CC BY
99
Сведения об авторах статьи: Байбурина Гульнар Анузовна - к.м.н., доцент кафедры патофизиологии ГБОУ ВПО БГМУ Минздрава России. Адрес: 450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3. Тел./факс: 273-85-71. Е-mail: [email protected].
Нургалеева Елена Александровна - д.м.н., профессор кафедры патофизиологии ГБОУ БГМУ Минздрава России. Адрес: 450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3. Тел./факс: 273-85-71. Е-mail: [email protected].
Башкатов Сергей Александрович - д.б.н., профессор кафедры генетики и фундаментальной медицины, декан биологического факультета ФГБОУ ВПО БГУ. Адрес: 450076, г. Уфа, ул. З. Валиди, 32. Е-mail: [email protected].
ЛИТЕРАТУРА
1. Владимиров, Ю.А. Свободные радикалы в живых системах / Ю.А. Владимиров, О.А. Азизова, А.И. Деев. - М.: ВИНИТИ, 1991. - 249 с.
2. Двоерядкина, Н.Н. Факторный анализ при исследовании структуры данных / Н.Н. Двоерядкина, Н.А. Чалкина // Вестник Ам-ГУ. - 2011. - Вып. 53. - С. 1-5.
3. Зозуля, Ю.А. Свободнорадикальное окисление и антиоксидантная защита при патологии головного мозга / Ю.А. Зозуля, В.А. Барабой, Д.А. Сутковой. - М.: Знание, 2000. - 344 с.
4. Королюк, М.А. Метод определения активности каталазы / М.А. Королюк, Л.И. Иванова, И.Г. Майорова // Лабораторное дело. -1988. - №1. - С.16-18.
5. Корпачев, В.Г. Моделирование клинической смерти и постреанимационной болезни у крыс / В.Г. Корпачев, С.П. Лысенков, Л.З. Телль // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. - 1982. - N° 3. - С. 78-80.
6. Лукьянова, Л.Д. Сигнальная функция митохондрий при гипоксии и адаптации / Л.Д. Лукьянова // Патогенез. - 2008. - Т. 6, № 3. -С. 4-12.
7. Методы биохимических исследований / под ред. М.И. Прохоровой - Л.: Изд-во Ленинградского университета, 1982. - 272 с.
8. Способ определения степени устойчивости к гипобарической гипоксии мелких лабораторных животных / Г.А. Байбурина, Е.А. Нургалеева. Д.З. Шибкова [и др.] // Заявка №20141377/14 с приоритетом от 17.09.2014.
9. Фархутдинов, Р.Р. Хемилюминесцентные методы исследования свободнорадикального окисления в биологии и медицине / Р.Р. Фархутдинов, В.А. Лиховских. - Уфа, 1995. - 87 с.
10. Физиологическое обоснование требований к лабораторным моделям для оптимизации параметров скрининга антигипоксиче-ской активности с использованием критериев резистентности к экстремальной гипоксической гипоксии / Е.Б. Шустов, Н.Н. Каркищенко, В.Н. Каркищенко [и др.] // Биомедицина. - 2013. - № 4. - С. 29-45.
11. Orellana, J.A. Modulation of brain hemichannels and Gap junction channels by pro-inflammatory agents and their possible role in neurodegeneration / J.A. Orellana // Аntioxid. Redox. Signal. - 2009. - Vol. 11, № 2. - P. 369-399.
УДК 615.322
© А.Р. Казеева, И.В. Петрова, К.А. Пупыкина, Р.Р. Фархутдинов, 2015
А.Р. Казеева, И.В. Петрова, К.А. Пупыкина, Р.Р. Фархутдинов СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА АНТИОКСИДАНТНОЙ АКТИВНОСТИ КОРНЕВИЩ С КОРНЯМИ И ТРАВЫ КРОВОХЛЕБКИ ЛЕКАРСТВЕННОЙ
ГБОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет» Минздрава России, г. Уфа
В статье приведены сведения об изучении антиоксидантной активности различных видов сырья кровохлебки лекарственной - корневищ с корнями и травы. Проведена оценка влияния водных извлечений в различных концентрациях (0,01 мг/мл; 0,1 мг/мл; 1,0 мг/мл) корневищ с корнями и травы кровохлебки на процессы свободнорадикального окисления в системе АФК и ПОЛ. Установлено, что они способны подавлять генерацию АФК и ПОЛ в модельных системах, что характеризует их антиоксидантные свойства, которые наиболее выражены при использовании водных извлечений из сырья кровохлебки лекарственной в концентрации 0,1 и 1,0 мг/мл.
Ключевые слова: антиоксидантная активность, кровохлебка лекарственная, корневища с корнями, трава.
A.R. Kazeeva, I.V. Petrova, K.A. Pupykina, R.R. Farkhutdinov COMPARATIVE ESTIMATION OF ANTIOXIDANT ACTIVITY OF GREAT BURNET
RHIZOMES AND HERB
The article presents the data on the study of antioxidant activity of different types of great burnet raw material - rhizomes and herb. We have estimated the influence of the water extractions in different concentration (0,01 mg/ml; 0,1 mg/ml; 1,0 mg/ml) of great burnet rhizomes and herb on processes of free-radical oxidation in ROS and lipid peroxidation systems. It has been revealed that they are capable to suppress generation of ROS and lipid peroxidation in model systems, that characterizes their antioxidant characteristics, which are highly manifested when great burnet water extracts in concentrations of 0,1 and 1,0 mg/ml are used.
Key words: antioxidant activity, great burnet, rhizomes, herb.
В настоящее время проблемы регуляции оксидативного стресса и поиск биологически активных веществ, обладающих антиоксидантной активностью, находятся в центре внимания исследователей. Возникновение и развитие многих воспалительных заболеваний сопровождаются свободнорадикальными ре-
акциями перекисного окисления липидов, денатурацией белков и нуклеиновых кислот. В норме скорость свободнорадикальных реакций относительно мала, что обусловлено сбалансированной работой системы антиокси-дантной защиты организма. При ее ослаблении возрастает продукция радикалов-
инициаторов, возникает «синдром липидной пероксидации», способствующий повреждению мембран клеток, развитию различных заболеваний желудочно-кишечного тракта, злокачественных образований [4].
Терапевтическая ценность лекарственных растений определяется входящими в их состав биологически активными веществами, к которым относятся все вещества, способные оказывать влияние на биологические процессы, протекающие в организме человека [2]. Кровохлебка лекарственная (Sanguisorba officinalis L.), семейство розоцветные (Rosaceae) - многолетнее травянистое растение, растет по заливным лугам, на полянах, по обрывам, в зарослях кустарников, по берегам болот и рек, распространена по всей Европе, в Северной Америке и в умеренном климате Восточной Азии. Разнообразный химический состав кровохлебки, включающий дубильные вещества, флавоноиды, органические кислоты, витамины, может расширить возможности ее использования. В практической медицине применяются корневища с корнями кровохлебки лекарственной в основном в качестве вяжущего и кровоостанавливающего средства, поэтому для нас представляло интерес провести сравнительное изучение антиокси-дантной активности корневищ с корнями и травы кровохлебки лекарственной.
Целью исследования явилось изучение влияния водных извлечений корневищ с корнями и травы кровохлебки лекарственной (Sanguisorba officinalis L.), произрастающей в Республике Башкортостан, на процессы сво-боднорадикального окисления (СРО) в модельных системах (МС) in vitro с использованием экспресс-метода определения антиокси-дантной активности, основанного на регистрации хемилюминесценции (ХЛ).
Материал и методы
Объектами исследования служили образцы сырья кровохлебки лекарственной, собранные в фазу цветения и плодоношения в 2014 году в Республике Башкортостан. Антиоксидантную активность водных извлечений [1] определяли методом регистрации хемилюминесценции на приборе «Хеми-люминомер ХЛМ-003» в системах, моделирующих процессы выработки активных форм кислорода (АФК) и перекисного окисления липидов (ПОЛ) [3].
В качестве МС, где генерировались АФК, использовали 10 мл фосфатного буфера (20 мМ KH2PO4, 105 мМ KCl) с добавлением раствора люминола (10-5 М) и цитрата натрия (50 мМ). Величину pH полученного раствора доводили до 7,45 ед. титрованием насыщен-
ным раствором едкого калия. Для инициирования реакций, сопровождающихся образованием АФК, вводили 1 мл 50 мМ раствора солей Fe2+. Регистрация свечения продолжалась в течение 5 минут при постоянном перемешивании. ХЛ МС характеризовалась спонтанным свечением, быстрой вспышкой и развивающейся затем медленной вспышкой. Основными наиболее информативными характеристиками ХЛ служили светосумма свечения, определяющаяся по интенсивности излучения, и амплитуда максимального свечения [4].
Влияние исследуемых водных экстрактов на ПОЛ изучали в липидах куриного желтка, сходных по составу с липидами крови. Ли-пиды получали путем гомогенизирования куриного желтка в фосфатном буфере в соотношении 1:5 и последующим разбавлением в 20 раз, отбирали 10 мл. Добавление в систему 1 мл 50 мМ раствора Fe2+ вело к инициированию окисления ненасыщенных жирных кислот, что сопровождалось ХЛ. По интенсивности свечения судили о процессах ПОЛ. Окисление ли-пидов инициировалось введением сернокислого железа, катализирующего окисление ненасыщенных жирных кислот, входящих в состав липидов и образование продуктов перекисного окисления. Уровень спонтанного свечения характеризует интенсивность перекисного окисления липидов до введения катализатора; амплитуда быстрой вспышки отражает скорость окисления ионов Fe2+ и образования АФК и гидроперекисей липидов; длительность латентного периода коррелирует с антиокислительной активностью изучаемого образца. Величина светосуммы свечения определяет способность липидов подвергаться окислению.
Результаты и обсуждение
Результаты исследования свидетельствуют о существенном ингибирующем влиянии исследуемых образцов кровохлебки лекарственной на кинетику свободнорадикаль-ного окисления в системе АФК и ПОЛ.
При добавлении в модельную систему, где генерировались АФК, водных извлечений корневищ с корнями и травы кровохлебки лекарственной уменьшалась амплитуда быстрой вспышки, удлинялся латентный период, медленная вспышка начиналась позже и угасала раньше, значение максимальной светимости снижалось (рис. 1.). Вследствие этого самая показательная характеристика хемилюминес-ценции - светосумма свечения - была меньшей по сравнению с контролем.
В табл. 1 приведены данные о влиянии корневищ с корнями и травы кровохлебки лекарственной на ХЛ модельных систем.
У"
- /Ч
/У V
У 2
вы кровохлебки лекарственной на ХЛ модельной системы, инициирующей реакции ПОЛ.
Рис. 1. Влияние водных извлечений корневищ с корнями и травы кровохлебки лекарственной на процессы СРО в модельной системе АФК: К - контроль; 1, 3, 4 - водные извлечения из корневищ с корнями кровохлебки 1,0 мг/мл; 0,1 мг/мл; 0,01 мг/мл; 2, 5, 6 - водные извлечения из травы кровохлебки 1,0 мг/мл; 0,1 мг/мл; 0,01 мг/мл
Таблица 1
Влияние корневищ с корнями и травы кровохлебки лекарственной на светосумму МС, генерирующей АФК
Опыт Концентрация, ХЛ в модели
мг/мл АФК,%.
Водные извлечения 0,01 36,9±3,5
из корневищ с корнями 0,1 13,2±2,4
кровохлебки 1,0 2,0±0,8
Водные извлечения из травы 0,01 68,3±2,8
кровохлебки 0,1 54,9±0,2
1,0 6,5±0,1
Рис. 2. Влияние водных извлечений корневищ с корнями и травы кровохлебки лекарственной на процессы СРО в модельной системе ПОЛ: К - контроль; 1, 3, 5 - водные извлечения из корневищ с корнями кровохлебки 1,0 мг/мл; 0,1 мг/мл; 0,01 мг/мл; 2, 4, 6 - водные извлечения из травы кровохлебки 1,0 мг/мл; 0,1 мг/мл; 0,01 мг/мл
Таблица 2
Влияние корневищ с корнями и травы кровохлебки
Угнетение ХЛ зависело от объема водного извлечения, добавляемого в модельную систему (0,01 мг/мл; 0,1 мг/мл; 1,0 мг/мл). Чем объем был выше, тем сильнее подавлялось свечение, что свидетельствовало о дозо-зависимом эффекте исследуемых экстрактов.
Внесение водных извлечений из корневищ с корнями и из травы кровохлебки лекарственной в МС желточных липопротеидов даже в наименьшей концентрации сопровождалось уменьшением амплитуды быстрой и медленной вспышек, увеличением длительности латентного периода, снижением значения максимальной светимости (рис. 2). Уровень свечения МС при добавлении водных извлечений корневищ с корнями и травы кровохлебки в концентрациях 0,1 и 1,0 мг/мл подавлялся практически до нуля. Следовательно, водные экстракты исследуемых образцов кровохлебки лекарственной могут рассматриваться как активные антиоксиданты перекисного окисления липидов.
В табл. 2 приведены данные о влиянии водных извлечений корневищ с корнями и тра-
Опыт Концентрация, ХЛ в модели
мг/мл ПОЛ,%
Водные извлечения 0,01 6,8±1,7
из корневищ с корнями 0,1 1,4±0,2
кровохлебки 1,0 0,5±0,1
Водные извлечения 0,01 45,7±2,2
из травы кровохлебки 0,1 2,1±0,3
1,0 1,3±0,1
Таким образом, в обеих МС исследуемые водные извлечения из корневищ с корнями и из травы кровохлебки лекарственной действовали в одинаковом направлении, а именно, снижали процессы образования свободных радикалов.
Выводы
1. Изучено влияние водных извлечений из корневищ с корнями и из травы кровохлебки лекарственной в различных концентрациях на процессы свободнорадикального окисления в системе АФК и ПОЛ.
2. Выявлена способность кровохлебки лекарственной подавлять генерацию АФК и ПОЛ в модельных системах, что характеризует ее антиоксидантные свойства, которые наиболее выражены при введении водных извлечений кровохлебки лекарственной в модельные системы АФК и ПОЛ в концентрации 0,1 и 1,0 мг/мл.
Сведения об авторах статьи: Казеева Алина Рамилевна - аспирант кафедры фармакогнозии с курсом ботаники и основ фитотерапии ГБОУ ВПО БГМУ Минздрава России. Адрес: 450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3.
Петрова Ирина Владимировна - м.н.с. ЦНИЛ ГБОУ ВПО БГМУ Минздрава России. Адрес: 450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3. Тел./факс: 8(347) 272-41-73.
Пупыкина Кира Александровна - д.фарм.н., профессор кафедры фармакогнозии с курсом ботаники и основ фитотерапии ГБОУ ВПО БГМУ Минздрава России. Адрес: 450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3. Тел./факс: 8 (347) 271-22-85. E-mail: pupykinak@ pochta.ru.
Фархутдинов Рафагат Равильевич - д.м.н., профессор, зав. ЦНИЛ ГБОУ ВПО БГМУ Минздрава России. Адрес: 450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3. Тел./факс: 8(347) 272-41-73.
ЛИТЕРАТУРА
1. Государственная фармакопея СССР: Вып. 1. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье/МЗ СССР. - 11-е изд., доп. - М.: Медицина, 1989. - 400 с.
2. Муллагулов Р.Т. Изучение антиоксидантной активности лекарственных трав методом хемилюминесценции в опытах in vitro/ Р.Т. Муллагулов, В.Н. Козлов, Л.Ф. Пономарева // Вестник Волжского университета им. В.Н. Татищева. - 2012. - № 1. - С.231-234.
3. Фархутдинов, Р.Р. Методики исследования хемилюминесценции биологического материала на хемилюминометре ХЛ-003 / Р.Р. Фархутдинов, С.И. Тевдорадзе // Методы оценки антиоксидантной активности биологически активных веществ лечебного и профилактического назначения: Сборник докладов. Под ред. проф. Е.Б. Бурлаковой. - М.: Изд-во РУДН, 2005. - С. 147-154.
УДК 611.352
© Коллектив авторов, 2015
И.И. Хидиятов, Р.Ф. Адиев, И.М. Насибуллин, Н.Р. Ария, Л.Г. Булыгин, Ф.Б. Гибадуллина МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ РАЗВИТИЯ АНАЛЬНЫХ ТРЕЩИН
ГБОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет» Минздрава России, г. Уфа
В статье приведен анализ морфологических изменений мышц внутреннего сфинктера у лиц различных возрастных групп. Проведено морфологическое исследование на 30 секционных препаратах анального канала, взятых из анодермы у трупов - у 11 мужчин и 19 женщин различных возрастных групп (22-35 лет (n=10); 36-60 лет (n=10) и 61-74 года (n=10)). Выявлено, что с возрастом происходит постепенная атрофия мышечных элементов внутреннего сфинктера в сочетании со склеротическими изменениями в строме и сосудах, что необходимо учитывать при выборе оперативного способа лечения. Ключевые слова: анальная трещина, исследование, возрастные изменения.
I.I. Khidiyatov, R.F. Adiev, I.M. Nasibullin, NR. Ariya, L.G. Bulygin, F.B. Gibadullina MORPHOLOGICAL ASPECTS OF ANAL FISSURE DEVELOPMENT
The article presents the analysis of morphological changes of muscles of the internal sphincter in individuals of various age groups. Morphological study on 30 sectional preparations of the anal canal, taken from corpses anoderm- 11 men and 19 women of different age groups (22-35 years of age (n=10); 36-60 (n=10) and 61-74 (n=10)). It is revealed that with age there is a gradual atrophy of the muscular elements of the internal sphincter in combination with sclerotic changes in stroma and vessels that must be considered when selecting surgical treatment method.
Key words: anal fissure, research, age-related changes.
Анальная трещина является одним из частых и трудноподдающихся лечению заболеваний человека. По данным Г.И. Воробьева (2006), заболеваемость анальной трещиной составляет 20-30 человек на 1000 человек взрослого населения. Среди больных колопр-октологического отделения пациенты с анальной трещиной составляют 11-13% [1,2,4,6,8,10]. В подавляющем большинстве случаев анальная трещина встречается у лиц в возрасте от 20 до 45 лет, что определяет социально-экономическую значимость проблемы [1,2]. Отмечено, что у лиц пожилого и старческого возраста, страдающих запорами, трещина анального канала встречается реже, чем у более молодых лиц [1,3,5,6,7,9]. Атрофиче-ские изменения внутреннего сфинктера, по нашему мнению, способствуют уменьшению числа больных с хронической анальной трещиной в пожилом и старческом возрасте, что необходимо учитывать при выборе оперативного способа лечения.
Целью исследования явилась морфологическая оценка изменений мышц внутреннего сфинктера у лиц различных возрастных групп.
Материал и методы
Морфологическим исследованиям подверглись 30 секционных препаратов анального канала, взятых из области анодермы у трупов (11 мужчин и 19 женщин) различных возрастных групп (22-35 лет (п=10); 36-60 лет (п=10) и 61-74 года (п=10)). Окраска препаратов проводилась по Романовскому - Гимзе и пикрофуксином по Ван Гизону.
Результаты и обсуждение
У лиц в возрасте 22-35 лет мышечная ткань анального сфинктера хорошо развита (рис. 1). Мышечные волокна имеют ровный, упорядоченный ход, цитоплазма прокрашивается равномерно, ядра имеют продольную ориентацию. Межмышечные прослойки представлены рыхлой соединительной тканью с сетью тонких структурированных пучков коллагено-вых волокон и тонкостенными сосудами.
У лиц 36-60-летнего возраста выраженность межмышечных соединительнотканных прослоек заметно возрастает (рис. 2). Они представлены утолщенными пучками коллагеновых волокон, местами имеющих извитой ход, упорядоченность которого теряется (рис. 3).
