CC BY
79
4. Строганова, И.Я. Культивирование респираторно-синцитиального вируса крупного рогатого скота с целью получения диагностических препаратов: автореф. дис. ... канд. вет. наук: 16.00.03/ И.Я. Строганова; МВА. - М., 1990 . - 16 с.
5. Разработка метода получения высокоактивного респираторно-синцитиального вирусного диагности-кума для не прямой реакции гемагглютинации / Л. Денер [и др.] // Вопр. вирусологии. - 1976. - № 6. -С.739-745.
6. Martin, H.T. Indirect haemagglutination test for the detection and assay of antibody to bovine respiratory sуncytiae virus / H.T. Martin// Vet.Rec. - 1983. - Vol. 113. - № 3. - P.290-293.
7. Метревели, Г.Д. Биологические свойства вируса и серологическая диагностика PC-инфекции крупного рогатого скота: автореф. дис. ... канд. биол. наук: 03.00.16 / Г.Д. Метревели; ВГНКИ. - М., 1989. - 19 с.
8. РНГА в серодиагностике респираторно-синцитиальной инфекции крупного рогатого скота / А.В. Васильев [и др.] // Ветеринария. - 1988. - № 10. - С.33-34.
'--------♦-----------
УДК: 619:616.988:75:636.22/28 И.Я. Строганова
СПЕЦИФИЧЕСКИЕ ГИПЕРИММУННЫЕ СЫВОРОТКИ К ВИРУСУ РЕСПИРАТОРНО-СИНЦИТИАЛЬНОЙ ИНФЕКЦИИ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА
Представлены результаты исследований по получению специфических гипериммунных сывороток к респираторно-синцитиальному вирусу крупного рогатого скота на белых мышах и морских свинках. Ключевые слова: гипериммунные сыворотки, респираторно-синцитиальный вирус.
I.Ya. Stroganova
SPECIFIC HYPERIMMUNE SERUMS TO THE VIRUS OF RESPIRATORY AND SYNCYTIAL CATTLE INFECTION
The results of research conducted on the white mice and cavies in order to receive specific hyperimmune serums to the respiratory and syncytial cattle virus are given.
Keywords: hyperimmune serums, respiratory and syncytial virus.
В настоящее время в Российской Федерации изменилась стратегия видения животноводства, в связи с этим возможны изменения в проявлении болезней животных. С сокращением количества крупных промышленных комплексов по откорму молодняка крупного рогатого скота актуальным остается изучение проявления вирусных болезней в племенных, товарных хозяйствах молочного, мясного направления и других.
Среди многообразия вирусных агентов, циркулирующих среди поголовья животных, необходимо отметить и респираторно-синцитиальный вирус крупного рогатого скота (PC).
Респираторно-синцитиальная инфекция - остропротекающая вирусная болезнь телят, характеризующаяся лихорадкой и поражением респираторных органов. В стадах крупного рогатого скота у молодняка с респираторными поражениями на долю PC-инфекции приходится около 40%.
Впервые респираторно-синцитиальный вирус выделили в 1969 году Веллеманс и Мунен в Бельгии. Болезнь зарегистрирована во многих странах мира, в том числе в нашей стране и Красноярском крае [1].
Болезнь вызывает РНК-содержащий вирус из семейства парамиксовирусов. В антигеном отношении все штаммы PC-вируса крупного рогатого скота родственны между собой и PC-вирусом человека [2].
Однако в отличие от других вирусных респираторных инфекций это заболевание остается изученным недостаточно, что связано со сложностью выделения и культивирования PC-вируса. Трудности культивирования, в свою очередь, затрудняют получение вирусного сырья в достаточном количестве и с необходимой инфекционной активностью для изготовления диагностических препаратов и средств специфической профилактики.
При разработке и использовании диагностических препаратов необходимо наличие специфических гипериммунных сывороток к PC-вирусу крупного рогатого скота, что и явилось целью настоящего исследования.
Материалы и методы исследования
Исследования проводились в лаборатории вирусологии Московской академии ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина и на кафедре эпизоотологии и паразитологии ИПБиВМ Красноярского государственного аграрного университета.
Для получения специфических сывороток использовали культуральную вируссодержащую суспензию и концентрированный очищенный вирус штамма «РС-Б» РС-вируса крупного рогатого скота.
Вирус культивировали в перевиваемых линиях клеток: почки эмбриона овцы (FLK'); почки теленка (Т-1); легкого эмбриона коровы (ПЛЭК, эпителиоидная); почки зеленой мартышки (46/47).
Для выращивания вируса применяли питательные среды гЛа, 199, Игла, Игла MEM с добавлением 2% фетальной сыворотки крупного рогатого скота, северных оленей и антибиотиков по 100 ЕД/мл.
Инфекционную активность вируса определяли титрованием в чувствительной культуре клеток по цито-патическому действию. Титр вируса рассчитывали по методу Рида и Менча (1937).
Концентрировали и очищали PC-вирус по методу M. Trudel et al. [3].
Электронную микроскопию осуществляя методом негативного контрастирования.
Иммунизировали белых мышей линии BALB/c и морских свинок с учетом схемы, предложенной Л.Н. Астаховой и М.Г. Брайнингер (1975,1976) [4, 5].
Активность полученных гипериммунных сывороток проверяли в реакции нейтролизации (РН) и реакция непрямой гемагглютинации (РНГА). РН ставили по общепринятой методике, РНГА в соответствии с наставлением.
Результаты исследований
Гипериммунизация белых мышей линии BALB/c вируссодержащей культуральной суспензией с инфекционным титром 3,5—4,0 lg ТЦД50/мл желаемых результатов не принесла. Поэтому в дальнейшем с этой целью использовали концентрированный и очищенный препарат PC-вируса крупного рогатого скота штамма «РС-Б».
Вирус концентрировали полиэтиленгликолем (ПЭГ-6000) с последующим ультроцентрифугированием в 20-60%-м градиенте плотности сахарозы и хранили при минус 70°С. Контроль препарата осуществляли электронной микроскопией.
Полученный PC-вирусный антиген вводили интроназально морским свинкам четыре раза по 0,2 мл в каждый носовой ход с интервалом 7 дней. В сыворотках морских свинок, взятых в эксперимент до иммунизации, антител к PC-вирусу крупного рогатого скота в РНГА не было обнаружено.
Сыворотку от животных получали через 14 дней после последней иммунизации. Результаты исследований представлены в таблице.
Титры антител в сыворотках иммунизированных морских свинок
Животные Номер животного Титры антител
PHrA РН
Иммунизированные 1 1:16 0
2 1:32 1:4
3 1:64 1:8
4 1:128 1:16
5 1:128 1:16
Контроль 6 - 0
7 - 0
8 - 0
Примечание: - не выявлены антитела в положительных титрах; 0 - не исследовали.
Из данных, представленных в таблице, следует, что концентрированный и очищенный препарат вируса «РС-Б» при указанном способе иммунизации не обладал ярко выраженной антигенной активностью для морских свинок. На его введение у животных синтезировались вируснейтрализующие антитела в титрах 1:4-1:16, что не достаточно для использования этих сывороток в качестве специфических гипериммунных в РНГА для положительного контроля.
Поэтому в дальнейшей работе использовали гипериммунные сыворотки, полученные на телятах.
Выводы
Гипериммунизация белых мышей линии BALB/c вируссодержащей культуральной суспензией PC-вируса штамма «РС-Б» желаемых результатов не принесла.
Концентрированный и очищенный препарат PC-вируса штамма «РС-Б» не обладал ярко выраженной антиген и активностью для морских свинок, титр антител в РН составил 1:4-1:16, а в РНГА - 1:16-1:128. Поэтому в дальнейшей работе в качестве специфических гипериммунных сывороток использовали сыворотки крови телят.
Литература
1. Куриленко, А.Н. Бактериальные и вирусные болезни молодняка сельскохозяйственных животных: учеб. для вузов / А.Н. Куриленко, В.А Крупальник, Н.В. Пименов. - М.: Колос, 2006. - 296 с.
2. Инфекционные болезни животных: учеб. пособие для вузов / Б.Ф. Бессарабов [и др.]; под ред. А.А. Сидорчука. - М.: Колос, 2007. - 617с.
3. Immunovirological studies on human respiratory sincytial virus structural proteins / M. Trudel [end al.] // Сan. J. Microbiol. - 1986. - Vol.32. - №1. - P. 12-15.
4. Астахова, Л.Н. Методы получения стандартных диагностических сывороток к респираторносинцитиальному вирусу / Л.Н. Астахова, М.Г. Брайненгер // Лаб. дело. - 1975. - № 12. - С. 730-732.
5. Астахова, Л.Н. О методах иммунизации пригодных для серийного приготовления диагностических сывороток к PC-вирусу / Л.Н. Астахова, М.Г. Брайненгер // Вопр. этиологии, эпидемиологии, патогенеза и диагностики вирусных заболеваний: сб. ст. - Свердловск, 1976. - С. 3-9.
'--------♦-----------
УДК 619:616.995.429.1 М.М. Аталаев, Ш.К. Алиев
РАСПРОСТРАНЕНИЕ ЭХИНОКОККОЗА РАЗНЫХ ПОРОД ОХОТНИЧЬИХ СОБАК В ДАГЕСТАНЕ
В статье приведены результаты исследования экстенсивности инвазии эхинококкозом одиннадцати пород охотничьих собак Дагестана. Больше инвазированы взрослые особи русского охотничьего спаниеля, немецкой короткошерстной легавой.
Ключевые слова: Дагестан, собака, эхинококкоз, гельминтозы, экстенсивность и интенсивность инвазии.
M.M. Atalayev, Sh.K. Aliyev DISTRIBUTION OF ECHINOCOCCOSIS OF THE HUNTING DOGS DIFFERENT BREEDS IN DAGESTAN
The results of research of echinococcosis invasion extensiveness of the hunting dogs eleven breeds in Dagestan are given in the article. Adult animal units of Russian hunting spaniel and German pointer are more invaded.
Keywords: Dagestan, dog, echinococcosis, helminthoses, invasion extensiveness and intensity.
Введение
В мире существует более 450 пород собак. Все породы собак выводились человеком для определенных нужд и разделены на группы: служебные, декоративные и охотничьи. Впервые об использовании собаки для поиска и ловли дичи было упомянуто в греческом словаре во II веке нашей эры [1]. Изначально собака выполняла охранную функцию, но позднее человек научил собаку охотиться. Главной целью для собак охотничьих пород является поиск животного и удержание его до нужного охотнику момента. Все охотничьи породы собак разделены на группы. Каждая из них подходит для определенного вида охоты [2]. Это обусловлено инстинктами, телосложением и характером собаки. Борзые, гончие, норные, лайки, подружейные собаки являются основными группами охотничьих пород. Подобное разделение оправдано спецификой работы [3]. Подружейные собаки разыскивают и поднимают дичь из камышей, кустарников и травы. После выстрела эти охотничьей собаки находят и приносят подстреленную дичь хозяину. У подружейных собак хорошо развито обоняние. В эту группу входят ретривверы, спаниели, сеттеры, лангхаары, дратхаары, курц-хаары. Борзые - группа охотничьих пород, предназначенная для травли зверя "по-зрячему", им необходимо увидеть добычу. Собаки этих пород крепкие и отличаются специфическим телосложением, что позволяет им
