Лечение токсической эрозии роговицы с применением раствора сульфатированных гликозаминогликанов (сГАГ) в эксперименте Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

УДК 617.72

DOI: 10.20310/1810-0198-2016-21-4-1686-1691

ЛЕЧЕНИЕ ТОКСИЧЕСКОЙ ЭРОЗИИ РОГОВИЦЫ С ПРИМЕНЕНИЕМ РАСТВОРА СУЛЬФАТИРОВАННЫХ ГЛИКОЗАМИНОГЛИКАНОВ (сГАГ) В ЭКСПЕРИМЕНТЕ

© А.В. Терещенко1*, |Ю.А. Белый1', Е.Х. Тахчиди

!) Г1 Y Тот...,г..,2)

С.В. Новиков3', Н.В. Майчук2', Г.Ю. Усанова2'

Калужский филиал МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова Минздрава России 248007, Российская Федерация. г. Калуга, ул. им. Святослава Федорова, 5 E-mail: [email protected] 2) МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова Минздрава России 127486, Российская Федерация, г. Москва, Бескудниковский бульвар, 59а E-mail: [email protected]

3) ООО «Научно-экспериментальное производство «Микрохирургия глаза» Минздрава России 127486, Российская Федерация, г. Москва, Бескудниковский бульвар, 59а E-mail: [email protected] [email protected]

Цель: изучение репаративной активности и протекторных свойств 0,5 % смеси сульфатированных гликозами-ногликанов (сГАГ) на экспериментальной модели токсической эрозии роговицы.

Материал и методы: 18 кроликам инсталлировали 0,1 % раствор бензалкония хлорида (БХ) 4 раза в день в течение 7 дней. Далее все животные были разделены на 3 опытные и 1 контрольную группу. В 1 -й опытной группе (6 глаз) инсталлировали 0,1 % БХ + 0,5 % сГАГ, во 2-й опытной группе (6 глаз) - 0,5 % сГАГ, в 3-й опытной группе (6 глаз) - 0,1 % БХ + 0,5 % сГАГ, в контрольной группе (18 глаз) - 0,9 % NaCl.

Результаты: на 7-е сутки эксперимента у всех животных отмечался отек роговицы, эпителий роговицы диф-фузно прокрашивался раствором флюоресцеина, по данным конфокальной микроскопии - выраженные явления воспаления в передних отделах роговицы. После начала инстилляций изучаемых растворов полное восстановление прозрачности и цитоархитектоники роговицы в 1 -й опытной группе наступило через 111 ± 5,62 ч, во 2-й опытной группе - через 10,66 ± 2,58 ч, в контрольной группе - через 119,33 ± 27,73 ч, в 3-й опытной группе -через 120 ч наблюдения эксперимент был прекращен (из-за грубых изменений структуры роговицы). Выводы: сроки полной эпителизации и восстановление цитоархитектоники роговицы во 2-й опытной группе и контрольной группе указывают на наличие выраженных регенераторных свойств сГАГ, а соотношение показ а-телей в 1 -й опытной группе и контрольной группе позволяют предположить наличие протекторных свойств сГАГ в условиях токсического воздействия БХ.

Ключевые слова: роговица; бензалкония хлорид; сульфатированные гликозаминогликаны; токсичность

ВВЕДЕНИЕ

Технология производства лекарственных растворов, используемых в офтальмологии, связана с применением различных консервантов для предотвращения микробной контаминации. Бензалкония хлорид (БХ) -наиболее распространенный консервант. Несмотря на минимальные концентрации в офтальмологических препаратах, БХ при длительном применении может оказывать токсическое действие на структуры глазной поверхности [1-5]. Это, в свою очередь, может привести к развитию токсических эрозий роговицы, а также к замедлению эпителизации роговицы при различной офтальмопатологии.

Сульфатированные гликозаминогликаны (сГАГ), входящие в состав стромы роговицы, способны стимулировать репаративные процессы и нормализовывать метаболические нарушения в соединительной ткани, а также обладают противоотечной и противовоспалительной активностью [6-10].

Необходимо изучение эффективности сГАГ на доклиническом этапе для разработки и внедрения новых методов лечения токсической эрозии роговицы у пациентов на фоне длительной медикаментозной терапии.

Цель - изучение репаративной активности 0,5 % раствора сульфатированных гликозаминогликанов (сГАГ) на экспериментальной модели токсической эрозии роговицы.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ

Экспериментальное исследование было выполнено на 18 кроликах (36 глаз) породы Шиншилла.

Для создания экспериментальной модели токсической эрозии роговицы проводили двукратные инстил-ляции 0,1 % раствора бензалкония хлорида в течение 7 дней по отработанной ранее методике [11].

После моделирования токсической эрозии роговицы все животные были разделены на 4 группы: 3 опытные и одну контрольную - в зависимости от режима инстилляций.

1686

В 1-й опытной группе (6 глаз) продолжили инсталляции 0,1 % раствора бензалкония хлорида с добавлением инсталляций 0,5 % раствора сульфатированных гликозаминогликанов.

Во 2-й опытной группе (6 глаз) инсталлировали 0,5 % раствор сульфатированных гликозаминоглика-нов, инстилляции раствора бензалкония хлорида были прекращены.

В 3-й опытной группе (6 глаз) на фоне продолжающихся инсталляций бензалкония хлорида закапывали физиологический раствор 0,9 % хлорида натрия.

В контрольной группе (18 глаз) инсталлировали физиологический раствор 0,9 % хлорида натрия.

Инсталляции исследуемых препаратов проводили 2 раза в день с дальнейшей оценкой зоны повреждения эпителия роговицы с использованием биомикроскопии глаз животных и окрашивания зоны повреждения 0,5 % раствором флюоресцеина натрия с последующей динамической фоторегистрацией переднего отрезка глаза.

Измерение площади деэпителизированной роговицы проводили с использованием программного обеспечения Adobe Photoshop СС.

Для оценки морфологических изменений ежедневно проводили конфокальную микроскопию роговицы на приборе Confoscan 4 (Nidek, Япония). Все результаты представлены в виде среднеарифметических значений ± стандартное отклонение.

РЕЗУЛЬТАТЫ

При клинико-морфологическом исследовании во всех опытных группах на 7 сутки эксперимента были зарегистрированы следующие изменения: у всех животных отмечалась слезотечение и блефароспазм. Конъюнктива всех глаз была отечная, гиперемирован-ная. Отмечалось снижение прозрачности роговицы за счет умеренного отека поверхностных слоев стромы, при окраске 0,5 % раствором флюоресцеина натрия роговица диффузно прокрашивалась в виде мелкоточечных эпителиальных дефектов.

По данным конфокальной микроскопии роговицы, во всех опытных глазах были зафиксированы явления повышенной десквамации эпителия и псевдокератини-зации. В поверхностном слое эпителия роговицы отмечалась размытость межклеточных границ с повышенной рефлективностью ядер и цитоплазмы клеток, наблюдались единичные эпителиальные дефекты. В передних слоях стромы роговицы наблюдались явления клеточного стромального отека, что проявлялось в виде повышения рефлективности ядер и цитоплазмы кера-тоцитов и визуализации их отростков. Также отмечалось снижение прозрачности экстрацеллюлярного мат-рикса и увеличение количества активных кератоцитов. При анализе морфологической картины глубоких стромальных и эндотелиального слоев роговицы изменений выявлено не было.

После получения клинико-морфологических изменений роговицы всем опытным животными проводились инстилляции согласно представленному дизайну исследования (табл. 1).

Через 6 часов от начала инсталляций исследуемых растворов во всех экспериментальных группах отмечались признаки раздражения, сохранялись слезотечение, светобоязнь. Конъюнктива оставалась гиперемирован-ной. Наименьшая по площади зона деэпителизирован-ной роговицы наблюдалась в 1-й (0,1 % БХ + сГАГ) и

Таблица 1

Характер инстилляций в экспериментальных группах

Группа исследования Характер инсталляций

1-я опытная группа 0,1 % БХ + 0,5 % сГАГ

2-я опытная группа 0,5 % сГАГ

3-я опытная группа 0,1 % БХ + 0,9 % NaCl

Контрольная группа 0,9 % NaCl

2-й (0,5 % сГАГ) опытных группах и составляла 46,37 ± ± 4,84 мм2 и 14,95 ± 4,43 мм2 соответственно.

Через 12 часов наблюдения в 1-й опытной группе (0,1 % БХ + 0,5 % сГАГ) зона деэпителизированной роговицы составляла 31,23 ± 3,72 мм2, полная эпители-зация с восстановлением прозрачности роговицы наступила через 111 ± 5,62 часов. Во 2-й опытной группе после инстилляций 0,5 % раствора сГАГ через 12 часов наблюдения в 4 опытных глазах наступила полная эпи-телизация. На конфокальной микроскопии через 12 часов наблюдения во 2-й опытной группе было выявлено восстановление морфологической структуры переднего эпителия роговицы, визуализировались клетки правильной формы с четкими границами без патологической рефлективности ядер и цитоплазмы. При изучении поверхностных слоев стромы отмечалось восстановление прозрачности экстрацеллюлярного матрикса, снижение количества активированных кератоцитов, сохранялась визуализация отростков единичных кера-тоцитов. В задних стромальных отделах и эндотели-альном слое роговицы изменений выявлено не было. В двух глазах 2-й опытной группы дефект эпителия составлял 6,55 ± 0,22 мм2, полная эпителизация была зафиксирована через 14 часов наблюдения. При наступлении полной эпителизации роговицы и восстановления ее морфологической структуры эксперимент был прекращен.

В 3-й опытной группе на фоне инсталляций 0,1 % раствора бензалкония хлорида в сочетании с 0,9 % физиологическим раствором NaCl клинические признаки раздражения нарастали с увеличением длительности наблюдения за экспериментальными животными. Через 24 часа наблюдения у всех опытных животных отмечалось выраженное слезотечение, светобоязнь. При биомикроскопии переднего отрезка глаза отмечалась ярко выраженная гиперемия конъюнктивы с явлениями смешанной инъекции, снижение прозрачности роговицы за счет отека поверхностных слоев стромы, вся поверхность роговицы прокрашивалась раствором флюо-ресцеина натрия, площадь деэпителизированной роговицы составляла 114,15 ± 1,48 мм2. На конфокальной микроскопии роговицы в структуре переднего эпителия визуалиализировались признаки ярко выраженного отека, межклеточные границы не видны, в поле зрения множественные эпителиальные дефекты, ядра клеток значительно увеличены в размерах, гиперрефлекторны. В передних и задних отделах стромы отмечалось увеличение количества кератоцитов, встречались конгломераты активированных кератоцитов под базальной мембраной эпителия, отек стромального нерва. В эндо-телиальном слое роговицы клетки правильной формы с четкими границами, однако, в цитоплазме эндотелио-цитов визуализирировалось понижение прозрачности цитоплазмы с микровключениями, что свидетельствова-

1687

Таблица 2

Динамика реэпителизации роговицы по площади эпителиального дефекта, сроки восстановления полной эпителизации

Сроки наблюдения, ч/экспериментальная группа Площадь эпителиального дефекта, мм2 Полная эпителизация роговицы, ч

6 ч 12 ч

1-я опытная группа (0,1 % БХ + 0,5 % сГАГ) 43,36 ± 4,84 31,25 ± 3,27 111 ± 5,62

2-я опытная группа (0,5 % сГАГ) 14,95 ± 4,43 1,03 ± 1,09 10,66 ± 2,58

3-я опытная группа (0,1 % БХ + 0,9 % N01) 111,45 ± 3,42 114,15 ± 1,48 -

Контрольная группа (№С! 0,9 %) 69,39 ± 10,65 55,39 ± 10,65 119,33 ± 27,73

ло об их отеке. При динамическом наблюдении за животными 3-й опытной группы через 120 часов от начала эксперимента во всех опытных глазах визуализировался выраженный хемоз конъюнктивы, смешанная инъекция. Роговица была диффузно отечная, тусклая, срез ее утолщен, поверхность шероховатая. Концен-трично лимбу отмечался рост поверхностных сосудов по направлению к оптической зоне на 2 мм. Поскольку изменения глазной поверхности приобретали характер необратимых, эксперимент в данной группе был прекращен.

В контрольной группе на фоне инсталляций 0,9 % физиологического раствора №С1 через 12 часов от начала эксперимента сохранились признаки умеренного раздражения глазной поверхности, которые проявлялись в виде смешанной инъекции конъюнктивы, отека поверхностных слоев стромы роговицы, однако, зона деэпителизации сократилась до 69,3 ± 10,65 мм2. На конфокальной микроскопии сохранялись признаки повышенной десквамации эпителия роговицы, визуализировались единичные дефекты эпителия. При этом отмечалось количественное снижение эпителиальных клеток с гиперрефлективной цитоплазмой и ядром. В передних отделах стромы сохранялась низкая прозрачность экстрацеллюлярного матрикса с повышенным скоплением активированных кератоцитов, что свидетельствовало о сохранении стромального отека роговицы. Реэпителизация роговицы проходила концен-трично лимбу, через 24 часа наблюдения зона десква-мации сократилась до 55,39 ± 10,38 мм2. Полное восстановление прозрачности роговицы с закрытием эпителиальных дефектов наступило через 119,33 ± 2,7 ч (табл. 2).

ОБСУЖДЕНИЕ

В настоящее время широко изучена роль БХ в развитии местных побочных реакции на фоне длительной местной медикаментозной терапии офтальмопатологии [12-13]. За счет детергентного действия положительно заряженной гидрофильной головки и незаряженного (углеводородного) остатка молекулы БХ способны встраиваться в клеточные мембраны, тем самым нарушая их проницаемость с последующим их повреждением [5; 14].

Длительное применение местных медикаментозных средств может вызывать токсическое повреждение роговицы, что необходимо учитывать при назначении терапии на длительный период времени, а также пациентам с сопутствующей патологией глазной поверхности [12].

Многообразие физиологических свойств сульфати-рованных гликозаминогликанов определило выбор методов лечения токсической эрозии роговицы в настоящем исследовании. Сульфатированные гликозами-ногликаны участвуют в различных биологических процессах, в т. ч. во взаимодействии «клетка - внеклеточный матрикс», активации хемокинов, ферментов и факторов роста [7; 15]. Доказана роль сульфатированных гликозаминогликанов в репарации соединительной ткани. При повреждении соединительной ткани происходит накопление сульфатированных гликозаминогли-канов в очаге повреждения, что предшествует активному фибриллогенезу. Влияние сГАГ на стимуляцию репаративных процессов в роговице осуществляется также за счет усиления миграции эпителиальных клеток с неповрежденных участков и увеличения митоти-ческой активности базальных клеток.

Результаты настоящего исследования продемонстрировали, что раствор оригинальной смеси сГАГ в концентрации 0,5 % стимулировали репаративную регенерацию в клетках эпителия роговицы (1 -я опытная группа). Это согласуется с ранее представленными данными в литературе, где указано, что экзогенно введенные сГАГ в низких концентрациях оказывают про-лиферативное действие на клетки фибробластов мыши линии L929. Репаративная активность оригинальной смеси сГАГ в концентрации 0,5 % на модели токсической эрозии роговицы кролика была изучена нами впервые.

В литературе также встречаются данные о протекторном действии несульфатированных гликозаминог-ликанов на клетки глазной поверхности кроликов в условиях токсического воздействия БХ. Протекторное действие сульфатированных гликозаминогликанов на клетки эпителия роговицы человека ранее не изучалось. Уникальная полианионная химическая структура сГАГ позволяет им связывать токсические вещества в межклеточном матриксе, блокируя поступление их в клетку. Также экзогенно введенные сГАГ могут создавать высокую концентрацию углеводов на клеточной поверхности клеток, что служит сетевым барьером для токсичных веществ. Более короткие сроки эпителиза-ции во 1-й опытной группе (0,5 % сГАГ + 0,1 % БХ) в сравнении с контрольной группой (0,9 % позво-

ляют предположить наличие выраженного протекторного действия смеси сГАГ.

Сульфатированные гликозаминогликаны способны связывать продукты распада и медиаторы воспаления, адсорбируя их, тем самым уменьшая степень выраженности воспалительной реакции. Механизм антиокси-дантного действия хондроитинсульфата исследователи

1688

связывают с ингибированием свободных форм кислорода, координацией синтеза митохондиальных и ядерных субъединиц электронно-транспортной сети посредством регулирования экспрессии ядерного респираторного фактора NRF2. В настоящей работе противовоспалительная активность и антиоксидантное действие сГАГ не изучались, однако, сроки восстановления прозрачности экстрацеллюлярного матрикса и ци-тоархитектоники роговицы по данным конфокальной микроскопии, а также купирование видимых признаков воспаления в опытных группах позволяют косвенно предположить наличие таких механизмов.

Результаты настоящего исследования указывают на выраженные регенераторные свойства 0,5 % раствора сГАГ, а также протекторное действие на клетки эпителия роговицы при токсическом воздействии раствора бензалкония хлорида в условиях эксперимента in vivo.

ВЫВОДЫ

В ходе настоящего исследования было установлено, что инстилляции оригинальной смеси 0,5 % с ГАГ вызывают более быструю эпителизацию и восстановление прозрачности роговицы (10,66 ± 2,58 ч) на модели токсической эрозии, чем в контрольной группе (119,33 ± 27,73 ч), что указывает на наличие выраженных регенераторных свойств изучаемой смеси.

Тот факт, что полная эпителизация роговицы на фоне инстилляций смеси 0,5 % сГАГ в опытной группе при продолжающихся инстилляциях раствора бензал-кония хлорида наступила быстрее (111 ± 5,62 ч), чем в контрольной группе, позволяет предположить наличие выраженного протекторного действия сГАГ в условиях токсического воздействия.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Егоров Е.А., Бржевский В.В., Муратова Н.В. Нежелательные эффекты офтальмогипотензивной терапии: синдром «сухого глаза» // Новости глаукомы. 2009. № 3. C. 3-5.

2. Егоров А.Е., Огородникова В.Ю. Изменение глазной поверхности под влиянием длительного применения антиглаукоматозных препаратов (обзор литературы) // Клин. офтальмология. 2011. № 1. С. 41-43.

3. Еричев В.П., Амбарцумян К.Г. Консерванты и вторичный синдром сухого глаза при длительной местной медикаментозной терапии первичной открытоугольной глаукомы // Глаукома. 2011. № 2. С. 59-66.

4. Малахова А.И. Комплексное изучение морфологических и гистохимических свойств роговицы при терминальной стадии первичной глаукомы // Глаукома. 2012. № 2. С. 5-9.

5. Панасюк А.Ф., Ларионов Е.В. Хондроитинсульфаты и их роль в обмене хондроцитов и межклеточного матрикса хрящевой ткани // Науч.-практ. ревматология. 2000. № 2. С. 46-55.

6. Анисимов С.И. Основные механизмы протекции тканей глаза с применением сульфатированных гликозаминогликанов. Экспериментальное исследование // Глаукома. 2007. № 2. С. 23-27.

7. Ларионов Е.В., Глыбина Т.А. Роль сульфатированных гликозаминогликанов (сГАГ) в физиологии и патофизиологии тканей паро-донта. Стоматология сегодня. М.: Полимедиа-Пресс, 2007. 245 с.

8. Огородникова В.Ю., Егоров Е.А., Егоров А.Е., Куроедов А.В., Ро-маненко И.А. Изменение переднего отрезка глаза у пациентов с продолжительным анамнезом первичной открытоугольной глаукомы // Практическая медицина. 2012. № 4. С. 21-23.

9. Панасюк А.Ф., Ярошук Г.В., Митрович Д. Влияние свободных радикалов на пролиферацию и обмен хондроцитов и на чувствительность клеточного монослоя к действию протеаз // Вопросы мед. химии. 1995. Т. 41. № 6. С. 19-22.

10. Pauloin T., Dutot M., Warnet J., Rat P. In vitro modulation of preservative toxicity: high molecular weight hyaluronan decreases apop-tosis and oxidative stress induced by benzalkonium chloride // Eur J. Pharm. Sci. 2008. V. 34. № 4-5. P. 263-273.

11. Серов В.В., Шехтер А.Б. Соединительная ткань. М., 1981. 321 с.

12. Тахчиди Х.П., Новиков С.В., Шацких А.В., Тахчиди Е.Х., Горбунова К.С. Особенности функционального значения комплекса сульфатированных гликозаминогликанов в регулировании пролиферации фибробластов in vitro // Морфология. 2012. Т. 142. № 5. С. 49-54.

13. Kopec L.K., Vacca Smith A.M., Bowen W.H. Structural aspects of glucans formed in solution and on the surface of hydroxyapatite // Gly-cobiology. 1997. № 7. P. 929-934.

14. Baudouin C. Detrimental effect of preservatives in eyedrops: implications for the treatment of glaucoma // Acta Ophthalmol. 2008. V. 86. № 7. P. 716-726.

15. Петров С.Ю., Сафонова Д.М. Консерванты в офтальмологических препаратах: от бензалкония хлорида к поликватернию // Глаукома. 2013. № 4. С. 82-87.

Поступила в редакцию 28 апреля 2016 г.

1689

UDC 617.72

DOI: 10.20310/1810-0198-2016-21-4-1686-1691

TREATMENT OF TOXIC EROSION OF THE CORNEA USING A SOLUTION OF SULPHATED GLYCOSAMINOGLYCAN (sGAG) IN THE EXPERIMENT

© A.V. Tereshchenko1), |Y.A. Belyy| 1), E.K. Takhchidi2), S.V. Novikov3), N.V. Maychuk2), G.Y. Usanova2)

1)1 Academician S.N. Fyodorov FSAE ISTC "Eye Microsurgery", Kaluga branch of Ministry of Health of Russia 5 Svyatoslava Fedorova St., Kaluga, Russian Federation, 248007 E-mail: [email protected] 2) Academician S.N. Fyodorov IRTC "Eye Microsurgery" of Ministry of Health of Russia 59a Beskudnikovskiy Blvd., Moscow, Russian Federation, 127486 E-mail: [email protected]

3) JSC "Scientific and Experimental Production "Eye Microsurgery" of Ministry of Health of Russia 59a Beskudnikovskiy Blvd., Moscow, Russian Federation, 127486 E-mail: [email protected] [email protected]

Purpose: to investigate corneal reparative activity and protective 0.5 % effect of sulphated glycosaminogli-can (sGAG) on model corneal toxic erosion.

Material and methods: 18 grey male rabbits (36eyes) weighting between 2 and 2.5 were used. Model of corneal toxic erosion was induced by treatment benzalkonium chloride (BAK) for 7 days. Then all animals randomly assigned to 4 groups: 1st group was treated with 0.1 % BAK + 0.5 % sGAG, 2nd group was treated 0.5 % sGAG, 3rd group was treated with 0.1 % BAK + 0.9 % NaCl, in control group - 0.9 % NaCl. Animal observation took place daily and included anterior eye segment bio microscopy, staining cornea with fluo-rescein and morphological control by confocal scanning microscopy.

Results: in 7 days after the impact corneal edema, erosion and inflammatory sings were observed in all cases. After starting the treatment full epithelisation in the first group was observed in 111 ± 5.62 hours, in the second one - in 10.66 ± 2.58 hours, in the control one - in 119.33 ± 27.73 hours, in the third - the experiment was finished in 120 hours (due to rood changes in corneal structure).

Conclusion: terms of reepithelisation in the experimental groups indicate the presence of protective and regenerative features of 0.5 % sGAG solution in conditions of toxic impact. Key word: cornea; benzalkonium chloride; sulphated glycosaminoglycan; toxity

REFERENCES

1. Egorov E.A., Brzhevskiy V.V., Muratova N.V. Nezhelatel'nye effekty oftal'mogipotenzivnoy terapii: sindrom «sukhogo glaza». Novosti glaukomy, 2009, no. 3, pp. 3-5.

2. Egorov A.E., Ogorodnikova V.Yu. Izmenenie glaznoy poverkhnosti pod vliyaniem dlitel'nogo primeneniya anti-glaukomatoznykh pre-paratov (obzor literatury). Russkiy meditsinskiy zhurnal. Klinicheskaya oftal'mologiya — Russian Medical Journal. Clinical Ophthalmology, 2011, no. 1, pp. 41-43.

3. Erichev V.P., Ambartsumyan K.G. Konservanty i vtorichnyy sindrom sukhogo glaza pri dlitel'noy mestnoy medika-mentoznoy terapii pervichnoy otkrytougol'noy glaukomy. Glaukoma — National Journal of Glaucoma, 2011, no. 2, pp. 59-66.

4. Malakhova A.I. Kompleksnoe izuchenie morfologicheskikh i gistokhimicheskikh svoystv rogovitsy pri terminal'noy stadii pervichnoy glaukomy. Glaukoma — National Journal of Glaucoma, 2012, no. 2, pp. 5-9.

5. Panasyuk A.F., Larionov E.V. Khondroitinsul'faty i ikh rol' v obmene khondrotsitov i mezhkletochnogo matriksa khryashchevoy tkani. Nauchno-prakticheskaya revmatologiya — Rheumatology Science and Practice, 2000, no. 2, pp. 46-55.

6. Anisimov S.I. Osnovnye mekhanizmy protektsii tkaney glaza s primeneniem sul'fatirovannykh glikozaminoglikanov. Eksperimental'noe issledovanie. Glaukoma — National Journal of Glaucoma, 2007, no. 2, pp. 23-27.

7. Larionov E.V., Glybina T.A. Rol' sul'fatirovannykh glikozaminoglikanov (sGAG) v fiziologii i patofiziolo-gii tkaney parodonta. Stoma-tologiya segodnya. Moscow, Publishing House Poly Media Press, 2007. 245 p.

8. Ogorodnikova V.Yu., Egorov E.A., Egorov A.E., Kuroedov A.V., Romanenko I.A. Izmenenie perednego otrezka glaza u patsientov s prodolzhitel'nym anamnezom pervichnoy otkrytougol'noy glaukomy. Prakticheskaya meditsina — Practical medicine, 2012, no. 4, pp. 21-23.

9. Panasyuk A.F., Yaroshuk G.V., Mitrovich D. Vliyanie svobodnykh radikalov na proliferatsiyu i obmen khondrotsitov i na chuvstvitel'nost' kletochnogo monosloya k deystviyu proteaz. Voprosy meditsinskoy khimii — Problems of Medical Chemistry, 1995, vol. 41, no. 6, pp. 19-22.

10. Pauloin T., Dutot M., Warnet J., Rat P. In vitro modulation of preservative toxicity: high molecular weight hyaluronan decreases apop-tosis and oxidative stress induced by benzalkonium chloride. Eur. J. Pharm. Sci., 2008, vol. 34, no. 4-5, pp. 263-273.

1690

11. Serov V.V., Shekhter A.B. Soedinitel'naya tkan'. Moscow, 1981. 321 p.

12. Takhchidi Kh.P., Novikov S.V., Shatskikh A.V., Takhchidi E.Kh., Gorbunova K.S. Osobennosti funktsional'nogo znacheniya kom-pleksa cul'fatirovannykh glikozaminoglikanov v regulirovanii proliferatsii fibroblastov in vitro. Morfologiya - Neuroscience and Behavioral Physiology, 2012, vol. 142, no. 5, pp. 49-54.

13. Kopec L.K., Vacca Smith A.M., Bowen W.H. Structural aspects of glucans formed in solution and on the surface of hydroxyapatite. Glycobiology, 1997, no. 7, pp. 929-934.

14. Baudouin C. Detrimental effect of preservatives in eyedrops: implications for the treatment of glaucoma. Acta Ophthalmol., 2008, vol. 86, no. 7, pp. 716-726.

15. Petrov S.Yu., Safonova D.M. Konservanty v oftal'mologicheskikh preparatakh: ot benzalkoniya khlorida k polikvaterniyu. Glaukoma -National Journal of Glaucoma, 2013, no. 4, pp. 82-87.

Received 28 April 2016

Терещенко Александр Владимирович, Калужский филиал МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова, г. Калуга, Российская Федерация, доктор медицинских наук, директор, заслуженный врач РФ, e-mail: [email protected]

Tereshchenko Aleksander Vladimirovich, Academician S.N. Fyodorov FSBI IRTC "Eye Microsurgery", Kaluga branch, Kaluga, Russian Federation, Doctor of Medicine, Director, Honored Doctor of Russian Federation, e-mail: [email protected]

Белый Юрий Александрович, Калужский филиал МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова, г. Калуга, Российская Федерация, доктор медицинских наук, профессор, зам. директора по научной работе, заслуженный врач РФ, e-mail: [email protected]

Belyy Yuriy Aleksandrovich, Academician S.N. Fyodorov FSBI IRTC "Eye Microsurgery", Kaluga branch, Kaluga, Russian Federation, Doctor of Medicine, Professor, Deputy Director on Scientific Work, Honored Doctor of Russian Federation, e-mail: [email protected]

Тахчиди Елена Христовна, МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова, г. Москва, Российская Федерация, кандидат медицинских наук, врач-офтальмолог отделения глаукомы, e-mail: [email protected]

Takhchidi Elena Khristovna, Academician S.N. Fyodorov FSBI IRTC "Eye Microsurgery", Moscow, Russian Federation, Candidate of Medicine, Ophthalmologist of Glaucoma Department, e-mail: [email protected]

Новиков Сергей Викторович, OOO «Научно-экспериментальное производство «Микрохирургия глаза», г. Москва, Российская Федерация, зам. генерального директора по производству, e-mail: [email protected]

Novikov Sergey Viktorovich, JSC "Scientific and Experimental Production "Eye Microsurgery", Moscow, Russian Federation, Deputy Director General for Production, e-mail: [email protected]

Майчук Наталья Владимировна, МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова, г. Москва, Российская Федерация, кандидат медицинских наук, врач-офтальмолог отдела рефракционной лазерной хирургии, e-mail: [email protected]

Maychuk Natalya Vladimirovna, Academician S.N. Fyodorov FSBI IRTC "Eye Microsurgery", Moscow, Russian Federation, Candidate of Medicine, Ophthalmologist of Refractive Laser Surgery Department, e-mail: [email protected]

Усанова Галина Юрьевна, МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова, г. Москва, Российская Федерация, аспирант, e-mail: [email protected]

Usanova Galina Yurevna, Academician S.N. Fyodorov FSBI IRTC "Eye Microsurgery", Moscow, Russian Federation, Post-graduate Student, e-mail: [email protected]

1691