CC BY
17
СОСТОЯНИЕ ПРОЦЕССОВ ЛИПОПЕРОКСИДАЦИИ КРОВИ ПРИ РАЗЛИЧНЫХ ВАРИАНТАХ ЕЕ ОБРАБОТКИ АКТИВНЫМИ ФОРМАМИ КИСЛОРОДА IN VITRO
1 19
А.К. Мартусевич , А.А. Мартусевич , Л.К. Ковалева
1ФГБУ «Приволжский федеральный медицинский исследовательский центр» Минздрава России
ГБОУ ВПО «Кировская государственная медицинская академия» Минздрава России
Abstract
The aim of this work is study of intratissue bioradical therapy (combination of oxygenation and darsonvalization) on lipid peroxyadtion in human blood in vitro. In first group of experiments action of processing time on this parameter was investigated. First blood sample was control, and second, third and fourth one were sparged with oxygen (100 ml.). All samples, excluding control, were processing with darsonvalization during 1, 3 and 10 min, respectively. In second experiments series differentiation of indicated complex action (with 3 min darsonvalization) from oxygenation and ozonation was executed. In all experiments intensity of lipid peroxydation and total antioxidant activity were estimated. It was stated, that combination of oxygenation and darsonvalization during 3 min stimulates blood antioxidant potential as ozonation.
Key words: lipid peroxidation, antioxidant activity, blood, darsonvalization, ozone, oxygen
Целью работы служило изучение влияния внутритканевой биорадикальной терапии, включающей введение в биосистему кислорода с последующей его активацией полем Дарсонваля, на перекисное окисление липидов крови in vitro. В первой серии экспериментов изучали влияние времени обработки на модуляцию процессов липопероксидации в крови. Для этого использовали 4 образца крови, первый из которых являлся интактным, остальные барботировали кислородом (100 мл.). По завершению обработки последние подвергали воздействию поля Дарсонваля в течение 1, 3 и 10 минут соответственно. Во второй серии экспериментов образцы крови разделяли на 4 порции (интактную, и 3 опытных). Первую и третью опытные порции барботировали 100 мл чистого кислорода, вторую - озоно-кислородной смесью (100 мл., концентрация озона - 500 мкг/л). Кроме того, третью порцию дополнительно помещали в поле Дарсонваля на 3 минуты. Оценивали интенсивность перекисного окисления липидов и общую антиоксидантную активность. Установлено, что in vitro воздействие, включающее оксигенацию крови и ее последующую обработку полем Дарсонваля (3 мин.),
обеспечивает стимуляцию антиоксидантных резервов, сопоставимую с озонированием.
Ключевые слова: липопероксидация, антиоксидантная активность, кровь, дарсонвализация, озон, кислород
Нарушения баланса про- и антиоксидантных систем крови и тканей являются значимым звеном патогенеза многих заболеваний и патологических состояний, даже непосредственно не связанных с формированием окислительного стресса [3,
4, 6-10]. В то же время спектр средств коррекции указанных метаболических нарушений представлен сейчас только озоном и антиоксидантной терапией [1, 2,
5, 9]. Поэтому расширение «ассортимента» модуляторов окислительного метаболизма является актуальным [1, 5-7]. В этом плане одним из альтернативных вариантов может стать генерация активных форм кислорода в самой биосистеме при действии различных электромагнитных полей, в том числе поля Дарсонваля. На этом принципе основан предлагаемый метод внутритканевой биорадикальной терапии, включающей введение в биосистему кислорода с последующей его активацией физическим фактором [9]. В то же время для адекватного применения данной технологии в эксперименте и клинике необходимо уточнение биологических эффектов подобного воздействия.
В связи с этим, целью работы служило изучение особенностей влияния рассматриваемой технологии обработки на перекисное окисление липидов крови in vitro.
Материал и методы исследования
Для проведения эксперимента образцы цельной консервированной крови обрабатывали источниками активных форм кислорода. Использовали кровь, полученную от 10 здоровых доноров. Проводили две серии экспериментов: в первой изучали влияние времени обработки на модуляцию процессов липопероксидации в крови. Для этого использовали 4 образца крови, первый из которых являлся интактным, остальные барботировали кислородом (100 мл.). По завершению обработки последние подвергали воздействию поля Дарсонваля в течение 1, 3 и 10 минут соответственно.
Во второй серии экспериментов образцы крови разделяли на 4 порции (интактную, на которую не оказывали воздействий, и 3 опытных). Первую и третью опытные порции барботировали 100 мл чистого кислорода, вторую -озоно-кислородной смесью (100 мл., концентрация озона - 500 мкг/л). Кроме того, третью порцию дополнительно помещали в поле Дарсонваля на 3 минуты. Время экспозиции после завершения манипуляций составляло 5 минут.
Оценивали интенсивность перекисного окисления липидов (по светосумме хемилюминесценции - ПОЛ) и общую антиоксидантную активность (АОА) методом индуцированной биохемилюминесценции на аппарате БХЛ-06. Результаты обрабатывали с использованием программы Statistica 6.0.
Результаты и обсуждение
Установлено, что все режимы сочетанной обработки крови кислородом и полем Дарсонваля приводят к активации процессов перекисного окисления
липидов в плазме крови образцов, причем выраженность этого эффекта прямо пропорциональна продолжительности воздействия (рис. 1).
□ О2+Дарсонваль 1 мин
□ О2+Дарсонваль 3 мин
□ О2+Дарсонваль 10 мин
Рис. 1. Состояние про- и антиоксидантных систем крови при различной продолжительности обработки крови полем Дарсонваля при предварительной
оксигенации
Рис. 2. Влияние обработки источниками активных форм кислорода на интенсивность липопероксидации и антиоксидантную систему крови
В то же время динамика общей антиоксидантной активности плазмы нелинейна: минимальная длительность дарсонвализации лишь умеренно повышает антиоксидантный потенциал (на 11%; р<0,05), увеличение ее
продолжительности до 3 минут способствует дальнейшему приросту параметра АОА (на 24% относительно уровня интактного образца; p<0,05), а 10-минутная обработка крови не приводит к сдвигам показателя. На этом основании можно заключить, оптимальным режимом является 3- минутная обработка крови.
С учетом результата первой серии экспериментов для сопоставления эффектов изучаемого воздействия с известными источниками активных форм кислорода (кислородом и озоном) использовали трехминутную дарсонвализацию.
Выявлено, что рассматриваемое комплексное воздействие по характеру влияния по окислительный метаболизм плазмы крови сопоставимо с эффектами озона: указанные факторы приводят к интенсификации ПОЛ на 9 и 12% относительно интактного образца соответственно (p<0,05), при этом АОА увеличивается на 26 и 24% соответственно (p<0,05). Оксигенация образцов крови, практически не оказывая влияния на активность липопероксидации, снижает антиоксидантный потенциал биожидкости (на 6%; p<0,05).
Заключение
Таким образом, in vitro сочетанное воздействие, включающее оксигенацию крови и ее последующую обработку полем Дарсонваля (3 мин.), обеспечивает стимуляцию антиоксидантных резервов, сопоставимую с озонированием.
Список литературы:
1. Бобырев В.Н., Почернява В.Ф., Стародубцев С.Г. с соавт. Специфичность систем антиоксидантной защиты органов и тканей - основа дифференцированной фармакотерапии антиоксидантами // Экспериментальная и клиническая фармакология. 1994. Т. 57, №1. С. 47-54.
2. Зборовская И.А., Банникова М.В. Антиоксидантная система организма, ее значение в метаболизме. Клинические аспекты // Вестник РАМН. 1995. №6. С. 53-60.
3. Казимирко В.К., Мальцев В.И., Бутылин В.Ю., Горобец Н.И. Свободнорадикальное окисление и антиоксидантная терапия. К.: Морион, 2004. 160 с.
4. Кения М.В., Лукаш А.И., Гуськов Е.П. Роль низкомолекулярных антиоксидантов при окислительном стрессе // Успехи современной биологии. 1993. №4. С. 456-470.
5. Клебанов Г.И., Теселкин Ю.О., Бабенкова И.В. с соавт. Антиоксидантная активность сыворотки крови // Вестник РАМН. 1999. №2. С. 15 -22.
6. Костюк В.А., Потапович А.И. Биорадикалы и биоантиоксиданты. Минск: БГУ, 2004.
7. Меньщикова Е.Б. с соавт. Окислительный стресс: патологические состояния и заболевания. Новосибирск: АРТА, 2008.
8. Мартусевич А.К., Карузин К.А. Оксидативный стресс и его роль в формировании дизадаптации и патологии // Биорадикалы и антиоксиданты. 2015. Т. 2, №2. С. 5-18.
9. Перетягин С.П., Мартусевич А.К., Ванин А.Ф. Молекулярно-клеточные механизмы трансформации гомеостаза биосистем активными формами кислорода и азота // Медицинский альманах. 2013. №3. С. 80-81.
10. Halliwell B.J., Cutteridge M.C. Free radicals in Biology and Medicine. Third edition. Oxford: Oxford University Press, 1999. 937 р.
