэффициент видовой чувствительности 4,46 4,11 1,49 - 7,05
C cum 5,8 10,2 - - 2,5
Кожно-резорбтивное действие слабо выражено не выявлено не выявлено не выявлено резко выражено
Местно-раздражающее действие: - кожа - слизистая оболочка глаза не обладает умеренно раздражает не обладает умеренно раздражает слабо выражено не обладает слабо выражено слабое
Сенсибилизирующее действие не выявлено
ванием нитратом ртути (II), количество белка — с помощью гемоглобинометра ГФ-3. Метгемо-глобин определяли по методу Эвелина и Мэллоя на спектрофотометре <^реко1». Функциональное состояние ЦНС определяли по способности суммировать подпороговые импульсы (СПИ).
Расчет ОЬ50 осуществляли методом пробит анализа с помощью программы МтИаЪ 14.0. Статистическую обработку данных проводили с использованием ^критерия Стьюдента.
Результаты и обсуждение. Острую токсичность исследуемых продуктов устанавливали при однократном пероральном, статическом ингаляционном и эпикутанном поступлениях. Установленные параметры токсичности представлены в табл. 2.
По параметрам острой токсичности в соответствии с классификацией ГОСТ 12.1.007-76 ФАЭ, ФАДЭ, ДГЭПТ, ДГППТ относятся к III-му классу умеренно опасных веществ по величине БЬ50. ДМПТ относится к Ш-му классу умеренно опасных веществ по БЬ50 для самцов белых крыс и ко П-му классу высоко опасных веществ для самцов белых мышей при внутриже-лудочном поступлении (табл. 2).
Клиническая картина интоксикации крыс во многом была однотипной для всех исследуемых продуктов и характеризовалась усиливающимся угнетением, сменяющимся атаксией, ярко выраженной пилоаррекцией и замедлением дыхания. Гибель животных наступала ко вторым суткам после воздействия. Отравление всеми веществами, кроме ДМПТ, приводило к приступам тонических судорог, усиливающихся после внешних раздражений, и переходу животных в боковое положение.
Сразу после введении ДГЭПТ наблюдали пи-лоаррекцию и нарастающий тремор тела. Через 5 мин после воздействия наступало сильное
возбуждение, парез задних конечностей, сменяющийся беспокойством и переходом в боковое положение с длительными тоническими и клонико-тоническими судорогами, на пике которых и наступала гибель животных.
Несколько отличалась клиническая картина отравления мышей производными анилина: она характеризовалась наличием фазы кратковременного двигательного возбуждения, которое затем сменялось угнетением, и в последствии была сходна с симптомами отравления крыс. При отравлении ФАЭ у некоторых животных наблюдалась ригидность хвоста.
Восстановление состояния у выживших животных происходило на 4—5 сутки и в дальнейшем поведение и внешний вид животных соответствовали норме.
Сопоставление смертельных доз показало отсутствие видовых различий в чувствительности крыс и мышей к действию ДГЭПТ и наличие высокой видовой чувствительности к ДМПТ, ФАЭ и ФАДЭ.
Ингаляционную затравку удалось осуществить лишь парами ДМПТ. Для остальных веществ действующую концентрацию создать не удалось в виду их низкой летучести. При воздействии максимальной концентрации паров ДМПТ (3192 мг/м3) у подопытных животных отмечали выраженные признаки интоксикации в виде адинамии, шаткой походки, слезотечения, затруднения дыхания и отсутствие реакции на внешний раздражитель. Через сутки отмечалась повышенная возбудимость и раздражение верхних дыхательных путей. В последующие дни состояние подопытных животных нормализовыва-лось, гибели не зарегистрировано.
Кожно-резорбтивного действия ДГЭПТ, ДГППТ и ФАДЭ выявлено не было. Нативный ФАЭ слабо раздражал кожу хвоста, не вызывал
гибели животных, но проявлялось резорбтив-ное действие, характеризующееся отчетливым угнетением и шаткой походкой после окончания экспозиции. Симптомы отравления сохранялись более суток. ДМПТ по кожно-резорбтивному действию относится ко II разряду по классификации Лойта. Клиническая картина отравления этим продуктом характеризовалась выраженным угнетением, слезоточивостью, гиперемией и последующим некрозом кончика хвоста, сильным тремором тела при попытке передвижения.
Многократные аппликации ДГППТ, ФАЭ, ФАДЭ на неповрежденные кожные покровы морских свинок не вызывали видимых изменений в зоне аппликаций, не влияли на толщину кожной складки, животные равномерно прибывали в весе. ДМПТ и ДГЭПТ вызывали в зоне нанесений местные изменения в виде сухости и шелушения кожи. Признаков резорбтив-ного действия в ходе данного эксперимента обнаружено не было. После прекращения нанесения продуктов клиническое выздоровление животных наступало без применения лечебных мероприятий.
При исследовании местного раздражающею действия ДМПТ на слизистые оболочки глаз кроликов наблюдали болевую реакцию, а через 30 мин — слезотечение и блефароспазм. Ре-зорбтивного действия на организм обнаружено не было. Уже через 1 сутки после опыта наступало клиническое выздоровление. После внесения ФАЭ в конъюнктивальный мешок глаза кролика развивался ожог 2-ой степени слизистой век, глазного яблока и роговицы. Изменения прослеживались до 15—20 дней. Внесение 50% масляной суспензии ФАДЭ вызывало химический ожог 1-ой степени конъюнктивы и роговицы. Изменения прослеживались до 10 дней.
Оценку кумулятивных свойств ДМПТ проводили по схеме Ю.С.Кагана, ФАЭ и ФАДЭ — по схеме Лима и соавт. Коэффициенты кумуляции ДМПТ, ФАЭ и ФАДЭ составили 2,5, 5,8 и 10,2 соответственно. Полученные результаты позволяют охарактеризовать ДМПТ и ФАЗ как соединения со слабо выраженными кумулятивными свойствами. Высокий показатель коэффициента кумуляции ФАДЭ позволяет предположить о развивающемся привыкании.
Обследование животных после окончания месячного эксперимента с ДМПТ выявило статистически достоверные изменения: эритропе-ния и лейкоцитоз, а также тенденцию к снижению содержания гемоглобина. В моче — достоверное увеличение хлоридов и тенденцию к возрастанию содержания белка.
После месячного воздействия ФАЭ и ФАДЭ у подопытных животных обнаруживались изменения в ЦНС, о чем свидетельствовало пониже-
ние СПП, а также изменения в системе красной крови, что выражалось в снижении гемоглобина и эритроцитов. Общим в действии ДМПТ, ФАЭ и ФАДЭ явилось достоверное повышение в крови уровня метгемоглобина.
Таким образом, проведенные исследования токсичности данных продуктов позволяют говорить о том, что характер токсического действия изученных соединений весьма близок к анилину и п-толуидину. Из пяти исследованных соединений наиболее токсичным является ДМПТ Для трех продуктов из пяти (ДМПТ, ФАЭ и ФАДЭ) характерно наличие видовой чувствительности: особенно чувствительны мыши. Показано, что введение в молекулу анилина радикалов, содержащих гидроксильную группу снижает острую токсичность и способность к кожной резорбции. В ряду производных п-толуидина увеличение числа атомов углерода в радикале у атома азота слабо изменяет параметры острой токсичности.
Заключение. Проведенные исследования позволяют рекомендовать для изученных продуктов следующие гигиенические нормативы:
- для паров ДМПТ по аналогии с нормированным п-толуидином предлагается ПДК в воздухе рабочей зоны 1 мг/м3 с пометкой «требуется специальная защита кожи и глаз»;
- для паров ФАЭ ОБУВ для воздуха рабочей зоны, рассчитанный по формулам, учитывающим токсичность продукта, составляет 0,5—1 мг/м3;
- ОБУВ аэрозоля ФДЭА для воздуха рабочей зоны составляет 0,5—1 мг/м3.
Список литературы
1. Василенко Н.М. Ароматические амины // В кн.: «Вредные химические вещества. Азотсодержащие ароматические соединения. Справочник» / Под ред. Б.А.Курляндского, В.А.Филова. — СПб.: Химия, 1992. — С. 88-242.
2. Вредные вещества в промышленности. Органические вещества. Спр. под ред. Н.В.Лазарева и Э.А. Левиной. — Л.:Химия, 1976. — Т. II. — С. 281-285.
3. Голиков С.Н., Саноцкий И.В., Тиунов Л.А. Общие механизмы токсического действия. — Л.: Медицина, 1986. — 280 с.
4. Общая токсикология / Под ред. Б.А.Курляндского и В.А.Филова. — М: Медицина, 2002. — 608 с.
5. Харчевникова Н.В., Жолдакова З.И. Соотношения «структура-метгемоглобинобразующая активность» в ряду ароматических аминов // Гиг. и санит, 1997. — № 3. — С. 41-44.
6. Faivre М. et al. Methemoglobine toxique pour des derives de l'aniline; paraphloroaniline et paratoluidine (Deux cas) // Arch. Mai. Prof, 1971. — V. 32. — № 9. — P. 575-577.
Материал поступил в редакцию 10.10.06.
Ye.V.Bubenkova
COMPARATIVE ASSESSMENT OF TOXICITY OF SOME ANILINE DERIVATIVES
Research Institute «Yarsynthes», Yaroslavl
A comparative toxicological study was conducted on 5 derivatives of aniline. As a result of this study, hygienic standards were recommended for workplace air.
УДК 615.917'458.81
Е.Г.Доркина, М.В.Гаврилин, А.Ю.Терехов, Л.Е.Саджая, Ю.А.Огурцов, Е.О.Сергеева
ИЗУЧЕНИЕ НЕКОТОРЫХ ТОКСИЧЕСКИХ СВОЙСТВ МИКРОКРИСТАЛЛИЧЕСКОЙ ЦЕЛЛЮЛОЗЫ ПРИ ДЛИТЕЛЬНОМ
ПРИМЕНЕНИИ
Пятигорская государственная фармацевтическая академия
Микрокристаллическая целлюлоза при длительном применении препятствует увеличению массы тела лабораторных животных за весь период наблюдения. После 2-х месяцев наблюдения проявляются признаки гематоток-сичности, выражающиеся в развитии тромбоцитопении, эритроцитопении, уменьшении содержания гемоглобина, ретикулоцитозе и повышении скорости оседания эритроцитов. Следствием этих явлений является уменьшение времени свёртывания крови.
Ключевые слова: микрокристаллическая целлюлоза, гематотоксичность, время свётрывания крови.
Введение. В настоящее время в фармацевтической промышленности широкое применение в качестве вспомогательного средства находит микрокристаллическая целлюлоза (МКЦ), которая вырабатывается, как правило, из хлопкового волокна. Это белый малогигроскопичный порошок, сильно набухающий в водной среде. МКЦ прекрасно прессуется, а затем при попада-
нии в водную среду легко дезинтегрируется. Эти свойства сделали МКЦ практически не заменимой в производстве таблеток. Эффективным является применение МКЦ для получения иммобилизованных сухих экстрактов из лекарственного растительного сырья. При этом, в ряде случаев, МКЦ по массе составляет основную часть таблетки.
Таблица 1
Динамика изменения массы тела (в г) в условиях хронического эксперимента у крыс, получавших МКЦ
Срок исследования Интактные животные 200 мг/кг 1000 мг/кг 2000 мг/кг
самки самцы самки самцы самки самцы самки самцы
Исходный вес 158,8+7,5 198,8+7,1 171,7+5,3 205,0+12,4 220,8+5,3 221,7+8,6 202,5+8,9 208,3+7,6
2 недели 184,4+6,7 228,3+9,6 191,7+6,1 228,3+10,9 213,3+7,2 196,7+6,5 209,2+11,5 214,2+8,2
6 недель 210,6+5,8 252,4+8,2 212,5+7,2 255,8+10,9 217,5+7,6 242,5+11,8 213,3+10,4 235,8+9,9
8 недель 230,2+7,6 275,6+9,5 218,3+8,3 248,3+10,8 227,5+5,8 229,2+8,5 210,8+9,8 237,5+12,2
Таблица 2
Прирост массы тела (в г) у крыс при введении МКЦ в условиях хронического эксперимента
Срок исследования Интактные Контроль № 1 (МКЦ, 200 мг/кг) Контроль № 2 (МКЦ, 1000 мг/кг) Контроль № 3 (МКЦ, 2000 мг/кг)
самки самцы самки самцы самки самцы самки самцы
2 недели 25,6+1,9 29,5+3,2 20,0+4,28 23,3+4,6 -7,5+1,1 P < 0,001 -25,0+3,7 P < 0,001 6,7+1,33 P < 0,001 5,9+1,10 P < 0,001
6 недель 51,8+4,5 53,6+6,1 40,8+6,9 50,8+5,4 -3,3+0,8 P < 0,001 20,8+2,1 P < 0,001 10,8+3,0 P < 0,01 27,5+6,3 P < 0,05
8 недель 71,8+5,1 76,8+5,3 46,7+6,4 P < 0,05 60,0+6,4 4,2+1,7 P < 0,001 8,3+2,5 P < 0,001 8,3+2,1 P < 0,001 29,2+8,0 P < 0,001
Примечание: Р — достоверность по отношению к интактным животным
