CC BY
67
УДК 615:616-089.583.29:599.323.4
СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ВЛИЯНИЯ НАТРИЯ 2-(ТЕТРАЗОЛО [1,5-С]ХИНАЗОЛИН-5-ИЛТИО)АЦЕТАТА И БЕМИТИЛА НА ФИЗИЧЕСКУЮ ВЫНОСЛИВОСТЬ
КРЫС В УСЛОВИЯХ ДЛИТЕЛЬНОЙ ГИПОКИНЕЗИИ
© Тозюк Е.Ю., Степанюк Г.И., Черноиван Н.Г.
Кафедра фармакологии
Винницкого национального медицинского университета им. Н.И. Пирогова, Винница, Украина
E-mail: elena.tozyuk@mail.ru
В опытах на крысах установлено, что длительная гипокинезия (18 суток) сопровождается снижением физической выносливости животных. На это указывало статистически значимое уменьшение продолжительности плавательного теста и времени удерживания животных на вращающемся стержне. Курсовое введение крысам в заданных условиях эксперимента раздельно натрия 2-(тетразоло[1,5-с]хиназолин-5-илтио)ацетата (КВ-28) (1,7 мг/кг в/б) в равной степени с бемитилом (32 мг/кг в/б) способствовало повышению как динамической, так и статической выносливости животных. Это свидетельствовало о наличии у КВ-28, как и у препарата сравнения, актопротекторной активности. Способность КВ-28 повышать физическую выносливость организма была в большей мере выражена в фазе тревоги и резистентности (3 и 13 сутки) общего адаптационного синдрома, а бемитила - в фазу тревоги.
Ключевые слова: длительная гипокинезия, актопротекторная активность, динамическая и статическая выносливость организма.
COMPARATIVE CHARACTERISTIC OF THE INFLUENCE OF SODIUM 2 - (TETRAZOL[1,5-C]QUINAZOLIN-5-YLTHIO) ACETATE AND BEMITYL ON THE PHYSICAL ENDURANCE OF RATS
UNDER LONG HYPOKINESIA Tozyuk E. Yu., Stepanyuk G.I., Chernoivan N. G.
Department of Pharmacology of Vinnitsa National Pirogov Medical University, Vinnitsa, Ukraine The experiments on rats revealed a decrease in physical endurance of animals resulted from long-term hypokinesia (18 days) proved by the statistically significant reduction in the duration of the swimming test and in time of animals' hold on the rotating bar. The course introduction of sodium 2-(tetrazol[1,5-c]quinazolin-5-ylthio) acetate (1.7 mg/kg intraperitoneally) equally to Bemityl (32 mg/kg intraperitoneally) to rats in the experimental conditions contributed to the increase both in dynamic and static endurance of animals. It proved the presence of actoprotective activity in КВ-28 like in the reference drug. The ability of КВ-28 to increase physical endurance was increasingly expressed in the phase of anxiety and resistance (3d and 13th days) of general adaptation syndrome and as for Bemityl - into the phase of anxiety.
Keywords: long-term hypokinesia, actoprotective activity, dynamic and static endurance.
Малоподвижный образ жизни, автоматизация труда, монотонная мышечная деятельность, а также вынужденное ограничение двигательной активности вследствие травм и болезней являются причинами гипокинезии, которая может оказывать негативное влияние на здоровье человека [3, 5, 7, 10]. В первую очередь это проявляется нарушениями гемодинамики, сопровождающимися кислородным голоданием тканей и активацией свободнорадикального окисления [7, 9], что в дальнейшем вызывает изменения в функционировании органов и систем (сердечно-сосудистой, пищеварительной, опорно-двигательной) [1, 2, 5, 10]. Для коррекции указанных нарушений могут быть использованы актопротекторы - препараты, повышающие физическую выносливость и трудоспособность в обычных и экстремальных условиях, к числу которых относится также и гипокинезия [8].
В связи с широким распространением данной патологии и ограничением арсенала актопротек-
торов практически одним бемитилом, актуальным является поиск химических веществ с актопро-текторной активностью, пригодных для создания на их основе новых лекарственных средств с указанным действием. В этом плане перспективными являются производные 5^-тио-тетразоло[1,5-с]хиназолина, среди которых в предыдущих скрининговых исследованиях нами выявлено соединение натрия 2-(тетразоло[1,5-с]хиназолин-5-илтио)ацетат (КВ-28), которое по способности повышать физическую выносливость крыс (плавательный тест) превышало бемитил в 2 раза [6], что и стало основанием для проведения данного эксперимента.
Цель исследования: охарактеризовать влияние натрия 2-(тетразоло[1,5-с]хиназолин-5-илтио)ацетата (соединения КВ-28) в сравнении с бемитилом на физическую (динамическую и статическую) выносливость животных в условиях длительной гипокинезии.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Хронический иммобилизационный стресс (ХИС), как вариант гипокинезии, моделировали путем помещения крыс в тесные деревянные пеналы на 16 ч/сут на протяжении 18 суток. Все исследования проводили согласно требованиям «Европейской Конвенции о защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных целях» (Страсбург, 1986). Животные были распределены на 4 группы по 6 особей в каждой: I - интактные животные; II - гипокинетические крысы без фармакологической коррекции (контроль); III и IV - гипокинетические крысы, получавшие ежедневно одноразово внут-рибрюшинно (в/б) на протяжении 18 дней соответственно КВ-28 (1,7 мг/кг) и бемитил (32 мг/кг), в дозах, равных их ЭД50 по плавательному тесту. Животным контрольной группы вводили аналогично эквивалентное количество изотонического раствора натрия хлорида.
Динамическую выносливость животных оценивали по показателям плавательного теста в воде ^ 24-26оС с дополнительным 10% грузом от массы крысы, прикрепленным к корню хвоста. Регистрировали продолжительность (мин) плавания до появления признаков полной усталости, проявляющейся отказом от плавания и 10-секундным погружением животного под воду. Статическую выносливость организма крыс оценивали по времени (с) удерживания на вращающемся со скоростью 15 об/мин стержне. Исследования проводили на 3, 13 и 18 сутки эксперимента, характеризирующие соответственно фазы тре-
воги, резистентности и истощения общего адаптационного синдрома [4]. Результаты обрабатывали с помощью статистической программы StatPlus 2009. Использовали параметрический критерий t Стьюдента при нормальном распределении, непараметрический критерий W Уайта -при его отсутствии, парный критерий Т Вилкок-сона - для определения значимых изменений в динамике внутри группы, достоверными считали изменения при р<0,05. Полученные данные представлены в таблицах 1 и 2.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
В ходе данного исследования установлено негативное влияние гипокинезии на физическую выносливость крыс без коррекции в сравнении с интактными животными. Это проявлялось достоверным уменьшением продолжительности плавания и времени удержания контрольных крыс на вращающемся стержне во все сроки наблюдения с наиболее выраженным нарушением динамической и статической выносливости на 18 сутки эксперимента (см. табл. 1 и 2).
Ежедневное введение в организм крыс натрия 2-(тетразоло [1,5 -с]хиназолин-5 -илтио)ацетата в заданных условиях эксперимента способствовало практически полному восстановлению динамической и статической выносливости организма животных в сравнении с интактной группой (р>0,05), за исключением продолжительности плавательния крыс в фазе истощения (18 сутки), где этот показатель был ниже на 20,6% (р<0,05), чем у интактных животных.
Таблица 1
Влияние натрия 2-(тетразоло[1,5-с]хиназолин-5-илтио)ацетата (соединение КВ-28) и бемитила на продолжительность плавания крыс в условиях длительной гипокинезии, (М±т, п=6)
Условия эксперимента Срок наблюдения Длительность плавания, мин Динамика, %
Интактные животные 3 сутки 5,42±0,36 -
13 сутки 6,61±0,31 -
18 сутки 6,45±0,19 -
Гипокинезия без коррекции (контроль) 3 сутки 3,15±0,24* -41,9'
13 сутки 4,49±0,25* -32,1'
18 сутки 3,71±0,17* -42,5'
Гипокинезия+КВ-28 3 сутки 4,85±0,16# +54,0к
13 сутки 5,98±0,12#° +33,2к
18 сутки 5,12±0,25*# +38,0к
Гипокинезия+бемитил 3 сутки 5,27±0,21# +67,3к
13 сутки 5,32±0,24*# +18,5к
18 сутки 4,82±0,29*# +29,9к
Примечания здесь и в табл. 2: * - р<0,05 относительно соответствующего показателя интактной группы; # - р<0,05 относительно соответствующего показателя контроля; ° - р<0,05 относительно соответствующего показателя при введении бемитила; i - динамика относительно интактной группы; к - динамика относительно контрольной группы.
Таблица 2
Влияние натрия 2-(тетразоло[1,5-с]хиназолин-5-илтио)ацетата (соединение КВ-28) и бемитила на статическую выносливость крыс в условиях длительной гипокинезии, (М±т, п=6)
Условия эксперимента Срок наблюдения Длительность удерживания на стержне, с Динамика, %
Интактные животные 3 сутки 154,83±5,3 -
13 сутки 178,67±4,77 -
18 сутки 186,00±4,95 -
Гипокинезия без коррекции (контроль) 3 сутки 99,00±3,18* -36,1'
13 сутки 106,67±3,89* -40,3'
18 сутки 89,33±1,77* -52,0'
Гипокинезия+КВ-28 3 сутки 149,83±2,83# +51,3к
13 сутки 160,50±3,18*#° +50,5к
18 сутки 180,50±3,89# +102,1к
Гипокинезия+бемитил 3 сутки 144,50±2,47# +46,0к
13 сутки 151,50±2,48*# +42,0к
18 сутки 176,5±4,95# +97,6к
Позитивная динамика в нормализации обоих показателей физической выносливости крыс с ХИС наблюдалась и на фоне действия бемитила, однако длительность плавательного теста на 13 и 18 сутки исследования была достоверно ниже величины аналогичного показателя в интактной группе.
Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о наличии у натрия 2-(тетразоло[1,5-с]хиназолин-5-илтио)ацетата (КВ-28), как и у бемитила, актопротекторной активности, что проявлялось статистически значимым повышением как динамической, так и статической выносливости крыс с моделью ХИС. При этом следует подчеркнуть, что исследуемые вещества более эффективно влияют на статическую, чем динамическую, выносливость крыс с хронической гипокинезией, о чем свидетельствуют более высокие показатели времени удержания животных на вращающемся стержне, что было особенно заметно к концу исследования.
В ходе проведенного эксперимента также установлено некоторое статистически значимое преимущество натрия 2-(тетразоло[1,5-с]хиназолин-5-илтио)ацетата над бемитилом в его влиянии на физическую выносливость стрессиро-ванных гипокинезией животных в фазе резистентности (13 сутки): показатели увеличения длительности плавательного теста относительно контроля составили соответственно 33,2 и 18,5%, а времени удержания на вращающемся стержне -соответственно 50,5 и 42,0% (см. табл. 1 и 2).
Анализируя результаты проведенного эксперимента, можно предположить, что более высокое актопротекторное действие натрия 2-(тетразоло[1,5-с]хиназолин-5-илтио)ацетата, как и бемитила, в фазе тревоги и истощения (соответственно 3 и 18 сутки эксперимента) связано с
торможением в организме крыс катаболических процессов, активация которых имеет место в указанные периоды общего адаптационного синдрома [1, 4, 7]. Для установления механизмов стимулирующего действия натрия 2-(тетразоло[1,5-с]хиназолин-5-илтио)ацетата (КВ-28) на физическую выносливость организма целесообразным является изучение влияния указанного соединения на показатели биоэнергетического и белкового обменов в организме животных при физических нагрузках.
На основании проведенных исследований можно сделать следующие выводы:
1. Длительная гипокинезия приводит к снижению динамической (плавательный тест) и статической (удержание на вращающемся стержне) выносливости крыс.
2. Курсовое введение крысам с ХИС натрия 2-(тетразоло[1,5-с]хиназолин-5-илтио)ацетата в дозе 1,7 мг/кг в/б, как и бемитила (32 мг/кг в/б) способствует повышению как динамической, так и статической выносливости животных.
3. Позитивная динамика показателей динамической выносливости при применении соединения КВ-28 в наибольшей мере выражена в фазу тревоги и резистентности (3 и 13 сутки эксперимента), тогда как на фоне использования бемити-ла - преимущественно в фазу тревоги (3 сутки ХИС). При этом по эффективности в фазе резистентности (13 сутки исследования) КВ-28 преобладает над бемитилом.
ЛИТЕРАТУРА
1. Астенические расстройства в терапевтической практике: руководство по диагностике и лечению / под ред. А.В. Шаброва, С.Л. Соловьевой. - СПб, 2010. - 379 с.
2. Долганова Т.И., Лунева С.Н., Колчерина В.В., Тка-чук Е.А., Романенко С.А., Гасанова А.Г. Функциональное состояние и обмен основных электролитов у человека при гипокинезии (обзор литературы) // Современные наукоемкие технологии. -2008. - № 11. - С. 6-10.
3. Куликов В.П., Киселев В.Н. Потребность в двигательной активности. Физиология. Валеология. Ре-абилитология. - Новосибирск: Наука, 1998. -149 с.
4. Селье Г. Стресс без дистресса / общ. ред. Е.М. Крепса; пер. с англ. - М. : Прогресс, 1982. -124 с.
5. Смирнов К.В. Пищеварение и гипокинезия. -М. : Медицина, 1990. - 224 с.
6. Степанюк Г.1., Тозюк О.Ю., Воскобойтк О.Ю., Коваленко С.1., Чорноiван Н.Г. Скриншг актопро-текторно! активносп в ряду нових похщних 5-Я-
тю-тетразоло[1,5-с]хшазолшу // Фармаколопя та лжарська токсиколопя. - 2012. - № 5. - С. 59-61.
7. Тимофеева Т.Г., Синицкий А.И., Филимонова Т.А., Панков Н.Е., Козочкин Д.А., Деев Р.В. Соотношение между липопероксидацией и окислительной модификацией белка в печени в динамике тридца-тисуточной гипокинезии // Фундаментальные исследования. - 2012. - № 2. - С. 143-146.
8. Фармакологическая коррекция физической работоспособности / под ред. Н. Н. Самойлова. - М.: «Зеркало», 2002. - 120 с.
9. Akpinar D., Yargigoglu P., Derin N. The effect of lipoic acid on antioxidant status and lipid peroxidation in rats exposed to chronic restraint stress // Physiological Research. - 2008. - Vol. 57, N 6. -P. 893-901.
10. Chrousos G. Stress and disorders of the stress system // Nature Reviews Endocrinology. - 2009. -Vol. 5, N 7. - P. 374-381.
