CC BY
87
даются от своих контаминантов. В итоге может быть или бессимптомное носительство микоплазмоподоб-ных бактерий, или, наоборот, развитие респираторной патологии, которую можно дифференцировать с помощью серологических тестов. Таким образом, микромицеты обладают необычным аутомикробио-зом, состоящим, по крайней мере, из вирусов или микоплазмоподобных микроорганизмов.
Выводы
1. Гифы микромицетов и их конидии являются носителями микоплазмоподобных бактерий в основном сферической формы, которые по электронной плотности и величине соответствуют элементарным тельцам и более взрослым клеткам молликут.
2. Механизм проникновения микоплазмоподоб-ных контаминантов в гифу микромицетов, их выход из конидий в окружающую среду и роль в эпидемиологии респираторных заболеваний остаются неизвестными.
ЛИТЕРАТУРА
1. Вирусы грибов, их ингибирующие и индуцирующие свойства [Текст]/А.Д.Бобырь,
Ю.П.Садовский.-Киев: Наукова Думка, 1978.-125 с.
2. Вирусы в культуре гриба FUSICOCCUM
AMIGDALI DEL [Текст]/Г.С.Муромцев,
Р.А.Максимова, И.М.Дадашева//Микробиология.-
1994.-Т.63, вып.2.-С.224-270.
3. Вирусы растений [Текст]/Р.Мэтьюз.-М.: Мир, 1973.-116 с.
4. Медицинская микоплазмология [Текст]/ С.В.Прозоровский, И.В.Раковская, Ю.В.Вульфович.-М.: Медицина, 1995.-286 с.
5. Устройство для топического электронномикроскопического обнаружения Ь-форм бактерий на полипах носа [Текст]:пат. № 2269938 Яи: МПК А 61 В 10/00 в 01 N 33/48/авторы и заявители В.М.Катола,
Э.В.Хмелькова; патентообладатель ГУ ДНЦ ФПД СО РАМН.-№2001125117; заявл. 16.08.04; опубл. 20.02.06, Бюл. №5.
6. Царство грибов: гетерогенность физиолого-
биохимических свойств и близость к растениям, животным и прокариотам (обзор)
[Текст]/Е.П.Феофилова//Прикладная биохимия и микробиология. -2001.-Т.37, №2. -С. 141-155.
7. Электронная микроскопия для начинающих [Текст]/Б.Уикли.-М.: Мир, 1975.-С.301-307.
8. Ь-формы бактерий и семейство Мусор1а8та1а-сеае в патологии [Текст]/В.Д.Тимаков, Г.Я.Каган.-М.: Медицина, 1973.-Часть 11.-С. 142-345.
Поступила 26.03.2008
УДК 612.014.462.9:616-078-099:546.26 К.В.Самсонов
СРАВНИТЕЛЬНАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ СОРБЦИИ БАКТЕРИЙ И БАКТЕРИАЛЬНЫХ ТОКСИНОВ УГЛЕРОДНЫМИ И УГЛЕРОДМИНЕРАЛЬНЫМИ СОРБЕНТАМИ
ГУ Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания СО РАМН
РЕЗЮМЕ
В 50 стендовых опытах установлены высокие сорбционные способности к бактериям и бактериальным токсинам углеродминерального сорбента СУМС-1, по отношению к углеродным сорбентам.
Ключевые слова: бактерии, бактериальный токсин, сорбенты.
SUMMARY
K.V.Samsonov
THE COMPARATIVE EFFECTIVENESS OF BACTERIA AND BACTERIAL TOXINS SORPTION WITH CARBONIC AND CARBONMINERAL SORBENTS
In 50 development tests, the high sorption of bacteria and bacterial toxins of carbonmineral sorbent SUMS-1 to carbonic sorbents was established.
Key words: bacteria, bacterial toxin, sorbents.
Для эфферентной терапии в России широко применяют различные сорбенты [1, 2]. Углеродмине-ральные сорбенты типа СУМС-1, созданные на основе минерального носителя - А1203, покрытого слоем активированного угля также активно внедряются в клиническую практику [3].
Цель исследования - сравнить сорбционные способности углеродных и углеминеральных сорбентов в отношении бактерий и бактериальных токсинов.
Материал и методы исследования
Подсчет количества микроорганизмов, адсорбированных на поверхности сорбента, проводили по следующей методике.
Сорбенты различных марок углей (углеродные СКН-1к, СКН-4м, углеродминеральные - СУМС-1) помещались в колонки высотой 12 см и диаметром 1 см, которые стерилизовались сухим жаром при температуре 1800С в течение 1 часа. В день проведения стендового опыта готовилась взвесь суточной куль-
Рис. 1. Скан-электронограмма внешней поверхности углеродминерального сорбента марки СУМС-1 с адсорбированными не ней колониями пневмококка. Увеличение х 4000.
Рис. 2. Скан-электронограмма внешней поверхности углеродминерального сорбента марки СУМС-1 с адсорбированными на ней колониями стафилококка. Увеличение х 4000.
туры некоторых пневмотропных микроорганизмов (стафилококка золотистого - штамм <^оо^46», пневмококка, стрептококка) с содержанием 109 микробных тел в 1 мл физиологического раствора, соответствующего оптическому стандарту мутности. Полученная культура микроорганизмов смешивалась с 25 мл стерильной лимфы человека и помещалась для адаптации на 1 час в термостат при температуре 37°С. Стендовые опыты проводились в стерильных условиях. Перед опытами колонки с сорбентами промывались раствором гепарина фирмы «Рихтер» (Венгрия) в разведении 5 тыс. ЕД гепарина на 500 мл физиологического раствора. Взвеси микроорганизмов пропускались методом самотека через колонки с сорбентами со скоростью 30 капель в минуту. Сорбенты после сорбции суспензии микроорганизмов обрабатывались для растровой электронной микроскопии по методу Ю.А.Ровенского (1979). Поверхность сорбента просматривали и фотографировали (рис. 1 -2 ) в электронном растровом микроскопе С-520 фирмы «Н1ТАСН1» (Япония). Полученную на фотографии площадь (8-фото) в соответствии с увеличением микроскопа и фотоувеличителя измеряли в мм2 на полуавтоматической системе анализа изображения «Ье^ А8М» (ФРГ).
Подсчитывали число колоний микроорганизмов (п) на поверхности сорбентов, а затем пересчитывали его на 1 мм2 площади поверхности сорбента по формуле:
п х 1 мм 2
X =---------------
5 - фото
Методика количественной оценки степени сорбции бактериальных токсинов различными марками сорбентов заключалась в следующем. Методика применялась в стендовых опытах, имитирующих процесс лимфосорб-ции. Через колонки с сорбентами различных марок (СКН-4м, СКН-1к, СУМС-1), высотой 12 см и диаметром 1 см методом самотека пропускали со скоростью 30 капель в минуту 25 мл взвеси лимфы человека с очищенным стафилококковым альфа-токсином, меченным I125. Для исследования брали лимфу человека в количестве 23 мл и смешивали ее с очищенным стафилококковым альфа-токсином, меченным I125, в объеме 2 мл, в разведении 1:3200, в дозе 0,44 мккюри. Полученную смесь ставили в термостат при температуре 37°С для адаптации.
Однако известно, что при сорбции из многокомпонентных растворов многие вещества взаимно вытесняют друг друга в поверхностном слое сорбента. В связи с этим, при адсорбции смеси, каждый компонент поглощается в меньших количествах, чем из индивидуальных растворов той же концентрации.
Поэтому нами в контрольных опытах вместо лимфы к токсину добавлялся 0,85% раствор №С1 (разведение и доза радиоактивного изотопа была такой же, как в основных опытах).
По разнице величин радиоактивности в пробах полученных смесей жидкостей (в имп/мин) до и после сорбции судили о сорбционной активности сорбентов. Радио-
Таблица 1
Количество микроорганизмов, сорбированных из лимфы на внешней поверхности изучаемых сорбентов ( в колониях на 1 мм2 (М+т), скорость сорбции - 30 капель/мин)
Марка сорбента Вид микроорганизмов
Стафилококк золотистый, штамм <^оо^46» Пневмококк Стрептококк
СУМС-1 150445+20057 102164+24429 94054+11386
СКН-4м 97259+12111 85137+12711 88216+9003
СКН-1к 80024+24237 81731+7547 93406+16683
Таблица 2
Активность углеродных и углеродминеральных сорбентов по извлечению из жидких сред очищенного стафилококкового альфа-токсина, меченого I125 (в имп/мин (М+т), скорость сорбции - 30 капель/мин)
Марка сорбента Смесь лимфы человека и очищенного стафилококкового альфа-токсина, меченого I125 Смесь физиологического раствора и очищенного стафилококкового альфа-токсина, меченого I125 Р
до сорбции после сорбции до сорбции после сорбции
СУМС-1 41516,0+4599,0 1255,3+366,2 41100,9+1796,5 1234,8+215,1 <0,05
СКН-1к 41182,6+2388,0 2022,4+474,6 41449,5+3442,2 1988,6+286,5 <0,05
СКН-4м 41938,2+1931,0 2383,4+482,5 41581,8+3887,9 2365,3+303,7 <0,05
активность проб определялась на установке «Гамма» (Венгрия) с автоматическим селекторным по энергии счетчиком с колодезным датчиком. Всего произведено 50 стендовых опытов.
Результаты исследований
Возможности сорбентов по извлечению из биологических жидкостей, например, лимфы, пневмотропных микроорганизмов представлены в таблице 1.
Из таблицы видно, что наибольшее количество пнев-мотропных микроорганизмов осаждал на своей поверхности углеродминеральный сорбент СУМС-1, что можно объяснить наличием на его поверхности различных по химической природе центров: полярных и неполярных (рис. 2).
Из пневмотропных микроорганизмов этим сорбентом в большей степени осаждался стафилококк, несколько меньше - пневмококк и стрептококк. Углеродные сорбенты дифференцированно сорбировали пневмотропные микроорганизмы. Так сорбент марки СКН-4м сорбировал стафилококк и стрептококк лучше, чем пневмококк. Сорбент марки СКН-1к сорбировал лучше стрептококк, чем другие микроорганизмы. В сравнительном аспекте сорбент марки СКН-4м лучше, чем сорбент марки СКН-1к сорбировал стафилококк и пневмококк, сорбент СКН-1к - лучше, чем сорбент СКН-4м сорбировал стрептококк.
Отдельной задачей ставилось сравнительное изучение детоксикационных свойств углеродных и углеродминеральных сорбентов. Для этого в 50 стендовых опытах оценивали сорбционную активность сорбентов по отношению к очищенному стафилококковому альфа-токсину, меченому I125, смешанному с лимфой человека вне организма. Контролем были 50 стендовых опытов, где сорбировались через те же сорбенты смесь физиоло-
гического раствора с очищенным стафилококковым альфа-токсином, меченым I125.
Результаты по сравнительной оценке детоксикационных возможностей углеродных (марки СКН-1к, СКН-4м) и углеродминеральных сорбентов (марки СУМС-1) представлены в таблице 2. Из данных таблицы видно, что наибольшей антитоксической сорбционной способностью обладает углеродминеральный сорбент СУМС-1, однако углеродные сорбенты достаточно хорошо адсорбируют стафилококковый альфа-токсин. Смешивание стафилококкового альфа-токсина с лимфой практически не влияло на степень сорбции его различными марками сорбентов, на что указывают результаты контрольных опытов.
Таким образом, сравнительная оценка углеродных и углеродминерального сорбента СУМС-1 показала, что последний обладает высокой сорбционной активностью, как по отношению к основным пневмотропным микроорганизмам (стафилококку золотистому, пневмококку, стрептококку), так и к микробным токсинам, а именно -к стафилококковому альфа-токсину.
ЛИТЕРАТУРА
1. Адсорбенты. Каталог-справочник [Текст]/
Н.А.Беляков, С.В.Королькова.-СПб.: СПб МАПО,
1997.-80 с.
2. Метод гемокарбоперфузии в эксперименте и клинике [Текст]/В.Г.Николаев.-Киев: Наукова Думка, 1984.-360 с.
3. Сорбционные материалы для детоксикации [Текст]/Л.Н.Рачковская//Проблемы сорбционной детоксикации внутренней среды организма.-Новосибирск,
1995.-С.223-231.
Поступила 26.03.2008
