CC BY
18
© Перепадя С.В., Винник Ю.А., Жуков В.И., Перепадя О.В., Зайцева О.В., Моисеенко А.С. УДК: 616.351-006-089
СОСТОЯНИЕ ОКИСЛИТЕЛЬНОЙ NO-СИНТАЗНОЙ СИСТЕМЫ У БОЛЬНЫХ КОЛОРЕКТАЛЬНЫМ РАКОМ
Перепадя С.В., Винник Ю.А., Жуков В.И.,
Перепадя О.В., Зайцева О.В., Моисеенко А.С.
Харьковский национальный медицинский университет, г.Харьков
У сироватцi кров1 239 хворих на колоректальний рак вжом eid 35 до 76 роюв з ргзними стадгями (I-IV) захворю-вання виявлено певне збшьшення рiвнiв продуктiв окислення оксиду азоту: NO2; NO3; S-ттрозотюлу; ендоте-лiальноï (eNOS) NO-синтази, а також одного з токсичних субстратiв окислювального дезамтрування амто-кислот - амiаку. При IV стадИ' пухлинного процесу спостершалося значне зниження активностi ферменту eNOS, що може бути прогностичним показником несприятливого проттання хвороби. Отриманi результаты свiдчать про спряженкть активаци вшьнорадикальних процеав i розвитку ендогенно'1' iнтоксикацiï оргашзму хворих на колоректальний рак.
Ключовi слова: оксид азоту, NO-синтазна активнють, колоректальний рак.
В последние годы в научной литературе появилось большое количество работ, свидетельствующих о важной роли оксида азота (NO) как полифункционального регулятора структурно-метаболических процессов [1,3,4,7]. Согласно современным представлениям, газообразный химический медиатор NO играет универсальную роль модулятора физиологических функций сердечно-сосудистой, нервной, иммунной, мышечной, дыхательной, пищеварительной и других систем организма.
Оксид азота, вместе с тем, - потенциально токсическая молекула, которая может быть губительной как для клеток, включая раковые, так и для внутриклеточных патогенных микроорганизмов. Установлено, что цитотоксичность NO является результатом образования большого количества этих молекул и инициацией апоптоза [5]. Двойственность действия NO проявляется в его способности защищать клетку от апоптозных сигналов и вызывать апоптоз.
Будет ли молекула NO обладать цитотоксически-ми функциями или проявится её цитотоксичность, зависит от типа клетки, фазы её развития, биоэлектрического потенциала, локальной концентрации NO и других активных форм кислорода. В организме NO синтезируется из аминокислоты L-аргинина, поэтому представляет большой интерес исследование свойств фермента NO-синтазы (NOS), точнее семейства NO-синтаз [6,8,9]. В настоящее время идентифицированы три изофермента NOS, которые названы в соответствии с тем типом клеток, где они были впервые обнаружены: нейрональная (nNOS), идуцибель-ная (iNOS), или макрофагальная (mNOS), и эндоте-лиальная ^NOS). Все изоформы NOS катализируют образование NO в ответ на рецепторную, химическую, биологическую или физическую стимуляцию.
Целью работы являлось изучение состояния NO-синтазной окислительной медиаторной системы у больных колоректальным раком и определение содержания в сыворотке крови токсичного продукта окислительного дезаминирования - аммиака.
Материалы и методы исследования
Клинически обследовано 239 больных колоректальным раком в возрасте от 35 до 76 лет, из них 146 мужчин и 93 женщины. В зависимости от формы развития рака толстого кишечника больные распределились следующим образом: рак прямой кишки (РПК)
выявлен у 29 мужчин и 25 женщин; сигмовидной (РСК) - у 35 мужчин и 25 женщин; слепой (РСлК) - у 15 мужчин и 12 женщин; поперечно-ободочной (РПОК) - у 48 мужчин и 18 женщин; толстой (РТК) - у 17 мужчин и 13 женщин. Первая стадия опухолевого процесса определена у 6 пациентов (4 мужчин и 2 женщин); вторая - у 34 (18 мужчин и 16 женщин); третья - у 161 (104 мужчины и 57 женщин) и четвертая -у 38 пациентов (20 мужчин и 18 женщин) с неоперабельным течением новообразования. Группа сравнения включала 43-и условно здоровых пациента в возрасте от 40 до 65 лет (23 мужчины и 20 женщин), которые представляли контрольную группу наблюдения.
Программа исследования ыО-синтазной окислительной системы предусматривала определение в сыворотке крови как больных, так и условно здоровых пациентов продуктов окисления оксида азота - нитритов (N02), нитратов (N03), Э-нитрозотиола, эндоте-лиальной (еЫОЭ) и индуцибельной (¡N08) N0-синтазы, а также одного из токсичных субстратов окислительного дезаминирования аминокислот, биогенных моноаминов, амидов аминокислот (1_-глутамина и 1_-аспарагина), пуриновых, азотистых оснований и др. -аммиака (ЫНз). Содержание N02, ЫОз, Э-нитрозотиола и активности eN0S, и ¡N08 определялись в соответствии с методическими рекомендациями [2].
Аммиак в сыворотке крови исследовался методом ионообменной хроматографии на ионитах. После разделения аминокислот на ионитах регистрация их количества и NНз осуществлялась на автоматическом анализаторе аминокислот ААА-339 (Чехия). Статистическая обработка полученных результатов исследования проводилась с использованием пакета программ «Биостатистика 4.03».
Результаты и их обсуждение
Учитывая, что первая стадия КРР была установлена только у 6 пациентов (4 мужчины и 2 женщины), средние значения анализируемых показателей были рассчитаны совместно без разделения по полам (табл.1). Обнаружено повышение содержания в сыворотке крови метаболитов обмена оксида азота -нитритов, нитратов. По сравнению с условно здоровыми мужчинами и женщинами достоверных отличий в содержании Э-нитрозотиола, а также активности eN0S и ¡N08 у больных не выявлено.
Том 13, №3-4, 2009 р1к
Таблица 1.
Состояние МО-синтазной окислительной системы у больных КРР при первой стадии опухолевого процесса.
Группа наблюдения (п) Показатели, M+m
Ж3 (нмоль/л) N<32 (мкмоль/л) N03 (мкмоль/л) в-нитрозотиол (ммоль/л) eN0S (пмоль/мин ■мгбелка) iN0S (пмоль/мин ■мгбелка)
Больные (п=6) 32,52+1,83* 18,43+1,26* 30,41+1,62* 0,29+0,04 0,88+0,07 0,32+0,05
Мужчины условно здоровые (п=23) 21,60+1,38 14,20+1,35 25,62+1,7 0,26+0,05 0,81+0,05 0,23+0,06
Женщины условно здоровые (п=20) 24,21+1,96 15,65+1,43 24,30+1,62 0,27+0,04 0,83+0,04 0,27+0,05
Примечание: * - различия с условно здоровыми достоверные, р<0,05.
При второй и третьей стадиях развития опухолевого процесса отмечалось значительное увеличение содержания в сыворотке крови аммиака, нитритов, нитратов и активности фермента eNOS (табл. 2). Комплексная оценка окислительной системы оксида азота свидетельствовала о повышении уровня его депонирования в зависимости от стадии формирования патологического процесса и степени тяжести болезни. Так, при третьей стадии заболевания наблюдались высокие уровни в сыворотке крови S-нитрозотиола (как у мужчин, так и у женщин), превышающие таковые у условно здоровых пациентов в 2 раза. Результаты оценки состояния NОS-окислительной медиаторной системы указывают на развитие при КРР эндотоксемии, степень которой тесно сопряжена со стадией болезни, тяжестью тече-
ния патологического процесса и уровнем накопления в сыворотке крови основного продукта окислительного дезаминирования - аммиака. Особенно высокие уровни его обнаруживались при третьей и четвертой стадиях болезни, что может свидетельствовать о нарушении как процессов пищеварения, так и процессов, связанных с обезвреживанием аммиака в организме при развитии онкопатологии.
При четвертой стадии опухолевого процесса, в условиях состояния неоперабельности, наблюдалось значительное увеличение в сыворотке крови содержания аммиака, нитритов, нитратов и S-нитрозотиола на фоне существенного снижения активности ферментов eNOS, iNOS, что может служить прогностически неблагоприятным показателем течения болезни.
Таблица 2.
Состояние МО-синтазной окислительной системы у больных КРР до лечения в зависимости от стадии опухолевого процесса
Показатели Пол, М+т (п), стадия болезни (группа наблюдения)
мужчины женщины
2яст. (п=18) 3яст (п=104) 4яст. (п=20) Условно здоров. (п=23) 2яст. (п=16) 3яст. (п=57) 4яст. (п=18) Условно здоров. (п=20)
NHз (нмоль/л) 37,21+2,60 37,21+2,61* 58,70+2,32* 21,62+1,38 40,63+2,30* 47,50+2,81* 59,33+4,30* 24,21+1,96
N02 (мкмоль/л) 19,52+1,60 24,31+1,41* 26,81+1,91* 14,22+1,35 21,71+1,21* 28,51+2,41* 31,24+1,61* 15,65+1,43
N03 (мкмоль/л) 32,81+1,91 40,60+1,71* 53,4+2,50* 25,60+1,71 33,61+1,50* 46,42+2,13* 57,21+3,60* 24,31+1,60
в-нитрозотиол (ммоль/л) 0,32+0,06 0,46+0,05* 0,82+0,07* 0,22+0,05 0,35+0,07 0,48+0,06* 0,89+0,07* 0,23+0,04
eN0S (пмоль/мин ■мг белка) 0,97+0,04* 1,05+0,06* 0,58+0,10* 0,81+0,06 0,97+0,06* 1,15+0,08* 0,56+0,09* 0,83+0,05
iN0S (пмоль/мин ■мг белка) 0,34+0,07 0,43+0,05 0,29+0,06 0,38+0,08 0,38+0,05 0,45+0,07 0,22+0,09* 0,47+0,05
Примечание: * - различия с условно здоровыми достоверные, р < 0,05.
Выводы
Таким образом, анализ содержания оксида азота и состояния динамики окислительной NО-синтазной системы выявил сопряженность активации свободно-радикальных процессов и развития эндогенной интоксикации организма, которые сопровождались значительным повышением в сыворотке крови содержания аммиака, NO2, NOз, S-нитрозотиола, что может быть использовано при разработке и обосновании комплекса лечебно-оздоровительных и реабилитационных мероприятий для каждой стадии КРР.
Литература
1. Гуревич К.Г., Шимановский Н.Л. Оксид азота: биосинтез, механизмы действия, функции// Вопросы биологии медицины и фармакологической химии. - 2000. - №4. -с.16-21.
2. Ковальова О.М., Демиденко Г.В., Горбач Т.В. Дiагности-ка ендотелiальноí функцп - оцЫка вазоактивного пулу оксиду азота// Методичн рекомендацп МОЗ Укра'ни. -Ки'в. - 2007. - 20с.
3. Малышев И.Ю. Введение в биохимию оксида азота. Роль оксида азота в регуляции основных систем организма// Российский журнал гастроэнтерологии, гапато-логии, колопроктологии. - 1997. - №1. - С.49-56.
4. Невзорова В.А., Зуга М.В., Гельцер Б.И. Роль оксида 7. азота в регуляции легочных функций// Терапевтический архив - 1997. - Т.69,№3. - С.68-73.
5. Dawson V.L., Dawson T.M. Nitric oxide neurotoxicity // J. 8. Chem. Neuroanat. - 1996. - №3-4. - P. 179-190.
6. Forstermann U., Closs E.J., Pollock J.S., et al. Nitric oxide 9. synthase isozymes, characterization, purification, molecular cloning and function // Hypertension. - 1994. - Vol. 23. -P.1121-1131.
Summary
STATE OF THE OXIDIZING NO-SYNTHASE SYSTEM IN PATIENTS RECEIVING COLORECTAL CANCER Perepadya S.V., Vinnik Ju.A., Zhukov V.I., Perepadya O.V., Zaytseva O.V., Moiseenko A.S. Key words: nitric oxide, NO-synthase activity, colorectal cancer.
It was determined in the blood serum of 239 patients receiving colorectal cancer at the age of 35 up to 76 with different (I-IV) stages of the illness significant increasing levels of the nitric oxide oxidation products: NO2; NO3; S-nitrozotiol; endothelial (eNOS) NO-synthase, and also one of the toxic substrates of oxidizing desamization of aminoacids - ammonia. In the IVth stage of tumouric process it was observed considerable decreasing eNOS ferment activity that can be prognosis index of inauspicious progress of the illness. Obtained results are evidence of the conjugation of activization of the free radical processes and development of endogenic intoxication in patients receiving colorectal cancer. Ukrainian Ministry of the Health Public Service, Kharkiv National Medical University, Lenin av., 4, Kharkiv, 61022
Mamepian надтшов до редакци_26. 05._09
Lowenstein C.J., Dinerman J.L., Snyder S.H. Nitric oxide: a physiologic messengers // Ann. Intern. Med. - 1994. -Vol.120. - P. 227-237.
Nathan C., Xie Q. Nitric oxide synthases: roles, tolls and controls // Cell. - 1994. - Vol. 79. - P. 915-918. Wang Y., Marsden P.A. Nitric oxide synthases: biochemical and molecular regulation // Curr. Opin. Nephrol. Hypertens. - 1995. - Vol. 4. - P. 12-22.
© Суржанский С.К., Воскресенская О.Ю., Ахмедов Х.К. УДК 616.31-08.-089.615.284
ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ ПРОТЕЗИРОВАНИЯ ВИЧ-ИНФИЦИРОВАННЫХ ПАЦИЕНТОВ ЗУБНЫМИ ПРОТЕЗАМИ ИЗ ТИТАНА
Суржанский С.К., Воскресенская О.Ю., Ахмедов Х.К.
Донецкий национальный медицинский университет им. М. Горького
Кафедра стоматологии ФИПО (г. Донецк)
Центр по профилактике и борьбе со СПИДом (г. Донецк)
До^дження присвячене вивченню ефективностi протезування ВШчнфкованих пацieнтiв незтмними зубними протезами з титану. Було обстежено 93 ВIЛ-iнфiкованих пацieнта, що потребують у протезувант. Уа пащ-енти перебували на диспансерному облк в Донецьком обласному центрi профшактики й боротьби зi СШДом. Серед обстежених пацieнтiв було зареестровано 53 жтки й 40 чоловiкiв у вiцi до 27 роюв Установлене, що у вах ВШ-Пнфтованих nацieнтiв, незалежно вiд наявностi або вiдсутностi зубних протезiв, згодом спостерша-еться погiршення стану пародонта. Однак, негативна динамiка пародонтальних iндексiв була мiнiмальною в групi пацieнтiв, ят отримали зубт конструкцИ з титану. У пацieнтiв, що одержали ортопедичне лiкування за допомогою штампованео-паяних зубних протезiв, погiршення стану пародонта було виражено максимально.
Ключовi слова: ВШчнфковаш, пародонт, зубы протези,
Сохранение функциональной полноценности жевательной системы является одним из наиболее важных компонентов обеспечения качества жизни [4]. Известно, что патологические изменения в полости рта ВИЧ-инфицированных пациентов могут привести к серьезным оппортунистическим инфекциям полости рта и всего организма [1]. Нарушения жевательной функции также могут способствовать развитию или усугублению патологии как в полости рта, так и на уровне макроорганизма. Эксперты категоричны в том, что больные ВИЧ должны сохранять функциональную полноценность жевательной системы для получения адекватного питания, важность которого в поддержании иммунной системы человека, а также сохранения здоровых уровней физической активности и обеспечения оптимального качества жизни давно и бесспорно установлена [6].
Кроме того, установлено, что среди ВИЧ-инфицированных наблюдается высокая распростра-
титан.
ненность заболеваний пародонта [5,8]. При этом потеря даже одного зуба приводит к нарушениям окк-люзионных соотношений зубных рядов и сопровождается перегрузкой тканей пародонта, что обусловливает дальнейшее прогрессирование пародонтита. Наконец, дефекты зубных рядов могут вызывать ряд эстетических и коммуникативных нарушений, особенно при локализации дефекта во фронтальном участке. Актуальность подобных нарушений связана с превалированием среди инфицированных молодых людей до 30 лет, которым зачастую эстетическая составляющая гораздо важнее, чем полноценная функция.
Таким образом, в литературе имеется достаточно материала для обоснования необходимости ортопедического лечения ВИЧ-инфицированных пациентов. Однако, установлено, что в полости рта у ВИЧ-инфицированных пациентов происходят серьезные биохимические и микробиологические сдвиги, отягощающие нормальное функционирование зубных про-
