CC BY
19
УДК: 616-005.4+616.12 - 008.46 - 036.12+616.24 - 002
СОСТОЯНИЕ ОКИСЛИТЕЛЬНО - АНТИ0КСИДАНТН0Г0 Г0МЕ0СТАЗА ПОСЛЕ АНТИ0КСИДАНТН0Й ТЕРАПИИ ПРИ ХРОНИЧЕСКОЙ СЕРДЕЧНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТИ ТЯЖЕЛОЙ СТЕПЕНИ, ВОЗНИКШЕЙ НА ФОНЕ ИШЕМИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНИ СЕРДЦА И ОСЛОЖНЕННОЙ ПНЕВМОНИЕЙ
Клименко H.A., Павлова Е.А.
Харьковский национальный медицинский университет
Установлено, что при хронической сердечной недостаточности тяжелой степени, развившейся на фоне ишемической болезни сердца и осложненной пневмонией, в крови больных до и после лечения наблюдается выраженная активация перекисного окисления липидов, что, вероятно, обусловлено истощением антиоксидантной системы и слабым влиянием терапии. Раннее включение антиоксидантов в комплексное лечение приводит к повышению активности каталазы и су-пероксиддисмутазы и стабилизации процессов пероксидации.
Ключевые слова: ишемическая болезнь сердца, хроническая сердечная недостаточность, пневмония, лерекисное окисление липидов, антиоксидантная система.
В патогенезе различных заболеваний одну из ключевых ролей играет процесс неферментативного (перекисного) окисления липидов (ПОЛ), который аутокаталитически нарастает в условиях нарушения баланса между продукцией свободных радикалов и механизмами антиокси-дантного контроля, оказывая разностороннее влияние на целостность и функции мембран. Он является основным молекулярным механизмом повреждений сердца и сосудов стрессорной и ишемической природы [1-12]. Ишемическая болезнь сердца (ИБС) является одной из основных причин, приводящих к развитию хронической сердечной недостаточности (ХСН), на фоне которой довольно часто, как тяжелое осложнение, возникает гипостатическая пневмония [13]. Учитывая активное участие легочной ткани в формировании свободнорадикального статуса организма и патогенетическую роль свободнорадикального окисления как мощного фактора мембранодеструкции, актуальным является исследование окислительно - антиоксидантного гомеостаза при ХСН, приведшей к развитию ги-псЩеавяэюстабтаяеирагонииЗсМфдования явилось изучение закономерностей процессов ПОЛ и активности антиоксидантной системы (АОС) после общепринятой и антиоксидантной терапии при ХСН тяжелой степени, возникшей на фоне ИБС и осложненной пневмонией.
Материалы и методы.
Под наблюдением находилось 27 человек зрелого и пожилого возраста (35 - 65 лет). Из них 9 человек (группа А, контрольная) - больные ИБС, со стабильной стенокардией напряжения, III функциональный класс (ФК) (одышка, сердцебиение, ангинозные боли у больных этой группы возникали при незначительной нагрузке), ХСН-ПБ (застойные явления возникли на фоне глубоких нарушений гемодинамики), которым проводилась обычная терапия. 9 наблюдаемых (группа В) - больные гипостатической пневмонией, возникшей на фоне ИБС, IV ФК (одышка, сердцебиение, ангинозные боли у больных этой группы возникали при какой - либо нагрузке), ХСН-МБ, которым также проводилась обычная
для таких больных терапия; 9 наблюдаемых (группа С) - больные гипостатической пневмонией, возникшей на фоне ИБС, IV ФК, ХСН - II Б, которым проводилась антиоксидантная терапия в дополнение к общепринятой терапии. В качестве антиоксидантов использовали тиотриазолин, который вводили по 2 мл 2,5% раствора внутримышечно два раза в сутки в течение 10 дней, и корвитин - 0,5 г, растворенный в 50 мл изотонического раствора NaCl, внутривенно капельно 1 раз в сутки в течение 5 дней. Длительность заболевания колебалась от 3-х месяцев до 5-ти лет. При определении ФК стенокардии напряжения пользовались критериями Нью-Йоркской ассоциации кардиологов (NYHA), диагноз устанавливали на основании жалоб, анамнеза заболевания, данных объективного обследования, 6 - минутного теста-ходьбы [15].
Изучение показателей ПОЛ и АОС проводили в плазме крови и эритроцитах до и после курса терапии. О состоянии ПОЛ судили по содержанию в исследуемых образцах первичных активных продуктов ПОЛ - диеновых коньюгат (ДК) и малонового диальдегида (МДА), о функционировании АОС - по активности в эритроцитах ключевых антиоксидантных ферментов - каталазы (КАТ) и супероксиддисмутазы (СОД).
Для определения показателей ПОЛ и АОС плазму отбирали в чистые сухие пробирки, эритроциты трижды отмывали охлажденным 0,9 % раствором NaC1 и гемолизировали дистиллированной водой (1:1). Затем часть гемолизата (0,1 - 0,5 мл) разводили в 200 раз дистиллированной водой, и из этого разведения брали необходимое количество для определения активности ферментов АОС. К остатку гемолизата добавляли равное по объему количество хло-роформ-этанольной (1:1) смеси, затем центрифугировали 15 мин. при 3000 об/мин., после чего из верхнего слоя брали необходимое количество жидкости для определения продуктов ПОЛ - ДК и МДА.
Определение проводили спектрофотометри-чески на спектрофотометре СФ-4А с использованием разных длин волн. Определение ДК
проводили по методу A.M. Карпищенко [16, 17] при длине волны 233 нм (против этилового спирта). Содержание ДК в пробе выражали в мкМ/л крови. МДА определяли при длине волны 532 нм по методу Т.К. Федоровой [18], основа-ном на реакции между МДА и тиобарбитуровой кислотой, которая при высокой температуре в кислой среде протекает с образованием окрашенного триметидилового комплекса. Активность КАТ определяли по методу М.А.Королюка и сотр. [19], основанном на способности перекиси водорода образовывать с солями молибдена стойкий окрашенный комплекс, при длине волны 410 нм. Затем активность каталазы рассчитывали по формуле и выражали в мккат/мгНв.
Активность СОД определяли методом окисления кверцетина в модификации В.А.Костюка и сотр.[19]. Оптическую плотность проб определяли при длине волны 406 нм сразу и через 20 мин. инкубации при температуре 37°С. Актив-
ность СОД рассчитывали по формуле и выражали в мккат/мгНв.
Статистическую обработку результатов исследований осуществляли непараметрическим (ранговым) методом Манна-Уитни на персональном компьютере с использованием программного пакета STATISTICA v.6.0 (компания StatSoft, Inc ®)[20].
Результаты исследований. Анализ показателей, характеризующих состояние ПОЛ, - содержания МДА и ДК («ранних перекисей») - показал, что в крови больных ги-постатической пневмонией, осложнившей ХСН тяжелой степени (группы В и С), которая, в свою очередь, возникла на фоне ИБС, до начала лечения отмечалось некоторое повышение концентрации продуктов ПОЛ: МДА - в 1,23 и 1,21 раза и ДК - в 1,18 и 1,17 раза соответственно по сравнению с контролем (табл. 1).
Таблица 1
Содержание продуктов ПОЛ в крови больных с ХСН тяжелой степени, возникшей на фоне ИБС и осложнившейся гипостатической пневмонией, после обычнойи комбинированной( с добавлением антиоксидантов) терапии (M ± m, n = 9)
Показа тели ПОЛ До лечения Значимость различия по U-критерию После лечения Значимость различия по U-критерию
Группа A, n=9 Группа B, n=9 Группа C, n=9 А-В А-С Группа A, n=9 Группа B, n=9 Группа C, n=9 А-В А-С
й 6,24 ± 0,62 7,65 ± 0,48 7,59 ± 0,66 1,41 -0,06 6,33 ± 0,53 8,01 ± 0,49 5,86 ± 0,77 1,68* -2,15*
ДК (мкМ/л) 113,14 ± 11,91 133,95 ± 15,00 133,12 ± 12,42 20,81 -0,83 105,43 ± 9,97 134,30 ± 15,11 122,14 ± 17,97 28,87 -12,16
Примечание: А - контрольная группа - ХСН (тяжелая степень) на фоне ИБС, обычная терапия; В - ХСН (тяжелая степень) на фоне ИБС, осложненная гипостатической пневмонией, обычная терапия, С - ХСН на фоне ИБС, осложненная гипостатической пневмонией, обычная и антиоксидантная терапия. *- р<0,05 достоверность различий с контролем.
После окончания курса лечения отмечалась тенденция к повышению концентрации МДА в группе В - по сравнению с исходной и в 1,27 раза (р<0,05) по сравнению с контролем. В группе С концентрация МДА снижалась и была в 1,3 раза меньше исходной, в 1,37 раза (р<0,05) меньше, чем в группе В, ив 1,08 раза меньше, чем в контроле. После лечения также отмечалась тенденция к некоторому увеличению концентрации ДК в группе В - относительно исходного уровня ив 1,27 раза - относительно данных контроля, в то время как в группе С отмечалось снижение концентрации ДК в 1,29 раза относительно исходного уровня, в 1,1 раза относительно группы В, но повышение в 1,15 раза по сравнению с контролем.
Таким образом, под влиянием общепринятой терапии в группе В сохраняются стабильно высокие концентрации ДК, а также уровни МДА, превышающие значения контроля, что, видимо, отражает состояние патологического гомеостаза в системе ПОЛ-АОС, и, вероятно, является объективным критерием тяжести процесса и показателем перехода организма в стадию истоще-
ния активности АОС. В то же время под влиянием общепринятой и антиоксидантной терапии в группе С концентрация МДА была существенно ниже контроля и показателей группы В, а концентрация ДК была существенно ниже исходной, что свидетельствует о стабилизации процессов пероксидации, восстановлении гомеостаза ПОЛ - АОС, нормализации функций клеток и более благоприятном течении заболевания в дальнейшем. Таким образом оценка интенсивности свободнорадикальных реакций по концентрации в крови промежуточных продуктов ПОЛ важна для мониторинга гомеостаза ПОЛ-АОС.
При изучении показателей АОС в крови больных ИБС, осложнившейся ХСН средней тяжести и пневмонией, было установлено исходное (до начала лечения) увеличение активности КАТ в 2,17 раза в группе В и - в 2,2 раза в группе С по сравнению с контролем, а также увеличение активности СОД - в 1,44 и 1,35 раза соответственно. Также следует отметить, что в группе В активность СОД была в 1,07 раза выше таковой в группе С (табл. 2).
Таблица 2
Активность ферментов АОС в крови больных с ХСН тяжелой степени, возникшей на фоне ИБС и осложнившейся гипостатической пневмонией, после обычной и комбинированной (с добавлением антиоксидантов) терапии (М ± т, п = 9)
Показатели До лечения Значимость различия по U-критерию После лечения Значимость различия по U-критерию
Группа А Группа В Группа С А-В В-С Группа А Группа В Группа С А-В А-С
Каталаза (мккат/мгНв) 5,53 ± 1,09 12,01 ± 2,49 12,21 ± 2,72 6,48** 0,2 11,53 ± 1,73 10,70 ± 2,65 13,72 ± 2,00 -0,83 3,02
Супероксид- дисмутаза (мккат/мгНв) 18,20 ± 2,28 26,38 ± 1,96 24,57 ± 3,02 8,18* -1,81 26,41 ± 2,00 27,59 ± 3,10 29,28 ± 2,53 1,18 1,69
Примечание: А - контрольная группа - ХСН (тяжелая степень) фоне ИБС, осложненная гипостатической пневмонией, обычна пневмонией, обычная и антиоксидантная терапия. *- р<0,05 ,' этой же группы до лечения.
После лечения отмечалось незначительное уменьшение активности КАТ в группе В (в 1,12 раза) и увеличение - в 1,12 раза - в группе С по сравнению с исходными значениями, а также снижение - в 1,07 раза - в группе В и увеличение в - 1,19 раза - в группе С относительно контроля. В то же время наблюдалось некоторое увеличение активности СОД в группах Ви С - в 1,05 и 1,19 раза соответственно - по сравнению с исходными значениями, а также повышение в 1,04 раза в группе Вив 1,12 раза в группе С относительно контроля. В группе В активность СОД была в 1,06 раза выше таковой в группе С (табл. 2).
Таким образом, комбинация общепринятой и антиоксидантной терапии положительно влияет на динамику активности эндогенных антиокислительных ферментов - КАТ и СОД, заметно увеличивающих резервы АОС организма. Восстановление активности ферментов АОС, особенно каталазы (которая предотвращает накопление в клетках перекиси водорода) и суперок-сиддисмутазы (которая инактивирует агрессивный супероксиданион), после дополнительного включения в схему терапии антиоксидантов является критерием эффективности антиоксидантной терапии. Раннее назначение антиоксидантов при гипостатической пневмонии в условиях хронического нарушения кровообращения, смешанной гипоксии позволяет существенно уменьшить токсическое действие продуктов ПОЛ на клетки и ткани, восстанавливая гомео-стаз в системе ПОЛ-АОС, а также наряду со своевременно начатым базисным лечением влиять на течение и исход болезни, существенно снижая летальность.
Перспективы дальнейших исследований в данном направлении возможны, в частности, в виде изучения закономерностей процессов ПОЛ и активности АОС при ХСН, возникшей на фоне ИБС, в зависимости от степени нарушений гемодинамики, после применения антиоксидантной терапии.
Выводы
1. При ХСН тяжелой степени тяже-
сти, возникшей на фоне ИБС и осложнившейся гипостатической пневмонией, как до, так и после базисной терапии наблюдается более выраженная активация
на фоне ИБС, обычная терапия; В - ХСН (тяжелая степень) на я терапия; С - ХСН на фоне ИБС, осложненная гипостатической *-р<0,01 в группе С после лечения - достоверность с данными
ПОЛ по сравнению с ХСН тяжелой степени тяжести, возникшей на фоне ИБС, без пневмонии, что, вероятно, отражает существование зависимости между тяжестью течения заболевания и активностью процессов ПОЛ. 2. Традиционное лечение гипоста-
тической пневмонии, осложнившей ХСН тяжелой степени, возникшую на фоне ИБС, не приводит к нормализации ПОЛ, что, вероятно, обусловлено истощением возможностей АОС. В то же время, сочетание базисной терапии с антиоксидантной увеличивает активность КАТ и СОД, стабилизируя процессы перокси-дации, восстанавливая окислительно-антиоксидантный гомеостаз и тем самым обосновывая необходимость раннего включения антиоксидантов в комплексное лечение гипостатической пневмонии при ХСН тяжелой степени.
Литература
1. Барабой В.А. Перекисное окисление и стресс. - СПб: Наука. - 1992. - 148 с.
2. Барабой В.А., Сутковой Д.А. Окислительно-антиоксидантный гомеостаз в норме и патологии/ Под ред. Ю.А. Зозули. - К.: Чернобыль-Интеринформ, 1997. -420с.
3. Владимиров Ю.А. Роль нарушения липидного слоя мембран в развитии патологических процессов// Пат. физиол. и эксперим. тер.-1989.-№4.-С.7 -17.
4. Владимиров Ю.А. Свободные радикалы в биологических системах// Соросовский образовательный журнал. -2000. - № 12. - С.13 -19.
5. Губский Ю.И., Левицкий Е.Л. Геном, метаболизм, болезни, лекарства// Шування та д1агностика. -20002001. - № 4 -1. -С. 23-29.
6. Зенков Н.К., Ланкин В.З., Меньшикова Е.Б. Окислительный стресс.-М: "Наука/ Интерпериодика",
7. Röfftopätflifaftia К.Н. Перекисное окисление в норме и патологии: Учебное пособие. Н. Новгород, 2000. 24 с.
8. Левицкий Е.Л. Пути и механизмы реализации антиоксидантного эффекта в клетке // Фармакол. вюник. -1998. -№2. -С. 68-71.
9. Temple M.D., Perrone G.G., Dawes I.W. Complex cellular responses to reactive oxygen species// Trends in Cell Biology. - 2005. - V. - 15, № 6. - P. 319 - 326.
10. Vladimirov Yu.A. Reactive oxygen and nitrogen species: diagnostic, preventive and therapeutic values//Biochemistry.-2004.- V. 69, № 1.- P. 1-4.
11. Биленко M.B. Ишемические и реперфузионные поражения органов (Молекулярные механизмы, пути предупреждения и лечения).- М: Медицина, 1989. - 368 с.
12. Нейко С. М. Пневмонп // Галицький лкарський вюник. -2002. - Т. 9., № 2. - С. 110-121.
13. Барна О.М. Маркери запалення в стратифкацп ризику 17. Каясова Л.С., Маркин Н.А. ПОЛ и методы определения серцево-судинних захворювань // Лки Украши.-2007.-№ продуктов пероксидации в биологических средах// Лаб. 115-116.-С. 6-11. дело. - 1994. - № 9. - С. 56 - 58.
14. Новоженов В.А. Антиоксидантная терапия в практике 18. Федорова Т.К., Коршунова T.C., Ларская Э.Т. Реакция с пульмонолога// Врач. - 2005. - № 10. - 31- 34. ТБК для определения МДА крови методом
15. Перечен Н.Б., Кутузова А.Э., Недошивин А.О. флюорометрии// Лаб. дело.- 1983.-№ 3. - С. 25 - 28. Применение пробы с 6-минутной ходьбой для оценки 19. Мешкова Н.П., Северин С.Е. Практикум по биохимии.-состояния больных с хронической сердечной М.: Медицина,1979.- С.259-260.
недостаточностью// Клиническая медицина. - 2000. - N 20. Халафян А.А. STATISTICA 6. Статистический анализ
16. 1Й!В-а|?и 316?,3. Андял Т., Штрегнер Я. Определение данных. 3-е изд. - М.: ООО «Бином-Пресс», 2007. - 512 с. антиоксидантных параметров крови и их
диагностическое значение// Лаб. дело.- 1991 .-№10.-С.9-1 3.
Реферат
СТАН ОКИСЛЮВАЛЬНО-АНТИОКСИДАНТНОГО ГОМЕОСТАЗУ П1СПЯ АНТИ0КСИДАНТН01 ТЕРАП11 ПРИ ХРОН1ЧН1Й СЕРЦЕВ1Й НЕДОСТАТНОСТ1 ВАЖКОГО СТУПЕНЯ, ЯКА ВИНИКЛА НАТЛ1 ИШЕМ1ЧНОТ ХВОРОБИ СЕРЦЯ I УСКЛАДНИЛАСЬ ПНЕВМОН1СЮ Клименко М.О., Павлова О.О.
Ключовы слова: ¡шемнна хвороба серця, хроннна серцева недостатнють, пневмонт, перекисне окисления ninifliB, антиоксидантна система.
Встановлено, що при хронннш серцевм недостатност1 важкого ступеня, яка виникла на тл1 ¡шемнноТ хвороби серця та ускпаднилась пневможею, до та пюля лкування в Kpoei хворих спостер1гаеться виражена активацт перекисного окислювання niniflie що, певно, обумовлено виснаженням можливостей антиоксидантноТ системи та слабким впливом Tepanii. Ранне включения антиоксидантщ до комплексного лкування призводить до пщвищення активност1 каталази i супероксиддисмутази та CTa6ini3aqii процессе пероксидацп.
Summary
STATE OF OXIDATIVE-ANTIOXIDANT HOMEOSTASIS AFTER ANTIOXIDANT THERAPY DURING CHRONIC CARDIAC INSUFFICIENCY ARISED ON BACKGROUND OF ISCHEMIC HEART DISEASE OF SEVERE DEGREE AND COMPLICATED BY PNEUMONIA
Klimenko N.A., A. Pavlova Ye.
Key words: ischemic heart disease, chronic cardiac insufficiency, pneumonia, lipid peroxidation, antioxidant system.
It is established, that during chronic cardiac insufficiency of severe degree arised on background of ischemic heart disease and complicated by pneumonia, before and after basic therapy in blood of patients there is an expressed increase of intensity of lipid peroxidation, that probably, is connected with exhaustion of antioxidant system and weak influence of therapy. The early inclusion of antioxidants to complex therapy leads to an increase of catalase and superoxide dysmutase activities and stabilization of lipid peroxidation.
УДК 616.12-005.4-008.331.1
0С0БЛИВ0СТ1 ВЕГЕТАТИВНОГО ДИСБАЛАНСУ У ХВОРИХ НА 1ШЕМ1ЧНУ ХВОРОБУ СЕРЦЯ В П0ЕДНАНН1 3 Г1ПЕРТОН1ЧНОЮ ХВОРОБОЮ
Кудря 1.П.
Вищий державний навчальний заклад Укра'ши "Укра'шська медична стоматолопчна академ1я", м. Полтава
Визначено особливост{ дисбалансу симпатичного та парасимпатичного eiddinie вищог нервовог системи у хворих на iшемiчну хворобу серця в залежностi eid стадп супутньог гтертотчног хвороби. 3 щею метою було обстежено 126 хворих з вище згаданою патологieю. Характерним для хворих на iшемiчну хворобу серця в поеднант з гтертотчною хворобою III стадп були циркадт ритми систолiчного артерiального тиску по типу «non-dipper» (42%) та дiастолiчного «dipper» (48,9%). Пригшчення активност1 вазомоторного центру, барорефлекторног реактивностi, гальмування автономного контуру регуляцп е вiдображенням ускладненого перебку у хворих поеднання iшемiчног хвороби серця та гтертотчног хвороби III стадп.
Ключов1 слова. Вар1абельнють серцевого ритму, вегетативна нервова система.
Вступ
BiflOMO, що анал1з вар1абельшсп серцевого ритму (ВСР) е ктькюним методом оцшки механ1зм1в нейрогуморальноТ регуляци серця, стввщношення пром1ж симпатичним та парасимпатичним вщдтами вегетативно! нервовоТ системи (ВНС) [1, 7, 9, 10]. Дисбаланс ланок ВНС з пщвищенням активное^
симпатичного i пригшченням парасимпатичного вщдту е одним ¡з патогенетичних мехаызм1в ¡шем1чно1 хвороби серця (IXC), ппертошчноТ хвороби (ГХ), виникненню серцевоТ недостатносп [2, 6, 12, 13]. В тепершнш час ВРС вважають найбтьш в1рогщним маркером оцшки прогнозу у хворих з даною патолопею [5, 15].
* Фрагмент ¡HiijiamueHoi' теми (державний реестращйний №01060003238) "Значения прозапальних, проаритммних, дисметабол!чних фактор1в для ускладненого nepeöizy zinepm0Hi4H0'f хвороби, iшем/чноi хвороби серця: диагностика, лкування".
