CC BY
39
БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИ
Состояние системы свертывания крови у животных с моделированным кардионекрозом на фоне профилактики КоОю
в условиях высокогорья
Махмудова Ж. А.1, Айдарбекова З. М.2, Айдарбекова А.3
1 Махмудова Жьтдыз Акматовна /Makhmudova Zhyldyz Akmatovna - кандидат биологических
наук, доцент,
кафедра фундаментальных дисциплин;
2Айдарбекова Зифаргуль Мусулманкуловна /Aidarbekova Zifargul Musulmankulovna - доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой, кафедра гистологии, цитологии и эмбриологии,
Кыргызская государственная медицинская академия им. И. К. Ахунбаева;
3Айдарбекова Айжан / Aidarbekova Aijan - доктор медицинских наук, профессор кафедры, кафедра терапевтической стоматологии,
Кыргызско-Российский Славянский университет им. Б.Н. Ельцина, г. Бишкек, Кыргызская Республика
Аннотация: установлено, что у кроликов, которым за 30 дней до моделирования катехоламинового кардионекроза в условиях низкогорья в течение 30 дней вводили коэнзим Q10: после воспроизведения катехоламинового кардионекроза в условиях высокогорья наблюдалось уменьшение выраженности гиперкоагуляционных изменений в системе свертывания крови животных.
Abstract: it was found that in rabbits, to which coenzyme Q10 was introduced in 30 days before modelling catecholamine cardionecrosis after producing catecholamine cardionecrosis in high altitude conditions, a decrease in severity of hypercoagulation changes in blood coagulation system of animals was observed.
Ключевые слова: высокогорье, профилактика, гемостаз, адреналин, некроз
миокарда, коэнзим Q10.
Keywords: high altitude, prophylaxis, hemostasis, adrenaline, myocardial necrosis, adrenaline, coenzyme Q10.
До настоящего времени от сердечно-сосудистых заболеваний (ССЗ) в Кыргызстане ежегодно умирает 18 тысяч человек, что составляет 48,8% смертности от всех болезней. Ежедневно от болезней сердечно-сосудистой системы и их тромбоэмболических осложнений умирает 50 человек [1].
В связи с освоением горных районов в Кыргызстане непрерывно происходит миграция населения на различные высоты.
Пребывание в условиях высокогорья сопровождается существенными перестройками системы гемостаза. В горных условиях развиваются закономерные динамические изменения свертываемости крови, характер которых определяет длительность высокогорных воздействий и конкретные климатогеографические особенности высокогорья [2].
Необратимая агрегация или активация факторов гемокоагуляции может активировать плазменные компоненты системы гемостаза и привести к формированию тромба в просвете коронарной артерии с последующим развитием инфаркта миокарда.
Таким образом, профилактика тромбозов и тромбоэмболий, также медикаментозная терапия нарушений коронарного кровотока должна непременно учитывать исходный гемостатический потенциал и его возможные изменения под действием лекарственных препаратов [3, 4, 5], так как применяемые при инфаркте
68
миокарда в условиях высокогорья лекарственные препараты могут оказывать разнообразное влияние на систему регуляции агрегатного состояния крови, усиливать или ослабить коагуляционную активность плазменных факторов, изменить противосвертывающий потенциал.
В современной кардиологии для профилактики заболеваний сердца нередко используют лекарственные препараты метаболического действия - витамины, аминокислоты, микроэлементы, содержание которых при сердечной патологии обычно снижается. К таким метаболитам относится и коэнзим Qi0 (убихинон) -липидорастворимое соединение из класса бензохинонов. ^Q10 - соединение, активно участвующее в энергетическом обмене клеток [6,7].
Целью данной работы явилось изучение эффективности коэнзима Qi0 в профилактике инфаркта миокарда у кроликов с катехоламиновым некрозом миокарда в условиях высокогорья на фоне предварительного введения коэнзима Q10 в течение 30 суток в низкогорье.
Методы исследования
Исследования проводились на 36 кроликах массой 2,5-3 кг в весенне-летний период на высокогорной базе КГМА (пер. Туя-Ашу, 3200 м над уровнем моря). Катехоламиновый некроз провоцировался однократным внутривенным введением адреналина в дозе 0,015 мг/кг массы тела.
При проведении исследований использовался коэнзим Q10 в виде таблеток «Нутрикэа». Таблетки «Нутрикэа» измельчали до порошкообразной массы, смешивали с кормом и скармливали кроликам в дозе 2 мг/кг массы тела один раз в сутки в течение месяца.
Животные были разделены на 3 группы: 1-я группа кроликов на 3-и сутки акклиматизации, 2 -я группа кроликов - животные, которым был введен адреналин на 3-и сутки пребывания в условиях высокогорья, 3-я группа кроликов, которые перорально получали ^Q10 в дозе 2 мг/кг массы тела один раз в сутки в течение 30 дней в условиях низкогорья, после чего были перевезены на п. Туя - Ашу и на 3 -и сутки их пребывания в условиях высокогорья у них был спровоцирован катехоламиновый некроз миокарда.
Забор крови для исследования осуществлялся из краевой ушной вены кроликов в силиконированные пробирки с цитратом натрия в соотношении 9:1. До и после моделирования повреждения миокарда и после приема ^Q10 исследовались следующие показатели сосудисто - тромбоцитарного гемостаза: количество
тромбоцитов в крови определялось с помощью фазово-контрастного микроскопирования по методу Fonio A. [8], о функциональных свойствах тромбоцитов судили по степени адгезии кровяных пластинок и агрегации тромбоцитов [9]. Состояние коагуляционного гемостаза в плазме крови у обследуемых животных изучалось по следующим показателям: время свертывания крови по Ли-Уайту в силиконированных и несиликонированных пробирках [10]; время рекальцификации плазмы определялось по методу Bergerhot N. D., Roka A. L. [11]; каолиновое время и каолин-кефалиновое время плазмы по методу Hatteresley P. C. [12]. Аутокоагулограмма регистрировалась по методике в модификации Баркаган З. С., Иванова Е. П. [9, 10]. Протромбиновое время определялась по Cwick A. I. [13]. Взаимодействие коагуляционного и антикоагулянтного механизмов системы свертывания крови исследовались по унифицированному методу определения толерантности плазмы к гепарину [9]. Количество фибриногена в плазме определялось весовым методом [9]. Фибринолитическая активность изучалась методом лизиса эуглобулинов плазмы крови по Kovarsik H. [14].
Статистическая обработка материала проводилась методом вариационной статистики с помощью компьютерных программных пакетов STATICT и MICROSOFTEXCEL. Разницу средних величин оценивали по t-критерию Стьюдента и вероятности Р.
69
Результаты и их обсуждение
Установлено, что в период кратковременного пребывания в высокогорье по показателям гемостазиограммы выявляется гипер-гипокоагуляционная фаза высокогорного тромбогеморрагического синдрома, с усилением адгезии и агрегации кровяных пластинок, гиперкоагуляционными сдвигами в различных фазах свертывания крови и угнетением фибринолиза.
При изучении системы гемостаза у подопытных кроликов с моделированным катехоламиновым некрозом миокарда в условиях высокогорья на 3 -и сутки по показателям сосудисто-тромбоцитарного и коагуляционного гемостаза выявлено еще большее усугубление ускорения свертывания крови, которое оценивается как гиперкоагуляционная фаза диссеминированного внутрисосудистого свертывания крови (ДВС -синдром).
(%)
70
60
50
40
30
20
10
0
1 2 3
■ группы
Рис. 1. Адгезия тромбоцитов у подопытных животных с моделированным некрозом миокарда на 3-сутки пребывания в условиях высокогорья, профилактически получавших КоQ10
в условиях низкогорья
Примечание: при сравнении 2 гр. с 1; 3 гр. с 2 гр; * р< 0,001
По показателям сосудисто-тромбоцитарного гемостаза у подопытных кроликов после введения адреналина отмечалось усиление функциональной активности тромбоцитов, которое проявлялось увеличением процента адгезии с 49,4±1,1 до 65,7±1,4 % (р<0,001) и агрегации с 26,4±0,7 до 17,33 ± 0,68 с. (р<0,001) кровяных пластинок. Также выявлялось уменьшение количества тромбоциов с 263,33±10,7 до 193,3±3,4 10 9/л, (р< 0,001).
По тесту Ли-Уайта также отмечались гиперкоагуляционные сдвиги: время свертывания цельной крови укорачивалось в несиликонированной пробирке с 7,83 ± 0,20 до 5,66 ± 0,18 мин. и в силиконированной пробирке с 10,20 ± 0,30 до 7,66 ± 0,22 мин. (р<0,001).
У животных, предварительно получавших в течение месяца ^Qi0 в дозе 2 мг/кг массы тела в условиях низкогорья, у которых в последующем был моделирован катехоламиновый некроз миокарда на 3 -сутки пребывания в условиях высокогорья отмечалось снижение скорости агрегации кровяных пластинок с 17,33 ± 0,68 до 21,5 ± 0,71 сек. (р<0,001) и процента адгезии тромбоцитов с 65,75 ± 1,41 до 55,1±0,6 % (р<0,001). В то же время, наблюдалось повышение количества тромбоцитов в пределах физиологической нормы с 193,33 ± 3,44 до 215,3 ± 8,38 109 г/л (р<0,001). Время свертывания цельной крови по тесту Ли-Уайта удлинялось с 7,66 ± 0,22 до 9,0 ± 0,16 мин. (р<0,001).
70
(с)
30
20
10
0
12 3
■ группы
Рис. 2. Агрегация тромбоцитов у подопытных животных с моделированным некрозом миокарда на 3-сутки пребывания в условиях высокогорья, профилактически получавших RaQig
в условиях низкогорья
Примечание: при сравнении 2 гр. с 1; 3 гр. с 2 гр; * р< 0,001
Также были выявлены гипокаогуляционные сдвиги и по биохимическим показателям коагулограммы: удлинение времени рекальцификации плазмы с 45,0 ± 1,6 до 53,16 ± 1,4 сек. (р<0,001), каолин-кефалинового времени с 26,16±1,4 до 29,08±1,1 сек. (р<0,001) и повышение толерантности плазмы к гепарину с 21,5 ± 0,7 до 16,41 ± 0,2 мин. (р<0,001). Отмечалось повышение активности антитромбина III с 13,58 ± 0,39 до 22 ± 1,0 сек. (р<0,001), снижение эуглобулинового фибринолиза с 566,25 ± 10,0 до 498,16 ± 12,2 мин. (р<0,001), при отрицательном этаноловом и протамин-сульфатном тестах.
Таблица 1. Показатели гемостаза у подопытных животных с моделированным некрозом миокарда на 3-сутки пребывания в условиях высокогорья, профилактически получавших КоQ10
в условиях низкогорья
Показатели гемостаза Интактные кролики Получавшие адреналин Получавшие КоОю
Время свертывания цельной крови по Ли-Уайту в несиликонированой пробирке (мин) 8,41±0,1 5,66±0,1* 6,66±0,2
В силиконированой пробирке (мин) 11,09±0,3 7,66±0,2* 9,0±0,1*
Время рекальцификации плазмы (с) 73,75±1,1 45,0±1,6* 53,16±1,4*
Каолиновое время плазмы (с) 31,91±0,5 24,41±1,1* 23,41±0,8
Каолин-кефалиновое время плазмы (с) 34,83±0,9 26,16±1,4* 29,08±1,1*
АКТ на 6 мин (с) 10,08±0,19 8,41±0,1* 8,08±0,3
На 8 мин (с) 8,33±0,2 6,5±0,2* 6,41±0,1
На 10 мин (с) 7,33±0,2 5,33±0,2* 5,5±0,1
Протромбиновое время плазмы (с) 12,25±0,2 9,0±0,2* 11,25±0,1
Тромбиновое время плазмы (с) 13,33±0,3 10,0±0,2* 12,16±0,1
Толерантность плазмы к гепарину (мин) 14,5±0,3 21,5±0,7* 16,41±0,2*
Антитромбин III (с) 22,5±0,6 13,58±0,3* 22,0±1,0*
Фибриноген (г/л) 2,18±0,05 1,05±0,09 1,91±0,01
Этаноловый тест (%) 20 65 -
Протамин-сульфатный тест (%) 35 60 -
Эуглобулиновый фибринолиз (мин) 487,58±11,3* 566,25±10,0* 498,16±12,2*
Примечание: при сравнении 2 гр. с 1гр., 3 гр. с 2 гр. * р< 0,001
71
Таким образом, профилактическое введение KoQi0 животным до моделирования катехоламинового некроза миокарда уменьшает проявления гипергипокоагуляционной фазы высокогорного тромбогеморрагического синдрома, характеризующейся тромбоцитопенией, усилением адгезии и агрегации кровяных пластинок, гиперкоагуляционными сдвигами в различных фазах свертывания крови и угнетением фибринолиза.
На основании проведенных нами исследований можно заключить, что профилактическое введение toQ^ в дозе 2 мг/кг массы животного в течение 30 дней в низкогорье, с дальнейшим моделированием некроза миокарда в условиях высокогорья привело к развитию положительных достоверных изменений показателей гемостаза, имеющих гипокоагуляционную направленность.
Литература
1. [Электронный ресурс]. Режим доступа: http://www.trend.az/regions/casia/kyrgyzstan/1545367.html
2. Исабаева В.А. Система свертывания крови и адаптация к природной гипоксии. Л.: Наука. 1983. 152 с.
3. Захаров А.Г. Изменение коагулограммы при адреналиновом кардионекрозе и его коррекции милдронатом у неадаптированных к высокогорью крыс Сб. статей Всероссийской 69-й итоговой научной студенческой конференции, посвященной 200-летию со дня рождения Н.И. Пирогова. Томск, 2010. С.40-41.
4. Махмудова Ж.А., Зурдинов А.З. Влияние ацетилсалициловой кислоты на гемостаз на фоне сочетанного воздействия экстремальных факторов. Материалы международной конференции «Актуальные вопросы современной медицины». Ош.-2003. С.64-69.
5. Махмудова Ж.А., Зурдинов А.З. Состояние системы гемостаза на фоне применения этомерозола в условиях сочетанного воздействия физической нагрузки и гипертермии при кратковременной адаптации. Сборник трудов научнопрактической конференции, посвященной 65-летию КГМА.- Бишкек . 2004. С.55-56.
6. Аронов Д.М. Применение коэнзима Q10 в кардиологической практике // РМЖ. 2004. Т. 12. (15). С. 22-27.
7. Ланкин В.З., Капелько В.И., Рууге Э.К и др. Коэнзим Q10: физиологическая функция и перспективы использования в комплексной терапии заболеваний сердечнососудистой системы: пособие для врачей М.: Медпрактика. М., 2008. 83 с.
8. Fonio A., Uber das functoinal verhalten der isolitrten sturkturebmente der Thromboseten des Hyolomers und der Gramlomers. // Asta Haemator, 1951.(6).Р.207-214.
9. Балуда В. П., Баркаган З.С., Гольдберг К.Д. и др. Лабораторные методы исследования системы гемостаза. Томск, 1980. С.354-360.
10. ИвановЕ.П. Диагностика нарушений гемостаза. Беларусь. Минск. 1983. С.105-200.
11. Bergerhot N.D., Estimation of plasma recalcification tame. // Ztschr. Vitamin - Hormon. - Fermehtforsch. 1954. V.6. (1). Р. 25.
12. Hatteresley P.C. - Amer. Med. Ass. 1966. Vol. 196. P. 436.
13. QwickA.I. Theprotrombin time. Coagulation, 1964. V.3. (4).Р.327.
14. Kovarsik H., Buluk K. Trombinaproteareplasmmina. // Astaphysiol. Polon, 1954.V.5. (1). Р.35.
72
