CC BY
37
7. Скляров П. М. Вплив антибютишв i середовищ для культивування ооципв in vitro на яшсш показники сперми буга!в: автореф. дис. ... к.. с.-г. н.: 03.00.20 / П. М. Скляров; УААН. 1н-т тваринництва. - Х., 1999. - 18 с.
8. Филатов А. В. Научные основы и практические методы применения озона и биологически активных веществ для повышения воспроизводительной способности свиноматок и хряков-производителей: автореф. дис. ... д. вет. н. (16.00.07 -ветеринарное акушерство и биотехника репродукции животных) / А. В. Филатов. -Киров, 2005 - 374 с.
9. Чистяков И. Я. Научно-производственное обоснование профилактики бесплодия тонкорунных овец (по зоне Ставропольского края): автореф. дис. ... к. б. н. / И. Я. Чистяков. - М.: Всесоюзный институт экспериментальной ветеринарии, 1965. - 22 с.
Стаття надшшла до редакцИ 4.09.2015
УДК 619:616-07:619:616.008.9:636.2
CniBmcbKa Л. Г., д. вет. н., професор, Федорович В. Л., к. вет. н.©
Льегеський нацгональний ушеерситет еетеринарног медицины та б1отехнологт 1мен1 С. З. Гжицького, м. Лье1е, Украгна
ПОР1ВНЯЛЬНА ШФОРМАТИВШСТЬ ЛАБОРАТОРНИХ ПОКАЗНИК1В ЗА ОСТЕОДИСТРОФП КОР1В
Наведено результати дослгджень окремих бгохгмгчних маркерге кроег та метаболт1е сполучног тканини за остеодистрофИ корге. Встаноелено, що у корге 1з субклтчним перебггом умгст загального кальцгю буе знижений у 18,9 %, концентрация неорганичного фосфору лише е 5,7 % теарин. У хеорих на остеодистрофгю корге лише у 5 % корге загальний кальцШ буе у нормг, а е 95,0 % еияелено його зниження, яке поеднуеалася з гтофосфатем1ею у 35,0 % хеорих теарин.
Обхрунтоеано найбыьш тформатиеш тести ранньог диагностики остеодистрофИ. Встаноелено, що критериями для диагностики субклтчного перебггу остеодистрофИ е лимонна кислота, загальш глгкозамтоглгкани, хондрогтинсульфати та с1алогл1копротегни. Дан1 маркери еиходили за ф1зюлог1чш л1мти у 100 % корге за субклтчного перебггу захеорюеання та е клШчно хеорих, проте концентрация остеокальцину - знижуеалася у 60 та 100 % егдпоегдно.
Ключов'1 слова: гнформатиенгсть, короеи, остеодистроф1я, загальний кальцгй, неоргангчний фосфор, лимонна кислота, ыалоглжопротегни, хондрогтинсульфати, глгкозамгноглгкани.
УДК 619:616-07:619:616.008.9:636.2
Сливинская Л. Г., д. вет. н., профессор, Федорович В. Л., к. вет. н.
Льеоеский национальный униеерситет еетеринарной медицины и биотехнологий имени С. З. Гжицкого, г. Льеое, Украина
СРАВНИТЕЛЬНАЯ ИНФОРМАТИВНОСТЬ ЛАБОРАТОРНЫХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ПРИ ОСТЕОДИСТРОФИИ КОРОВ
Приеедены результаты исследоеаний отдельных биохимических маркерое кроеи и метаболитое соединительной ткани при остеодистрофии корое. Устаноелено, что у корое при субклиническом течением содержание общего кальция было снижено е 18,9%, концентрация неорганического фосфора только е 5,7% жиеотных. У больных остеодистрофией корое е 5% корое общий кальций был е норме, а е 95,0% еыяелено его снижение, которая сочеталась с гипофосфатемией е 35,0% больных жиеотных.
© Слшнська Л. Г., Федорович В. Л., 2015
205
Обоснованно наиболее информативные тесты ранней диагностики остеодистрофии. Установлено, что критериями для диагностики субклинического течения остеодистрофии является лимонная кислота, общие гликозаминогликаны, хондроитинсульфаты и сиалогликопротеины. Данные маркеры выходили за физиологические лимиты в 100% коров при субклиническом течении заболевания и в клинически больных, однако концентрация остеокальцина - снижалась в 60 и 100% соответственно.
Ключевые слова: информативность, коровы, остеодистрофия, общий кальций, неорганический фосфор, лимонная кислота, сиалогликопротеины, хондроитинсульфаты, гликозаминогликаны.
UDC 619:616-07:619:616.008.9:636.2
Slivinska L.G., doctor of veterinary science, professor Fedorovich V.L., candidate of veterinary science
L 'viv national university of veterinary medicine and biotechnologies named after S. Z. Gzhytskyj
COMPARATIVE INFORMATIVE LABORATORY PARAMETERS FOR OSTEODYSTROPHY COWS
The results of some studies of biochemical markers of blood and connective tissue metabolites osteodystrophy cows are given in article. It was established that cows with subclinical disease course content of total calcium was reduced to 18.9%, the concentration of inorganic phosphorus in only 5.7% of the animals. In cows with osteodystrophy only 5% of cows total calcium was normal, and 95.0% found its decline, which combined with hypophosphatemia in 35.0% of patients animals.
Proved most informative tests early diagnosis of osteodystrophy. Established that the criteria for the diagnosis of subclinical course osteodystrophy is citric acid, common glycosaminoglycans, and chondroitinsulphates sialglycoproteins. These markers beyond the physiological limits of 100% of cows with subclinical disease and clinically sick, but osteocalcin concentration - declining 60 and 100% respectively.
Keywords: informative, cows, osteodystrophy, total calcium, inorganic phosphorus, citric acid, sialglycoproteins, chondroitinsulphates, glycosaminoglycans.
На раншх стад1ях дiагностики остеодистрофп у KopiB таю показники, як загальний кальцш, неоргашчний фосфор, загальна лужна фосфатаза та лужний резерв не завжди достатньо шформативш внаслщок здатносп гомеостазу до врiвноваження. Недосконалють цих теспв вимагае розроблення чутливих бiохiмiчних критерпв юсткового метаболiзму. Тому на сьогодш актуальним е визначення тих метаболтв, яю е специфiчними складовими мшерального i оргашчного матриксу юстки або iнгредiентiв, що вщграють роль у li формуванш або деструкци [1].
На жаль, !х використання у вггчизнянш ветеринарнш дiагностицi обмежене. Це пов'язано з високою вартютю реагента, потребою в спещальному обладнанш, квалiфiкованому персонала
Поряд з цим юнуе ряд маркерiв, як можуть бути надшним критерiем для ощнки стану юстково! тканини i не вимагають коштовних витрат i складних маншуляцш [2-5].
Мета дослщження. Провести порiвняльну ефективнють окремих лабораторних показниюв за остеодистрофп корiв при рiзних формах li переб^у.
MaTepian i методи дослщжень. Дослщження здшснювали у трьох господарствах Львiвськоl обласп на коровах чорно-рябо! породи у вщ 3-10 роюв.
206
У попередшх роботах нами було встановлено, що ращони тварин не збалансоваш за змютом макро- i мшроелеменив й вiтамiнiв [6].
Для бiохiмiчних дослiджень у rapiB вiдбирали проби кровi, в якш визначали: загальний кальцiй - за допомогою реактиву арсеназо III (Bauer P., 1981), неоргашчний фосфор - з амонiймолiбдатом за OH Lopez, J.A. Lowry (1946), магнш - по реакци з кальмагггом, лимонну кислоту - по Е. Beutler i М.К. Veh (1959) в модифшаци Ат. Каракашова, Е. Вiчева (1968) [7], остеокальцин -хемшюмшсцентний методом, глiкозамiноглiкани (ГАГ) у сироватщ кровi з алцiановiм сишм (Вб) по EW Gold (1979) та ix фракцiйний склад [8], аалоглкопротеши - за А. Gottschalk (1972) G.W. Jourdian et al. (1971), хондротнсульфати (ХТС) - за методикою М. Nemeth-Csoka (1961) [9].
Результати дослщження. На пiдставi виявлених симптомiв i отриманих результатiв лабораторних дослщжень було створено три групи корiв: клiнiчно здоровi, з субклшчним перебiгом остеодистрофи без виражених патогномошчних клiнiчниx ознак i xворi з клшчними симптомами остеодистрофи.
Концентрацiя загального кальцда та неорганiчного фосфору в сироватщ кровi клiнiчно здорових корiв знаходилася в межах норми. У корiв iз субклiнiчним перебiгом умют загального кальцiю був знижений у 18,9 % корiв, а в 81,1 % лiмiти його були у межах норми (табл. 1). В цей час для гомеостазу кальщю запускаються мехашзми резорбцп юстково' тканини як його джерела.
У 94,3 % корiв iз субклшчним перебiгом концентрацiя неорганiчного фосфору була в норм^ а гiпофосфатемiя розвивасться лише в 5,7 % тварин (табл. 1).
У хворих на остеодистрофда корiв лише у 5 % корiв загальний кальцiй був у норм^ а в 95,0 % виявлено гшокальщемда, яка поеднувалася з гiпофосфатемieю у 35,0 % хворих тварин (табл. 1). Середш 1хш показники становили 2,2±0,05 i 1,6±0,07 мкмоль/л. В цей перюд гомеостаз кальцiю та фосфору не може тдтримуватися за рахунок юстково' тканини та iншиx меxанiзмiв.
У складi матриксу кютково1 тканини мютиться велика кiлькiсть органiчниx кислот. Серед них важливе мюце вiдводиться лимоннш кислотi (ЛК, цитрат). Цитрат синтезуеться остеобластами i володiе сильною спорщненютю до iона кальцiю, мiж вмютом цих компонентiв у тканинах юнуе тiсний зв'язок. У процесi мiнералiзацii кiстки лимонна кислота е ключовим метаболiтом, оскiльки бере активну участь у перенесенш iонiв кальцiю iз кiстки в кров шляхом утворення комплексних сполук з фосфором i кальщем, що сприяе пiдвищенню 'хнього вмiсту в кiстковiй тканиннi до рiвня, при якому починаються процеси кристатзацп та кальцифшацп кiстки.
Концентращя лимонно' кислоти у сироватцi кровi корiв iз субклiнiчним перебiгом та хворих на остеодистрофда була зниженою в 100 % тварин (табл. 1). Ii' середнш умют становив 157,7±3,30 та 146,8±1,20 мкмоль/л. Зменшення концентрацп лимонно! кислоти вiдбуваеться за рахунок пригшчення циклу Кребса в остеобластах тд впливом паратгормону як основного регулятора кальщефосфорного обмiну, який спочатку запускае резорбцда кiстки, а по^м пригнiчуе И мiнералiзацiю через зниження рiвня лимонно'' кислоти в кютковш тканинi. В цiлому зниження И вмiсту в сироватцi кровi настае швидше, нiж розвиваеться гiпокальцiемiя.
За результатами дослiдження кровi ми вiдмiчали, що зниження лимонно'' кислоти в корiв iз субклiнiчним переб^ом остеодистрофи паралельно поеднуеться з гiпокальцiемiею та гiпофосфатемiею у 18,9 i 5,7 % корiв (табл. 1).
207
За даними лггератури, остеокальцин е маркером формування юстково! тканини, вш вщображае активнють остеобластiв. Дефщит кальцiю у рацiонi супроводжуеться зниженням його концентраций За вiдновлення оптимально! кшькосп кальцiю зростае вмiст остеокальцину, що вказуе на зменшення надходження кальщю з кiстки у кров.
Рiвень остеокальцину був знижений у 60,0 % корiв як iз субклiнiчним перебiгом та у 100 % хворих на остеодистрофда, що поеднувалося iз зниженням концентрацп лимонно! кислоти (табл. 1). Тобто у юстковш тканинi в цiлому порушувалися процеси кальцифшацп.
Визначаючи вмiст складових сполучно! тканини, а саме: загальш ГАГ, шалоглшопротеши та хондро!тинсульфати, ми встановили !х зростання у корiв iз субклiнiчним перебiгом та хворих на остеодистрофда. Так, !хня кшьюсть була бiльшою у 100 % корiв обох дослiдних груп (табл. 1).
Дiагностичне значення даних показниюв пов'язане з тим, що вони складають основу мiжклiтинноl речовини оргашчного матриксу юстково! тканини, в результат li резорбцп вони першими надходять у кров i тому е шформативними критерiями остеодистрофп.
Такий характер метаболiчних зрушень в кровi корiв за субклiнiчного перебiгу остеодистрофп дозволяе оцшити стан обмiну полiмерiв сполучно! тканини не вдаючись до шших методiв дiагностики (рентгенографi!). Ц дослщження е важливими також у диференщальнш дiагностицi первинних процесiв за остеодистрофп та вторинних уражень печiнки i нирок.
Лiтература
1. Федорович В. Л. Стан шсткового метаболiзму за остеодистрофп корiв /
B. Л. Федорович, Л. Г. Слiвiнська // Наук. вюник Луган. нац. аграр. ун-ту. - Луганськ, 2011. - № 31. - С. 223-226.
2. Стадник А. М., Федорович В. Л. Современные направления доклинической молекулярной диагностики остеодистрофии // Ученые записки Витеб. гос. акад. вет. медицины. - 2007. - Т.43 - Вып. 1. - С. 228 - 230.
3. Ковзов В. В. Диагностика нарушений обмена веществ у высокопродуктивных коров // Ученые записки Витеб. гос. акад. вет. медицины. - 2007. - Т. 43 - Вып. 1. -
C.109 - 111.
4. Морозенко Д. В. Бiохiмiчнi показники метаболiзму сполучно! тканини у дiагностицi захворювань дрiбних домашшх тварин: Монографiя / Д. В. Морозенко. -Харшв, 2011. - 120 с.
5. Biochemical markers of bone formation and resorption around parturition and during lactation in dairy cows with high and low standard milk yields / A. Liesegang, R. Eicher, M.-L. Sassi [et all.] // J Dairy Sci. - 2000. - Vol. 83. - P. 1773-1781.
6. Слiвiнська Л. Г. Остеодистрофiя корiв у мюцевост!, збвдненш на бюгенш мшроелементи (Етюлопя) / Л. Г. Слiвiнська, В. Л. Федорович, С. К. Демидюк // Наук. вюник Львiв. нац. ун-ту вет. медицини та бютехнологш iменi С.З. Гжицького. - Львiв, 2014. - Т. 16, № 3 (60). - Ч. 1 - С. 324-329.
7. Каракашов Ат. Микрометоды в клинической лаборатории / Ат. Каракашов, Е. Вичев. - София: Медицина и физкультура, 1966. - 256 с.
8. Способ определения гликозамингликансульфатов в сыворотке крови: А. С. №960626 СССР, М. кл3. G 01 №33148. / М. Р. Штерн, О. П. Тимошенко, Ф. С. Леонтьева, Г. Ф. Клюева. (СССР). - №2998857128 - 13; Заявлено 23.10.80. Опубл. 23.09.82. Бюл. №35 - С. 163.
9. Nemeth-Csoka М. A turbidimetric method for the determination of chondroitin sulphuric acid by rivanol / М. Nemeth-Csoka // Biochim. Biophys. Acta. - 1961. - Vol. 50. -P. 585-590.
Стаття надшшла до редакцИ 9.09.2015
208
Табмщя I
Вцхнлення вшсту показнншв кров[ кор]в за осгеодистрофп
Груш КЗр1Е ЗагальЕнн кальщн. мкыоль,,л Неоргашчний фссфср, мкмоль.-п Лимонна ЕИСПОИ, мкмоль.-п Остеокашцнн, нг мл Загяльш ГАГ. мг ЮОмп С1алнгп1ко-протйни. ммппь/л Хснррситнн-сульфагн, г. л
К1-ТЬ ТЕ. N ОТ Е1-ТЬ ТЕ. N К1-ТЪ ТЕ. N ОТ Ш-ТЬ ТЕ. N ОТ К1-ТЬ ТЕ. N Ж К1-ТЬ ТЕ. N ж К1-ТЬ ТЕ. У
Кгашчно здсргв1 15 15 - 15 15 - 10 10 - 10 10 10 9 1 10 10 - 10 10
у вщсотках 100 100 - 100 100 100 100 100 100 100 90 10 100 100 - 100 100
За суйнпшчшгщ пврейгу асгеодиетрофи 53 43 10 53 50 3 10 - 10 10 4 5 10 10 10 10 10 - 10
у вщсотках 100 81,1 18,9 100 94,3 5,7 100 - 100 100 40 60 100 - 100 100 - 100 100 - 100
Хвор1 на опЕоднтгрсфло 20 1 19 20 13 7 10 - 10 10 - 10 10 10 10 10 10 - 10
у вцсотках 100 5 95 100 65 100 - 100 100 - 100 100 - 100 100 - 100 100 - 100
Прямики: М- норма;
<Х - менше норми; - Ьшьше норма.
