CC BY
35
УДК 611.342-018.001.6:591.8
7. Boyer J. L. New concepts of mechanisme of hepatocite bile formation // Phisiol. Rev. 1998. Vol. 60, № 2 . P. 303-326.
I. D. KUANOVA, F. CH. BAGIKIROVA
TO THE QUESTION OF CARDIAL LESIONS IN CHILDREN WITH CHRONIC CHOLECYSTOCHOLANGEITIS
The aim of the work is to upgrade diagnostics and effectiveness of treatment of the children with chronic cholecystocholangeitis by studying functional state of the cardiovascular system.
The results of clinical observations and investigations show that the functional parameters of cardiovascular system in children with cholecystocholangeitis can reflect the pathological process activity and, therefore, can be used to evaluate the providing treatment. Investigations of the functional state of the cardiovascular system can outline the way of the further rehabilitation of the children with chronic cholecystocholangeitis.
Keywords: Cardiovascular system, chronic
cholecystocholangeitis.
Г. М. МОГИЛЬНАЯ, В. Н. ЯРЕМЕНКО, Е. И. НЕВЕНЧЕНАЯ
СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА СТАНОВЛЕНИЯ ЗАЩИТНОГО БАРЬЕРА ДПК РАСТИТЕЛЬНОЯДНЫХ И ПЛОТОЯДНЫХ МЛЕКОПИТАЮЩИХ В ОНТОГЕНЕЗЕ
Кафедра гистологии, цитологии и эмбриологии КГМУ
Введение
Как известно, углеводсодержащие биополимеры (УСБ), секретируемые эпителиоцитами желудочно-кишечного тракта, имеют отношение к формированию его защитного барьера [1, 3, 4, 5, 6]. Для млекопитающих с различным типом питания показана зависимость между химическим составом защитного барьера желудка и генетически детерминированным типом питания [4, 5]. Вместе с тем защитный барьер двенадцатиперстной кишки (ДПК) изучен недостаточно.
Настоящая работа посвящена выявлению зависимости гистохимических особенностей становления защитного барьера ДПК в онтогенезе у животных с различным типом питания.
Материалы и методы
Объектом исследования послужила слизистая оболочка ДПК взрослых плотоядных (кошка, собака) и растительноядных (кролик, морская свинка, мышь, хомяк) животных, а также зародышей в ранний и поздний пренатальный периоды, в период новорожденности и в постнатальный период (ранний - молочного и поздний - смешанного питания). Всего изучен материал от 306 особей: 28 - взрослые животные, 130 - эмбрионы и плоды в различные сроки пренатального онтогенеза и 148 - животные в постнатальном периоде развития (табл. 1).
Животные были взяты из вивария Кубанской медицинской академии. Здесь же производилось оплодотворение, там же эмбрионы и плоды выращивались до определенного возраста. Эвтаназию животных, за исключением собак, кошек и кроликов, производили путем передозировки (в 2-3 раза) эфира. Собак и кошек забивали электрическим током, кроликов - с помощью воздушной эмболии через вены уха. Материал фиксировали в 10%-ном нейтральном формалине, а также в жидкости Гамперля, фиксацию производили при температуре 4°С. Материал заливали в парафин, готовили срезы толщиной 5-7 мкм. Изучение общеморфологи-
ческой картины стенки ДПК и измерение основных параметров слизистой оболочки проводились на срезах, окрашенных гематоксилином-эозином [10]. Для изучения распределения УСБ использован комплекс гистохимических методов (ШИК-реакция, альциановый синий при рН 2,7, альциановый синий и основной коричневый при рН 1,0) в сочетании с ферментными обработками, что позволило провести идентификацию выявляемых веществ [2]. С этой целью использовали схему, разработанную М. Г. Шубичем и Г. М. Могильной [7]. Кроме того, была проведена количественная оценка распределения ШИК-реактивных и альцианофильных БГ в зоне ворсинок и крипт, а также дана оценка в баллах содержания УСБ в микроструктурах слизистой оболочки ДПК. В каждом препарате подсчитывали число БГ в 5-10 случайно выбранных ворсинках или, соответственно, криптах, после чего определяли среднее количество бокаловидных гландулоцитов (БГ). По формуле [9] вычисляли средний цитохимический коэффициент (СЦК). Для оценки секреторной активности БГ использовали показатель муцинпродуцирующей активности (МПА), вычисленный по формуле: МПА=СЦКX , где X - среднее количество БГ, рассчитанное на одну ворсинку или крипту.
Количественный материал обрабатывали методом вариационной статистики по Стьюденту. Расчеты выполняли на компьютере по оригинальной программе, разработанной на кафедре гистологии, цитологии и эмбриологии КГМУ.
Результаты исследования и их обсуждение
Морфологическое исследование ДПК показало, что рельеф слизистой оболочки у плотоядных животных формируется в раннем плодном периоде (35-40 суток) онтогенеза. В то время как у растительноядных - в различные сроки: у морской свинки (45-е сутки) и кролика (18-е сутки) - в раннем, а у мыши (22-е сутки) и хомяка (10-е сутки) - в позднем плодном периоде.
Дифференцировка секреторных клеток дуоденальных желез также происходит в различные периоды
Таблица 1
Распределение изученных животных по отрядам, семействам и видам
Класс Отряд Семейство Вид Пренатальный период Ново- рож- ден- ные Постнатальный период Взрос- лые Тип питания
Ранний Поздний Лакто- трофный Период смешанного питания
Млекопитающие Mammalia Хищные Carnivora Собачьи Canidae Собака омашняя Canis familiaris 35-40 7 50-55 6 5 3-10-14 7 28-32 6 3 Плотояд- ный
Кошачьи Felidae Кошка домашняя Felis domestika 38-40 12 48-50 10 12 3-15-20 7 25-30 5 4 Плотояд- ный
Грызуны Rodentia Мышиные Muridae Мышь Mus musculus 11-13 15-17-21 4 2-7-10 15-20-25-30 5 Раститель- ноядный
14 16 9 14
Подсемейство хомяки Хомяк быкновенный Mesocri cetus auratus 7-10 14 12 10 8 2-5 7 6-10-15 11 6 Раститель- ноядный
Морские свинки Cavidae Морская свинка Cavid porcellus 45-55 8 64 4 4 5-10-15 10 25-30 8 5 Раститель- ноядный
Зайце- образные Lagomorpha Заячьи Leporidae Кролик домашний Orystolagus familiaris Oryctolaguscuni culus 18-20 14 25-28 15 5 5-10-20 18 25-30 8 5 Раститель- ноядный
Итого 69 61 38 58 52 28 306
Примечание: в числителе указан возраст животного в сутках, в знаменателе - количество животных.
Таблица 2
Морфометрические параметры слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки плотоядных животных в различные сроки онтогенеза (х ± Бх)
Параметры Вид животного Пренатальный период Период новорожден- ности Постнатальный период Взрослые животные (период дефинитивного питания)
Ранний плодный (35-40 суток) Поздний плодный (50-55 суток) Лакто-трофный период (3-14-е сутки) Период смешанного питания (20-30-е сутки)
1 2 3 4 5
Толщина слизистой оболочки (мкм) Собака 378,0 ± 1,88 728,1 ± 0,76* 1088,2 ± 1,45* 1090,1 ± 1,05* 1266,2 ± 0,94* 1502,0 ± 3,08*
Кошка 524,0 ± 0,67 700,2 ± 1,54* 710,0 ± 3,81** 1300,2 ± 1,71* 1400,2 ± 1,41* 1550,0 ± 1,64*
Высота ворсинок (мкм) Собака 270,2 ± 2,21 571,0 ± 4,94* 922,2 ± 0,94* 900,0 ± 5,21* 1166,0 ± 3,29* 1250,0 ± 3,28*
Кошка 475,4 ± 0,77 675,2 ± 0,73* 606,2 ± 1,58* 1042,4 ± 1,30* 1090,1 ± 1,34* 1110,2 ± 0,86*
Глубина крипт(мкм) Собака 124,1 ± 0,56 132,0 ± 3,14* 130,2 ± 1,83** 140,1 ± 1,70* 156,1 ± 1,80* 187,2 ± 0,86*
Кошка 50,3 ± 0,57 65,1 ± 1,04* 110,1 ± 1,98* 120,2 ± 2,65* 175,1 ± 1,06* 220,2 ± 2,03*
Примечание: * - Р<0,001, ** - Р<0,01.
39
онтогенеза: у собаки, кошки и морской свинки - в раннем плодном, у кролика и хомяка - в позднем плодном, а у мыши - в раннем постнатальном периоде. Результаты морфометрических исследований приведены в таблицах 2 и 3.
К позднему плодному периоду онтогенеза плотоядных животных, а также морской свинки (62-е сутки) и кролика (28-е сутки) УСБ являются постоянным компонентом апикальной зоны каемчатых энтероцитов секрета БГ и эпителиоцитов дуоденальных желез. Здесь определяются умеренные или даже высокие концентрации ШИК-реактивных и альцинофильных веществ. Причем характер распределения упомянутых веществ в секрете БГ и клеток дуоденальных желез вакуолизи-рованный. Для БГ плотоядных животных характерен более высокий уровень синтеза ШИК-реактивных веществ. Так, для клеток, локализованных в зоне ворсинок, СЦК составляет: у собаки - 2,44 ± 0,62 усл. ед., у кошки - 3,20 ± 0,18 усл. ед., у морской свинки - 1,57 ± 0,27 усл. ед., у кролика - 2,37 ± 0,54 усл. ед. При этом МПА соответственно равна 53,9 ± 3,54, 51,2 ± 2,98, 12,14 ± 3,33 и 24,49 ± 4,30 усл. ед. БГ крипт характери-
зуются более низкими темпами синтеза: МПА составляет 49,30 ± 3,45 у собаки, 49,60 ± 3,12 у кошки, 10,02 ± 1,60 усл. ед. у морской свинки и 7,82 ± 1,03 усл. ед. у кролика.
В период новорожденности толщина слизистой оболочки, высота ворсинок и глубина крипт нарастают, эта тенденция прослеживается и в постнатальном периоде (табл. 3). Цитохимическая характеристика эпителиоцитов слизистой оболочки с возрастом меняется. При этом для ШИК-реактивных веществ возрастные изменения связаны с усилением темпа их синтеза, что находит отражение в увеличении количества секрета и интенсивности его окрашивания в БГ и каемчатых эпителиоцитах. МПА БГ у собаки составляет 60,0 ± 4,03 (Р<0,05), у кошки - 52,0 ± 3,76 (Р>0,05), у морской свинки - 28,38 ± 11,73 (Р>0,05), у кролика - 13,0 ± 1,90 (Р<0,05), у мыши - 15,76 ± 3,09, у хомяка - 13,26 ± 1,03 усл. ед. Исчерченная каемка энтероцитов ворсинок и крипт плотоядных животных, а также морской свинки и кролика сохраняет умеренные концентрации ШИК-реактивных веществ. ДПК мыши и хомяка в зоне каемки содержит низкие концентрации упомянутых
Таблица 3
Морфометрические параметры слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки растительноядных животных в различные сроки онтогенеза (х ± Эх)
Параметры Вид животного Пренатальный период Период новорожден- ности Постнатальный период Взрослые животные (период дефинитивного питания)
Ранний плодный Поздний плодный Лактотрофный период (3-14-е сутки) Период смешанного питания (20-30-е сутки)
1 2 3 4 5
Толщина слизистой оболочки (мкм) Кролик 187,90 ± 5,1** 233,60 ± 4,3* 258,50 ± 5,8** 480,20 ± 5,9* 550,80 ± 6,0*
Морская свинка 256,77 ± 0,9 265,32 ± 3,2* 569,66 ± 2,8* 580,30 ± 4,1** 708,30 ± 4,0* 910,38 ± 5,9*
Хомяк 311,25 ± 15,0* 335,00 ± 5,5** 432,25 ± 6,1* 542,33 ± 23,1*
Мышь 132,4 ± 2,8 156,50 ± 7,8* 236,80 ± 8,9* 310,00 ± 9,4* 316,20 ± 8,0* 535,80 ± 6,4*
Высота ворсинок (мкм) Кролик 120,25 ± 4,4* 150,83 ± 3,9* 180,50 ± 4,7* 335,80 ± 5,1** 344,14 ± 5,0**
Морская свинка 184,13 ± 1,4 217,40 ± 4,3* 385,75 ± 1,6* 293,40 ± 3,2* 447,50 ± 5,0* 555,55 ± 2,9*
Хомяк 124,00 ± 8,93* 240,00 ± 17,5* 217,50 ± 2,9** 318,75 ± 4,91* 354,67 ± 7,3*
Мышь 93,40 ± 2,6 123,00 ± 5,4* 167,20 ± 9,4* 249,00 ± 5,1* 259,80 ± 8,6** 340,60 ± 6,0*
Глубина крипт (мкм) Кролик 47,40 ± 1,4* 57,50 ± 1,2* 59,13 ± 1,4** 124,20 ± 2,3* 158,60 ± 3,0*
Морская свинка 30,52 ± 0,6 43,20 ± 1,2* 165,71 ± 4,2* 217,70 ± 2,2* 267,33 ± 1,6* 277,82 ± 2,9**
Хомяк 91,00 ± 4,2 113,00 ± 8,98* 154,00 ± 2,1*
Мышь 34,20 ± 1,6 30,90 ± 2,5** 49,00 ± 1,3* 56,60 ± 3,2** 47,30 ± 0,5** 93,60 ± 3,3*
Примечание: * - Р<0,001, ** - Р<0,05.
Примечание к таблицам 2 и 3: 1 - различия между ранним плодным периодом и поздним плодным периодом; 2 - различия между поздним плодным периодом и периодом новорожденности; 3 - различия между периодом новорожденности и лактотрофным периодом; 4 - различия между лактотрофным периодом и периодом смешанного питания; 5 - различия между периодами смешанного и дефинитивного питания.
веществ. К периоду новорожденности цитохимические свойства секреторных клеток дуоденальных желез не меняются.
В ходе постнатального онтогенеза происходит постепенное усиление темпов синтеза ШИК-реактивных веществ БГ. У взрослых животных СЦК для БГ ворсинок составляет: у собаки - 3,50 ± 0,14, у кошки - 2,5 ± 0,7, у морской свинки - 2,98 ± 0,24, у кролика - 2,54 ± 0,58, у мыши - 2,89 ± 0,84, у хомяка - 2,12 ± 0,91 усл. ед. При этом МПА составляет 70,0 ± и 55,0 усл. ед. (у собаки и кошки соответственно), 40,38 ± 6,78, 29,42 ± 4,02, 26,29 ± 3,1 и 23,17 ± 2,40 усл. ед. (у морской свинки, кролика, мыши и хомяка соответственно). Помимо нейтральных гликопротеинов, зона исчерченной каемки, секрет БГ и эпителиоцитов дуоденальных желез ДПК изученных видов животных содержит кислые гликопротеины. Причем сиалогликопротеины определяются в умеренных количествах, а сульфогликопротеины у плотоядных животных - в низких, а у растительноядных - в следовых концентрациях.
Итак, у плотоядных и растительноядных животных становление морфологического статуса ДПК с нарастанием толщины слизистой оболочки, высоты ворсинок и глубины крипт происходит во все изученные сроки онтогенеза. В то время как цитохимические свойства защитного барьера формируются у разных видов животных в различные сроки: у плотоядных, а также у морской свинки и кролика - к моменту рождения. Так как именно в эти сроки в составе защитного барьера определяется весь набор УСБ, главным компонентом которого являются нейтральные гликопротеины, последние отличаются универсальностью распределения в микроструктурах слизистой оболочки (каемка энтеро-цитов, секрет БГ и эпителиоцитов дуоденальных желез). ДПК мыши и хомяка характеризуется более поздними сроками становления защитного барьера - лишь в раннем постнатальном периоде онтогенеза. При этом нейтральные гликопротеины и сиалогликопротеины выявляются в позднем пренатальном периоде, а суль-фогликопротеины в гистохимически определяемых концентрациях появляются в микроструктурах слизистой оболочки в лактотрофном периоде.
Таким образом, у плотоядных животных, а также у морской свинки и кролика, имеющих более высокую кислотность желудочного сока, а следовательно, агрессивное по отношению к слизистой оболочке ДПК желудочное содержимое, формирование защитного барьера происходит в ходе пренатального онтогенеза, и в его составе выявляются как нейтральные, так и кислые гликопротеины. У мыши и хомяка становление защитного барьера заканчивается лишь в раннем постнатальном периоде, темпы синтеза УСБ у них значительно ниже.
Поступила 25.09.2006
ЛИТЕРАТУРА
1. Берлин Л. Б., Успенский В. М. Гистологические и некоторые гистохимические особенности слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки у здоровых людей // Архив анат., гистол. и эмбриол. 1970. Т. 59. Вып. 10. С. 64-70.
2. Лилли Р. Патогистологическая техника и практическая гистохимия. М.: изд-во «Мир», 1969. 654 с.
3. Могильная Г. М. Сравнительная гистохимия гликопротеинов защитного барьера двенадцатиперстной кишки // Язвенная болезнь двенадцатиперстной кишки, осложненная кровотечением. Краснодар, 1988. С. 59-64.
4. Могильная Г. М., Шубич М. Г. Адаптивный характер защитного барьера желудка у млекопитающих // Труды II Украинского съезда анатомов, гистологов, эмбриологов. Полтава, 1985.
5. Могильная Г. М., Яременко В. Н. Гистохимические особенности становления защитного барьера желудка у млекопитающих в различные периоды онтогенеза // Архив анат., гистол. и эмбриол. 1988. Т. 95. Вып. 8. С. 73-78.
6. Успенский В. М. Защитные механизмы слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки при повышенной кислотообразующей функции желудка // Врачебное дело. 1972, № 8. С. 72-74.
7. Шубич М. Г., Лопунова Ж. К., Могильная Г. М. Экономный метод дифференциального гистохимического анализа полисахаридов //Архив анат., гистол. и эмбриол. 1966. Т. 50. Вып. 1. С. 71-74.
8. Яцковский А. Н., Боронихина Т. В., Суханов Б. П., Луцик А. Д. Изменение дуоденальных желез при модификации рациона (гистохимическое исследование с использованием лектинов) // Морфология. 1993. Т. 104. № 3-4. С. 112-118.
9. Astaldi G. and Verga L. The glycogen contect of the cells of lymphatic leukemia // Acta Haematol. 1957. Vol. 18. P. 129-132.
10. Card W. J. and Marks J. N. The relationship between the acid output of stomach following “maximal” histamine accumulation and the parietal cell mass // Clin. Sci. 1960. Vol. 19, № 1. P. 147-163.
G. M. MOGIL’NAYA, V. H. YAREMENKO, E. I. NEVENCHENAYA
COMPARATIVE CHARACTERISTICS OF THE MAKING OF DEFENSIVE BARRIER OF DUODENUM OF HERBIVOROUS AND CARNIVORE MAMMALS IN ONTOGENESIS
This article presents the findings on the making of morphological status of the duodenum of herbivorous and carnivore mammals in ontogenesis. It is shown that the terms of making of duodenum defensive barrier, and also the level of synthesis of carbon, contained biopolymers included in its content, depend on genetically determined animals’ food type.
Keywords: duodenum, carbon contained
biopolymers, ontogenesis.
