CC BY
27
ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
© Коллектив авторов, 2011 УДК 617.713-001.17-085
СРАВНЕНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ ЭПИТЕЛИЗИРУЮЩИХ ВЕЩЕСТВ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ОЖОГЕ РОГОВИЦЫ
А.Е. Севостьянов, В.А. Соколов, М.В. Мнихович
ГОУ ВПО «Рязанский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова» Министерства здравоохранения и социального развития РФ, г. Рязань Учреждение Российской академии медицинских наук НИИ морфологии человека РАМН, г. Москва
Произвели морфологическое сравнение регенераторных свойств на экспериментальном ожоге роговицы кролика. Лечение производили в основной группе эк-дистероном, в контрольной группе - актовегином. Выявлено ускорение эпителиза-ции переднего эпителия роговицы при использовании экдистерона в сравнении с актовегином. В разные сроки наблюдения площадь дефекта эпителия при лечении экдистероном была достоверно меньше, чем в контрольной в 1,8 раз, что подтверждает гистологическое исследование.
Ключевые слова: экспериментальный ожог роговицы, эпителизация, морфологическая оценка, экдистерон, актовегин.
При ожогах глаз страдают все отделы глаза, однако наибольшую тяжесть поражения получает роговица, в силу своей локализации она является наиболее уязвимым отделом глазного яблока [3].
С целью скорейшего заживления роговицы показано применение лекарственных препаратов, оказывающих положительное действие на репаративные процессы. К таким средствам относятся фи-тоэкдистероиды (ФЭС) [1,2].
Цель исследования - сравнить регенераторное действие ФЭС при экспериментальных ожогах с общепризнанным эпителизирующим, регенераторным препаратом актовегин 20%.
Материалы и методы
Исследования были выполнены на 36 кроликах обоего пола, весом 2-2,5 кг.
Были сформированы опытная группа - 18 животных (36 глаз), контрольная группа -18 животных (36 глаз).
Ожоги II степени вызывались аппликацией фильтровальной бумаги, смоченной 2,5% раствором гидрооксида натрия с экспозицией 5 секунд на роговицу.
В опытной группе лечение включало ежедневные инстилляции (четыре раза в день) масляного раствора фито-экдистероида экдистерон 0,01%, в контрольной группе лечение включало ежедневные инстилляции (четыре раза в день) глазного геля актовегин 20%, все кролики получали глазные капли ципромед 0,3%. Дефект роговицы определяли окрашиванием флюоресцеи-ном с последующим расчетом площади дефекта на цифровых фотографиях компьютерной программой РИо1о-М. Фотографирование производили на 1, 3, 7, 14 сутки. Гистологическое исследование проводилось методом окрашивания срезов роговицы гематоксилин-эозином на 1, 3, 7, 14 дни.
Результаты и их обсуждение
В опытной группе (лечение масляным раствором ФЭС) гистологически через первые сутки преобладали явления структурного повреждения и экссудации. Ткань роговицы имела выраженные некротические изменения с небольшим эпителиальным покрытием в один слой кубических клеток. Волокна собственного слоя набухшие, расслоенные, клеточные элементы в нем отсутствовали, имелись и участки со слабой лейкоцитарной инфильтрацией с преобладанием эозинофи-лов. Так имелась картина тяжелых дистрофических и некротических изменений с тенденцией к расплавлению ткани, но уже с начинавшейся эпителизацией.
На 3 сутки отмечалось во всех слоях роговицы активные регенераторные процессы при сохранении еще некротизации в центре. Роговица частично была покрыта активно пролиферирующим многослойным плоским неороговевающим эпителием, среди клеток которого определялись многочисленные фигуры митоза. В субэпителиальных участках собственного слоя - нейтрофильная инфильтрация, в остальных отделах - набухание волокон и пролиферация молодых элементов фибропластического ряда. Отмечалась выраженная активная регенерация эпителия, который покрывал роговицу на большом протяжении и состоял в основном из двух или трех слоев.
К 7 имела место выраженная активная регенерация эпителия, который покрывал роговицу на большом протяжении и состоял в основном из трех или четырех слоев. В периферических отделах отмечалась интенсивная эозинофильная инфильтрация, пролиферация молодых клеток эпителия, который уже на значительном протяжении имел многослойное строение, в базальном слое закономерно определялись фигуры митоза. Регенерация эпителия отмечалась в ранние сроки. Отечность собственного слоя и инфильтрация уменьшались к 7 суткам наблюдения.
На 14 сутки эпителизация распространялась мощным пластом, в субэпите-
лиальных участках грануляционная ткань отсутствовала. В поверхностных отделах собственной ткани наблюдалась слабая инфильтрация эозинофилами.
В группе контроля гистологически на первые сутки в роговице наблюдались выраженные некротические изменения, осложнённые воспалительной реакцией, инфильтрация собственного слоя лейкоцитами. Зона некроза с дефектом эпителия чётко обнаруживались на третьи сутки опыта. Четвертые сутки характеризовались тяжёлыми некротическими изменениями с явлениями расплавления тканей. В ряде случаев отмечалась слабая регенерация при наличии выраженных дистрофических изменений в поверхностных слоях собственного вещества. Роговица незначительно была покрыта пролиферирующим плоским неороговевающим эпителием, среди клеток которого определялись фигуры митоза. В субэпителиальных участках собственного слоя - нейтрофильная инфильтрация, в остальных отделах -набухание волокон и пролиферация молодых элементов фибропластического ряда. Отмечалась регенерация эпителия, который покрывал роговицу на большом протяжении и состоял в основном из одного слоя клеток.
На 7 день в центральной части роговицы еще имелась зона некроза, но в периферических отделах уже отмечалась регенерация эпителия в виде пласта на значительном протяжении, состоящего из двух слоёв клеток, медленно переходящего в эпителий обычного строения. В подлежащем собственном слое отмечалась слабая пролиферация молодых элементов фибропластического ряда и потеря эозинофилии. По периферии же отмечалась регенерация многослойного плоского эпителия, переходящего в двуслойный. В этих участках в собственном слое - умеренная нейтрофильная инфильтрация и пролиферация фибропластических элементов.
На 14 сутки в центре роговицы всё ещё имелся некротически измененный собственный слой, ближе к периферии
был покрыт тонким пластом регенерирующего эпителия. Имелись и участки, где собственная ткань роговицы уже имела нормальное строение и наблюдалась лишь усиленная пролиферация клеток фибропластического ряда, а под эпителием отмечалось разрастание грануляционной ткани (в виде пласта). Регенераторные процессы в эпителии наблюдались больше по периферии роговицы.
При определении площади дефекта эпителия роговицы был отмечен определенный параллелизм. В контрольной группе на первый день площадь дефекта составила 56,17±1,64 мм2, в дальнейшем площадь дефекта эпителия сокращалась незначительно и составляла на 3 день 24,33±0,52 мм2, на 7 день 8,68±0,61 мм2 и на 14 день 7,59±0,36 мм2. Более выраженная эпители-зация была отмечена в опытной группе. На первый день площадь дефекта составила 47,23±1,37 мм2. В дальнейшем площадь сокращалась и составляла на 3 день 18,12±0,53 мм2, на 7 день 6,19±0,23 мм2 и на 14 день 2,84±0,4 мм2 . При проведении вариационного статистического анализа различия показателей дефекта эпителия в опытной и контрольной группах были достоверны на 1, 3, 7, 14 дни.
Морфологическое исследование роговицы показало, более выраженную регенеративную активность роговицы в опытной группе по сравнению с контрольной группой.
Полученные экспериментальные данные свидетельствуют, что масляный раствор ФЭС оказывает более выраженное противовоспалительное, эпителизирующее
действие по сравнению с актовегином при химических (щелочных) ожогах. Данный эффект объясняется тем, что ФЭС повышают фагоцитарную активность нейтрофилов, стимулируют биосинтез белка, активируют цитоплазматическую РНК тем самым, оказывая ранозаживляющее действие при повреждении тканей [2, 4].
Выводы
1. Масляный раствор ФЭС обладает лучшим ранозаживляющим действием по сравнению с актовегином.
2. При лечении ФЭС в опытной группе наблюдалось больше слоев эпителия, чем в контрольной группе, так же в опытной группе отмечено отсутствие грануляционной ткани в конце наблюдения.
3. В разные сроки наблюдения площадь дефекта эпителия при лечении ФЭС была достоверно меньше, чем в контрольной в 1,8 раз.
Литература
1.
2. Дармограй В.Н. [и др.] // Человек и лекарство: тез. докл. VI Рос. Нац. конгр. - М., 1999. - С. 145-146.
3. Пучковская Н.А. Ожоги глаз / Н.А. Пучковская, С.А. Якименко,
B.М. Непомнящая. - М.: Медицина, 2001. - 269 с.
4. Сыров В.Н. // Эксперим. и клинич. фармакология. - 1994. - Т. 57, №5. -
C. 66-72.
COMPARISON OF THE EFFECTIVENESS OF SUBSTANCES IN EXPERIMENTAL EPITHELIALIZED CORNEAL BURN
A.E. Sevost'yanov, V.A. Sokolov, M.V. Mnikhovich
Produced a morphological comparison of the regenerative properties of the pilot burn the cornea of rabbit. Treatment of the product of Dili in the main group of ecdys-terone in the control group - akto-veginom. Revealed the acceleration of epithelialization anterior corneal epithelium using ecdysterone compared to Actovegin. At different peri-
ods of observation of the defect area of the epithelium in the treatment of ecdysterone was significantly lower than control by 1.8 times, confirming the histological examination.
Соколов Владимир Анатольевич - д-р мед. наук, проф. кафедры глазных и ЛОР болезней ГОУ ВПО РязГМУ Минздравсоцразвития России.
Адрес: 390000 г. Рязань, ул. Павлова, д.46, кв. 16.
E-mail: [email protected].
Севостьянов Александр Евгеньевич - ассистент кафедры глазных и ЛОР болезней ГОУ ВПО РязГМУ Минздравсоцразвития России.
E-mail: [email protected].
Мнихович Максим Валерьевич - канд. мед. наук, ведущий научный сотрудник центральной патологоанатомической лаборатории Учреждения РАМН Научноисследовательского института морфологии человека РАМН, Российская Федерация, г. Москва.
E-mail: [email protected].
