CC BY
34
УДК [547.575+615.214.31]:599.323.4:616.379-008.64:616.153.45
Р.Д. Закрутный1, С.Ю. Штрыголь1, С.И. Мерзликин1, А.В. Мельник2,
А.А. Ходаковский2
МЕТАБОЛИЧЕСКИЕ ЭФФЕКТЫ ДИАКАМФА ГИДРОХЛОРИДА И БЕМИТИЛА У КРЫС С МОДЕЛЬЮ
ХРОНИЧЕСКОГО ИММОБИЛИЗАЦИОННОГО СТРЕССА ПРИ НОРМОГЛИКЕМИИ И АЛЛОКСАНОВОМ
САХАРНОМ ДИАБЕТЕ
Национальный фармацевтический университет, кафедры фармакологии и токсикологической химии Украина, 61002, г. Харьков, ул. Пушкинская, 53. E-mail: shtrygol@mail.ru 2Винницкий национальный медицинский университет им. Н.И. Пирогова, кафедры биохимии и фармакологии, Украина, 21018, г. Винница, ул. Пирогова, 56
Цель. Установить влияние диакамфа гидрохлорида и бемитила на углеводный, энергетический обмен и проокси-дантно-антиоксидантный баланс у нормо- и гипергликемических крыс в условиях хронического иммобилизационного стресса.
Материалы и методы. Экспериментальная терапия диакамфа гидрохлоридом (25 мг/кг внутрибрюшинно) и бемити-лом (50 мг/кг внутрибрюшинно) нормогликемических крыс и животных с аллоксановым сахарным диабетом на фоне двухнедельной иммобилизации.
Результаты. При хроническом иммобилизационном стрессе, особенно на фоне аллоксан-индуцированного диабета уменьшается запас гликогена во внутренних органах, развивается лактоацидоз, снижается пул АТФ, антиоксидантная защита и активируется оксидативный стресс. Бемитил и диакамфа гидрохлорид корригируют эти нарушения, причем последний особенно эффективен при сахарном диабете.
Выводы. В условиях иммобилизационного стресса при нормогликемии диакамфа гидрохлорид и бемитил сопоставимо нормализуют углеводный, энергетический обмен и прооксидантно-антиоксидантный баланс. На фоне сахарного диабета более выраженную коррекцию обменных процессов обеспечивает диакамфа гидрохлорид.
Ключевые слова: диакамфа гидрохлорид, бемитил, хронический иммобилизационный стресс, сахарный диабет, метаболизм.
R.D. Zakrutnyy1, S.Yu. Shtrygol'1, S.I. Merzlikin1, A.V. Mel'nik2,
A.A. Khodakovskiy2
METABOLIC EFFECTS OF DIACAMPH HYDROCHLORIDE AND BEMITHYLUM IN RATS WITH CHRONIC IMMOBILIZATION STRESS MODEL UNDER THE CONDITIONS OF NORMOGLYCAEMIA AND ALLOXAN-INDUCED
DIABETES MELLITUS
National University of Pharmacy, Departments of Pharmacology and Toxicological Chemistry, 53 Pushkinskaya Street, Kharkov, 61002, Ukraine.
2Vinnitsa National Medical University named after N.I. Pirogov, Departments of Pharmacology and Biochemistry, 56Pirogova Street, Vinnitsa, 21018,Ukraine
Purpose. To evaluate the influence of diacamph hydrochloride and bemithylum on carbohydrate and energy metabolism, as well as pro-antioxidant balance in normoglycaemic rats and on the model of diabetes mellitus.
Materials and methods. Diacamph hydrochloride (25 mg/kg i.p.) and bemithylum (50 mg/kg i.p.) experimental therapy in normoglycemic rats and ones with diabetes mellitus model under the conditions of immobilization during two weeks.
Results. In chronic immobilization stress, especially against the background of alloxan-induced diabetes mellitus there were pathological changes as follows: significant decrease of glycogen level in internal organs, appearance of lactate-acidosis, depletion of ATP pool, oxidative stress activation against the background of antioxidant protection exhaustion. Both diacamhp hydrochloride and bemithylum eliminated these impairments, diacamph hydrochloride was more effective in diabetes mellitus at that.
Summary. In chronic immobilization stress in normoglycaemic animals the diacamph hydrochloride and bemithylum exert comparable normalizing effect on carbohydrate and energy metabolism, as well as pro-antioxidant balance. Under the conditions of diabetes mellitus diacamph hydrochloride provides more marked effect than bemithylum.
Key words: diacamph hydrochloride, bemithylum, chronic immobilization stress, diabetes mellitus, metabolism.
Введение
Неблагоприятное влияние стрессирующих факторов на человека постоянно усиливается. У больных сахарным диабетом (СД) астениза-ция и снижение устойчивость к стрессу требует применения не только сахароснижающих, но и адаптогенных, акто- и стресспротекторных препаратов [1]. Ассортимент последних ограничен преимущественно производными имидазола (бемитил, этомерзол) и адамантана (броман-тан). При СД особенно важно, чтобы препараты такой направленности действия благоприятно влияли на углеводный и энергетический обмен, прооксидантно-анти-оксидантный баланс. Это обусловлено тем, что дисбаланс аэробного и анаэробного пути окисления глюкозы, нарушение энергетического обмена, усиление процессов свободнорадикального окисления являются общими механизмами повреждения головного мозга и внутренних органов при СД и стресс-реакции.
В Национальном фармацевтическом университете разработан разрешенный к применению противодиа-бетический препарат диакамф. Он не влияет на нормо-гликемию, стимулирует регенерацию панкреатических в-клеток, уменьшает инсулинорезистентность, проявляет антиоксидантные свойства [2]. Получена удобная для разработки инъекционной формы малотоксичная водорастворимая соль - диакамфа гидрохлорид (ДГ). Он проявляет церебропротекторный эффект при нормогликемии и СД, отличаясь от диакамфа выраженным антигипокси-ческим действием [3]. ДГ обладает актопротекторными свойствами, особенно при СД [4], но биохимические механизмы этого действия остаются неясными.
Цель работы - оценить влияние ДГ в сравнении с известным акто- и стресспротектором бемитилом на показатели углеводного и энергетического метаболизма, а также на прооксидантно-антиоксидантный баланс в эксперименте на нормо- и гипергликемических животных на фоне хронического иммобилизационного стресса (ХИС).
Материалы и методы
Эксперименты выполнены на 49 белых нелинейных крысах самцах массой 160-170 г. СД моделировали после 24-часовой депривации пищи подкожным введением аллоксана моногидрата (Sigma, США) в виде 5% раствора в ацетатном буфере, рН 4,5 [5]. Через 10 дней, когда гликемия превышала 11 ммоль/л, у диабетических крыс
моделировали ХИС, помещая их в тесные пеналы на 16 ч. ежедневно в течение 15 суток [6]. Нормогликемических животных подвергали такому же воздействию. В течение всего периода ХИС части животных ежедневно вводили внутрибрюшинно ДГ в дозе 25 мг/кг, обеспечивающей наиболее выраженный актопротекторный эффект, другой части - бемитил (50 мг/кг) [4].
По завершении ХИС крыс подвергали эвтаназии под пропофоловым наркозом. Выделяли четырехглавую мышцу бедра, печень, сердце и головной мозг, помещали их в охлажденный изотонический 1,15% раствор KCl, измельчали ножницами и гомогенизировали в стеклянном гомогенизаторе Поттера при 3000 об/мин в среде, содержащей 0,25 М сахарозы и 0,01 М Трис (рН 7,4) в соотношении 1:10 (масса/объем). Все процедуры проводили при температуре 4-6°С. Гомогенаты центрифугировали в течение 30 мин. при 600 g, отбирали аликвоты постъядерного супернатанта и хранили до анализа при -20°С.
Концентрацию глюкозы в крови определяли глюкозо-оксидазным методом, содержание гликогена в тканях -после его полного гидролиза по приросту глюкозы [7], общего белка - микробиуретовым методом с реактивом Бенедикта, малонового диальдегида (МДА) - с тиобарби-туровой кислотой [8], карбонильных групп белков (КГБ) -с 2,4-динитрофенилгидразином [9]. Активность суперок-сиддисмутазы (СОД) определяли по ингибированию окисления кверцетина [10], NADPH-оксидазы (КФ 1.6.3.1) -по поглощению NADPH при 340 нм [11], содержание лак-тата (метод Хохорста) и пирувата (метод Цока-Лампрех-та) - спектрофотометрически, адениловых нуклеотидов -хроматографически [7]. Энергетический заряд (ЭЗ) рассчитывали по формуле:
ЭЗ = (2АТФ + АДФ) : 2(АТФ + АДФ + АМФ) [7].
В работе использовали наборы реактивов производства ООО НПП «Филисит-Диагностика» (Украина). Результаты обрабатывали статистически с помощью программы Statistka 6.0 с использованием критерия t Стьюдента.
Результаты и обсуждение
У крыс с аллоксановым СД гликемия составила 12,3±0,09 ммоль/л, вдвое превышая показатель здоровых животных. ХИС в течение 15 дней приводил к увеличению содержания глюкозы в крови по сравнению с интактным контролем на 44% у нормогликемических
крыс и на 128% у диабетических (табл.1), что достоверно выше, чем у животных с СД, не подвергавшихся стрессу (р < 0,001). Под влиянием ХИС уменьшался запас гликогена в основных депо (табл. 1). В скелетных мышцах и печени животных, подвергавшихся только влиянию ХИС, он достоверно снизился соответственно на 28% и 42%, при сочетанном воздействии гипергликемии и стресса - на 42% и 50%.
ДГ в отличие от бемитила одинаково эффективно снижал гликемию в условиях ХИС на 21% у нормо- и на 40% у гипергликемических животных. У крыс с ХИС оба препарата нормализовали содержание гликогена в тканях. По выраженности влияния на содержание гликогена в мышцах и печени в условиях ХИС на фоне аллоксан-индуци-рованного диабета ДГ превосходил бемитил. Оба препарата значительно повышали этот показатель в сравнении с таковым у животных группы ХИС+СД, не получавших лечения (табл. 1).
ХИС сопровождался активацией анаэробного путь метаболизма глюкозы - гликолиза (табл. 2), о чем свидетельствуют неполная утилизация пировиноградной кислоты,
накопление лактата с достоверным повышением соотношения лактат/пируват. В печени крыс, подвергавшихся ХИС, уровень лактата достоверно увеличивался на 188%, пирувата - на 29%, соотношение лактат/пируват возрастало на 123% по сравнению с показателями интактных животных. ХИС характеризовался гипоэнергетическим состоянием головного мозга и миокарда (табл. 2). Так содержание АТФ в головном мозге и сердце крыс снизилось на 25% и 22%, ЭЗ - на 13% и 11%, уровень АДФ повысился на 43% и 41%, а АМФ - на 32% и 29% соответственно относительно интактного контроля. Аналогичные, но более выраженные нарушения углеводного обмена с истощением энергетических ресурсов наблюдали и у животных с ХИС на фоне СД (табл. 1 и 2).
ДГ и бемитил при изолированном ХИС оказывали одинаковый антиацидотический эффект. В условиях сочетания ХИС и СД эффективнее был ДГ, снижавший содержание лактата, пирувата и соотношение лактат/пиру-ват по сравнению с показателями нелеченных животных на 70%, 24% и 61 % соответственно против 63%, 16% и 56% на фоне бемитила.
Таблица 1
Влияние диакамфа гидрохлорида (ДГ) и бемитила на гликемию и содержание гликогена, продуктов метаболизма глюкозы в органах крыс в условиях хронического иммобилизационного стресса (ХИС)
и его сочетания с сахарным диабетом (СД), п=7
№ п/п Экспериментальная группа Глюкоза крови, ммоль/л Гликоген, мг/г влажной ткани Лактат, мкмоль/г влажной ткани Пируват, мкмоль/г влажной ткани Лактат / пируват
Печень Скелетные мышцы Печень
1 Интактный контроль 6,26±0,14 75,0±3,45 33,7 ±1,98 1,49±0,04 0,197±0,010 7,69±0,45
2 ХИС 9,03±0,06* 43,8±1,07* 24,2 ±1,41* 4,30±0,13* 0,254±0,012* 17,1±0,93*
3 ХИС+ДГ 7,11±0,29* 67,6±2,03# 30,9 ±1,22# 2,10±0,09*# 0,209±0,007# 10,1±0,65*#
4 ХИС+бемитил 10,1±0,20 * # ° 66,2±3,16# 29,8 ±1,25# 2,20±0,11*# 0,204±0,007# 10,9±0,77*#
5 ХИС+СД 14,3±0,18* # 37,2±1,41*# 19,4 ±0,48 * # 6,46±0,16*# 0,295±0,008*# 21,9±0,73*#
6 ХИС+СД+ДГ 8,60±0,12*§ ° 62,8±2,25*§° 28,4 ±1,51*§ ° 1,91±0,09*§° 0,223±0,005*§° 8,56±0,38§
7 ХИС+СД+бемитил 11,6±0,13*§ 55,6±2,11*§ 24,8 ±0,74*§ 2,37±0,13*§ 0,247±0,007*§ 9,64±0,65*§
Примечания:
1. * - р < 0,05 относительно группы № 1;
2. # - р < 0,05 между группами № 2 и № 3, № 2 и № 4 , № 2 и № 5;
3. § - р < 0,05 между группами № 5 и № 6, № 5 и № 7;
4. ° - р < 0,05 между группами № 6 и № 7.
ДГ и бемитил уменьшали энергодефицит, но их эффективность различалась в зависимости от особенностей модельной патологии (табл. 2). При ХИС оба препарата достоверно увеличивали содержание АТФ (соответственно на 28% и 30%) и ЭЗ (на 13% и 14%), снижали уровень АДФ (28% и 29%) и АМФ (на 23% и 24%) в головном мозге. Аналогично изменялись показатели обмена адениловых
нуклеотидов в миокарде. Однако при сочетании ХИС и СД более выраженное влияние на энергетический обмен оказывал ДГ. Об этом свидетельствует достоверное увеличение содержания АТФ, ЭЗ, снижение уровня АДФ и АМФ в органах в сравнении с таковыми на фоне применения бемитила (табл. 2).
Таблица 2
Влияние диакамфа гидрохлорида (ДГ) и бемитила на содержание адениловых нуклеотидов и энергетический заряд в органах крыс при хроническом иммобилизационном стрессе (ХИС) и его сочетании
с сахарным диабетом (СД), п=7
№ п/п Экспериментальные группы АТФ АДФ АМФ Энергетический заряд
мкмоль/г влажной ткани
Головной мозг
1 Интактный контроль 2,86±0,14 0,874±0,043 0,581±0,019 0,763±0,008
2 ХИС 2,13±0,08* 1,25±0,04* 0,765±0,049* 0,665±0,005*
3 ХИС + ДГ 2,73±0,12# 0,904±0,046# 0,590±0,023# 0,752±0,010#
4 ХИС + бемитил 2,76±0,11# 0,895±0,061# 0,583±0,023# 0,757±0,008#
5 ХИС + СД 1,58±0,05*# 1,77±0,07*# 1,01±0,04*# 0,565±0,009*#
6 ХИС + СД + ДГ 2,50±0,08*§ ° 0,96±0,046§° 0,65±0,014*§° 0,73±0,004*§°
7 ХИС + СД + бемитил 2,22±0,09*§ 1,13±0,04*§ 0,75±0,040*§ 0,68±0,01*§
Миокард
1 Интактный контроль 3,32±0,11 0,92±0,040 0,51±0,021 0,80±0,008
2 ХИС 2,58±0,17* 1,30±0,10* 0,65±0,042* 0,71±0,010*
3 ХИС + ДГ 3,20±0,13# 0,94±0,041# 0,53±0,032# 0,79±0,006#
4 ХИС + бемитил 3,25±0,15# 0,93±0,044# 0,52±0,027# 0,79±0,007#
5 ХИС + СД 1,87±0,07*# 1,85±0,14*# 0,88±0,061*# 0,616±0,010*#
6 ХИС + СД + ДГ 3,00±0,10*§ ° 1,05±0,05*§° 0,58±0,023*§° 0,762±0,010*§°
7 ХИС + СД + бемитил 2,61±0,15*§ 1,24±0,07*§ 0,640±0,019*§ 0,718±0,009*§
Примечания:
1. * - р<0,05 относительно группы № 1;
2. # - р < 0,05 между группами № 2 и № 3, № 2 и № 4, № 2 и № 5;
3. § - р < 0,05 между группами № 5 и № 6, № 5 и № 7.
4. ° - р<0,05 между группами № 6 и № 7.
Неблагоприятные изменения энергетического обмена сопровождались усилением свободнорадикальных процессов на фоне сниженной антиоксидантной защиты. В условиях ХИС без эндокринопатии содержание МДА и КГБ в головном мозге возрастало соответственно на 79% и 50%, в миокарде - на 78% и 52%, в печени - на 98% и 59% (табл. 3). ХИС сопровождался достоверным увеличением активности прооксидантного энзима НАДФН-оксидазы на 16% и снижением активности антиоксидантного фермента СОД на 21%. Аллоксан-индуцированный СД значительно усугублял прооксидантно-антиоксидантный дисбаланс, вызванный иммобилизацией. В частности, в группе животных с ХИС и СД статистически значимо возросла активность продуцента супероксидных анион-радикалов НАДФН-оксидазы на 38% и снизилась на 48% активность СОД. При ХИС на фоне СД нарушения прооксидантно-антиокси-дантного баланса были выражены сильнее.
ДГ и бемитил предупреждали развитие окислительного стресса в головном мозге, миокарде и печени, но их эффективность различалась в зависимости от вида патологии. При изолированном ХИС антиоксидатный эффект исследуемых препаратов был почти одинаковым, что подтверждается отсутствием достоверных различий липопероксидации и окислительной деструкции белков между группами леченных животных и контролем
(табл. 3). Оба препарата в условиях изолированного ХИС в равной степени предупреждали нарушения активности про- (НАДФН-оксидаза) и антиоксидантного (СОД) ферментов, которая не отличались от показателей интактно-го контроля. В условиях ХИС у животных с СД антиокси-дантный эффект ДГ превосходил таковой бемитила.
Заключение
В условиях модели ХИС возникает ряд метаболических нарушений в скелетных мышцах, сердце, печени и головном мозге крыс. Угнетаются процессы окислительного фосфорилирования и его сопряжение с тканевым дыханием, формируется гипоэнергетическое состояние (снижается уровень АТФ и накапливается АДФ в мозге и миокарде), уменьшается запас гликогена в печени и скелетных мышцах, преобладает анаэробный путь метаболизма глюкозы с развитием лактатацидоза. Одновременно нарушается баланс про- и антиоксидантных ферментов - возрастает активность прооксидантного энзима НАДФН-оксидазы и уменьшается активность антиокси-дантного энзима СОД, активируются процессы свобод-норадикального окисления липидов и белков в печени, мозге и миокарде. СД резко усиливает метаболические нарушения, вызванные ХИС.
Таблица 3
Влияние диакамфа гидрохлорида (ДГ) и бемитила на показатетели прооксидантно-антиоксидантного баланса у крыс при хроническом иммобилизационном стрессе (ХИС) и его сочетании с сахарным диабетом (СД), п=7
№ п/п Экспериментальные группы Малоновый диальдегида, мкмоль/г влажной ткани Карбонильные группы белков, мкмоль/мг белка НАДФН-оксидаза, нмоль/мин на 1 мг белка Супероксид-дисмутаза, у.е./мг белка
Головной мозг Миокард Печень Головной мозг Миокард Печень Печень
1 Интактный контроль 12,4+0,41 10,8+0,29 10,6+0,42 4,25+0,12 2,35+0,14 8,58+0,26 1,31+0,05 8,34+0,19
2 ХИС 21,0+0,63* 19,1+0,76* 20,9+1,23* 6,40+0,19* 3,57+0,23* 13,6+0,46* 1,51+0,06* 6,61+0,70*
3 ХИС+ДГ 13,1+0,54# 11,6+0,46# 11,7+0,93# 4,38+0,16# 2,45+0,16# 9,24+0,56# 1,34+0,04# 7,55+0,46#
4 ХИС+бемитил 13,7+0,86# 11,9+0,36# 12,3+0,91# 4,42+0,22# 2,48+0,19# 9,30+0,70# 1,33+0,03# 7,44+0,56#
5 ХИС+СД 30,5+0,94*# 26,9+0,96*# 30,1+1,92*# 7,75+0,30*# 4,36+1,16*# 17,1+1,17*# 1,81+0,12*# 4,31+0,71*#
6 ХИС+СД+ДГ 14,8+1,02*§° 14,3+0,38*§° 14,2+0,64*§° 4,81+0,23*§° 2,79+0,15*§° 9,26+0,57§ 0 1,34+0,06§ 7,16+0,40*§
7 ХИС+СД + бемитил 18,2+0,80*§ 15,6+0,41*§ 16,6+0,71*§ 5,46+0,11*§ 3,19+0,09*§ 10,8+0,29*§ 1,52+0,05*§° 6,36+0,52*§°
Примечания:
1. * - р < 0,05 относительно группы №1;
2. # - р < 0,05 между группами №2 и №3, №2 и №4 , №2 и №5;
3. § - р<0,05 между группами №5 и №6, №5 и №7;
4. ° - р<0,05 между группами №6 и №7.
ДГ и бемитил способствуют активации окислительного фосфорилирования, усилению его сопряжения с тканевым дыханием в головном мозге и миокарде, угнетению гликогенолиза и росту запасов гликогена в скелетных мышцах и печени, активации аэробного пути обмена глюкозы и уменьшению лактатацидоза в гепатоцитах, восстановлению баланса в системе про- и антиоксидантов, угнетению процессов пероксидации липидов и белков в головном мозге, миокарде и печени крыс. Эти метаболические эффекты ДГ и бемитила сопоставимы в условиях изолированного ХИС, тогда как при его сочетании с ал-локсановым СД более выраженное влияние на обменные процессы оказывает ДГ.
Полученные результаты свидетельствуют об энерго-тропных и антиоксидантных свойствах ДГ, экспериментально обосновывая целесообразность его применения как стресс- и церебропротектора при нормогликемии и особенно при СД. Благоприятное влияние ДГ на формирование энергодефицита и развитие оксидативно-
го стресса в тканях головного мозга крыс с модельной гипокинезией позволяет предположить наличие у него нейропротекторных свойств в условия данной патологии. Это предположение подтверждается данными о защитном действии ДГ на ишемизированный головной мозг крыс при билатеральной каротидной окклюзии как в условиях СД, так и при нормогликемии [3]. Ней-ропротекторные свойства ДГ при острой церебральной ишемии тоже обусловлены нормализацией углеводного и энергетического обмена, сохранением пула антиокси-дантных ферментов в структурах головного мозга. Процесс липопероксидации является триггерным фактором инициации нейроапоптоза. С учетом того, что при модельном инсульте ДГ демонстрирует выраженный анти-нейроапоптотический и цитопротекторный эффект [3], в дальнейших исследованиях целесообразно оценить эти свойства как один из возможных механизмов це-ребропротекторного действия при гипокинезии, в том числе при СД.
ЛИТЕРАТУРА
1. TODAY Study Group. Binge eating, mood, and quality of life in youth with type 2 diabetes: baseline data from the today study / D. Wilfley, R. Berkowitz, A. Goebel-Fabbri [et al.] // Diabetes Care. - 2011. - Vol. 34. - P.858-860.
2. Сучасш аспекти перорально! фармакотерапи цукрового дiабету 2 типу : монографiя / В.П. Черних, Л.М. Малоштан, Л.М. Воронша [та iH.]. - Харюв: «БУРУН i К», 2010. - 208 с.
3. Шведський В.В. Вплив дiакамфу идрохлориду на показники енергетичного обмшу в головному мозку щурiв i3 моделлю церебрально! шемп на rai цукрового дiабету / В.В. Шведський, С.Ю. Штриголь, С.1. Мерзлтн // Клiн. фармацiя. -2011.- Т. 15, №3.- С.57-61.
4. Закрутний Р.Д. Актопротекторш властивостi оригiнального антигiперглiкемiчного засобу на моделi цукрового дiабету / Р.Д. Закрутний, С.Ю. Штриголь, С.1. Мерзлiкiн // Науково-техшчний прогрес i оптимiзацiя технологiчних процеав створення лiкарських препаратiв: Мат. 4-! наук.-практ. конф. з м1жнар. участю 29-30 вересня 2011 р. - Тернопшь: ТДМУ „Укрмедкнига". - 2011. - С.205-206.
5. Dave K.R. Effect of alloxan-induced diabetes on serum and cardiac butyrilcholinesterases in the rat / K.R. Dave, S.S. Katyare // J. of Endocrinology. - 2002. - Vol.175, №1 - Р.241-250.
6. Киричек Л.Т. Стресспротекторы в эксперименте и в клинике / Л.Т. Киричек. - Харьков: ИПП «Контраст». - 2008. - 304 с.
7. Прохорова М.И. Современные методы биохимических исследований / М.И. Прохорова. - Л.: Изд-во Ленинградского ун-та, 1982. - 272 с.
8. Камышников В.С. Справочник по клинико-биохимическим исследованиям и лабораторной диагностике / В.С. Камышников. - 3-е изд. - М. : МЕДпресссинформ, 2009. - 896 с.
9. Заичко Н.В. Окислительная модификация белка сыворотки крови как маркер активности ревматоидного артрита и ее изменения под влиянием фармакотерапии амизоном, ин-дометацином, нимесулидом / Н.В. Заичко // Вестник Винницкого государственного медицинского университета. -2003. - №7 (2/2). - С.664-666.
10. Костюк В.А. Простой и чувствительный метод определения активности супероксиддисмутазы, основанный на реакции окисления кверцетина / В.А. Костюк, А.И. Потапович, Ж.В. Ковалева // Вопр. мед. химии. - 1990. - № 2. - С. 88-91.
11. p22phox mRNA expression and NADPH oxidase activity are increased in aortas from hypertensive rats / T. Fukui, N. Ishizaka, S. Rajagopalan [et al.] // Circ. Res. - 1997. - Vol . 80, № 1. -P. 45-51.
ПОСТУПИЛА 04.12.2013
