Научная статья на тему 'Совершенствование методов серологической диагностики в системе эпидемиологического надзора за риккетсиозами группы клещевой пятнистой лихорадки'

Совершенствование методов серологической диагностики в системе эпидемиологического надзора за риккетсиозами группы клещевой пятнистой лихорадки Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

CC BY
307
74
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
РИККЕТСИОЗЫ ГРУППЫ КЛЕЩЕВОЙ ПЯТНИСТОЙ ЛИХОРАДКИ / RICKETTSIA SPP. / ИММУНОФЕРМЕНТНЫЙ АНАЛИЗ / SPOTTED FEVER GROUP RICKETSIOSES / TICK TYPHUS OF NORTHERN ASIA / ENZYME-LINKED IMMUNOSORBENT ASSAY

Аннотация научной статьи по клинической медицине, автор научной работы — Абрамова Н. В., Рудаков Н. В., Пеньевская Н. А., Седых Н. Н., Кумпан Л. В.

Представлены результаты апробации и изучения эффективности непрямого твердофазного варианта иммуноферментного анализа (ИФА) для серологической диагностики инфекций, вызываемых риккетсиями из группы клещевой пятнистой лихорадки. Применение экспериментальных тест-систем для обнаружения антител классов IgM и IgG к антигену R.sibirica subsp. sibirica в парных сыворотках крови позволило верифицировать диагноз клещевого риккетсиоза у больных Алтайского края в подавляющем большинстве случаев, в том числе при отрицательных результатах реакции связывания комплемента. Использование риккетсиозных антигенов различной видоспецифичности в качестве основы твердофазного непрямого варианта ИФА открывает перспективы для широкомасштабного сероэпидемиологического изучения географического распространения старых и новых видов риккетсий и их роли в патологии человека.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по клинической медицине , автор научной работы — Абрамова Н. В., Рудаков Н. В., Пеньевская Н. А., Седых Н. Н., Кумпан Л. В.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Perfection of serum diagnostics methods in system of epidemiological supervision for a spotted fever group ricketsioses

The results of approbation and detection of efficiency of indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for serological diagnostics of the infections caused by spotted fever group rickettsiae in West Siberia have been presented. Application of experimental tests-systems for detection of IgM and IgG antibodies to R.sibirica antigens in twin blood serums has allowed to verify the diagnosis of tick-borne ricketsiosis in patients from Altai region in majority of cases, including negative results of complement fixation test. Using rickettsial antigens of various species-specificity in indirect ELISA opens prospects for large-scale sero-epidemiological assay of geographical distribution of old and new species of rickettsiae and their roles in a human pathology.

Текст научной работы на тему «Совершенствование методов серологической диагностики в системе эпидемиологического надзора за риккетсиозами группы клещевой пятнистой лихорадки»

дается кислотному фактору [1,9], присоединение дополнительных химических агрессивных компонентов дуодено-гастрального рефлюкса (пепсин, желчные кислоты) усиливает повреждающую способность рефлюк-тата [5].

Таким образом, анализируемые клинические симптомы кислой и желчной регургитации, в зависимости от выраженности наблюдаемых при них эндоскопических изменений СОП, выстраиваются в определенный иерархический ряд (от наименьших эндоскопических проявлений - к наибольшим) (рис. 2).

Таким образом, выявлены особенности в клинической и эндоскопической картине ГЭРБ, протекающей на фоне хронической описторхозной инвазии. Для клинической картины ГЭРБ у пациентов с описторхозом характерно:

ЛИТЕРАТУРА

1. Ивашкин В.Т., Лапина Т.Л. Наиболее значимые кислотозависимые заболевания в практике врача. - М.: РГА, 2005. - 30 с.

2. Коненков В.И., Бородин Ю.И., Горчаков В.Н. и др. Паразитарные инвазии: лямблиоз, описторхоз (научноинформационное издание). - Новосибирск, 2006. - 40 с.

3. Бондаренко О.Ю., Захарова Н.В., Ивашкин В.Т. и др. Влияние терапии омепразолом на качество жизни больных гастроэзофагеальной рефлюксной болезнью» // Российский журнал гастроэнтерол., гепатол. и коло-проктол. - 2005. - №5. - С.22-28.

4. Васильев Ю.В. Гастроэзофагеальная рефлюксная болезнь в стадии рефлюкс-эзофагита: диагностика и терапия // Фарматека. - 2004. - №13. -С.1-5.

5. Гриневич В. Мониторинг рН, жёлчи и импеданс-мониторинг в диагностике ГЭРБ // Экспериментальная и клиническая медицина. - 2004. -№5. - С.14-16.

6. Исаков В.А. Эпидемиология ГЭРБ: Восток и Запад // Экспериментальная и клиническая медицина. - 2004.

- №5. - С.2-6.

7. Калягин А.Н. Нетипичные внепищеводные проявления гастроэзофагеальной рефлюксной болезни. // Современные проблемы гастроэнтерологии: Материалы межрегиональной научно-практич. конф. / Под ред. А.Н. Калягина. - Иркутск, 2008. - С.43-56.

- доминирование симптомов жёлчной регургитации (ощущение горечи во рту, горькой отрыжки);

- вытеснение (классических для ГЭРБ) проявлений кислотной регургитации (изжога, отрыжка кислым) на второй план и отсутствие случаев их моносимптом-ности (без сопутствующих клинических проявлений желчного ГЭР).

При хроническом описторхозе преобладает эндоскопически негативная форма ГЭРБ, однако, воспалительные изменения СОП чаще протекают по типу эрозивного рефлюкс-эзофагита. Закономерностью ГЭРБ на фоне описторхозной инвазии является вариант клинической картины, с проявлениями только жёлчной регур-гитации (без изжоги и отрыжки кислым), ассоциация с отсутствием эндоскопических изменений, несмотря на выраженность симптомов.

8. Маев И.В., Самсонов А.А. Применение современных антацидных средств в терапии кислотозависимых заболеваний желудочно-кишечного тракта // Справочник поликлинического врача. - 2005. - №5. - С.3-7.

9. Трухманов А.С. Гастроэзофагеальная рефлюксная болезнь: клиника, диагностика, лечение // Русский медицинский журнал: Болезни органов пищеварения. -2001. - Т.3. №1. - С.19-24.

10. Щербаков П.Л. Гастроэзофагеальный рефлюкс у детей - актуальная проблема детской гастроэнтерологии // Российский журнал гастроэнтерол., гепатол. и ко-лопроктол. - 2002. -№1. - С.62-67.

11. Dent J., Brun J., Fendrick A.M., et al. An evidence-based appraisal of reflux disease management - the Genval workshop report // Gut. - 1999. - Vol. 44. - P.1-16.

12. Kulig M., Leodolter A., Vieth M., et al. Quality of life in relation to symptoms in patients with gastroesophageal reflux disease - an analysis based on the ProGERD initiative // Aliment. Pharmacol. Ther. - 2003. - Vol. 18. - P.767-776.

13. Stanghellini V., Armstrong D., Monnikes H., Bardhan K.D. Systematic review: do we need a new gastroesophageal reflux disease questionnaire? // Aliment. Pharmacol. Ther. -2004. - Vol. 19. - P.463-479.

14. Wang H., Liu B., Jiang J.L. Clinical features of gastroesophageal reflux disease in geriatric patients // Zhonguo Yi Xue Ke Xue Yuan Xue Bao. - 2002. - Vol. 24. №

2. - P.178-180.

Информация об авторах:

Белобородова Эльвира Ивановна - д.м.н., профессор, заведующая кафедрой; Святенко Ирина Александровна -врач-терапевт, преподаватель кафедры терапии Томского военно-медицинского института, заочный аспирант.

© АБРАМОВА Н.В., РУДАКОВ Н.В., ПЕНЬЕВСКАЯ Н.А., СЕДЫХ Н.Н., КУМПАН Л.В., САМОЙЛЕНКО И.Е., РЕШЕТНИКОВА Т.А., ОБЕРТ А.С. - 2010

СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ МЕТОДОВ СЕРОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ В СИСТЕМЕ ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКОГО НАДЗОРА ЗА РИККЕТСИОЗАМИ ГРУППЫ КЛЕЩЕВОЙ ПЯТНИСТОЙ ЛИХОРАДКИ

Н.В. Абрамова1, Н.В. Рудаков1-2, Н.А. Пеньевская1, Н.Н. Седых3, Л.В. Кумпан1, И.Е. Самойленко2,

Т.А. Решетникова2, А.С. Оберт3 ('Омская государственная медицинская академия, ректор - д.м.н., проф. А.И. Новиков, кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии, зав. - д.м.н., проф. Н.В. Рудаков, кафедра фармакологии с курсом клинической фармакологии, зав. - к.м.н., доц. С.В. Скальский; 2Омский НИИ природноочаговых инфекций, директор

- д.м.н., проф. Н.В. Рудаков; 3Алтайский государственный медицинский университет, ректор - д.м.н., проф.

В.М. Брюханов, кафедра педиатрии №1 с курсом детских инфекций, зав. - д.м.н., проф. Г.И. Выходцева)

Резюме. Представлены результаты апробации и изучения эффективности непрямого твердофазного варианта иммуноферментного анализа (ИФА) для серологической диагностики инфекций, вызываемых риккетсиями из группы клещевой пятнистой лихорадки. Применение экспериментальных тест-систем для обнаружения антител классов IgM и IgG к антигену R.sibirica subsp. sibirica в парных сыворотках крови позволило верифицировать диагноз клещевого риккетсиоза у больных Алтайского края в подавляющем большинстве случаев, в том числе при отрицательных результатах реакции связывания комплемента. Использование риккетсиозных антигенов различной видоспецифичности в качестве основы твердофазного непрямого варианта ИФА открывает перспективы для широкомасштабного сероэпидемиологического изучения географического распространения «старых» и «новых» видов риккетсий и их роли в патологии человека.

Ключевые слова: риккетсиозы группы клещевой пятнистой лихорадки, Rickettsia spp., иммуноферментный анализ.

PERFECTION OF SERUM DIAGNOSTICS METHODS IN SYSTEM OF EPIDEMIOLOGICAL SUPERVISION FOR

A SPOTTED FEVER GROUP RICKETSIOSES

N.V Abramova1, N.V. Rudakov1-2, N.A. Penyevskaya1, N.N. Sedih3, L.V. Kumpan1, I.E. Samoylenko2,

T.A. Reshetnikova2, A.S. Obert3 ('Omsk State Medical Academy, 2Omsk Scientific Research Institute of Natural-Focal Infections,

3Altai State Medical University)

Summary. The results of approbation and detection of efficiency of indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for serological diagnostics of the infections caused by spotted fever group rickettsiae in West Siberia have been presented. Application of experimental tests-systems for detection of IgM and IgG antibodies to R.sibirica antigens in twin blood serums has allowed to verify the diagnosis of tick-borne ricketsiosis in patients from Altai region in majority of cases, including negative results of complement fixation test. Using rickettsial antigens of various species-specificity in indirect ELISA opens prospects for large-scale sero-epidemiological assay of geographical distribution of «old» and «new» species of rickettsiae and their roles in a human pathology.

Key words: spotted fever group ricketsioses, Rickettsia spp., tick typhus of Northern Asia, enzyme-linked immunosorbent assay.

В настоящее время известно около двух десятков риккетсиозов из группы клещевой пятнистой лихорадки (КПЛ). Из них в России эпидемиологическое значение имеют клещевой риккетсиоз (КР) или клещевой сыпной тиф Северной Азии, с этиологическим агентом Rickettsia sibirica и астраханская пятнистая лихорадка, вызываемая риккетсиями генокомплекса R.conorii. Отмечены единичные завозные случаи везикулезного риккетсиоза, вызываемого R.akari [5]. Выявлен новый риккетсиоз, вызываемый R.heilongjiangensis, названный Дальневосточным клещевым риккетсиозом [2]. Методами генотипирования получены данные, свидетельствующие о возможной этиологической роли R.helvetica в развитии острых лихорадочных заболеваний после присасывания клеща на территории Пермского края [3]. В Приморском крае ранее отмечали случаи лихорадки цуцугамуши, однако сегодня это заболевание не выявляют из-за отсутствия диагностику-ма, в то время как в соседней Японии наблюдается рост заболеваемости [5].

Количество видов риккетсий из группы КПЛ, циркулирующих в природных очагах на территории России, не ограничивается только выше перечисленными. Из клещей различных географических зон с достаточным постоянством удается выделять риккетсии и других, в том числе, новых видов риккетсий, с доказанной и пока не установленной патогенностью для человека [4]. Изучение клинико-эпидемиологической роли патогенов риккетсиозной природы как хорошо известных, так и новых, в значительной степени, сдерживается отсутствием высоко чувствительных и доступных методов серологической диагностики.

«Золотым стандартом» для диагностики риккетсио-зов является реакция непрямой иммунофлюоресценции (РНИФ), рекомендованная ВОЗ [5]. Однако для нее необходимы корпускулярные антигены, коммерческий выпуск которых отсутствует в связи со значительными технологическими сложностями их получения. В связи с чем, РНИФ достаточно трудоёмка и не пригодна для одновременного исследования большого количества проб. Наиболее распространенным методом, применяемым в практическом здравоохранении, остается реакция связывания комплемента (РСК), которая была предложена для диагностики риккетсиозов еще в 1940-х годах прошлого века. Коммерческие цельнорастворимые антигены для РСК позволяют с высокой специфичностью, но с умеренной чувствительностью выявлять комплемен-тсвязывающие антитела (АТ) к R.sibirica. Однако, для обнаружения АТ к риккетсиям других видов, эти диа-гностикумы, по-видимому, менее пригодны [2].

В 1980-х годах для диагностики риккетсиозов, вызываемых R.rickettsii, R.tsutsugamushi, R.prowazekii и R.conorii, было предложено использовать иммунофер-ментный анализ (ИФА) [5,7,8,9,10]. Применение этого метода было ограничено исследовательскими работами в рамках специализированных риккетсиозных лабора-

торий, при этом авторы отмечали высокую специфичность и чувствительность ИФА для выявления АТ в низких титрах в сравнении с РСК и РНИФ [10].

Цель работы: апробация и изучение эффективности метода ИФА для серологической диагностики инфекций, вызываемых риккетсиями из группы КПЛ, циркулирующими на территории России.

Материалы и методы

Выявление антител в сыворотках крови пациентов проводили непрямым твердофазным вариантом ИФА (ИФА-IgM и ИФА-IgG). Для сенсибилизации поли-стироловых планшетов использовали цельнорастворимые антигены, приготовленные по общепринятой методике [1] с нашими модификациями из штаммов риккетсий следующих видов: R.sibirica subsp. sibirica (R.sibirica); R.sibirica subsp.BJ-90 (R.BJ-90); R.tarasevichiae; R.heilongjiangensis; R.raoultii; R.akari. Эти штаммы, хранящиеся в коллекции Омского НИИПОИ, были изолированы нами из клещей в различных природных очагах Сибири, Алтая и Дальнего Востока. Исследуемые сыворотки разводили в 10 раз. В качестве конъюгатов использовали коммерческие антивидовые антитела к IgM и IgG человека. Оптическую плотность (ОП) субстратно-индикаторного раствора измеряли на спектрофотометре. Результат оценивали как положительный, если оптическая плотность анализируемой пробы была выше отсекающего значения (cut off), рассчитанного по формуле: (ОП1+ ОП2)/2 + 0,2, где ОП1 - оптическая плотность контроля конъюгата, ОП2 - оптическая плотность «отрицательной» контрольной сыворотки.

После предварительной оптимизации условий выполнения ИФА для обнаружения противориккетси-озных АТ классов IgM и IgG было исследовано 276 сывороток крови пациентов из трех групп. Первая (референтная) группа состояла из 36 больных с типичной клинической картиной клещевого риккетсиоза, госпитализированных в инфекционное отделение МУЗ ГБ №11 г.Барнаула в эпидемический сезон (с мая по октябрь) 2006 и 2007 гг. Сыворотки крови от 15 больных КР были параллельно исследованы в ИФА и РСК с коммерческим диагностикумом. Вторая (контрольная группа) состояла из 80 клинически здоровых людей г.Омска, обследованных вне эпидемического сезона КР. Обе группы были сопоставимы по возрастному и половому составу. В третью группу (опытную) вошли 58 лихорадящих больных Тарского района Омской области, обследованных по подозрению на клещевой энцефалит (КЭ) и иксодовый клещевой боррелиоз (ИКБ) в мае-сентябре 2008 г.

Результаты и обсуждение

Результаты применения ИФА для обнаружения антител к антигенам различных видов риккетсий в сыворот-

ках крови больных сравниваемых групп представлены в таблице 1. В контрольной группе только одна проба крови давала положительную реакцию на наличие АТ к антигену В..$іЬітіса. С остальными пятью риккетсиозны-ми антигенами для всех сывороток контрольной группы реакция была отрицательной. Результаты ИФА для обнаружения IgG-АТ к риккетсиям также продемонстрировали высокую специфичность метода. Ни одна проба, ни с одним из исследуемых антигенов не давала положительных реакций.

В группе больных с типичной клиникой КР с помощью ИФА в подавляющем большинстве проб удалось выявить АТ классов ^М и (или) IgG к антигенам

различных видов риккетсий. В сыворотках крови лихорадящих больных, контактировавших с клещами на территории Тарского района Омской области, также обнаружили АТ к изучаемым риккетсиозным антигенам, хотя процент таких находок значительно меньше, чем у алтайских больных. Вместе с тем, факты выявления противориккетсиозных антител у больных этой группы представляют значительный интерес, поскольку до настоящего времени в Омской области не было зарегистрировано ни одного случая КР, однако в клещах были выявлены ЯЛат$еу1сЫае, к.таои1Ш и рик-кетсия, генетически близкая к R.helvetica [4]. Клиникоэпидемиологический анализ случаев обнаружения АТ к риккетсиям у больных опытной группы будет представлен в отдельном сообщении.

Важно отметить, что у больных КР из референтной группы чаще всего обнаруживаются АТ к антигену к^Ьтеа $иЫр. $Штка, что вполне закономерно, так как именно этот вид риккетсий является доминирующим в Алтайском крае. На втором месте по частоте положительных реакций - ИФА с антигеном к.таои1Ш, на третьем - с антигеном к.акати, на четвертом - с антигеном к.Taтaseviеhiae, на пятом - с антигеном к. heilongjiangensis. Только в одной из 65 проб наблюдали положительную реакцию в ИФА-^М с антигеном к^Ьтеа $иЫр. В|-90.

Антитела класса ^М к Бейтса выявлены в среднем в 81,5% сывороток крови, причем чаще во второй пробе крови, чем в первой (86,2% и 77,8% соответственно). Антитела класса IgG к к.$Шпеа выявлены в среднем в

69,2% сывороток крови, причем чаще в первой, чем во второй сыворотках крови (72,2% и 65,5% соответственно). В четырех случаях (как на фоне ^М-АТ, так и без них) отмечена обратная сероконверсия IgG к к.$Шпеа.

Очень часто в одной и той же пробе обнаруживали антитела к двум и более риккетсиозным антигенам. Только в сыворотках крови 4-х больных КР выявляли ^М-АТ к единственному виду риккетсий - к.$Шпеа, тогда как ^М к антигенам других видов риккетсий выявляли всегда в сочетании с 1^М к к.$Шпеа.

Количество положительных проб, содержащих IgG-АТ только к одному виду риккетсий, было несколько больше, чем при выявлении ^М. Причем «моно-

варианты» IgG обнаружены не только к R.sibirica, но и к R. tarasevichiae и к R. akarii. Однако при этом у больных выявляли IgM к R.sibirica или обнаруживали IgG к R.sibirica, но в другой пробе крови.

Антитела класса IgG к R.raoultii во всех случаях обнаруживали вместе с IgG к антигенам не менее двух других видов риккетсий. Ни у одного больного не были обнаружены IgG к R.BJ-90 или к R.heilongjiangensis.

Анализ полученных данных позволил заключить, что для лабораторного подтверждения диагноза «клещевой риккетсиоз» у больных Алтайского края необходимо тестировать сыворотки крови в ИФА на наличие IgM и IgG к антигену R.sibirica subsp. sibirica. Причем, исследование парных сывороток в ИФА-IgG целесообразно в том случае, если в ИФА-IgM получены отрицательные результаты.

Для оценки эффективности серологической верификации диагноза КР для различных алгоритмов применения ИФА были рассчитаны показатели, рекомендуемые для характеристики лабораторных тестов [6]: чувствительность (sensitivity-Se), специфичность (specificity-Sp); прогностическая ценность положительного результата (positive predictive value - PV+); прогностическая ценность отрицательного результата (negative predictive value - PV-) (табл. 2).

Оказалось, что у большинства (77,8%) больных для подтверждения диагноза было достаточно исследовать на наличие IgM к R.sibirica только первую сыворотку крови. Тестирование 2-й пробы крови позволяло верифицировать диагноз еще у 13,9% больных.

Таблица 1

Частота обнаружения методом ИФА антител к различным видам риккетсий в сыворотках крови пациентов

Алтайского края и Омской области

Виды риккетсий Группы больных

Референтая Контрольная Опытная

iaM iaG iaM iaG iaM iaG

абс. % абс. % абс. % абс. % абс. % абс. %

R.sibirica subsp. sibirica 5B 81,5±4,8 45 б9,2±5,7 1 1,2±1,2 G G 12 9,2±2,5 7 5,3±1,9

R.raoultii 24 B6,9±6,G 7 1G,8±B,8 G G G G 14 1G,7±2,7 2 1,5±1,1

R.akarii 22 33,8±5,9 9 13,8±4,3 G G G G 12 9,2±2,5 2 1,5±1,1

R.tarasevichiae 7 1G,8±B,8 BG 4,б±2,б G G G G 11 8,4±5,9 G G

R.heilonajianaensis B 4,б±2,б G G G G G G 9 б,9±2,2 G G

R.sibirica subsp.BJ-9G 1 1,5±1,5 G G G G G G 21 16,G±B,2 1B 9,9±2,б

Количество исследованных сывороток б5 1GG,G б5 1GG,G 8G 1GG,G 8G 1GG,G 1B1 1GG,G 1B1 1GG,G

Примечание: референтная группа - больные клещевым риккетсиозом (Алтайский край), контрольная группа - здоровые люди, опытная группа - лихорадящие больные с подозрением на КЭ или ИКБ (Омская область).

Таблица 2

Эффективность различных алгоритмов применения ИФА с антигеном В..$гЬтш $иЫр. $іЬітіса для серологической верификации КР у больных Алтайского края

Алгоритм применения ИФА Больные (п=В6) Здоровые (n=8G) Характеристики теста

«+» ИФA (а) «-» ИФA (c) « + » ИФA (b) «-» ИФA (d) Se,% a/(a+c) Sp,% d/(b+d) # + + ГО > < ^ ГО > < CL "О

ИФА-!дМ (1-я проба) 28 8 1 79 77,8±б,9 98,8±1,2 9б,б±3,4 9G,8±B,1

ИФА-1дМ (парные пробы) BB B 1 79 91,7±4,б 98,8±1,2 97,1±2,9 97,5±1,7

ИФА-1дМ (парные пробы) + ИФА-!дС (парные пробы) 3б G 1 79 1GG 98,8±1,2 97,3±2,7 1GG

Примечание: 8е - чувствительность; 8р - специфичность; РУ+ - прогностическая ценность положительного результата; РУ- - прогностическая ценность отрицательного результата.

Таким образом, при исследовании парных проб крови в ИФА для обнаружения ^М к к.вШпеа удалось подтвердить диагноз КР у 91,7% больных. При исследовании в ИФА на наличие IgG к к^ШНеа всех (трех) пар сывороток крови, в которых не были выявлены ^М к И^Ьшса, обнаружена сероконверсия IgG к изучаемом-му антигену, что повысило «подтверждаемость» диагноза до 100%.

Представляло интерес выяснить, совпадают ли результаты лабораторного подтверждения КР с помощью ИФА с результатами серологической верификации с помощью РСК. Для этого сыворотки крови от 15 больных КР были параллельно исследованы в ИФА и в РСК с коммерческим диагностикумом. Оказалось, что иссле-

подтвержденных в результате совместного применения ИФА-^М и ИФА-IgG (табл. 3).

Таким образом, непрямой твердофазный вариант иммуноферментного анализа является высокочувствительным и специфичным методом обнаружения антител к антигенам риккетсий. Применение экспериментальных иммуноферментных тест-систем для обнаружения антител классов ^М и IgG к антигену к^ШНеа $иЫр. вШпеа в парных сыворотках крови позволяет верифицировать диагноз клещевого риккетсиоза у больных Алтайского края в подавляющем большинстве случаев, в том числе при отрицательных результатах РСК. Использование риккетсиозных антигенов различной видоспецифичности в качестве основы твердофазного

Таблица 3

Анализ совпадений результатов серологической верификации диагноза клещевого риккетсиоза у больных Алтайского края при использовании ИФА и РСК

Алгоритм применения ИФА Всего больных ИФA (+) РСК (+) Совпадения положительных результатов ИФA и РСК, % Совпадения отрицательных результатов ИФA и РСК, %

абс. % абс. %

ИФА-!дМ (1-я проба) 15 1G бб,7±12,2 G G G 1GG

ИФА-!дМ (парные пробы) 15 12 8G,G±1G,B 8 53,3±12,9 бб,7±13,б 1GG

ИФА-!дМ (парные пробы) и ИФА-!дв (парные пробы) 15 15 1GG 8 53,3±12,9 53,3±12,9 1GG

дование парных сывороток в РСК позволило верифицировать диагноз КР только в 66,7% случаев, верифицированных с помощью ИФА-^М, и в 53,3% случаев,

непрямого варианта ИФА открывает перспективы для широкомасштабного сероэпидемиологического изучения географического распространения «старых» и «новых» видов риккетсий и их роли в патологии человека.

ЛИТЕРАТУРА

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

1. Здродовский П.Ф., Голиневич Е.М. Учение о риккет-сиях и риккетсиозах. - М.: Медицина, 1972. - 496 с.

2. Медянников О.Ю., Макарова В. А. Дальневосточный клещевой риккетсиоз: описание нового инфекционного заболевания // Вестник РАМН. - 2008. - №7. - С.41-44.

3. Нефедова В.В., Коренберг Э.И., Ковалевский Ю.В. и др. Микроорганизмы порядка Rickettsiales у таежного клеща (Ixodes persulcatus sch.) в Предуралье // Вестник РАМН. - 2008. - №7. - С.47-50.

4. Рудаков Н.В., Шпынов С.Н., Самойленко И.Е. и др. Современные подходы к изучению Rickettsiales // Бюллетень Сибирской медицины. - 2006. - Прил.1. -

С.111-115.

5. Тарасевич И.В. Современные представления о риккетсиозах // Клин. микробиол. и антимикроб. химиотер.

- 2005. - Т.7. №2. - С.119-129.

6. Флетчер Р., Флетчер С., Вагнер Э. Клиническая эпидемиология. Основы доказательной медицины. - М.:

Медиа Сфера, 1998. - 352 с.

7. Clements M.L., Dumler J.S., Fiset P., et al. Serodiagnosis of Rocky Mountain spotted fever: comparison of IgM and IgG enzyme-linked immunosorbent assays and indirect fluorescent antibody test // J. Infect. Dis. - 1983. - Vol.148.

- P.876-880.

8. Crum J.W., Hanchalay S., Eamsila C. New paper enzymelinked immunosorbent technique compared with microimmunofluorescence for detection of human serum antibodies to Rickettsia tsutsugamushi // J. Clin. Microbiol.

- 1980. - №11. - P.584-588.

9. Kelly D.J., Wong P.W., Gan E., Lewis G.E. Comparative evaluation of the indirect immunoperoxidase test for the serodiagnosis of rickettsial disease // Am. J. Trop. Med. Hyg.

- 1988. - Vol.38. - P.400-406.

10. La Scola B., Raoult D. Laboratory diagnosis of Rickettsioses: current approaches to diagnosis of old and new rickettsial diseases // J.Clin.Microbiol. - 1997. - Vol.35. №11. - P.2715-2727.

Информация об авторах: 644045, Омск-45, ул. Ленина, 12, Омская государственная медицинская академия, кафедра фармакологии с курсом клинической фармакологии, E-mail: [email protected]., rickettsia@ mail.ru; Абрамова Н.В. - аспирант кафедры; Рудаков Н.В. - д.м.н., профессор, директор Омского НИИПОИ Роспотребнадзора, заведующий кафедрой; Пеньевская Наталья Александровна - к.м.н., доцент; Седых Н.Н. -врач-инфекционист; Кумпан Л.В. - к.м.н., преподаватель кафедры; Самойленко И.Е. - к.м.н., ведущий научный сотрудник; Решетникова Т.А. - к.м.н., старший научный сотрудник; Оберт Анатолий Сергеевич - д.м.н.,

профессор, зав. курсом.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.