CC BY
44= ^^
Обзоры
УДК 616-008.8:576.31
СОВРЕМЕННЫЕ ПОДХОДЫ К МОРФОЛОГИЧЕСКОМУ ИССЛЕДОВАНИЮ БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЕЙ
Захарова Г. П.1, Шабалин В. В.1, Донская О. С.2
1 ФГБУ «Санкт-Петербургский НИИ уха, горла, носа и речи» Минздрава России, 190013, Санкт-Петербург, Россия
(Директор - засл. врач РФ, акад. РАН, проф. Ю. К. Янов)
2 ФГБОУ ВО «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И. П. Павлова», Санкт-Петербург, Россия, 197022
(Ректор - докт. мед. наук, проф. акад. РАН С. Ф. Багненко)
THE PRESENT-DAY APPROACHES ТО MORPHOLOGIC STUDY OF BIOLOGIC FLUIDS
Zakharova G. P., Shabalin V. V., Donskaya O. S.
1 Federal State Budgetary Institution "Saint Petersburg Research Institute of Ear, Throat, Nose and Speech", Ministry of Health of the Russian Federation, Saint Petersburg, Russia
2 Federal State Budgetary Institution Higher Vocational Education "Pavlov First Saint Petersburg State Medical University" of the Ministry of Health of the Russian Federation, Saint Petersburg, Russia
Жизнь - это не столько структура, сколько процесс, создающий и поддерживающий структуру.
Норберт Винер
Рост числа хронических воспалительных заболеваний верхних дыхательных путей и среднего уха обосновывает необходимость разработки новых технологий изучения их патогенеза, прогнозирования, ранней диагностики и лечения. Нарушение состава биологических жидкостей слизистой оболочки верхних дыхательных путей играет значительную роль в патогенезе этих заболеваний. Одним из наиболее перспективных направлений исследования в медицине является морфология биологических жидкостей человека. Это фундаментальное направление представляет принципиально новый подход к исследованию заболеваний, их диагностике и лечению.
Ключевые слова: биологическая жидкость, морфология биологической жидкости, клиновидная дегидратация, системная самоорганизация, структуризация, структура, твердая фаза.
Библиография: 60 источников.
The high incidence rate of chronic inflammatory diseases of upper air passages and middle ear substantiates the necessity of development of the new technologies of pathogenesis study, prognosis, early detection and treatment. The disorder of composition of upper air passages mucosae biologics fluids plays a prominent part in the pathogenesis of these diseases. One of the most prospective research trends in medicine is the human biologic fluids morphology. This fundamental trend is a principally new approach to the study of diseases, diagnostics and treatment thereof.
Key words: biologic fluid, human biologic fluids morphology, sphenoidal dehydration, system self-organization, structuring, structuration, solid phase.
Bibliography: 60 souses.
Сокращения
ВДП - верхние дыхательные пути БС - биологическая система БЖ - биологическая жидкость МЦС - мукоцилиарная система СО - слизистая оболочка
ФМБЖ - функциональная морфология биологических жидкостей
Используемые термины Автоколебания - колебания, при которых система имеет запас потенциальной энергии, расходую-
щейся на совершение колебаний. Это - незатухающие колебания, которые могут существовать при отсутствии внешнего воздействия, причем амплитуда и период колебания определяются только свойствами самой системы и в определенных пределах не зависят от начальных условий. Автоколебания -основа устойчивости, постоянства и целостности биологических систем.
Диссипативная структура - это открытая система, которая поддерживает себя в термодинамически неравновесном, но структурно устой-
чивом состоянии за счет потоков вещества и энергии (И. Р. Пригожин). Термин «диссипатив-ная» подчеркивает, что поддержание структуры требует затраты (диссипации) энергии.
Нелинейный процесс - скачкообразное изменение поведения и свойств системы, не пропорциональное воздействующему усилию.
Нелинейный периодический процесс - особая форма колебательного процесса - периодические колебания или автоколебания.
Нелинейные системы - системы, свойства которых зависят от происходящих в них процессов.
Периодический процесс - повторяющийся процесс, у которого каждый цикл в точности воспроизводит любой другой цикл.
Самоорганизация - свойство биологических систем приобретать новые формы и структурно-функциональные характеристики.
Неуклонный рост заболеваемости, частота обострений и недостаточная эффективность лечения больных хроническими воспалительными заболеваниями верхних дыхательных путей (ВДП) и среднего уха, в том числе их сочетанной патологии, приводит к значительным нарушениям здоровья и качества жизни пациентов. В настоящее время хронические риносинусит и средний отит занимают лидирующие места в структуре патологии ЛОРорганов. Возникновение опасных для жизни орбитальных и внутричерепных осложнений, развитие тугоухости у детей и взрослых при хроническом среднем отите определяют социальную значимость заболеваний и обусловливают актуальность изучения патогенетических особенностей и разработки новых методов диагностики и лечения пациентов с хроническим риносинуси-том и средним отитом.
Мукоцилиарная система как биологическая система. Известно, что главная роль в защите дыхательных путей человека от внешних и внутренних патогенных воздействий принадлежит мукоцилиарной системе (МЦС). Основная функция МЦС - мукоцилиарный клиренс - представляет сложный комплексный механизм очищения, нарушение которого является как основной причиной, так и следствием хронического воспалительного процесса дыхательных путей [1, 2]. Недостаточность сведений о характере нарушений мукоцилиарной системы при хроническом воспалении ЛОРорганов обусловлена трудностью исследования основных ее компонентов: реснитчатого аппарата и секрета слизистой оболочки, представляющих уникальные сложноструктурированные биологические объекты исключительно малых размеров.
С точки зрения современной науки МЦС представляет биологическую систему со всеми характерными для нее признаками: открытость, дина-
мичность, нелинейность, неравновесность и в то же время относительная устойчивость [3]. Она способна к адаптации по отношению к внешней среде, переходу из одного состояния в другое, обусловленному механизмами саморегуляции. МЦС характеризуется нелинейностью и диссипативно-стью происходящих в ней процессов [2]. При осуществлении мукоцилиарного очищения в МЦС одновременно протекает множество нелинейных периодических процессов на разных уровнях иерархической структуры системы.
Как и любая биологическая система мукоци-лиарная система имеет иерархическое строение и несколько уровней структурно-функциональной организации. Она представляет совокупность взаимосодействующих элементов, обладает свойством целостности, которая порождается структурой системы, типом связей между ее элементами и означает несводимость ее свойств к сумме свойств составляющих элементов.
Особенность биологических систем заключается в том, что они способны к самоорганизации - спонтанному образованию и развитию сложных упорядоченных структур. Это позволяет характеризовать их как самоорганизующиеся, самоподдерживающиеся, диссипативные, колебательные системы [4].
Специфической чертой диссипативных структур является способность к спонтанному возникновению новых форм порядка. При возрастании потока энергии система может прийти в точку неустойчивости, после прохождения которой она может пойти по совершенно другому пути, допускающему возникновение новых структур и упорядоченных форм.
В настоящее время при анализе состояния БС широкое применение в медицине и биологии имеет заложенный основателями теории функциональных систем системный подход [5, 6]. Он оказывается перспективным для решения проблем многих заболеваний на более высоком, чем при использовании традиционных методов уровне. Для создания глубокого фундаментального и целостного представления о состоянии МЦС в норме и причинно-следственных связях ее элементов при патологии необходимо применение системного подхода в ее изучении основанного на трудах разработчиков теории систем: А. А. Богданова (1925), А. Н. Колмагорова (1938), П. К. Анохина (1948), Б. П. Белоусова (1959), А. И. Опарина (1968), Х. Бернал (1969), П. Эткинса (1987), Н. Ю. Климонтовича (1986), И. Пригожина, И. Стенгерс (1986), А. Ю. Лоскутова, А. С. Михайлова (1990), Ю. А. Колесникова (1997) и др. [7-17]. Однако до настоящего времени данные о МЦС ЛОРорганов представлены в оториноларингологии фрагментарными сведениями, целостное представление
о МЦС как сложной БС, способной к саморегуляции, отсутствует.
Биологические жидкости. Биологическая жидкость - биологическая система, обладающая всеми функциями живого организма, включая способность сохранять и передавать информацию в виде структур и функций [12]. Биологические жидкости (БЖ) представляют биологический материал организма, который содержит информацию о состоянии внутренней среды и служит предметом лабораторных исследований для диагностики различных патологических состояний. В практической медицине наиболее часто используется исследование состава крови, содержащей интегральную информацию о функциональном состоянии всего организма [18].
Биологические жидкости представляют наиболее удобный для изучения динамики физиологических и патологических процессов организма объект. Это - сложные полидисперстные неклеточные структуры с неустойчивыми связями входящих в них компонентов: сыворотка крови, лимфа, ликвор, моча, секреты эндокринных и экзокринных желез (желудочный и панкреатический сок, желчь, слюна, пот, молоко, слеза), отделяемое из ран, секрет слизистой оболочки, внутриклеточная и внеклеточная жидкость [3]. Основные компоненты биологических жидкостей включают: воду, минеральные соли, белки, лио-тропные жидкие кристаллы. [19]. Лиотропные жидкие кристаллы представляют структурно упорядоченные растворы биологических молекул, в том числе амфифильных, которыми являются липиды. Амфифильными называются молекулы, имеющие в своем составе растворимую в воде ионную и нерастворимую части, обладающие отчетливыми двулучепреломляющими свойствами кристаллов.
Биологические жидкости выполняют широкий спектр жизненно важных функций в жизнедеятельности организма человека на всех его уровнях. Самые незначительные изменения в процессе жизнедеятельности организма проявляются в изменении структурной упорядоченности лиотроп-ных жидких кристаллов. Элементы БЖ моментально реагируют изменением своей структуры на любые воздействия внешнего и внутреннего характера, что позволяет наблюдать за динамикой заболевания и осуществлять коррекцию проводимого лечения. Для биологических жидкостей характерны различные типы устойчивых колебаний физико-химических, биохимических и морфологических параметров. При этом их молекулярный состав постоянно меняется. Устойчивое неравновесие - постулат Э. С. Бауэра (1935) [20] - является фундаментальным принципом биологической кибернетики. Это качественно новое понимание устойчивости, которое существует у биологиче-
ских систем, обладающих развитой сетью внешних и внутренних обратных связей.
Секрет слизистой оболочки ВДП и системы среднего уха (слуховая труба) до настоящего времени представляет наименее обследованный компонент МЦС, что связано с отсутствием адекватных методов его получения и исследования. Известно, что при воспалительном процессе состав секрета и характер протекающих в нем обменных процессов меняется. Исследование секрета СО ВДП и системы среднего уха представляет большое значение в диагностике их воспалительных заболеваний [21-23]. Однако современные аналитические методы (биохимические, иммунологические, физические и др.) не обеспечивают интегральность оценки информации, заложенной в БЖ, так как они позволяют определять лишь количественный и качественный составы отдельных компонентов без анализа их взаимосвязей (во многом определяющих особенности структуры и функции органов и систем). Это оставляет закрытой большую часть информации, заложенной в секрете слизистой оболочки, и затрудняет его использование в диагностических целях, что обосновывает необходимость применения новых высокотехнологичных, в том числе междисциплинарных, методологических подходов к проведению научных исследований в этом направлении. Особенно актуальна на данном этапе исследований разработка неинва-зивных методов ранней диагностики на доклиническом этапе заболевания, позволяющих прогнозировать возникновение, результаты лечения, рецидивирование и осложнение воспалительного процесса.
В настоящее время созданы методики, позволяющие анализировать принципиальные связи устойчивых структур организма, например компьютерная томография, ЯМР-томография и другие. Однако технология выявления высокодинамичных связей в жидких средах организма была разработана лишь в последние годы. До недавнего времени морфологические исследования в биологии и медицине распространялись только на клеточные элементы. Биологические жидкости оставались недоступны для морфологического исследования. Методы клиновидной и краевой дегидратации биологических жидкостей предоставили возможность получения интегрированной информации, заложенной в особенностях морфологической картины твердой фазы биологических жидкостей, так как дегидратированная биологическая жидкость фактически является «срезом» неклеточной ткани организма [3]. По данным проведенных в последние годы исследований при дегидратации БЖ структурообразова-ние твердой фазы протекает по определенным закономерностям, с учетом взаимосвязей компо-
нентов, физических законов и внешних условий. Это позволяет на основании анализа структур твердой фазы получить интегральную информацию о состоянии изучаемого объекта [24].
Новое направление исследования - «функциональная морфология» биологических жидкостей». Новое перспективное направление исследования в медицине - «функциональная морфология» биологических жидкостей» - сформировано учеными Российского НИИ геронтологии и МОНИКИ им. М. Ф. Владимирского. Оно основано на учении о самоорганизации сложных систем, разработанном школами нобелевского лауреата Ильи Пригожина (1986) и Германа Хакена (1991) [15, 25]. Направление решает проблему преобразования молекулярных процессов биологической жидкости в диапазон видимых структурных зон в форме устойчивых твердофазных образований.
В 1986 году В. Н. Шабалиным и С. Н. Шатохи-ной установлено, что при дегидратации БЖ структурируются и приобретают устойчивые морфологические формы. Авторами разработана методологическая база для исследования структур биологических жидкостей - методы клиновидной и краевой дегидратации, на которых основывается большая часть проводимых в настоящее время морфологических исследований БЖ [3].
Основной принцип применения нового методологического подхода - морфологического исследования биологических жидкостей - заключается в преобразовании молекулярных процессов БЖ в диапазон видимых структурных зон в форме устойчивых твердофазных образований. При высыхании БЖ образуется сухая пленка сферической формы - фация, представляющая тонкий срез БЖ. Структуры фаций, образованные при высыхании биологической жидкости, интегрально отражают молекулярные механизмы взаимодействия ее компонентов в жидкой фазе. Это позволяет с помощью микроскопического исследования структур твердой фазы БЖ проводить диагностику физиологического и патологического состояний организма на доклиническом этапе развития заболевания. Разработка методологической базы этого направления исследований представляет несомненную актуальность для различных областей клинической медицины, включая оториноларингологию.
Теоретической основой морфологического исследования биологических жидкостей служат законы и принципы нового междисциплинарного направления научных исследований - теории самоорганизации систем. Появление этой теории во второй половине ХХ века подготовлено всем ходом мировой науки, стремящейся к объяснению закономерностей развития материального мира. Возникновению и развитию теории
способствовали работы ученых: основоположников статистического описания сложных движений - Л. Больцмана и А. Пуанкаре [26, 27], разработчиков теории систем - А. А. Богданова, А. Н. Колмагорова (1938), П. К. Анохина (1948), Б. П. Белоусова (1959), А. И. Опарина (1968), Х. Бернал (1969), Эткинса (1987), Н. Ю. Климонтовича (1986), И. Пригожина, И. Стенгерс (1986), А. Ю. Лоскутова, А. С. Михайлова (1990), Ю. А. Колесникова (1997) [7-17]. Кроме того, неравновесными процессами в открытых системах в прошлом веке занимались Л. Берталанфи [28] и многие другие ученые. Основоположниками современной теории самоорганизации биологических систем можно считать И. Пригожина (1986) и Г. Хакена (1991) [15, 25].
Теория самоорганизации объясняет процессы возникновения, устойчивости, распада и возрождения самых разнообразных структур живой и неживой материй. Междисциплинарное направление теории обусловлено тем, что принципы, управляющие процессами самоорганизации материи, - одни и те же, безотносительно природы систем. Согласно теории все живые существа представляют сложные биологические системы, которые при своем возникновении и развитии приобретают формы и функции в результате самоорганизации [11, 12, 16, 29].
Одним из видов самоорганизации БС являются так называемые неравновесные фазовые переходы, например при переходе биологической жидкости из жидкой фазы в твердую во время дегидратации. Образующиеся структуры называются диссипативными, так как процесс перехода требует затрат (диссипации) энергии. Специфической чертой диссипативных структур является способность к спонтанному возникновению новых структур и упорядоченных форм [30].
Переход биологической жидкости из жидкой фазы в твердую (высыхание, замораживание) осуществляется путем самоорганизации в соответствии с объективными закономерностями физико-химических процессов и индивидуальными свойствами систем. Согласно современным представлениям самоорганизация биологических систем обусловлена биофизическими и биохимическими процессами, которые протекают в них в соответствии с генетической обусловленностью и возможностями саморегуляции БС.
Гипотетическое объяснение механизма самоорганизации БЖ с позиции квантовой физики принадлежит В. Н. Шабалину, С. Н. Шатохиной (2001). Согласно теории протекающие в БЖ при самоорганизации биофизические и биохимические процессы обусловлены автоволновым взаимодействием их составных элементов [31, 32]. Однако, несмотря на то что основные принципы
теории самоорганизации признаются многими учеными, взгляды на самоорганизацию материи в целом, а биологических систем и биологических жидкостей в частности на сегодняшний день представляют предмет дискуссии [33-35].
В соответствии с теорией основными условиями, необходимыми для самоорганизации БС, БЖ, в частности, служат: движение - система должна находиться в движении; открытость - система должна обмениваться энергией с окружающей средой; кооперативность - согласованность происходящих в системе процессов - система должна содержать элементы, согласованные в своих действиях; неравновесность - энергетическое поле системы должно быть дифференцированно по градиентной плотности заряда. Яркий пример нелинейного процесса в МЦС представляет зональное волновое распределение структур твердой фазы при самоорганизации капли высыхающей БЖ.
Историческое развитие. Первые шаги к развитию ФМБЖ были сделаны еще в 1804 г. Т. Е. Ловицем, которым были предложены методы качественного определения химических веществ по их кристаллографическим признакам (метод микрокристаллических реакций и метод выветренных солей). Однако в медицинских исследованиях кристаллографические методы начали применяться лишь с 60-х гг. прошлого столетия. На способности БЖ образовывать кристаллы при добавлении в раствор кристаллообразующего вещества был основан тезиграфический метод исследования, представляющий один из вариантов принципиальных подходов ФМБЖ. При этом чаще всего используется добавление в БЖ СиС^ или №С1 [36, 37]. Приоритет в развитии этого направления исследования БЖ принадлежит сотрудникам МОНИКИ им. М. Ф. Владимирского, которые в 19801990-х гг. провели ряд морфологических исследований структур твердой фазы БЖ у пациентов с эндокринной патологией (болезнь Иценко-Кушинга, диффузный токсический зоб, феохро-моцитома), аллергическими заболеваниями, почечной недостаточностью, новообразованиями различной локализации и др. [38]. К первым работам по ФМБЖ, основанным на принципе подхода к исследованию твердой фазы БЖ - без добавления кристаллообразующего вещества, относятся исследования офтальмолога Е. Г. Рапис (1980), направленные на изучение особенностей структуризации высыхающей пленки белка. В последующем ряд авторов попытались раскрыть механизмы формирования структуры капли белка в БЖ при дегидратации [39].
Современное состояние ФМБЖ. Диагностика патологического процесса на основе функциональных морфологических исследований до
настоящего времени основывалась преимущественно на описании морфотипов фаций различных биожидкостей, полученных с помощью методов клиновидной и краевой дегидратации в норме и при патологии. При диагностике заболевания морфологическими критериями и маркерами патологического процесса служат характерные для нормы и патологии структуры твердой фазы различных БЖ. В настоящее время большая часть функциональной морфологической диагностики основана на изучении текстур фаций различных биожидкостей при физиологических и патологических состояниях. При этом продолжается набор базы статистических данных морфотипов структур твердой фазы БЖ при различных заболеваниях для дальнейшего выявления морфологических маркеров различных патологических процессов в организме человека.
На основании проведенных исследований установлено, что для патологического состояния организма характерно нарушение образования структур твердой фазы биологических жидкостей в виде асимметричности их расположения, отсутствия характерных для нормы и образования патологических структур. Одним из механизмов нарушения структуризации при патологии является образование патологически прочных белко-во-солевых комплексов и агрегатов, которые не распадаются при дегидратации, что отражается на структуре фации. При этом структуры, характерные для нормы, а также симметрично расположенные формообразующие элементы фации: радиальные трещины, аркады, секторы, отдельности, конкреции - могут отсутствовать, проявлять полиморфизм и асимметрию. Наблюдается появление новых характерных для патологического процесса структур. Возможность применения данного метода в медицинских исследованиях обосновали В. Н. Шабалин и С. Н. Шатохина (1986, 2001), давшие основные характеристики морфологических структур различных БЖ в норме и при патологии [3]. Авторы разработали и дали теоретическое обоснование применению метода клиновидной дегидратации, основанное на принципах самоорганизации БЖ и переводе аутоколебательных процессов БЖ в диапазон видимых волн [4, 24, 31]. Однако до настоящего времени механизмы перехода БЖ в твердую фазу изучены недостаточно и представляют предмет дискуссии со стороны исследователей. Ряд авторов придерживаются мнения, что процессы дегидратации БЖ могут быть трактованы в рамках стандартных подходов изучения высыхания коллоидных растворов [34, 35].
В то же время метод клиновидной дегидратации широко используется в медицинских исследованиях в диагностических целях. Он основывается на определенных авторами метода
Рис. 1. Фации сыворотки крови при физиологическом состоянии организма *15. Цит. по Шабалину В.Н, 2001.
Рис. 2. Фации сыворотки крови при различных патологических состояниях *15. Цит. по В. Н. Шабалину, 2001.
закономерностях структуризации БЖ, которая протекает различно в норме и при патологии. При дегидратации БЖ (сыворотки крови) образуется сухая пленка - фация (высушенная капля БЖ) - с наличием центральной, периферической и переходной зон. Основными структурными элементами фации являются трещины (радиальные и поперечные), сектора, отдельности и конкреции. Физиологическое состояние организма характеризуется симметричным расположением радиальных трещин, отдельностей, конкреций и других формообразующих элементов фации
(рис. 1). При патологических состояниях наблюдаются нарушение симметричности рисунка фации, изменение формы или полное отсутствие основных формообразующих элементов фации (рис. 2). Кроме того, авторами наблюдались характерные патологические структуры, которые являлись маркерами патологических процессов. К маркерам патологических состояний отнесены: жгуты, указывающие на гипоксию (рис. 3, а), бляшкообразные структуры (рис. 3, б), свидетельствующие об интоксикации эндогенного или экзогенного происхождения; ворон-
Рис. 3. Маркеры патологических процессов в фациях сыворотки крови: а - жгуты; б - бляшки; в - трещины; г - «язык Арнольда»; д - «ковер Серпинского»; е - морщины. Цит. по В. Н. Шабалину, 2001.
кообразные трещины (рис. 3, в), указывающие на высокое напряжение защитных механизмов; морщины - маркеры повышенного содержания липидов (рис. 3, е). Аномальные поля типа «языков Арнольда» (рис. 3, г), «ковров Серпинского» (рис. 3, д) являлись признаками воспалительного процесса и были обнаружены в сыворотке крови больных острыми и хроническими неспецифическими воспалительными заболеваниями внутренних органов. Кроме того, найдены морфологические маркеры, наиболее свойственные лицам пожилого возраста, морфотипы анизотропных структур которых могут служить индикаторами патологического старения органов и организма. Совместно с сотрудниками РФЯЦ ВНИИЭФ авторами разработаны подходы к математическому
анализу фаций, позволяющие применять статистические методы исследования по отдельным показателям: длине, толщине, углу отклонения трещин - и таким обобщенным показателям, как индексы деструкции, релаксации и нарушений [40]. Структурные образования фации твердой фазы сыворотки крови, сформированные грибами рода Candida, врожденный системный кан-дидоз бобовидными споровыми образованиями представлены на рис. 4.
В настоящее время морфологические исследования структур твердой фазы БЖ нашли достаточно широкое применение в различных областях медицины. В урологии с помощью Литос-системы по структуризации мочи при дегидратации проводится экспресс-диагностика мочекаменной
а) б) в)
Рис. 4. Патологические структуры в фациях сыворотки крови при грибковых поражениях. Цит. по В. Н. Шабалину, 2001.: а -скопления клеток Candida albicans *45; б - врожденный системный кандидоз - специфические полиморфные включения х35,
в - бобовидные споровые образования х70.
болезни, позволяющая определять вид камнео-бразующих солей, диагностировать мочекаменную болезнь на ранней стадии (рис. 5, б) [41-43]. При морфологических исследованиях мочи обнаружены характерные различия микроскопической картины в норме и при патологии [44]. Появление прозрачной краевой зоны при клиновидной дегидратации мочи является ценным информативным признаком, свидетельствующим о присутствии белка в исследуемом материале (рис. 5, в). У больных мочекаменной болезнью с протеинурией устанавливаются патологически прочные связи камнеобразующих солей с белками. Эти связи настолько прочные, что даже при клиновидной дегидратации, когда активизируются осмотические и онкотические силы, они не в состоянии их разрушить. В результате аномальные белково-солевые агрегаты перемещаются в высыхающей капле как единый комплекс. Только по окончании процесса дегидратации (завершении испарения связанной воды), соли отрываются от белковых компонентов и кристаллизуются в белковой среде краевой зоны. При высоких концентрациях глюкозы в моче фация имеет вид стекловидной пленки (рис. 5, г). Такой характер структуризации связан с тем, что глюкоза при дегидратации не кристаллизуется и препятствует кристаллизации солей, находящихся вместе с ней в растворе. При высокой концентрации глюкоза полностью блокирует кристаллизацию всех солей, растворенных в моче, в результате фация представляет собой прозрачную аморфную пленку. При низких концентрациях в условиях метода
клиновидной дегидратации глюкоза вытесняется из массы капли мочи на периферию и образует прозрачное аморфное кольцо. Таким образом, метод клиновидной дегидратации может иметь самостоятельное значение в диагностике мочекаменной болезни, протеинурии, глюкозурии.
В настоящее время разрабатываются подходы к математическому анализу фаций, автоматизации проведения исследований [45]. Предпринимаются попытки компьютерной математической обработки и разработки критериев по анализу различных параметров [40], статистической обработки, кластерного и дискриминант-ного анализа.
В оториноларингологии при исследовании методом клиновидной дегидратации слюны больных с холестеатомой среднего уха в структуре фации обнаружен характерный пластинчатый морфотип, что предположительно может служить дополнительным критерием в диагностике данного патологического процесса [46-48]. Изучены особенности морфологических структур твердой фазы БЖ секрета СО ВДП (рис. 6, 7) и среднего уха при хроническом воспалительном процессе [49]. На основании проведения экспериментальных исследований по определению длительности структуризации секрета полости носа разработана диагностика воспалительного процесса [50].
В офтальмологии выявлены различия структуры твердой фазы внутриглазной жидкости у больных глаукомой в зависимости от стадии патологического процесса [51]. На основании изучения различных типов кристаллов слезы у боль-
а) б)
Рис. 5. Образцы фаций мочи Цит. по В. Н. Шабалину, 2001: а - в норме, фация покрыта мелкокристаллическим налетом солей; б - при мочекаменной болезни, кристаллизация солей в краевой зоне; в - фация мочи больной с протеинурией: наличие краевой аморфной белковой зоны (первичный пиелонефрит); г - фация мочи больного с глюкозурией при высокой концентрации глюкозы.
а)
б)
Рис. 6. Образцы фаций секрета слизистой оболочки полости носа здоровых пациентов. 1 - центральная зона с звездоподобными кристалли-ческими структурами; 2(а) - периферическая зона с аморфными белковыми компонентами; 2(б) - периферическая зона с симметричными радиальными трещинами. Увеличение 4^9.
а)
б)
Рис. 7. Образцы фаций секрета слизистой оболочки полости носа больных хроническим гнойным риносинуситом: а - нарушение кристаллизации, аморфизация центральной зоны фации; включения в центральной зоне фации. Увеличение 4x9; б -аморфные структуры в центральной и периферической зонах; дендритные структуры 1-2 порядка. Увеличение 4x9.
ных с заболеваниями слезоотводящей системы разработана дифференциальная диагностика аллергического и воспалительного процессов [52]. Различные методы кристаллографии используются в дифференциальной диагностике катаракты, глаукомы, миопии и их сочетаний [53, 54], воспалительных заболеваний глаз и других заболеваний [55].
В публикациях последних лет представлена возможность наиболее полноценного использования метода в современных условиях [56].
Современные подходы к морфологическому исследованию БЖ наиболее полно отражает классификация А. К. Мартусевича [57], основанная на принципиальных особенностях механизма высыхания капли биоматериала. Классификация включает три основные группы подходов:
- к первой группе относятся подходы, исследующие собственную кристаллизацию биологического субстрата; они различаются условиями проведения процесса кристаллизации (на воз-
духе - клиновидная дегидратация, классическая кристаллоскопия; в закрытой ячейке - краевая дегидратация; в условиях создания вакуума на модифицируемых поверхностях - профильная дегидратация и др.);
- вторая группа - тезиграфические методы, изучающие кристаллогенез биологических жидкостей с использованием кристаллообразующих веществ, усиливающих кристаллизицию [36];
- третья группа методов - экспериментальные, интегрирующие все подходы, включающие различные манипуляции с биосредой в процессе высушивания.
Метод хромокристаллоскопии изучает кри-сталлогенез с использованием красителей, избирательно окрашивающих отдельные компоненты биологических жидкостей, что позволяет определить их состав (фоновая, постдегидратационная, дифференциальная кристаллоскопия). С помощью этого метода определено место расположения различных типов белков в высохшей капле
сыворотки крови: альбумины - краевая зона, а- и Р-глобулины - промежуточная зона, иммуноглобулины - центральная зона [58].
В последние годы фундаментальный анализ ФМБЖ с систематизацией имеющихся в настоящее время в медицине методов морфологического исследования БЖ, их теоретического обоснования, а также исторический анализ развития методологии морфологического исследования БЖ проведен С. А. Краевым, Н. А. Колтовым, 2016 [59].
Таким образом, методы исследования морфологических структур твердой фазы БЖ в настоящее время достаточно широко применяются в ряде областей клинической медицины [56]. Это обосновано достоинствами метода, заключающимися в простоте выполнения, высокой чувствительности, информативности и невысокой стоимости. В то же время, несмотря на новизну и перспективность, функциональная морфология БЖ на современном этапе развития имеет ряд существенных недостатков, которые снижают эффективность ее диагностического использования в практической медицине.
Недостатки ФМБЖ. В настоящее время ФМБЖ находится на феноменологическом уровне своего развития, который заключается в описательном и субъективном характере оценки результатов. Методы объективной количественной и статистической обработки текстур фаций, а также качественной оценки фрактальных структур с выраженными пространственными характеристиками разработаны недостаточно. Несмотря на разработку подходов к математическому анализу фаций, по их отдельным параметрам фундаментальные, экспериментальные исследования, количественные оценки представлены единичными работами [60].
Механизмы дегидратационной самоорганизации БЖ остаются неизученными и объясняются как стандартными подходами к высыханию коллоидных растворов [34, 35], так и с позиций современной физики - гипотеза В. Н. Шабалина и С. Н. Шатохиной (2001) об аутоволновом механизме процесса самоорганизации. Отсутствие полного понимания принципиальных различий используемых методов ФМБЖ и единого мнения о фундаментальных механизмах самоорганизации БЖ обосновывает существование терминологической путаницы. Под термином кристаллоскопии нередко необоснованно объединяют все существующие методы, в то время как она представляет только часть ФМБЖ [57].
Заключение. Переход биологической жидкости в твердую фазу при дегидратации сопровождается образованием кристаллических структур, морфотип которых представляет интегральную картину взаимодействия молекулярного и атомарного составов в жидкой фазе биологической жидкости. Морфологический анализ структур твердой фазы БЖ позволяет проводить диагностику физиологического и патофизиологического состояний организма даже на самых ранних (доклинических) этапах заболевания.
«Функциональная морфология» биологических жидкостей представляет кардинально новое научное направление, отличающееся принципиальной новизной по своим теоретическим основам, методике исследования, виду получаемой информации, подходу к диагностике и лечению заболеваний. Соответственно дальнейшее развитие методологии «функционального морфологического» исследования биологических жидкостей человека представляет несомненную актуальность для различных областей клинической медицины, в том числе и оториноларингологии.
ЛИТЕРАТУРА
1. Кобылянский В. К. Мукоцилиарная система. Фундаментальные и прикладные аспекты. М.: БИНОМ, 2008. 415 с.
2. Захарова Г. П., Янов Ю. К., Шабалин В. В. Мукоцилиарная система верхних дыхательных путей. СПб.: Диалог, 2010. 390 с.
3. Шабалин В. Н., Шатохина С. Н. Морфология биологических жидкостей человека. М.: Хризистом, 2001. 304 с.
4. Шабалин В. Н., Шатохина С. Н., Шабалин В. В. Фундаментальные основы самоорганизации биологических жидкостей // Функциональная морфология биологических жидкостей: матер. 3-й Всерос. науч.-практ. конф. М., 2004. С. 5-7.
5. Хакен Г. Информация и самоорганизация. Макроскопический подход к сложным системам. М.: Мир, 1991. 240 с.
6. Судаков К. В. Функциональные системы. М.: Изд-во РАМН, 2011. 320 с.
7. Богданов А. А. Тектология: Всеобщая организационная наука / Международный институт Александра Богданова. Сост., предисловие и комментарии Г. Д. Гловели. Послесловие В. В. Попкова. М.: Финансы, 2003.
8. Колмогоров А. Н. Об аналитических методах в теории вероятностей // Успехи математических наук. 1938. № 5. С. 5-41.
9. Анохин П. К. Системогенез как общая закономерность эволюционного процесса // Бюл. эксп. биол. и мед. 1948. № 26(2). С. 81-99.
10. Белоусов Б. П. Периодически действующая реакция и ее механизмы // Радиационная медицина: сб. реф. М.: Медгиз, 1959. С. 45-148.
11. Опарин А. И. Жизнь, ее природа, происхождение и развитие. М.: Наука, 1968. 173 с.
= ^^
Обзоры
12. Бернал Х. Возникновение жизни. М.: Мир, 1969. 391 с.
13. Эткинс П. Порядок и беспорядок в природе. М.: Мир, 1987. 224 с.
14. Климонтович Н. Ю. Без формул о синергетике. Минск, 1986. 223 с.
15. Пригожин И., Стенгерс И. Порядок из хаоса. Пер. с англ. М.: Прогресс, 1986. 429 с.
16. Лоскутов А. Ю., Михайлов А. С. Введение в синергетику. М.: Наука, 1990. 85 с.
17. Колесников Ю. А. К тайнам мироздания. Магадан, 1997. 244 с.
18. Рязанцев С. В., Тырнова Е. В., Клячко Л. Л., Захарова Г. П., Косенко В. А. Соотношение антимикробных белков секретов слизистых оболочек при хроническом риносинусите // Х съезд оториноларингологов Украины. Судак, 2005. С. 144.
19. Колотилов Н. Н., Бакай Э. А. Жидкокристаллическая структура биологических объектов // Молекул. биология. 1980. Вып. 27. С. 87-96.
20. Бауэр Э. С. Теоретическая биология. М.-Л.: ВИЭМ, 1935. 206 с.
21. Захарова Г. П. Морфологические особенности носового секрета у больных хроническим гнойным риносину-ситом // Рос. оториноларингология. 2006. № 5(24). С. 3-6.
22. Хмельницкая Н. М., Рязанцев С. В., Клячко Л. Л., Анхимова Е. С. Методы получения и исследования экзокрин-ных секретов для изучения некоторых параметров местного иммунитета // Клин. лаб. диагн. 1997. № 12. С. 43-44.
23. Захарова Г. П., Шабалин В. В., Дроздова М. В., Донская О. С., Рубис И. А. Морфологические особенности секрета слизистой оболочки при хроническом гнойном риносинусите и секреторном отите // Рос. оториноларингология. 2015. № 5. С. 28-33.
24. Шабалин В. Н., Шатохина С. Н. Принципы аутоволновой самоорганизации биологических жидкостей // Вестн. Рос. акад. мед. наук. 2000. № 3. С. 45-49.
25. Хакен Г. Информация и самоорганизация. Макроскопический подход к сложным системам. М.: Мир, 1991. 240 с.
26. Больцман Л. Дальнейшие исследования теплового равновесия между молекулами газа: избр. тр. М., 1984. С. 125-189.
27. Пуанкаре А. Фигуры равновесия жидкой массы. М.: НИЦ «Регулярная и хаотическая динамика», 2000. 208 с.
28. Берталанфи Л. фон. Общая теория систем - критический обзор // Исследования по общей теории систем: Сб. переводов / Общ. ред. и вст. ст. В. Н. Садовского, Э. Г. Юдина. М.: Прогресс, 1969. С. 23-82.
29. Шабалин В. Н., Шатохина С. Н. Системная самоорганизация биологических жидкостей и старение // Сб. 1-го Рос. съезда геронтологов и гериатров. Самара, 1999. С. 502-505.
30. Клаузиус Р. Механическая теория тепла // В кн. Второе начало термодинамики: сб. работ. М.-Л., 1934.
31. Шабалин В. Н., Шатохина С. Н. Фундаментальные основы биологических ритмов // Вестн. Рос. акад. мед. наук. 2004. № 8. С. 4-7.
32. Шабалин В. Н. , Шатохина С. Н. Аутогенные ритмы и самоорганизация биожидкостей // Бюл. эксп. биологии и медицины. 1996. № 10. С. 364-371.
33. Денисова Н. А. Фундаментальные ошибки фундаментальной науки. Точка зрения. Бишкек: Илим, 1998. 80 с.
34. Тарасевич Ю. Ю. Механизмы и модели дегидратационной самоорганизации биологических жидкостей // Успехи физических наук. 2004. Т. 174, № 7. С. 780-790.
35. Яхно А. Г., Санин О. А., Санина В. Г. Динамика механических свойств капель биологических жидкостей в процессе высыхания как отражение особенностей самосборки их компонентов от нано- до микроуровня // Биофизика. 2011. Т. 56, № 6. С. 1016-1022.
36. Камакин Н. Ф., Мартусевич А. К. Современные подходы к кристаллоскопической идентификации состава биологических жидкостей // Экология человека. 2003. № 5. С. 23-25.
37. Камакин Н. Ф., Мартусевич А. К. Характеристика тезиокристаллоскопического портрета биологических жидкостей организма человекав норме и при патологии // Вестн. новых мед. технологий. 2003. Т. 10, № 4. С. 5759.
38. Калинин А. П., Мороз Л. А., Макеев С. А. О кристаллографическом исследовании сыворотки крови при некоторых эндокринных заболеваниях // Сов. медицина. 1987. № 7. С. 36-39.
39. Гольбрайх Е., Рапис Е. Г, Моисеев С. С. О формировании узора трещин в свободно высыхающей пленке водного раствора белка // Журн. технич. физики. 2003. Т. 73, № 10. С. 116-121.
40. Бузоверя М. Э., Сельченков В. Л., Сельченкова Н. И. [и др.]. Математический анализ структур твердой фазы биологических жидкостей // Геронтология и гериатрия. Вып. 1. М., 2001. С. 55-60.
41. Дасаева Л. А., Шатохина С. Н., Шилов Е. М., Шабалин В. Н. Выявление больных на ранних стадиях мочекаменной болезни и оценка эффективностиих лечения с помощью Литос-системы // Клин. лаб. диагностика. 2003. № 9. С. 41.
42. Дасаева Л. А., Шилов Е. М., Шатохина С. Н. Определение вида камнеобразующих солей в моче у больных уро-литиазом с помощью Литос-системы // Геронтология и гериатрия. Вып. 2. 2003. С. 218-220.
43. Дасаева Л. А., Шилов Е. М. Опыт применения «Литос-теста» и рентгеноспектрального микроанализа мочи в лабораторной диагностике мочекаменной болезни // Нефрология. 2003. № 7. С. 228-229.
44. Тарусинов Г. А. Кристаллографическое исследование мочи в диагностике и дифференциальной диагностике диффузных заболеваний соединительной ткани у детей // Педиатрия. 1994. № 1. С. 55-57.
45. Самородов А. В. Автоматизация кристаллографических исследований биологических жидкостей человека // Биомедицинские технологии и радиоэлектроника. 2003. № 11. С. 59-64.
Российская оториноларингология № 1 (86) 2017
46. Шатохина С. Н., Зенгер В. Г., Шабалин В. Н. Морфотипы слюны в диагностике холестеатомы среднего уха // Клин. лаб. диагностика. 2002. № 10. С. 39.
47. Шатохина С. Н., Самбулов В. И. Холестеатома среднего уха: диагностическое исследование слюны // Врач. 2002. № 4. С. 28-29.
48. Азнаурян А. М. Разработка неинвазивных методов диагностики при хроническом гнойном среднем отите с холестеатомой // Рос. оториноларингология. 2007. № 1. С. 11-15.
49. Захарова Г. П. Морфологические особенности секрета слизистой оболочки при хроническом гнойном рино-синусите и секреторном отите //Рос. оториноларингология. 2015. № 5. С. 28-33.
50. Захарова Г. П., Шабалин В. В., Янов Ю. К. Длительность структуризации биологических жидкостей в неинва-зивной диагностике воспалительного процесса полости носа и околоносовых пазух // Рос. оториноларингология. 2012. № 6. С. 70-75.
51. Деев Л. А., Шабалин В. Н., Шатохина С. Н. Структурные особенности твердой фазы внутриглазной жидкости у лиц пожилого возраста с различными стадиями глаукомы // Актуальные проблемы геронтологии. М., 1999. С. 181-183.
52. Белоглазов В. Г., Атькова Е. Л., Федоров А. А., Сафонова Т. Н., Малаева Л. В. Возможности применения метода кристаллографии слезы при патологии слезоотводящей системы // Вестн. офтальмологии. 2003. № 4. С. 49-51.
53. Колединцев М. Н., Майчук Н. В. Современные методы анализа слезной жидкости // Новое в офтальмологии. 2002. № 4. С. 32-37.
54. Курышева Н. И., Колединцев М. Н. Кристаллография слезной жидкости как метод прогнозирования риска развития катаракты у больных первичной глаукомой // Вестн. офтальмологии. 1999. № 5. С. 5-6.
55. Тюриков Ю. А., Покоева Т. В. Кристаллографический метод исследования слезной жидкости в диагностике новообразований // Офтальмол. журн. 1992. № 4. С. 223-226.
56. Максимов С. А. Морфология твердой фазы биологических жидкостей как метод диагностики в медицине// Бюл. сибирской медицины. № 4. 2007. С. 80-84.
57. Мартусевич А. К., Воробьев А. В. Камакин Н. Ф., Зимин Ю. В. Метод хромокристаллоскопии в свете современной биокристалломики: сущность, роль, перспективы // Вестн. Нижегородского университета им. Н. И. Лобачевского. 2009. № 1. С. 78-83.
58. Обухова Л. М., Конторщикова К. Н. Определение локализации групп белков в высохшей капле сыворотки крови при помощи красителей // Вестн. Нижегород. ун-та им. Н. И. Лобачевского. 2008. № 3. С. 116-119.
59. Краевой С. А., Комповой Н. А. Кристаллизация сыворотки крови методом открытой капли (угловая дегидратация). Кн. 1, ч. 1. Мо.:-Смоленск: Электронный математический и медико-биологический журн «Математическая морфология». 2016. 320 с.
60. Петров В. О., Привалов О. О., Поройский C. B. Автоматизация этапа анализа характеристик белковых фракций при электрофорезе биологических жидкостей // Бюл. Волгоград. науч. центра РАМН. 2008. № 3. С. 5354.
Захарова Галина Порфирьевна - докт. мед. наук, ведущий научный сотрудник Санкт-Петербургского НИИ ЛОР. Россия, 190013, Санкт-Петербург, ул. Бронницкая, д. 9; тел. 8-905-289-46-42, e-mail: GalinazaharovaLOR@ yandex.ru
Шабалин Владимир Владимирович - канд. биол. наук, старший научный сотрудник Санкт-Петербургского НИИ ЛОР. Россия, 190013, Санкт-Петербург, ул. Бронницкая, д. 9; тел. 8-921-651-84-11, e-mail: vvschabalin@mail. ru
Донская Ольга Сергеевна - аспирант каф. пропедевтики стоматологических заболеваний Первого Санкт-Петербургского ГМУ им. И. П. Павлова. Россия, 197022, Санкт-Петербург, ул. Льва Толстого, д. 6-8, тел. 8-950-0058-135, e-mail: Olia.psz@yandex.rukafedra
REFERENCES
1. Kobylyanskii V. K. Mukotsiliarnaya sistema. Fundamental'nye i prikladnye aspekty [Mucociliary system. Fundamental and applied aspects]. M.: BINOM, 2008. 415 (In Russian).
2. Zakharova G. P., Yanov Yu. K., Shabalin V. V. Mukotsiliarnaya sistema verkhnikh dykhatel'nykh putei [Upper respiratory tract mucociliary system]. SPb.: Dialog, 2010. 390 (In Russian).
3. Shabalin V. N., Shatokhina S. N. Morfologiya biologicheskikh zhidkostei cheloveka [Human biologic fluids morphology]. M.: Khrizistom, 2001. 304 (In Russian).
4. Shabalin V. N., Shatokhina S. N., Shabalin V. V. Fundamental'nye osnovy samoorganizatsii biologicheskikh zhidkostei. Funktsional'naya morfologiya biologicheskikh zhidkostei: mater. 3-i Vseros. nauchn.-prakt. konf. [The fundamentals of biologic fluids self-organization. Functional morphology of biologic fluids: the materials of the 3rd All-Russian Scientific and Practical Conference]. M., 2004: 5-7 (In Russian).
5. Khaken G. Informatsiya i samoorganizatsiya. Makroskopicheskii podkhod k slozhnym sistemam [Information and self-organization. Macroscopic approach to complex systems]. M.: Mir, 1991. 240 (In Russian).
6. Sudakov K. V. Funktsional'nye sistemy [Functional systems]. Moskva: Izdatel'stvo RAMN, 2011. 320 (In Russian).
7. Bogdanov A. A. Tektologiya: Vseobshchaya organizatsionnaya nauka. Mezhdunarodnyi institut Aleksandra Bogdanova. Sost., predislovie i kommentarii G. D. Gloveli. Posleslovie V. V. Popkova [General organizational science. Aleksand Bogdanov International Institute. Composition, foreword and comments by G. D. Gloveli. Foreword by V. V. Popkov]. M.: Finansy, 2003 (In Russian).
8. Kolmogorov A. N. Ob analiticheskikh metodakh v teorii veroyatnostei [On analytical methods in the theory of probabilities]. Uspekhi matematicheskikh nauk. 1938; 5: 5-41 (In Russian).
= ^^
Обзоры
9. Anokhin P. K. Sistemogenez kak obshchaya zakonomernost' evolyutsionnogo protsessa [Systemogenesis as general principle of evolutionary process]. Byulleten'eksperimental'noi biologii i meditsiny. 1948; 26(2): 81-99 (In Russian).
10. Belousov B. P. Periodicheski deistvuyushchaya reaktsiya i ee mekhanizmy. Radiatsionnaya meditsina: sb. referatov [Alternating reaction and its mechanisms. Medical radiology: the collection of abstracts]. M.: Medgiz, 1959. 45-148 (In Russian).
11. Oparin A. I. Zhizn', ee priroda, proiskhozhdenie i razvitie [Life, its nature, genesis and development]. M., Nauka, 1968. 173 (In Russian).
12. Bernal Kh. Vozniknovenie zhizni [The origin of life]. M.: Mir, 1969. 391 (In Russian).
13. Etkins P. Poryadok i besporyadok v prirode [The order and disorder in nature]. M.: Mir, 1987. 224 (In Russian).
14. Klimontovich N. Yu. Bez formul o sinergetike [Synergetics without formulae]. Minsk, 1986. 223 (In Russian).
15. Prigozhin I., Stengers I. Poryadok iz khaosa. Per. s angl. [Order from chaos. Translation from English]. M.: Progress, 1986. 429 (In Russian).
16. Loskutov A. Yu., Mikhailov A. S. Vvedenie v sinergetiku [Introduction into synergetics]. M.: Nauka, 1990. 85 (In Russian).
17. Kolesnikov Yu. A. K tainam mirozdaniya [To mysterium cosmographicum]. Magadan: 1997. 244 (In Russian).
18. Ryazantsev S. V., Tyrnova E. V., Klyachko L. L., Zakharova G. P., Kosenko V. A. Sootnoshenie antimikrobnykh belkov sekretov slizistykh obolochek pri khronicheskom rinosinusite. Kh s''ezd otorinolaringologov Ukrainy [The proportion of antimicrobial proteins of mucosa secretion in chronic rhinosinusitis. The 10 th Congress of Otorhinolaryngologists of Ukraine]. Sudak, 2005. 144 (In Russian).
19. Kolotilov N. N., Bakai E. A. Zhidkokristallicheskaya struktura biologicheskikh ob''ektov [Liquid crystalline structure of biological objects]. Molekulyarnaya biologiya. 1980; 27: 87-96 (In Russian).
20. Bauer E. S. Teoreticheskaya biologiya [Theoretical biology]. M.-L.: VIEM, 1935. 206 (In Russian).
21. Zakharova G. P. Morfologicheskie osobennosti nosovogo sekreta u bol'nykh khronicheskim gnoinym rinosinusitom [Morphologic peculiarities of the nasal secretion in the patients with chronic suppurative rhinosinusitis]. Rossiiskaya otorinolaringologiya. 2006; 5(24): 3-6 (In Russian).
22. Khmel'nitskaya N. M., Ryazantsev S. V., Klyachko L. L., Ankhimova E. S. Metody polucheniya i issledovaniya ekzokrinnykh sekretov dlya izucheniya nekotorykh parametrov mestnogo immuniteta [The methods of obtaining and study of exocrine secretion for the study of some parameters of local immunity]. Klinicheskaya laboratornaya diagnostika. 1997; 12: 43-44 (In Russian).
23. Zakharova G. P., Shabalin V. V., Drozdova M. V., Donskaya O. S., Rubis I. A. Morfologicheskie osobennosti sekreta slizistoi obolochki pri khronicheskom gnoinom rinosinusite i sekretornom otite [Morphologic peculiarities of mucosa secretion in chronic suppurative rhinosinusitis and secretory otitis media]. Rossiiskaya otorinolaringologiya. 2015; 5: 28-33 (In Russian).
24. Shabalin V. N., Shatokhina S. N. Printsipy autovolnovoi samoorganizatsii biologicheskikh zhidkostei [The principles of auto-wave self-organization of biologic fluids]. VestnikRossiiskoi akademii meditsinskikh nauk. 2000; 3: 45-49 (In Russian).
25. Khaken G. Informatsiya i samoorganizatsiya Makroskopicheskii podkhod k slozhnym sistemam [Information and self-organization. Macroscopic approach to complex systems]. M.: Mir, 1991. 240 (In Russian).
26. Bol'tsman L. Dal'neishie issledovaniya teplovogo ravnovesiya mezhdu molekulami gaza. Izbrannye trudy [The further study of thermal equilibrium among gas moleculae. Selective works]. M., 1984. 125-189 (In Russian).
27. Puankare A., Puankare A. Figury ravnovesiya zhidkoi massy [Liquid mass equilibrium figures]. M.: NITs «Regulyarnaya i khaoticheskaya dinamika», 2000. 208 (In Russian).
28. Bertalanfi L. fon. Obshchaya teoriya sistem - kriticheskii obzor. Issledovaniya po obshchei teorii sistem: Sb. perevodov. Obshch. red. i vst. st. V. N. Sadovskogo i E. G. Yudina [General system theory - critical review. The study on general system theory: The collection of translations. General edition and introductory article by V. N. Sadovskii and E. G. Judin]. M.: Progress, 1969. 23-82 (In Russian).
29. Shabalin V. N., Shatokhina S. N. Sistemnaya samoorganizatsiya biologicheskikh zhidkostei i starenie. Sb. 1 Ros. s''ezda gerontologov i geriatrov [System self-organization of biologic fluids and aging. The collection of the 1st Russian Congress of Gerontologists and Geriatricians]. Samara, 1999. 502-505 (In Russian).
30. Klauzius R. Mekhanicheskaya teoriya tepla. Vtoroe nachalo termodinamiki: sb. rabot [Mechanical heat theory. The second law of thermodynamics: The collection of works]. M-L., 1934 (In Russian).
31. Shabalin V. N., Shatokhina S. N. Fundamental'nye osnovy biologicheskikh ritmov [Fundamentals of biologic rhythms]. Vestnik Rossiiskoi akademii meditsinskikh nauk. 2004; 8: 4-7 (In Russian).
32. Shabalin V. N. , Shatokhina S. N. Autogennye ritmy i samoorganizatsiya biozhidkostei [Autogenic rhythms and self-organization of biorhythms]. Byulleten'eksperimental'noi biologii i meditsiny. 1996; 10: 364-371 (In Russian).
33. Denisova N. A. Fundamental'nye oshibki fundamental'noi nauki. Tochka zreniya [Fundamental mistakes of fundamental science. Viewpoint]. Bishkek: Ilim, 1998. 80 (In Russian).
34. Tarasevich Yu. Yu. Mekhanizmy i modeli degidratatsionnoi samoorganizatsii biologicheskikh zhidkostei [The mechanisms and models of dehydration self-organization of biologic fluids]. Uspekhifizicheskikh nauk. 2004; 174; 7: 780-790 (In Russian).
35. Yakhno A. G., Sanin O. A., Sanina V. G. Dinamika mekhanicheskikh svoistv kapel' biologicheskikh zhidkostei v protsesse vysykhaniya kak otrazhenie osobennostei samosborki ikh komponentov ot nano do mikrourovnya [Dynamics of mechanical properties of biologic fluid drops in the process of drying as a reflection of specific features of self-assembly of their components from nano- to microlevel]. Biofizika. 2011; 56; 6: 1016-1022 (In Russian).
36. Kamakin N. F., Martusevich A. K. Sovremennye podkhody k kristalloskopicheskoi identifikatsii sostava biologicheskikh zhidkostei [The present-day approaches to crystalloscopic identification of biologic fluids composition]. Ekologiya cheloveka. 2003; 5: 23-25 (In Russian).
37. Kamakin N. F., Martusevich A. K. Kharakteristika teziokristalloskopicheskogo portreta biologicheskikh zhidkostei organizma chelovekav norme i pri patologii [The specific features of teziocrystalloscopic portrait of human organism biologic fluids in normal state and in pathology]. Vestnik novykh meditsinskikh tekhnologii. 2003; 10; 4: 57-59 (In Russian).
38. Kalinin A. P., Moroz L. A., Makeev S. A. O kristallograficheskom issledovanii syvorotki krovi pri nekotorykh endokrinnykh zaboleva-niyakh [On crystallographic study of blood serum in some endocrine diseases]. Sovetskaya meditsina. 1987; 7: 36-39 (In Russian).
39. Gol'braikh E., Rapis E. G, Moiseev S. S. O formirovanii uzora treshchin v svobodno vysykhayushchei plenke vodnogo rastvora belka [On generation of crack patterns in freely drying film of protein water solution]. Zhurnal tekhnicheskoi fiziki. 2003; 73; 10: 116-121 (In Russian).
40. Buzoverya M. E., Sel'chenkov V. L., Sel'chenkova N. I. [et al.]. Matematicheskii analiz struktur tverdoi fazy biologicheskikh zhidkostei [Mathematic analysis of the structure of hard phase of biologic fluids]. Gerontologiya igeriatriya; 1. M., 2001: 55-60 (In Russian).
41. Dasaeva L. A., Shatokhina S. N., Shilov E. M., Shabalin V. N. Vyyavlenie bol'nykh na rannikh stadiyakh mochekamennoi bolezni i otsenka effektivnostiikh lecheniya s pomoshch'yu Litos-sistemy [The revealing of patients at the early stages of urinary stone disease and treatment efficacy evaluation using Litos-system]. Klinicheskaya laboratornaya diagnostika. 2003; 9: 41 (In Russian).
Российская оториноларингология № 1 (86) 2017
42. Dasaeva L. A., Shilov E. M., Shatokhina S. N. Opredelenie vida kamneobrazuyushchikh solei v moche u bol'nykh urolitiazom s pomoshch'yu Litos-sistemy [Determining the type of stone-forming salts in urine of urolithiasis patients using Litos-system]. Gerontologiya i geriatriya. 2003; 2: 218-220 (In Russian).
43. Dasaeva L. A., Shilov E. M. Opyt primeneniya «Litos-testa» i rentgenospektral'nogo mikroanaliza mochi v laboratornoi diagnostike mochekamennoi bolezni [The experience of the use of Litos-test and electron probe urine microanalysis in the laboratory diagnostics of urinary stone disease]. Nefrologiya. 2003; 7: 228-229 (In Russian).
44. Tarusinov G. A. Kristallograficheskoe issledovanie mochi v diagnostike i differentsial'noi diagnostike diffuznykh zabolevanii soedinitel'noi tkani u detei [Crystallographic urine test in diagnostics and differential diagnostics of diffuse diseases of connective tissue in children]. Pediatriya. 1994; 1: 55-57 (In Russian).
45. Camorodov A. V. Avtomatizatsiya kristallograficheskikh issledovanii biologicheskikh zhidkostei cheloveka [Automation of crystallographic examination of human biologic fluids]. Biomeditsinskie tekhnologii i radioelektronika. 2003; 11: 59-64 (In Russian).
46. Shatokhina S. N., Zenger V. G., Shabalin V. N. Morfotipy slyuny v diagnostike kholesteatomy srednego ukha [Saliva morphotypes in the middle ear cholesteatoma diagnostics]. Klinicheskaya laboratornaya diagnostika. 2002; 10: 39 (In Russian).
47. Shatokhina S. N., Sambulov V. I. Kholesteatoma srednego ukha: diagnosticheskoe issledovanie slyuny [Middle ear cholesteatoma: saliva diagnostic examination]. Vrach. 2002; 4: 28-29 (In Russian).
48. Aznauryan A. M. Razrabotka neinvazivnykh metodov diagnostiki pri khronicheskom gnoinom srednem otite s kholesteatomoi [The development of non-invasive diagnostic methods in chronic suppurative otitis media with cholesteatoma]. Rossiiskaya otorinolaringologiya. 2007. № 1. S. 11-15 (In Russian).
49. Zakharova G. P. Morfologicheskie osobennosti sekreta slizistoi obolochki pri khronicheskom gnoinom rinosinusite i sekretornom otite [The morphological peculiarities of mucosa secretion in chronic suppurative rhinosinusitis and secretory otitis]. Rossiiskaya otorinolaringologiya. 2015; 5: 28-33 (In Russian).
50. Zakharova G. P. , Shabalin V. V., Yanov Yu. K. Dlitel'nost' strukturizatsii biologicheskikh zhidkostei v neinvazivnoi diagnostike vospalitel'nogo protsessa polosti nosa i okolonosovykh pazukh [The duration of biologic fluid structuration in non-invasive diagnostics of the nasal cavity and paranasal sinus inflammatory process]. Rossiiskaya otorinolaringologiya. 2012; 6 : 70-75 (In Russian).
51. Deev L. A., Shabalin V. N., Shatokhina S. N. Strukturnye osobennosti tverdoi fazy vnutriglaznoi zhidkosti u lits pozhilogo vozrasta s razlichnymi stadiyami glaukomy [Structural specific features of the solid-phase of intraocular fluid in aged persons with various stages of glaucoma]. Aktual'nyeproblemy gerontologii. Moskva, 1999: 181-183 (In Russian).
52. Beloglazov V. G., At'kova E. L., Fedorov A. A., Safonova T. N., Malaeva L. V. Vozmozhnosti primeneniya metoda kristallografii slezy pri patologii slezootvodyashchei sistemy [The possibilities of application of tear crystallography method in lachrymal system pathology]. Vestnik oftal'mologii. 2003; 4: 49-51 (In Russian).
53. Koledintsev M. N., Maichuk N. V. Sovremennye metody analiza sleznoi zhidkosti [The present-day method of lacrimal fluid analysis]. Novoe v oftal'mologii. 2002; 4: 32-37 (In Russian).
54. Kurysheva N. I., Koledintsev M. N. Kristallografiya sleznoi zhidkosti kak metod prognozirovaniya riska razvitiya katarakty u bol'nykh pervichnoi glaukomoi [Lacrimal fluid crystallography as a method of prognosis of the risk of cataract development in the patients with primary glaucoma]. Vestnik oftal'mologii. 1999; 5: 5-6 (In Russian).
55. Tyurikov Yu. A., Pokoeva T. V. Kristallograficheskii metod issledovaniya sleznoi zhidkosti v diagnostike novoobrazovanii [Crystallographic method of lacrimal fluid examination in the neoplasms diagnostics].Oftal'mologicheskii zhurnal. 1992; 4: 223226 (In Russian).
56. Maksimov S. A. Morfologiya tverdoi fazy biologicheskikh zhidkostei kak metod diagnostiki v meditsine [Morphology of solid phase of biologic fluids as a diagnostic method in medicine]. Byulleten'sibirskoi meditsiny. 2007; 4 80-84 (In Russian).
57. Martusevich A. K., Vorob'ev A. V. Kamakin N. F., Zimin Yu. V. Metod khromokristalloskopii v svete sovremennoi biokristallomiki: sushchnost', rol', perspektivy [The method of chromocrystalloscopy in the light of the present-day biocrystallomy: essence, role, prospects]. VestnikNizhegorodskogo universiteta im. N. I. Lobachevskogo. 2009; 1: 78-83 (In Russian).
58. Obukhova L. M., Kontorshchikova K. N. Opredelenie lokalizatsii grupp belkov v vysokhshei kaple syvorotki krovi pri pomoshchi krasitelei [Determination of protein groups localization in a dry drop of blood serum using colorants]. Vestnik Nizhegorodsk. Un-ta im. N. I. Lobachevskogo. 2008; 3: 116-119 (In Russian).
59. Kraevoi S. A., Kompovoi N. A. Kristallizatsiya syvorotki krovi metodom otkrytoi kapli (uglovaya degidratatsiya) [Crystallization serum drops by open (corner dehydration)]. Kn. 1, ch. 1. Mo.: Smolensk: Elektronnyi matematicheskii i mediko-biologicheskii zhurnal «Matematicheskaya morfologiya». 2016. 320 (In Russian).
60. Petrov V. O., Privalov O. O., Poroiskii C. B. Avtomatizatsiya etapa analiza kharakteristik belkovykh fraktsii pri elektroforeze biologicheskikh zhidkostei [Automation of the stage of analysis of protein fractions characteristics in biologic fluids electrophoresis]. Byulleten' Volgogradskogo nauchnogo tsentra RAMN. 2008; 3: 53-54 (In Russian).
Galina Porfiryevna Zakharova - MD, leading scientific researcher of the department of development and deployment of hi-tech
methods of treatment of Saint Petersburg Research Institute of Ear, Throat, Nose and Speech. Russia, 190013, St Petersburg, Bronnitskaya
St., 9, e-mail: GalinaZaharovaLOR@ yandex.ru
Vladimir Vladimirovich Shabalin - MD candidate, senior scientific researcher. Saint Petersburg Research Institute of Ear, Throat,
Nose and Speech. Russia, 190013, St Petersburg, Bronnitskaya St., 9, e-mail: vvshabalin@mail.ru
Olga Sergeyevna Donskaya - Post-graduate student of the Department of Propaedeutics of Dental Diseases of Pavlov First Saint
Petersburg State Medical University, Russia, 197022, St Petersburg, 6-8 Lev Tolstoy str., tel.: 8-950-00-58-135, e-mail: Olia.psz@yandex.
rukafedra
