Состояние митохондриальных ферментов лимфоцитов крыс с эктопическим ростом С-45 в легком под влиянием электромагнитных воздействий Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

Сравнение результатов цитологического исследования с гистологическим диагнозом является важнейшим методом контроля качества в цитологической лаборатории. Метод жидкостной цитологии позволяет снизить маску доброкачественности, которая может быть определена при

обычном цитологическом скрининге, и более точно выделить пациенток с высокой степенью риска. Чувствительность цитологического исследования является весьма важным фактором эффективности скрининга рака шейки матки.

состояние митохондриальных ферментов лимфоцитов крыс С эктопическим РОСТОМ С-45 в легком под влиянием электромагнитных воздействий

д.в. леонтьева, с.м. кечеджиева, а.и. шихлярова, Т.А. куркина

ФГУ «Ростовский научно-исследовательский онкологический институт Росмедтехнологий»,

г. Ростов-на-Дону

Цель исследования. - установить характер изменения ферментативной активности лимфоцитов крыс с эктопическим ростом саркомы-45 в легком под влиянием комбинированной электромагнитотерапии.

Материал и методы. Опыты проводились на 42 беспородных крысах-самцах с эктопическим ростом в ткани легкого, которые были распределены на 2 группы: контрольная - без воздействия и опытная - с воздействиями. Крысам опытной группы воздействовали на проекцию гипоталамуса переменными сверхнизкочастотными магнитными полями. Спустя 15-20 мин проводились воздействия на кожные покровы, топографически связанные с легкими, импульсным электрическим полем, производимым аппаратом СКЭНАР. Комбинированные воздействия осуществлялись 5 нед, начиная с 7 дня после перевивки. По окончании лечения животные были декапитированы. Гистологические исследования легких позволили разделить опытную группу на животных с регрессией опухолевого процесса - эффективное лечение (2а) и без регрессии - неэффективное лечение (2б). Исследование цитохимической активности дегидрогеназ (СДГ и а-ГФДГ) лимфоцитов периферической крови проводили по методу РП. Нарциссова (1963) с нитротетразолием фиолетовым, подсчитывая число гранул фор-мазана, продукта цитохимической реакции, в 50 лимфоцитах. Ферментативную активность

выражали в условных единицах. Для более полной оценки функционального состояния клеточной популяции учитывали индекс активности ферментов (1а) и коэффициент соотношения 1аСДГ и 1аа-ГФДГ (ксдг/гфдг X который позволяет оценить характер взаимодействие цикла Кребса и а-глицерофосфатного шунта во внутренней мембране митохондрий. Оценивали гетерогенность популяции лимфоцитов, по коэффициенту соотношения клеток с высокой (1а) и низкой (1о) активностью ферментов (К1а1о).

Результаты. При изучении ферментного профиля лимфоцитов периферической крови через неделю после начала воздействий было установлено, что 1а СДГ и К^ в группе 2а превышали данные показатели в группе 2б - 154 у.е. против 138 у.е. и 1,05 у.е. против 0,86 у.е. соответственно (р<0,05). КСдГ/ГФдГ во всех трех группах был больше 1, что говорило о преимущественном использовании аэробного, более продуктивного, дыхания клеток. В середине опыта, через 4 нед после перевивки опухоли, во всех группах был зафиксирован скачок 1а как СДГ, так и а-ГФДГ, особенно в группе 2б, где он поднялся до 192,8 у.е.(р<0,05), К(

СДГ/ГФДГ

этих

групп свидетельствовал об интенсификации цикла Кребса. Известно, что чрезмерная активация ферментов СДГ и а-ГФДГ, характерная для целого ряда заболеваний, приводит к перерасходу субстратов энергетического метаболизма и чревата дальнейшим глубоким истощением, что

и произошло к концу опыта (6 нед после перевивки) как в контрольной группе, так и в опытной группе с неэффективными воздействиями, КСдГ/ГФдГ которых приобрел значение меньше 1, т.е. ознаменовал переход к гликолитическому, менее энергетически выгодному, механизму получения АТФ. В это же время в лимфоцитах животных с выраженным противоопухолевым эффектом сохранилось преобладание цикла Кребса (Ксдг/гфдг был равен 1,05).

Вы воды. Комбинированное воздействие СНЧМП и СКЭНАР на животных-опухоленосителях оказывает выраженное противоопухолевое влияние, сопровождающееся оптимизацией энергетического метаболизма иммунокомпетентных клеток, а именно накопление эндогенных субстратов окислительного фосфорилирования.

исследование эффективности облучения культур опухолевых клеток ионами углерода

а.н. липенгольц1, в.ф. хохлов1, п.в. ижевский1, в.н. кулаков1, и.н. шейно1, а.а. голубев2, а.д. фертман2, в.е. лукьяшин2, н.в. марков2, е.ю. Григорьева3, е.ю. колдаева3, м.и. лукашина3, м.г. найденов3

Федеральный медицинский биофизический центр им. А.И. Бурназяна ФМБА России, г. Москва1 Государственный научный центр Российской Федерации - Институт теоретической

и экспериментальной физики, г. Москва2 Государственное учреждение «Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина Российской академии медицинских наук», г. Москва3

Цель работы - исследование цитотокси-ческого действия ионов углерода на культуры опухолевых клеток на установке ТВН-ИТЭФ обеспечивающей энергию углеродного пучка в диапазоне от 2400 МэВ до 3600 МэВ.

Материал и методы. Контрольные и исследуемые образцы клеточной линии меланомы B16F10 засевали в полной среде в 6 луночные планшеты и подсчитывали количество колоний на 3, 5, 7 и 15 дни, с использованием инвертированного микроскопа ЛОМО (Россия) при увеличении х10. За колонию принимали группу не менее чем 20 живых клеток одинаковой морфологии, расположенных в непосредственном контакте друг с другом. Использовали следующую среду для культивирования: 500 мл RPMI1640 с 10% содержанием термически инактивированной (+56оС 30 мин. на водяной бане) телячьей эмбриональной сыворотки, L-глутамином 4 мМ, гентамицином (из 1000х стока до 1х концентрации), HEPES-Na 1мМ в итоговом объеме.

Для оценки действия радиации использовали МТТ-тест выживаемости клеток (Mosmann Т..

1983). Тест характеризует интенсивность окислительно-восстановительных процессов в клетках культуры и является косвенной характеристикой активной биомассы.

Результаты. Клетки облучали ионами С14 в дозах, эквивалентных 10 и 20 Гр, в двух положениях: «на входе» и «на пике Брэгга». После облучения клетки снимали с пластика и проводили оценку количества погибших клеток рутинным методом по включению трипанового синего. В первые часы после облучения разницы между контрольными и экспериментальными образцами по выживаемости не обнаружено отличий, в том числе в образцах, облученных «на входе» и «на пике Брэгга». Для оценки жизнеспособности опухолевых клеток после облучения проведена сравнительная оценка способности клеток образовывать колонии в зависимости от полученной дозы. Оценка количества колоний на 12—15-й дни после облучения показала достоверную разницу (р<0,05) между количеством образовавшихся колоний в подгруппах. Облучение клеток в дозе, эквивалентной 20 Гр «на входе» , вероят-