Научная статья на тему 'Сравнительная оценка количественого определения апротинина разными методами'

Сравнительная оценка количественого определения апротинина разными методами Текст научной статьи по специальности «Фармакология»

843
253
Поделиться
Ключевые слова
апротинин / лекарственные формы апротинина / химические анализы и тесты

Аннотация научной статьи по биологии, автор научной работы — Шкуратова Н. А., Наприенко Е. Н., Шарова О. В., Макарова Е. А., Дорошенко А. С.

В параллельном исследовании в экспериментальных сериях лекарственных препаратов, изготовленных в ходе отработки полного цикла технологии апротинина в Томском филиале ФГУП «НПО «Микроген» МЗ РФ «НПО «Вирион», определяли содержание активного компонента и его ингибирующую активность, выраженную в разных единицах измерения, в сравнении с аналогами: Контрикалом (Германия) и Ингитрилом (Россия). Количественное содержание апротинина в ампуле (флаконе) определяли методом ВЭЖХ, его ингибирующую активность по отношению к трипсину методами, описанными в нормативных документах на Ингитрил (в ЕД) и Контрикал (АТрЕ), различающимися по субстрату, используемому для установления протеолитической активности трипсина. Цель дозировать собственный препарат апротинина в АТрЕ вместо использованных ранее ЕД. Экспериментальные серии, изготовленные на поздних этапах отработки технологии, по удельной активности в ЕД, приходящейся на массу целевого продукта, соответствующую дозе высокоочищенного препарата Контрикал, были сходны с ним и аналогичны коммерческой серии Ингитрила, изготовленной из полупродукта другого производителя. Метод количественного определения в АТрЕ для экспериментальных препаратов давал значения, отличающиеся от значений, полученных при анализе таких же доз апротинина в препарате Контрикал, но сравнимые с коммерческой серией Ингитрила. Делается вывод о том, что использование метода количественного определения и дозирования в АТрЕ для апротинина, изготовленного по собственной технологии, возможно при усовершенствовании технологической схемы с целью уменьшения примесей целевого продукта без потери при этом его активности.

Похожие темы научных работ по биологии , автор научной работы — Шкуратова Н.А., Наприенко Е.Н., Шарова О.В., Макарова Е.А., Дорошенко А.С.,

During parallel study, in experimental series of drugs which were manufactured in the course of full cycle of Apronitine technology, content of active component and its inhibiting activity in several units was measured in comparison of the analog drugs: Contrical (Germany) and Ingitril (Russia). The aim was to dose Apronitine in ATpE instead of ED. It is concluded that using the given method is possible while improving technologic scheme.

Текст научной работы на тему «Сравнительная оценка количественого определения апротинина разными методами»

СИБИРСКИЙ МЕДИЦИНСКИЙ ЖУРНАЛ № 22009 (выпуск 2)

КЛИНИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

УДК 615.635-615.012:54.074

О.В. Шкуратова, Е.Н. Наприенко, О.В. Шарова, Е.А. Макарова, А.С. Дорошенко

E-mail: obtk@virion.tomsknet.ru

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ АПРОТИНИНА РАЗНЫМИ МЕТОДАМИ

Филиал ФГУП «НПО «Микроген» МЗ РФ «НПО «Вирион», г Томск, Россия

ВВЕДЕНИЕ

Апротинин - международное название антифер-ментного препарата, получаемого из органов (легкие и др.) крупного рогатого скота, поливалентного ингибитора протеиназ. Лекарственные препараты, содержащие в качестве действующего вещества апро-тинин, оказывают антипротеолитическое, антифиб-ринолитическое, гемостатическое действие, подавляя при патологических процессах чрезмерную активацию протеолитических ферментов (трипсина, химо-трипсина, калликреина, плазмина и др.) в крови и тканях. Они эффективны для лечения и профилактики панкреатитов, различных форм шока, фибрино-литических коагуалопатий. В России зарегистрированы препараты апротинина зарубежных производителей под торговыми названиями Гордокс, Траси-лол® 500000, Контрикал®, а также российских производителей - Ингитрил, Апротекс, Веро-Наркап® [1].

Активность апротинина определяют разными методами и, соответственно, выражают в различных единицах: КИЕ - калликреин ингибирующие единицы; Ph.Eur.U - трипсин инактивирующие единицы Европейской фармакопеи (1 Ph.Eur.U соответствует 1800 КИЕ); АТрЕ - антитрипсиновые единицы (1 АТрЕ соответствует 1,33 КИЕ); ЕД - единицы действия по фармакопейной статье на Ингитрил [2]. Гордокс, Трасилол, выпускаемые в виде жидких концентратов, определяют и дозируют в КИЕ. Контри-кал и российские аналоги выпускают в лиофилизи-рованном виде. Количественное определение апро-тинина и дозирование этих препаратов (за исключением Ингитрила) проводят в АТрЕ.

Для первого отечественного препарата апротинина Ингитрил, разработанного в СССР, были установлены другие единицы количественного определения и дозирования. Согласно нормативному документу (ВФС 42-708-95), его выпускали по 15 ЕД в ампуле (флаконе). При внедрении Ингитрила в медицинскую практику сравнение, проведенное разработчиками препарата эмпирическим путем (биохимическими методами и определение количества апро-тинина методом ВЭЖХ), показало, что 15 ЕД Ингитрила (содержимое 1 ампулы или флакона) приблизительно соответствует 10000 АТрЕ (содержимому 1 флакона) Контрикала.

Томский филиал ФГУП «НПО «Микроген» МЗ РФ «НПО «Вирион» выпускал готовую лекарственную форму Ингитрил в течение 9 лет (1999-2007 гг.) из лиофилизированного полупродукта апротинина, закупаемого у других российских производителей. Сравнительная оценка количественного определения этого препарата разными методами в тот период подтвердила, что его номинальная доза в ампуле 15 ЕД приблизительно соответствовала 10000 АТрЕ Контрикала: в параллельном исследовании пяти серий Ингитрила в 2002 г., в Институте государственного контроля лекарственных средств, их антитрип-синовая активность в ампуле составила от 9111 до 10304 АТрЕ. С 2005 г. в НПО «Вирион» начаты работы по внедрению полного технологического цикла производства Ингитрила, начиная от сырья (легких крупного рогатого скота), по собственной технологической схеме. Кроме того, в связи с рекомендациями экспертов Фармакопейного комитета поставлена задача в перспективе перейти на выпуск лекарственной формы апротинина в АТрЕ, для которой мы зарегистрировали торговую марку Контривир. Для отработки методики количественного определения активности препарата в АТрЕ с целью его дозирования в этих единицах необходимо было сравнить степень выявления апротинина разными методами в препаратах, изготовленных по собственной технологии, и других аналогах.

Таким образом, цель настоящего исследования -провести количественное определение апротинина разными методами в препаратах, изготовленных в НПО «Вирион» на разных этапах отработки собственной технологической схемы, и оценить для них в сравнении с известными аналогами соотношение между дозировками в разных единицах в расчете на массу действующего вещества.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ

Объектом изучения явились экспериментальные и опытно-промышленные серии готовых препаратов апротинина (Ингитрила и Контривира) с различной дозировкой действующего вещества в ампуле, изготовленные в 2005-2008 гг. в период разработки и внедрения собственной технологической схемы полного цикла производства этого продукта из сырья (лег-

ких крупного рогатого скота). Их сравнивали в параллельных анализах с препаратом Контрикал® (Германия), рег. № П N012371/01 и коммерческой серией препарата Ингитрил (Россия), рег. № 95/124/4, изготовленной в Томском филиале ФГУП «НПО «Микроген» «НПО «Вирион» в тот же период времени.

Экспериментальные и опытно-промышленные серии (за исключением серии № 051207) были приготовлены из лиофилизированного полупродукта апротинина, полученного в результате постадийной переработки сырья. Партии полупродукта для приготовления экспериментальной серии № 011105 были наработаны по малообъемной лабораторной технологии в течение 2005 г. Партии полупродукта апротинина для изготовления других серий были произведены в период с апреля 2007 г. по март 2008 г. по мере отработки масштабированной технологии, отличающейся от лабораторной. Лиофилизирован-ный полупродукт, соответствующий требованиям нормативного документа (проекта спецификации), разводили водой для инъекций (ФС 42-2620-97) до расчетной концентрации, доводили рН раствора добавлением натрия гидроокиси до заданных значений, затем стерилизовали фильтрации через капсулы с конечным размером пор 0,2 мкм и разливали в ампулы соответствующей вместимости (в зависимости от дозы). Соотношение ингредиентов в растворе препарата рассчитывали на основании данных анализа удельной активности апротинина (в ЕД или в АТрЕ) в расчете на 1 г полупродукта. Расчетная концентрация действующего вещества в растворе для серий Ингитрила (и Контривира № 011105) была 30 ЕД/мл, для других серий Контривира -15000 АТрЕ/мл. Дозу разлива препаратов устанавливали, принимая во внимания фактические аналитические значения количественного определения в приготовленном растворе, для достижения номинального значения в ампуле: для Ингитрила 15 ЕД, для Контривира 30000-35000 АТрЕ (для серии № 011105

- 60 ЕД). Серия Ингитрила № 051207 была приготовлена из жидкого полупродукта (без его промежуточной лиофилизации), который после определения удельной активности (ЕД/мл) разлили в ампулы из расчета номинальной дозы 15 ЕД. После разлива все препараты лиофилизировали по стандартной производственной технологии. Объем серий, изготовленных в 2005-м и 2007 годах, составил 1,0-2,0 л, в 2008 г.

- 14 л.

Количественное определение апротинина в ЕД проводили по методике, изложенной в ВФС 42-708-95 и ФСП 42-0504-7815-06 на Ингитрил. Суть метода -определение снижения протеолитической активности трипсина при взаимодействии с препаратом апро-тинина в стандартных условиях. За единицу ингибирующего действия (1 ЕД) принимают величину, обратную наименьшему количеству препарата, необходимого для 100% торможения активности 1 г

трипсина при условиях определения. Протеолитиче-скую активность трипсина выражают в тирозиновых единицах (ТЕнь355.) по Ансону (устанавливают в реакции расщепления гемоглобина при 35,50С и рН 7,8). По вышеуказанным нормативным документам приемлемые значения для препарата Ингитрил - не менее 550 ЕД/г или среднее количественное содержание в ампуле от 13,5 до 16,5 ЕД.

Количественное определение апротинина в АТрЕ проводили по методике, предоставленной нам в 2002 г. Институтом государственного контроля лекарственных средств НЦ ЭГКЛС, аналогичной для препарата Контрикал® 10000 (НД 42-32-00). Суть метода - торможение под действием препарата ап-ротинина катализированного трипсином расщепления синтетического субстрата БАПНА (N-a-бен-зоил-аргинин-4-нитроанилида), которое измеряют по снижению образуемого из субстрата специфического продукта (4 - нитроанилина), эквивалентного активности трипсина в оптимальных условиях опыта при 25°С. Установленную в реакции расщепления хромогенного субстрата БАПНА активность трипсина выражают в протеазных единицах. 1000 АТрЕ соответствуют количеству препарата, тормозящему на 50% активность 2 протеазных единиц трипсина. В соответствии с нормативной документацией на Конт-рикал среднее содержание апротинина во флаконе должно быть от 9000 до 11000 АТрЕ.

Среднюю массу содержимого в ампуле (флаконе) определяли в соответствии с ГФ XI, вып. 2.

Определение количества действующего вещества (апротинина) в миллиграммах в ампуле (флаконе) проводили методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Для проведения ВЭЖХ использовали жидкостной хроматограф высокого давления фирмы Waters (США), включающий насос для подачи подвижной фазы в системе под давлением, УФ-детектор, дегазатор, автоинжектор и компьютер с программным обеспечением Breeze, и аналитическую колонку для обращенно-фазовой хроматографии: Luna 5ц С18(2), 250х4,6 мм, (Phenominex, США). Подвижной фазой служил Буфер А (рН 2,2), представляющий собой 0,2 М раствор перхлората натрия с добавлением 10 мМ ортофосфорной кислоты, разбавленный ацетонитрилом (70:30 объем к объему) при скорости потока 1 мл/мин, время пропускания (анализа) - 35 мин. Элюент детектировали при длине волны 200 нм [3]. Пробы для анализа подготавливали следующим образом: содержимое ампул с препаратами апротинина разводили подвижной фазой (Буфер А + ацетонитрил) до концентрации 4 мг/мл, объем раствора для разведения образцов рассчитывали, исходя из средней массы содержимого ампулы каждой конкретной серии. Стандарт апротинина (Sigma, кат. № А3886) разводили до концентрации (4+0,2) мг/мл. Для анализа на колонку наслаивали 10 мкл пробы (около 40 мкг анализируемого препарата или стандарта апротинина).

Значения площадей целевого пика, полученные при последовательном хроматографировании проб стандарта и испытуемых препаратов, использовали для расчета количества апротинина по формуле:

S х с х v

X ^ пР ^st У пр

Sst ’

где Х - количество граммов апротинина в ампуле (флаконе) испытуемого препарата;

S - площадь целевого пика на хроматограмме раствора испытуемого препарата (совпадающего по времени удерживания с основным пиком на хроматограмме стандарта);

С^ - концентрация раствора стандарта апроти-нина;

V - объем разведения образца испытуемого препарата;

Sst - площадь пика апротинина на хроматограмме раствора стандарта.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Фактические аналитические данные количественного определения апротинина разными методами в сравниваемых препаратах представлены в таблице 1.

Для серии референс-препарата Контрикал эти данные соответствуют требованиям нормативного документа на него по содержанию апротинина во флаконе: среднее значение 9141 АТрЕ соответствует

интервалу 10000±1000 АТрЕ с допустимым отклонением от номинального значения в единичном образце от 85 до 115%.

При количественном определении дозы апротинина в ЕД установленное для Контрикала среднее значение 15,8 ЕД было в пределах 15±1,5 ЕД во флаконе. Это согласуется с заявленным соотношением между этими единицами дозирования, полученными ранее опытным путем для препаратов апротинина: 1 ампула 15 ЕД Ингитрила равна 1 ампуле 10000 АТрЕ Контрикала [2]. Количество действующего вещества во флаконе Контрикала, установленное нами методом ВЭЖХ, равное 1,99 мг, на наш взгляд, также является приемлемым значением. Известно, что 1 флакон этого препарата (средняя масса которого в использованной нами серии составила 14,4 мг) помимо активного фармацевтического ингредиента, дозируемого в АТрЕ, содержит 10 мг вспомогательного вещества (маннитола). Известно также из данных фирмы Байер (Германия), впервые внедривших апроти-нин в медицинскую практику, что 1,4 мг этого высо-коочищенного препарата имеют специфическую активность 10000 КИЕ. Зная, что 1 АТрЕ = 1,33 КИЕ, теоретически ожидаемое содержание действующего вещества во флаконе Контрикала должно быть в среднем 1,86±0,19 мг (то есть от 1,67 до 2,05 мг). Таким образом, для этого препарата в нашей аналитической лаборатории получены удовлетворительные результаты при анализе всеми указанными методами, подтверждающие данные производителя.

Таблица 1

Сравнительные аналитические данные количественного определения апротинина

в препаратах

Препарат, № серии Срок хранения до анализа* Средняя масса содержимого ампулы, мг Количество апротинина в ампуле, мг (метод ВЭЖХ) Количественное определение Аналитические данные до хранения

ЕД/амп. АТрЕ/амп.

Экспериментальные серии

Контривир, G111G5 39 мес 41,6 1G,8 5G,2 27693 56,8 ЕД/амп. 249G4 АТрЕ/амп.

Ингитрил, G21GG7 15 мес 24,1 2,17 11,4 7376 12,G ЕД/амп.

Ингитрил, G411G7 15 мес 26,6 1,86 12,1 737G 13,3 ЕД/амп.

Ингитрил, G512G7 15 мес 18,3 3,66 24,4 12342 24,G ЕД/амп.

Контривир,G112G7 15 мес 6G,9 1G,98 84,2 42643 35365 АТрЕ/амп.

Контривир,G212G7 15 мес 81,9 1G,64 77,2 38514 34488 АТрЕ/амп.

Контривир, G312G7 15 мес 83,G 11,62 77,7 4G4G9 32385 АТрЕ/амп.

Опытно-промышленные серии

Ингитрил, G1G4G8 12 мес 13,G Н.о. 17,3 9195 16,5 ЕД/амп.

Препараты сравнения

Ингитрил, G2G3G7 24 мес 13,5 2,1G 13,5 7825 14,3

Контрикал®, 8А651 Через 1 год после выпуска 14,4** 1,99 15,8 9141 Нет данных

* - Анализируемые образцы хранились при температуре от 2 до 8°С (условия хранения по нормативной документации -при температуре от 2 до 20°С); ** - в том числе 10 мг вспомогательного вещества.

Для коммерческой серии препарата Ингитрил (№ 020307), также взятой нами в качестве препарата сравнения, удовлетворительные значения были получены при количественном определении в ЕД и анализе методом ВЭЖХ. Среднее содержание апроти-нина в ампуле (для образцов на конце срока годности) составило 13,5 ЕД, а установленное методом ВЭЖХ содержание действующего вещества в ампуле

- 2,1 мг. Эти значения соответствуют требованиям нормативного документа на Ингитрил, сопоставимы с паспортными данными этой серии и значениями, полученными для содержимого 1 флакона Контрика-ла. Таким образом, по результатам вышеуказанных анализов количество действующего вещества в ампуле Ингитрила серии № 020307 сопоставимо с дозой апротинина во флаконе препарата Контрикал. Результат параллельного количественного определения ап-ротинина в АТрЕ при анализе серии № 020307 составил 7825 АТрЕ/ампула, что несколько ниже теоретически ожидаемого значения 10000±1000 АТрЕ/ам-пула и аналитических данных для препарата Конт-рикал. Следовательно, сопоставимые по массе и определении в ЕД дозировки действующего вещества в этих двух препаратах оказались различными при определении в АТрЕ.

В сравнительном испытании двух экспериментальных серий Ингитрила № 021007 и № 041107 с расчетной дозой 15 ЕД количество апротинина в ампуле, установленное методом ВЭЖХ, равное 2,17 и 1,86 мг, было сопоставимо с теоретическими и фактическими аналитическими значениями, полученными для дозы препарата Контрикал. Однако при количественном определении в ЕД фактические аналитические значения среднего содержания апроти-нина в ампуле этих серий были 11,4 и 12,1 ЕД, что менее 13,5 ЕД (нижней границы норматива), но в соответствии с ранее полученными для них аналитическими данными. При определении в АТрЕ средние значения количественного содержания апротинина в ампуле этих серий (7376 и 7370 АТрЕ) также были ниже нормы 9000 АТрЕ, установленной для Контри-кала с учетом допустимого отклонения, и ниже пропорционально соответствующих теоретически ожидаемых значений (минимум должны быть 76008000 АТрЕ). Низкие результаты ингибирующей активности апротинина в готовом продукте указанных экспериментальных серий Ингитрила могут быть обусловлены тем, что они были изготовлены из партий полупродукта с удельной активностью на пределе или чуть ниже нормы, недостаточно очищенных от примесей, полученных на ранних этапах отработки технологии.

В экспериментальной серии Ингитрила № 051207, приготовленной на более поздних этапах отработки полного цикла технологии апротинина из жидкого полупродукта, фактическое аналитическое значение количественного определения его активности регламентированным методом оказалось выше расчетной

- 24 ЕД. При сравнительном испытании разными методами образцов на сроке хранения специфическая активность этой серии, измеренная в ЕД, осталась на том же уровне: 24,4 ЕД. Содержание действующего вещества в ампуле 3,66 мг, установленное методом ВЭЖХ, пропорционально соответствует этому значению при сравнении с соотношением таких же показателей в референс-препарате Контрикале. В то же время специфическая активность апротинина в ампуле, измеренная в АТрЕ, была меньше теоретически ожидаемой. По аналогии с референс-препаратом пропорционально соответствующее значение должно быть как минимум 16200 АТрЕ, фактические аналитические данные - среднее значение 12342 АТрЕ.

Подобные различия мы наблюдали и при исследовании экспериментальных серий препарата Конт-ривир: № 011207, № 021207 и № 031207. Сравнение аналитических значений содержания действующего вещества в ампуле этих серий, установленных методом ВЭЖХ (см. табл. 1), с аналогичными значениями для препарата Контрикал показало, что они соответствуют приблизительно 5,3-5,8 дозы референс-препарата. Фактические значения количественного определения в ЕД для этих серий (84,2; 77,2 и

77.7 ЕД/ампула, соответственно номеру серии) укладываются в теоретически ожидаемый пропорционально этим дозам допустимый диапазон от 71,6 до

95.7 ЕД/ампула. При параллельном определении активности апротинина в ампуле этих серий другим методом фактические аналитические значения (42643; 38514 и 40409 АТрЕ/ампула) были ниже теоретически ожидаемых значений для указанных доз по аналогии с Контрикалом (как минимум должно быть на уровне 47000-52000 АТрЕ/ампула). Кроме того, сопоставляя результаты количественного определения апротинина в АТрЕ экспериментальных серий Контривира, полученные на разных сроках хранения, можно отметить, что фактические аналитические значения сразу после их изготовления ниже, чем на сроке хранения 15 месяцев. Подобная тенденция была отмечена нами ранее в ходе изучения стабильности экспериментальных серий методом ускоренного старения при анализе образцов, заложенных на хранение при повышенных температурах. В то же время для экспериментальных серий Ингитрила, изготовленных по сходной технологии, но оцениваемых в ЕД, показатель количественного определения оставался стабильным при всех условиях и сроках хранения. Одной из возможных причин неадекватных результатов количественного определения в АТрЕ (ниже теоретических значений) может быть разный состав примесей в наших препаратах по сравнению с Контрикалом, которые изменяют конкуренцию между апротинином и субстратом БАПНА за активный центр трипсина и приводят к занижению результатов анализа данным методом.

Сравнительные испытания образцов с большим сроком хранения (более 3 лет) экспериментальной

серии Контривир № 011105, изготовленной по лабораторной технологии (расчетная доза апротинина в ней 60 ЕД/ампула), показали, что ее специфическая активность, измеренная в АТрЕ, осталась практически на том же уровне, что и после изготовления, хотя аналитические значения в ЕД несколько снизились по сравнению с исходными (см. табл. 1). Количество апротинина при определении в ЕД в 1 ампуле этого препарата соответствует 4 дозам Контрикала, а при определении в АТрЕ - 3 его дозам. Количество ап-ротинина в ампуле, установленное методом ВЭЖХ, соответствует 5,3 дозы референс-препарата (так же как в других экспериментальных сериях Контриви-ра). Таким образом, соотношение значений количественного определения апротинина тремя этими методами для данной серии отличается от такового в экспериментальных сериях, приготовленных в 2007 г. по другой технологии. Можно предположить, что полупродукт апротинина в этой серии, несмотря на хорошую удельную активность в целом, содержит действующее вещество с меньшей функциональной активностью, чем в других сравниваемых препаратах, либо какие-то интерферирующие примеси, приводящие к неадекватным результатам в биохимических анализах.

В итоге четыре экспериментальные серии препаратов апротинина, изготовленные в ходе отработки его технологии, по удельной активности в ЕД, приходящейся на массу целевого продукта, соответствующую дозе высокоочищенного препарата Контрикал, сходны с этим препаратом и аналогичны коммерческой серии Ингитрила, изготовленной из закупаемого полупродукта другого производителя. Метод количественного определения в АТрЕ с высокоспецифичным для трипсина субстратом БАПНА при анализе наших экспериментальных препаратов давал значения, отличающиеся от значений, полученных при анализе таких же доз апротинина в препарате Контрикал, но сравнимые с коммерческой серией Ингитрила. При этом сами методы показывали в нашей лаборатории приемлемую повторяемость и воспроизводимость результатов (различия в пределах 10%). Использование метода количественного определения и дозирования в АТрЕ для нашего препарата апротинина возможно при усовершенствовании собственной технологической схемы с целью уменьшения примесей целевого продукта без потери при этом его активности. Следует сказать, что в опытнопромышленной серии Ингитрила № 010408, приготовленной в 2008 г. (для экспертизы в рамках регистрации разработанной технологии), параллельное количественное определение апротинина в образцах на сроке хранения 1 год (половина заявленного срока годности) выявило фактические аналитические значения в ЕД и в АТрЕ в среднем на ампулу, в соотношении, сопоставимом с таковым для референс-препарата Контрикал.

ЛИТЕРАТУРА

1. Фонд фармацевтической информации. Базы данных. Государственный реестр лекарственных средств: Доступен по URL: http://www.drugreg.ru/FPI/

2. Энциклопедия лекарств. Справочник лекарств. Действующие вещества. Апротинин. Доступен по URL: http://www.rlsnet.ru

3. Giorgio Raspi, Antonio Lo Moro and Maria Spinetty. High-performance liquid chromatographic method for the determination of aprotinin in body fluids // Journal of Chromatography. - 1990. - V. 525. Р. 426-432.

COMPARATIVE ASSESSMENT OF QUANTITATIVE DEFINITION OF APRONITINE BY SEVERAL METHODS

O.V. Shkouratova, Ye.N. Naprienko, O.V. Sharova, Ye.A. Makarova, A.S. Doroshenko

SUMMARY

During parallel study, in experimental series of drugs which were manufactured in the course of full cycle of Apronitine technology, content of active component and its inhibiting activity in several units was measured in comparison of the analog drugs: Contrical (Germany) and Ingitril (Russia). The aim was to dose Apronitine in ATpE instead of ED. It is concluded that using the given method is possible while improving technologic scheme.

Key words: apronitine, drug forms of apronitine, chemical analyses and tests.

УВАЖАЕМЫЕ АВТОРЫ РУКОПИСЕЙ,

ПРЕДСТАВЛЯЕМЫХ В «СИБИРСКИЙ МЕДИЦИНСКИЙ ЖУРНАЛ»!

С целью повышения оперативности взаимодействия между редакцией «СМЖ» и авторами с 2003 г. в каждой рукописи должен указываться электронный адрес (e-mail) лица, ответственного за переписку с редакцией «СМЖ».

Обработка рукописей без e-mail задерживает её публикацию в очередных номерах.

Приоритет в публикации рукописей отдается авторам, имеющим текущую годовую подписку на «СМЖ».

Переписка с авторами осуществляется по e-mail: medicina@tomsk.ru