CC BY
69
Статья
лимфатического узла. На протяжении всех сроков опыта в лимфатическом узле вдвое уменьшено число лимфоидных узелков с центрами размножения, расширена паракортикальная зона, сокращена площадь мозгового вещества, а также резко снижается плотность распределения клеток во всех зонах органа. Спустя 7 недель после введения CCL4 в структурных зонах печеночных лимфатических узлов идет четкое подавление функции лимфоци-топоэза и бласттрансформации клеток (исчезают клетки с картинами митозов и бласты) и угнетается созревание антителпроду-цирующих (зрелых) плазматических клеток. Нарушения в структурной организации и в соотношении популяции лимфоидных клеток в печеночных лимфоузлах через 7 недель после введения CCL4 говорят о развитии иммунодефицитного состояния.
Литература
1. Прокопенко Л.Г. и др. // Патол. физиол. и эксперим. терапия.- 1983.- № 5.- С. 59-63.
2. Ялукова С.Л., Иванов Л.Н. // Тез. докл. Второго Рос. Конгр.по патофизиол. с междунар. участием.- М., 2000.- С. 138.
3. Евченко Е.В. и др. // Морфол. ведомости (приложение).-М.-Берлин, 2004.- № 1-2.- С. 36.
4. Обернихин С.С. Морфо-функциональные изменения органов иммунной системы при конканавалин А-индуцированном гепатите: Автореф. дис... к.м.н.- М., 2005.- 26 с.
5. Стефанов С.Б. // Цитол.- 1974.- Т.16, № 5.- С. 785-787.
6. GrayD. // Res. Immunol.- 1991.- Vol. 142.- P. 236-242.
7. Сапин М.Р., Никитюк Д.Б. Иммунная система, стресс и иммунодефицит.- М.: АПП Джангар, 2000.- 184 с.
8. Бородин Ю.И. и др. // II съезд лимфологов России: Тез. докл.- СПбГУ, 2005.- С. 39-41.
9. Ковалевский Г.Г. Очерки иммуноморфологии.- Новосибирск: НГУ, 1976.- 266 с.
10. Вылков И.Н. Патология лимфатических узлов.- София: Медицина и физкультура, 1980.- 248 с.
11. Григоренко Д.Е. // Архив анат., гистол. и эмбриол.-1991.- Т. 101, № 7.- С. 9-13.
THE MORPHOFUNCTIONAL STATE OF LIVER’S LYMPHOID NODULES AT EXPERIMENTAL HEPATITIS
D.E. GRIGORENKO, M.R. SAPIN, A.M. KHREBTOVSKY Summary
It was studied the far-off effect (1-7 weeks) of the influence of CCI4 on regional liver’s lymphoid nodules at rats with simulating hepatitis. It was established the depression of lymphocitopoesis, the supression of blasttransformation and maturing of antibodyproducing cells in structure zones of liver’s lymphoid nodule after 7 weeks. The sharp violation in correlation of lymphoid cells in liver’s lymphoid nodules shows the development of immunodificitis at animals 7 weeks later after finishing CCl4 influence.
Key words: influence of CCl4, lymphocitopoesis
УДК 616-002.151
СОСТОЯНИЕ НЕКОТОРЫХ СИСТЕМ АНТИЭНДОТОКСИНОВОЙ ЗАЩИТЫ У БОЛЬНЫХ ГЕМОРРАГИЧЕСКОЙ ЛИХОРАДКОЙ С ПОЧЕЧНЫМ СИНДРОМОМ
С.Г. НЕХАЕВ*
Среди многочисленных проявлений инфекционных заболеваний в настоящее время все большее внимание исследователей привлекает синдром интоксикации (СИ). Обладая типичным спектром клинических проявлений, интоксикационный синдром во многом наиболее точно характеризует течение инфекционного процесса и зачастую определяет исход заболевания [1—2]. Тем не менее, механизм его развития до настоящего времени не полностью расшифрован. В настоящее время не вызывает сомнений,
* 300012, Тула, ул. Болдина,128. Тульский государственный университет, кафедра пропедевтики внутренних болезней
что пусковым фактором в развитии СИ являются эндотоксины (ЭТ), по химической природе представляющие собой липополи-сахариды [3]. У больных геморрагической лихорадкой с почечным синдромом ЭТ в больших количествах освобождаются при взаимодействии возбудителя с эндотелием мелких сосудов (арте-риол, венул, капилляров), а также, но в значительно меньших дозах поступают в системный кровоток из кишечника. Проведенные in vitro исследования [4] и клинические наблюдения убедительно показали вовлеченность в патофизиологические процессы интоксикации практически всех органов и систем организма. Причиной этого служил чрезвычайно спектр биологической активности ЭТ. Но мультисистемость изменений при системной эндотоксинемии не является только следствием непосредственного взаимодействия липополисахаридов с различными органами и системами организма. Свое влияние на них ЭТ может оказывать и опосредованно, через систему эндогенных медиаторов.
Характер взаимодействия возбудителя и макроорганизма определяется не только типом и дозой поступившего токсина, но и выраженностью ответной реакции организма [5]. Ответная реакция организма является одним из наиболее филогенетически древних защитно-адаптационных механизмов в ответ на воздействие экзо- и эндо- чужеродных агентов. Суммируя все вышеизложенное, СИ можно охарактеризовать как эволюционно выработанный универсальный способ взаимодействия макро- и микроорганизмов, имеющий многоступенчатую организацию и однотипные проявления в клинике инфекционных заболеваний.
Реализация СИ ведется на локальном и системном уровнях [6]. Локальная фаза инициируется взаимодействием ЭТ с гуморальными и клеточными (полиморфноядерными лейкоцитами -ПМЯЛ) системами организма, что ведет к реализации их эффек-торного потенциала и сопровождается выделением ряда биоактивных эндогенных медиаторов липидной (простагландин, про-стациклин, тромбоксан, лейкотриены, тромбоцит-активирующий фактор) и белковой природы (интерлейкин, интерферон, опухо-ленекротизирующий фактор). Поступая в системный кровоток, эти медиаторы меняют функциональное состояние большинства органов и систем организма, играя роль индуктора системной фазы СИ. Неизбежность реализации СИ на системном уровне легко понять, если рассмотреть эту проблему с позиций теории функциональных систем (ФС), предложенной П.К.Анохиным [7]. В основу этой теории положена концепция об организации посредством морфо-функциональных связей взаимозависимых между собой комплексов органов и систем, имеющих свое функциональное назначение и взаимодействующих с другими ФС организма. В этом случае органы и ткани являются элементами ФС организма, выполняя свою роль во взаимосвязи с другими структурно-функциональными единицами системы. Исходя из положений этой теории, любое экзо- или эндогенное воздействие на один или ряд элементов ФС выводит из равновесия всю систему, оказывает влияние и на жизнедеятельность других ФС организма. Именно по таким принципам развивается СИ. Проникнув в организм ЭТ на пути реализации своих патофизиологических эффектов встречает ряд защитных систем, среди которых видное место отводится антиэндотоксиновым системам [8].
Изучение эндотоксинсвязывающих систем организма является одной из самых актуальных проблем современной науки, так как эти системы являются одним из самых эффективных защитных барьеров на пути развития системой эндотоксинемии и выступают в роли модулятора реализации широкого спектра биоэффектов ЭТ, инициируя манифестацию СИ на локальном и системном уровнях. Липополисахариды являются амфиопатиче-ской молекулой, вследствие чего наблюдается достаточно быстрое их связывание при поступлении в кровоток с природными антиэндотоксиновыми системами. В организме имеется множество систем, осуществляющих глубокоэшелонированную защиту от ЭТ. Наиболее мощными из них являются эндотоксинсвязываю-щие системы крови. Основную эндотоксинсвязывающую популяцию клеток крови представляют ПМЯЛ [9-11]. При этом постоянно поступающий в низких концентрациях ЭТ обеспечивает состояние физиологической системной эндотоксинемии, поддерживая систему ПМЯЛ в состоянии физиологического тонуса [12]. Связавшись с нейтрофилами, липополисахариды не имеют возможности реализовать свои патофизиологические эффекты, проникая в свободном виде в органы и ткани организма.
При превышении концентрацией ЭТ в системном кровотоке физиологического порога липополисахариды могут модифициро-
С.Г. Нехаев
вать функциональное состояние ПМЯЛ, изменяя их метаболические характеристики. Ответная реакция со стороны лейкоцитов однотипна и проявляется реализацией их эффекторного потенциала. Одним из механизмов реализации патофизиологических эффектов эндотоксина при этом является формирование пула липополисахарид-перегруженных ПМЯЛ. В системном кровотоке появляются гиперактивированные нейтрофилы. Такие нарушения связывают со сверхвысокой текучестью мембран.
В реализации системной фазы интоксикационного синдрома видное место занимает премирующий эффект ЭТ на ПМЯЛ. Данный эффект опосредуется фактором, образующимся в тромбоцитах под влиянием ЭТ. Суть феномена премирования заключается в «подготовке» ПМЯЛ к ускоренной выработке активных форм кислорода (АФК) в ответ на воздействие различных стимулов. Дальнейшие патофизиологические проявления представляют собой эффект вмешательства АФК в различные метаболические процессы в органах и тканях [13]. В присутствии сывороточного комплемента липополисахариды могут вызывать, преимущественно вследствие образования известного активатора кислородного метаболизма - хемотаксического фактора С5, заметную стимуляцию дыхательных процессов лейкоцитов. Кульминационным моментом нарастания метаболических нарушений в ПМЯЛ является генерация «респираторного взрыва», который сопровождается выработкой активных форм кислорода.
Образование активных форм кислорода является непременным условием для осуществления перекисного окисления липидов (ПОЛ) [14,15]. В норме все клетки, включая и ПМЯЛ содержат широкий спектр соединений, которые предотвращают выработку избыточного количества активных форм кислорода. Одним из звеньев многопрофильной антиоксидантной системы являются ферментативные антиоксиданты. К этой группе относят малоновый деальдегид (МДА) и каталазу, принимающих непосредственное участие в регулировании системной фазы интоксикационного синдрома. Вирус геморрагической лихорадки с почечным синдромом (ГЛПС), обладая выраженным вазотропным действием, вызывает воспалительные и деструктивные процессы в стенке мелких сосудов, что ведет к образованию и накоплению в крови и тканях продуктов ПОЛ, обладающих токсическими свойствами [15]. В условиях интоксикации нарушается баланс между скоростью процессов образования активных форм кислорода и мощностью антиоксидантной защиты, что способствует самоускорению процесса ПОЛ, что приводит к гибели клеток. ПОЛ является характеристикой функционального состояния ПМЯЛ с точки зрения выполнения ими функций антиэндотоксинового барьера.
Материалы и методы. Концентрации МДА и каталазы в крови определялись в начальном (до 7-го дня болезни), олигури-ческом (8-13 дни болезни), полиурическом (14-19 дни) периодах заболевания, а также при реконвалесценции (после 20-го дня болезни). Полученную от больных венозную кровь помещали в пробирки с антикоагулянтом - гепарином (3-4 капли). Через 2 часа проводили отделение плазмы от эритроцитарной массы.
Для определения МДА отбирали 0,5 мл плазмы и помещали в пластмассовые пробирки. Затем к плазме добавляли 5 мл 17% трихлоуксусной кислоты и выдерживали 15 мин., после чего образцы центрифугировали при скорости 5000 об/мин в течение 7 мин. Полученный супернатант сливали, а осадок переносили в стеклянные пробирки и добавляли 2 мл дистиллированной воды, а также 1 мл 0,8% тиобарбитуровой кислоты. Раствор тиобарби-туровой кислоты (0,8% концентрации) готовили непосредственно перед употреблением: к 40 мг тиобарбитуровой кислоты добавляли 2,5 мл дистиллированной воды, затем выдерживали на водяной бане до полного растворения кислоты и доливали 2,5 мл ледяной уксусной кислоты. Далее пробирки закрывали пробками и вновь помещали на водяную баню, где выдерживали в течении 1-го часа при температуре 99-100 0С. Затем пробирки с раствором охлаждали и центрифугировали при скорости 6000 об/мин в течении 10 мин. В полученном центрифугате регистрировали оптическое поглощение на фотометре КФК-3 при длине волн 535,0 нм и 580,0 нм. Концентрацию МДА в сыворотке крови рассчитывали по формуле: С=0,21+26,5Д, где Д= Д535,0-Д580,0. Единицы измерения: С - нм/мл; Д - ед. опт. пл.
Для определения уровня каталазы готовили 3 пробы: опытную, холостую, контрольную. В опытной пробе реакцию запускали добавлением 0,1 мл сыворотки крови к 2 мл 0,03% раствора перекиси водорода. В холостую пробу вместо сыворотки вносили
0,1 мл дистиллированной воды. В контрольной пробе к 2 мл
дистиллированной воды добавляли 0,1 мл сыворотки. Реакцию останавливали через 10 мин добавлением к пробам 1 мл 4% молибдата аммония. Интенсивность окраски растворов изучали на фотометре при длине волны 410 нм. Концентрацию каталазы сыворотки крови считали по формуле: С=Ек- Ео-100%, где Ек -экстинкция контрольной пробы, Ео -опытной пробы. Результат выражается в %. Холостая проба нужна для сверки показателей.
Таблица
Концентрация каталазы и МДА в динамике заболевания
Дни болезни Контроль
< 7 8-13 14—19 > 20
Ката- лаза, нм/мл п = 9 14,5+1,3 п = 20 11,1+0,7 п = 25 12,1+0,86 п = 14 12,7+0,86 п = 18 14,08+0,6
МДА, % п = 9 3,0+0,2 п = 20 ,9+0,35 п = 23 3,75+0,3 п = 13 3,8+0,29 п = 18 3,85+0,4
Результаты. Показатели уровней каталазы и МДА в сыворотке крови в начальном, олигурическом, полиурическом периодах заболевания и в период реконвалесценции представлены в табл.: у больных со среднетяжелым течением ГЛПС в лихорадочном (начальном) периоде заболевания уровень каталазы крови практически не изменился по сравнению с соответствующим показателем контрольной группы. Однако в олигурическом (8-13 дни болезни) периоде заболевания уровень каталазы в крови заметно снизился до 11,12+0,72 нм/мл, что достоверно значимо отличалось от показателя контрольной группы. Данный показатель имел значимые различия не только с показателем контрольной группы, но и с аналогичным показателем в лихорадочный период болезни. В последующие периоды болезни (полиуриче-ский и период реконвалесценции) концентрация каталазы осталась на этом же уровне, составив 12,10+0,86 и 12,65+0,86 нм/мл соответственно, что имело достоверные отличия и от показателя контрольной группы и от показателя в лихорадочный период, но не отличалось от показателя в олигурический период.
В противоположность концентрации каталазы уровень МДА до 7-го дня болезни достоверно снижался по сравнению с аналогичным показателем контрольной группы до 3,03+0,21%. В олигурическом периоды заболевания зарегистрировано восстановление данного показателя (3,88+0,35%) до значения контрольной группы. В полиурическом периоде и периоде реконва-лесценции концентрация МДА существенно не изменилась.
В условиях выраженной интоксикации снижение уровня каталазы в сыворотке крови происходит не сразу, а только начиная с олигурического периода заболевания. При этом симптомы интоксикации достигают своей максимальной выраженности обычно уже в лихорадочном периоде болезни, сохраняясь достаточно выраженными и в олигурическом периоде, тогда как в полиурический период СИ отступает на второй план, а в период реконвалесценции, как правило, исчезает вовсе. Такая динамика концентрации данного фермента может быть отражением кумулятивных проявлений СИ и, кроме того, может являться проявлением других, пока не изученных механизмов патогенеза ГЛПС. Еще одной причиной снижения уровней каталазы в эти периоды заболевания может быть воздействие на синтез этого фермента продуктов уремической интоксикации при развитии острой почечной недостаточности. Кроме снижения синтеза данного фермента, причиной уменьшения его концентрации в крови может быть повышенное его потребление на предотвращение выработки ПМЯЛ избыточных количеств АФК [15]. Независимо от причин такой динамики уровней каталазы в разные периоды заболевания, снижение ее концентрации имеет отрицательное значение для инфекционного процесса при ГЛПС за счет уменьшения «тормозного» эффекта на синтез АФК. Вероятным последствием этого может быть ускорение процессов ПОЛ и накопление в организме токсических продуктов этого процесса.
С патофизиологической точки зрения, рекомендуется разработка методов лечения, направленных на рост уровня каталазы в крови, что должно привести к сокращению проявлений системной фазы СИ и к снижению тяжести течения заболевания. В отличие от каталазы, уровень МДА снижен только в начальном периоде заболевания в разгар СИ. Несмотря на симптомы интоксикации в олигурическом периоде, концентрация МДА в крови уже восстановилась до контрольных величин. Снижение уровня
Статья
этого фермента в начальном периоде имеет те же причины, что и снижение уровней каталазы в иные периоды заболевания. Показатель уровня МДА значительно раньше реагирует на изменения условий выраженной интоксикации, что дает основание для его применения в качестве критерия развития инфекционного процесса. Быстрое восстановление его уровня в крови в олигуриче-ском периоде говорит о меньшем, по сравнению с каталазой, вовлечении МДА в патофизиологические процессы при СИ.
Выводы. В динамике инфекционного процесса у больных ГЛПС снижаются уровни ферментативных антиоксидантов -каталазы и МДА, причем уровень МДА снижается раньше, но и раньше восстанавливается. Снижение в организме количества антиоксидантов имеет негативное значение в развитии инфекционного процесса и СИ, так как ведет к накоплению токсических продуктов ПОЛ. Причины такой динамики изучаемых показателей имеют различную природу и требуют дальнейшего изучения.
Литература
1. Малое В.А. и др. // Ж. микробиол., эпидемиол., и иммуно-биол.- 1994.- №5.- С.105-109.
2. Войно-Яснецкий М.В. Биология и патология инфекционных процессов.- Л.:Медицина, 1981.- 208 с.
3. Doran J.E. // Curr. Stud. Hematol. Blood Transfus.- 1992.-№59.- Р. 66-99.
4. Яковлев М.Ю. Системная эндотоксинемия в физиологии и патологии человека: Автореф. дис. ... д. м. н.- М., 1993.- 55 с.
5. Borzotta A.P., Polk H.C. // Surg. Clin. N. Amer.- 1980.-№5.- Р. 315-336.
6. Малое В.А., Пак С.Г. // Тер. архив.- 1992.- №11.- С.7-11.
7. Бабушкина А.Ф. // Казан. мед. ж.- 2002.- №3.- С.194-197.
8. Апполонин А.В. и др. // Ж. микробиол., эпидемиол.. и им-мунобиол.- 1990.- №11.- С. 100-106.
9. Маянский А.Н., Маянский Д.И. Очерки о нейтрофиле и макрофаге.- Новосибирск: Наука,1983.- 255 с.
10. Пермяков Н.К. и др. // Арх. патол.- 1989.- Т.51.- Вып. 5.- С. 3-11.
11. Munford R.S. // Mathod Find. Exp. Clin. Pharmacol.-1986.- Vol. 8.- P. 63-65.
12. Proctor R.A. // Elsevier Science Publishers B.V.- 1985.-Vol. 3.- P.244-259.
13. Кузнецов В.И. и др. // Эпидемиол. и инфекц. болезни.-2003.- №4.- С. 30-33.
14. Оконенко Л.Б. // Лаб. дело.- 1987.- №1.- С. 55-56.
15. Миронов В.И. и др. // Врач. дело.- 1988.- №6.- С. 119.
STATE OF SOME SYSTEMS OF ANTIENDOTOXIN PROTECTION IN HEMORHAGIC FEVER PATIENTS WITH RENAL SYNDROME
S.G. NEKHAEV Summary
State of antiendotoxin system has an effect upon infection’s process. In the condition of intoxication in hemorrhagic fever patients with renal syndrome the reduction of importants elements content of this system is observed that is a reason of weakening capacity of antiendotoxin protection.
Key words: antiendotoxin system, hemorrhagic fever patients
УДК: 615.27:[616.36-056.5:550.382.8
ФАРМАКОЛОГИЧЕСКАЯ КОРРЕКЦИЯ НАРУШЕНИЙ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ ГЕПАТОЦИТОВ И АНТИОКСИДАНТНОГО СТАТУСА В УСЛОВИЯХ ОСТРОГО ТОКСИЧЕСКОГО ПОРАЖЕНИЯ ПЕЧЕНИ И ВОЗДЕЙСТВИЯ ПОСТОЯННОГО МАГНИТНОГО ПОЛЯ
В.П. ГАВРИЛЮК, В.Т. ДУДКА, А.И. КОНОПЛЯ, А.В. ПИГАРЕВА, Е.С. РОМАНОВА*
Большой объем накопленной в последнее время информации о патологической морфологии печени заставляет по-новому взглянуть на механизмы развития печеночной патологии, роль печеночных клеток в развитии патологии других систем при
поражении данного органа [1]. Изучение состояния печени при токсических поражениях приобретает большую важность, особенно в условиях увеличения воздействия на организм разнообразных агрессивных факторов внешней среды, в том числе и постоянных магнитных полей (ПМП). Не выяснены особенности длительного действия постоянного электромагнитного поля при токсическом повреждении печени и процессах ее репаративной регенерации, что делает коррекцию нарушений неразрешенной.
Материалы и методы. В качестве экспериментальной модели токсического поражения печени использовано введение четыреххлористого углерода (ЧХУ) (внутримышечно 3 мл/кг в виде 50% раствора в оливковом масле, пятикратно, с интервалом 24 ч) [1]. Воздействие ПМП проводили в течение 30 дней в специальной установке, состоящей из высокостабилизированного источника постоянного тока и колец Гельмгольца с радиусом 1,5 м. Внутри колец создавалось ПМП с индукцией 3х10-4 Тл, вектор которого находился на суперпозиции с вертикальной составляющей вектора геомагнитного поля на территории г. Курска. Испытуемые лабораторные животные помещались в центр установки, где неоднородность поля не превышала 30%.В сыворотке крови опытных особей определяли концентрацию общего билирубина, общего белка, фибриногена и активность аспартат- и аланинами-нотрансфераз (АЛТ и АСТ), щелочной фосфатазы (ЩФ), у-глутамилтранспептидазы (ГГТ), ставили тимоловую пробу. Величины показателей определяли с использованием стандартных наборов реактивов [3]. Выраженность перекисного окисления липидов (ПОЛ) оценивали по содержанию ацилгидропереки-сей (АГП) и малонового диальдегида (МДА), в сыворотке крови определяли активность каталазы [2, 5]. Исследовали влияние на функции гепатоцитов фармпрепаратов: тиамина хлорида, р-ра для инъекций («Верофарм», Россия); рибофлавина моноадено-зинфосфат, р-ра для инъекций («Дальхимфарм», Россия); нико-тинамида, р-ра для инъекций («Борисовский ЗМП», Беларусь) эспа-липона (а-липоевая кислота) («Esparma», Германия); коэн-зима Q («ВитаЛайн», США); глутоксима, р-ра для инъекций («ФАРМА ВА», Россия); эссенциале, р-ра для в/в инъекций («Рон-Пуленк Рорер», Германия); рибоксина («Вирион»).
Статобработку проводили с помощью программ «Statgraphics», «Microsoft Excel» и «Biostat», используя непараметрические методы: критерии Вилкоксона, Крускала - Уоллиса, Фридмана и непараметрический вариант критерия Ньюмена -Кейлса. Статистически значимыми считали различия с p<0,05.
0 5 10 15 20 25 30
е ЧХУ+ ПМП + Комплекс 2 Ц ЧХУ+ ПМП + Комплекс 1 □ ЧХУ+ ПМП
Рис. Динамика на фоне лечения проявлений синдромов нарушения функциональной активности гепатоцитов в условиях острого токсического отравления печени на фоне воздействия ПМП Обозначения: комплекс 1 - эссенциале + а-липоевая кислота + коэнзим Q + тиамин хлорид + рибофлавин моноаденозинфосфат + никотинамид; комплекс 2 - эссенциале + глутоксим + рибоксин
* Курский государственный медицинский университет
Статья
Результаты. Воздействие ПМП в течение 30 дней приводит к развитию цитолитического синдрома повреждения гепато-цитов, их недостаточности и развитию иммуновоспалительного синдрома. У животных через сутки после последнего отравления ЧХУ выявлено развитие острого токсического поражения печени, (синдромы биохимического поражения печени: цитолиз, холе-стаз, печеночно-клеточная недостаточность, иммуновоспали-тельный синдром, угнетение синтетической функции)[4]. После совместного воздействия ЧХУ и ПМП на первые сутки после отравления эти синдромы еще более выражены. При этом синдром цитолиза и снижение синтетической функции сохраняются до 28 дня, печеночно-клеточной недостаточности до 21 дня, а иммуновоспалительный и холестаза - до 14 дня, после острого отравления ЧХУ (рис.). Одновременно в сыворотке крови опытных особей растет уровень ацилгидроперекисей в 4,2 раза и МДА
- в 2,0 раза, на 34,0% снижается активность каталазы, тогда как при совместном воздействии ЧХУ и ПМП эти показатели меняются еще больше. Все это говорит о необходимости в условиях острого токсического поражения печени, а тем более в условиях воздействия ПМП, раннего начала проведения специфической корригирующей терапии нарушений функциональной активности гепатоцитов и антиоксидантного статуса. Для этого нами изучалась эффективность двух фармакологических комплексов. На фоне приема комплекса препаратов «эссенциале + эспа-липон + коэнзим Q + тиамин хлорид + рибофлавин моноаденозинфосфат + никотинамид» через сутки после острого отравлении ЧХУ и 30дневного воздействия ПМП не развивается синдром печеночноклеточной недостаточности, снижается длительность иммуно-воспалительного синдрома, синдрома холестаза до 14 дней и восстанавливается синтетическая функция гепатоцитов уже на 2 неделе после последнего отравления гепатотропным ядом. Использование эссенциале вместе с витаминами и витаминоподобными соединениями сокращает длительность синдрома цитолиза на 7 дней, а иммуновоспалительного и синтетической недостаточности гепатоцитов - на 2 недели по сравнению с группой животных, не получавших данные препараты (рис.). Применение фармакологического комплекса «эссенциале + глутоксим + рибоксин» оказалось еще более эффективным, чем эссенциале с витаминами. Его использование не дает развитию у животных в условиях острого отравления ЧХУ и воздействия ПМП иммуно-воспалительного синдрома, печеночно-клеточной недостаточности и сохраняет синтетическую функцию гепатоцитов. Длительность синдрома холестаза снижается на 3 недели, а цитолиза - на 2, по сравнению с группой животных, не получавших корригирующих средств. Та же эффективность предложенных схем наблюдается и при изучении корригирующего их эффекта на концентрацию продуктов ПОЛ и активность каталазы. Использование эссенциале с комплексом витаминов нормализует активность каталазы уже на 1-е сутки после отравления ЧХУ и воздействия ПМП, МДА на 14 день, а АГП - на 28 день. Использование эссенциале вместе с рибоксином и глутоксимом нормализует уже на первые сутки концентрацию АГП и активность каталазы, тогда как концентрация МДА приходит к норме к 21 дню.
Вывод. Применение в условиях острого токсического поражения печени и действия магнитного поля комплекса эссен-циале с витаминами (а-липоевая кислота, коэнзим Q, тиамин хлорид, рибофлавин моноаденозинфосфат, никотинамид) или в большей степени с глутоксимом и рибоксином эффективно корригирует нарушенные показатели функциональной активности гепатоцитов и снижает выраженность ПОЛ, особенно в период наибольшей их выраженности (первые сутки).
Литература
1. Алексеева Н.Н. и др. Печень и иммунологическая реактивность.- Киев.: Наук. думка.- 1991.- 168 с.
2. Кушманова О.Д., Ивченко Е.М. Руководство к лабораторным занятиям по биологической химии.- М.: Медицина.- 1983.-
С.98-99.
3. Меньшикова В.В. Лабораторные методы исследования в клинике: справочник.- М.: Медицина, 1987.- 365 с.
4. Подымова С.Д. Болезни печени (рук-во для врачей).- М.: Медицина, 1998.- 704 с.
5. Стальная Н.Д., Гаришвилли Т.Г. // Современные методы в биохимии / Под ред. В.Н. Ореховича.- М., 1977.- С. 66-68.
PHARMACOLOGIC CORRECTION OF DISORDERS OF FUNCTIONAL ACTIVITY OF HYPATOCYTES AND ANTI-OXIDANT STATUS IN CONDITIONS OF ACUTE TOXIC DEFEAT OF LIVER AND EXPOSURE OF CONSTANT MAGNETIC FIELD
V.P. GAVRILYUK, V.T. DUDKA, A.I. KONOPLYA, A.V. PIGAREVA,
E.S. ROMANOVA
Summary
Application in conditions of acute toxic defeat of a liver and exposure of a constant magnetic field of a complex essentiale with vitamins and a-acidum lipoicum, coenzyme Q) reduces the broken parameters of functional activity of hepatocytes and reduces an expressiveness of oxidation of the lipids, caused by influence of a hepa-totropic poison and the physical agent. The combination essentiale with glutoxinum and riboxinum appeared more effective.
Key words: magnetic field, hepatocytes, acute toxic poisoning.
УДК 612-083: 577.112.6 : 616.36
ПРИМЕНЕНИЕ ОПИОИДНОГО ПЕПТИДА DSLET ПРИ ОСТРЫХ ТОКСИЧЕСКИХ ГЕПАТОПАТИЯХ
И.И. БОБЫНЦЕВ, А.И. КОНОПЛЯ, Л.А. СЕВЕРЬЯНОВА,
М.Ю. СМАХТИН*
Введение. Ныне активно изучается возможность применения при разных формах патологий регуляторных пептидов. Многие из них уже нашли применение в клинической практике. Не ослабевает интерес к группе опиоидных пептидов, обладающих анальгетической и противовоспалительной активностью [4, 8]. Синтетический опиоидный пептид DSLET (Tyr — D — Ser —
— Gly — Phe — Leu — Thr ) является высокоселективным лигандом опиоидных S (дельта)-рецепторов [4], которые экспрессируются лимфоцитами в различных лимфоидных органах и гепатоцитами [3]. Природные лиганды этих рецепторов (энкефалины) оказывают влияние на метаболиэм в клетках печени [6].
Установлено стимулирующее влияние DSLET в отношении физиологической регенерации гепатоцитов [10]. Отсутствие данных об эффектах этого пептида и подобных ему лигандов в условиях патологии печени затрудняет дальнейшее изучение роли регуляторных механизмов ее регенерации, а также целенаправленный поиск новых гепатопротекторных препаратов пептидной природы. Иммунная система участвует в контроле процессов регенерации печени [2], а эффекты опиоидных пептидов могут зависеть от исходной активности иммунной функции [4].
Цель работы - изучение гепато- и иммунотропной активности селективного агониста S-опиатных рецепторов (пептида DSLET) в условиях экспериментальных токсических гепатопатий, отличающихся исходным уровнем иммунной реактивности.
Материалы и методы исследования. Исследования выполнены на мышах СВА массой 22-25 г с использованием экспериментальных моделей острых токсических гепатопатий, сопровождающихся как повышением иммунной реактивности (отравление CCI4), так и ее снижением (отравление гидразином) [11]. Острое токсическое поражение печени вызывали внутрижелу-дочным введением 50% раствора CCI4 в растительном масле по 3 мл/кг массы тела в течение 5 дней подряд или однократным внутрибрюшинным введением 50 мг/кг сернокислого гидразина. DSLET был синтезирован в Кардиологическом научном центре РАМН. На основе исследований гепато- и иммунотропных эффектов DSLET в физиологических условиях [10] были выбраны три дозы пептида - 1.5, 50 и 150 мкг/кг массы, отличающиеся по степени выраженности его эффектов. Навески растворяли в стерильном изотоническом растворе NaCl и вводили внутри-брюшинно в объеме 0.1 мл 10-кратно с интервалом в 24 часа между инъекциями до, одновременно и после поступления гепа-тотропных ядов. На следующий день после последнего введения препарата животных забивали под эфирным наркозом и выделяли печень. Кусочки органов фиксировали в 10% нейтральном фор-
* 305041, г. Курск, ул. К. Маркса 3, Курский государственный медунивер-ситет, кафедра биохимии и кафедра патофизиологии, тел. (0712) 56-54-60
