CC BY
29
14. Little M.P. A Model of Cardiovascular Disease Giving a Plausible Mechanism for the Effect of Fractionated Low-Dose Ionizing Radiation Exposure / M.P. Little, A. Gola, I. Tzoulaki // PLoS Computational. Bio. - 2009. - V. 5, #10. - e. 1000539.
ПОКАЗАТЕЛИ ХОЛЕСТЕРИНА И ИММУННОЙ СИСТЕМЫ У ЛИЦ С ПРИЗНАКАМИ ВЕГЕТО-СОСУДИСТОЙ ДИСТОНИИ, ПРОЖИВАВШИХ НА ТЕРРИТОРИИ, ЗАГРЯЗНЕННОЙ РАДИОНУКЛИДАМИ Соколенко В.Л.
Оценивали связь между уровнем холестерина и показателями иммунной системы у лиц с признаками синдрома вегето-сосудистой дистонии, проживающих на радиационно загрязненных территориях. Установили, что в данной когорте уровень общего холестерина достигает максимальных гомеостатических значений. Лимфоцитарное звено при этом несколько активировано, но эффект сопровождается угнетением процессов дифференцировки функционально зрелых Т-лимфоцитов. Дисфункции специфического иммунитета в определенной степени компенсируются ростом уровня гранулоцитарных клеток на фоне снижения активности профессиональных фагоцитов.
Ключевые слова: холестерин, вегето-сосудистая дистония, радиация, иммунитет.
Стаття надшшла 1.03.2016 р.
CHOLESTEROL RATE AND IMMUNE SYSTEM INDICES IN PEOPLE WITH SYMPTOMS OF VEGETATIVE-VASCULAR DYSTONIA, WHO LIVED IN THE TERRITORIES CONTAMINATED WITH RADIONUCLIDES Sokolenko V.L.
We evaluated the link between cholesterol level and immune system indices in people with symptoms of vegetative-vascular dystonia syndrome who lived in contaminated areas. It is determined that total cholesterol level reaches maximum homeostatic value within this group. At the same time lymphocytes are slightly activated, but the effect is accompanied by inhibition of differentiation processes of functionally mature T lymphocytes. Specific immunity dysfunction is to some extent compensated by growth of granulocytic cells in the background of decrease in activity of professional phagocytes.
Key words: cholesterol, vegetative-vascular dystonia, radiation, immunity.
Рецензент
УДК 616.72-002-021.5-07: [612.017+616.34-008.87]-053.2
СОСТОЯНИЕ МИКРОБИОЦЕНОЗА КИШЕЧНИКА И ИММУНИТЕТА У ДЕТЕЙ БОЛЬНЫХ РЕАКТИВНЫМИ АРТРИТАМИ В ОСТРОМ ПЕРИОДЕ
Определены частота и степень нарушений микробиоценоза кишечника у детей больных РеА в остром периоде. II степень дисбиоза установлена у 62,5%, I степень - у 37,5% детей. Установлены особенности нарушений иммунологического гомеостаза больных в остром периоде РеА в виде депрессии Т-системы и активизации В-системы, процессов фагоцитоза, продукции ИЛ-6. Выявлены достоверные прямые связи между содержанием грибов рода Candida, фагоцитарным звеном и CD21, а также обратные корреляции между количеством кишечной палочки и уровнем ИЛ-6, содержанием лактобактерий и спонтанным НСТ-тестом. Полученные результаты подтверждают важную иммуннорегулирующую роль микрофлоры кишечника у больных РеА.
Ключевые слова: дети, реактивные артриты, микрофлора кишечника, иммунитет.
Работа является фрагментом НДР «Вивчення стану та систем организму дитини i 'ix структурно-функцюналъна характеристика при соматичнш патологи у сучасних умовах» номер державноi реестраци 0111U003577.
Одним из наиболее дискуссионных вопросов проблемы эндомикроэкологии человека до настоящего времени остаются причинно-следственные связи между дисбиозами, вторичными иммунодефицитами и протекающими на их фоне заболеваниями [10].
Одна из функций нормофлоры кишечника - иммунотропная. Нормофлора активирует иммунную систему всего организма, бифидо- и лактобактерии стимулируют лимфоидный аппарат, синтез иммуноглобулинов, цитокинов, способствуют уменьшению проницаемости сосудистых тканевых барьеров для токсических продуктов, патогенных микроорганизмов, препятствуют транслокации бактерий во внутренние органы и кровь. Нарушение колонизационной резистентности кишечника способствует адгезии и колонизации слизистой оболочки патогенными и условно-патогенными бактериями, обусловливает поступление токсинов в кровоток, пролонгируя клинические проявления основного заболевания. Микроэкологические и иммунные нарушения препятствуют процессу выздоровления и элиминации возбудителя из организма больного [9,2]. Одним из основных направлений деятельности индигенной (нормальной) микрофлоры является обеспечение нормального иммунного ответа [4,7]. Известна важная роль состояния стенки кишечника в патогенезе артропатий. РеА являются одной из актуальных проблем современной ревматологии [3,5,8]. В последние годы наблюдается тенденция к нарастанию числа детей, страдающих РеА. Существует многообразие этиологических факторов
приводящих к развитию этих заболеваний. Диагностика РеА до сих пор остается сложной [11]. Существующие клинико-лабораторные подходы и клинические рекомендации не позволяют проводить объективную диагностику этих ранних заболеваний. Трудности диагностики РеА связаны с отсутствием общепринятых диагностических критериев, а также с широкой распространенностью клинически стертых форм заболевания, когда одни его симптомы отсутствуют, а другие слабо выражены [1,6,11].
В литературе было найдено небольшое количество работ, которые исследуют состояние иммунитета и кишечной флоры у больных реактивными артритами. Все эти работы посвящены взрослому контингенту больных.
Поэтому актуальной задачей представляется изучение состояния кишечной микрофлоры и иммунной системы для усовершенствования диагностики и прогнозирования течения РеА в остром периоде у детей.
Целью работы было оценить частоту, характер и степень выраженности нарушений кишечного микробиоценоза у детей больных РеА в остром периоде. Определить состояние клеточного, фагоцитарного звеньев иммунитета, метаболизма провоспалительных цитокинов ИЛ-1Р, ИЛ-6 в остром периоде и установить их взаимосвязь с выраженностью нарушений кишечного микробиоценоза у детей больных РеА.
Материал и методы исследования. Бактериологические и иммунологические исследования были проведены у 40 детей больных РеА в остром периоде. В возрасте от 2 до 6 лет было 19 детей (47,5%), в возрасте от 7 до 14 лет - 21 ребенок (52,5%). Мальчиков было 22 (55,0%), девочек 18 (45,0%). Контрольную группу составили 23 здоровых ребенка. В возрасте от 2 до 6 лет - 12 детей (52,2%), в возрасте от 7 до 14 лет - 11 детей (47,8%). Мальчиков 12 (52,2%), девочек 11 (47,8%). Группы были идентичны по возрасту и полу. Обследование детей проводилось в городском детском кардиоревматологическом отделении КУОЗ "Харьковская городская детская клиническая больница №24" и городских детских поликлиник ах города Харькова. Диагноз РеА устанавливался согласно приказу МОЗ Украины от 19.07.2005 №362 «Протокол дiагностики та лшування хвороб юстково-м'язово! системи та сполучно! тканини у дгтей МКХ-Х М00-М25 артропатп».
Иммунологические исследования включали изучение показателей клеточного, гуморального, моноцитарно-фагоцитарного звеньев иммунитета, содержание цитокинов (ИЛ-1Р, ИЛ-6). В клеточном звене иммунитета определяли субпопуляции лимфоцитов (CD3+, CD4+-, CD8+, CD25, CD21) методом мембранной иммунофлюоресценции с моноклональными антителами. Т-активные лимфоциты - методом розеткообразования по Felsburg P.J. et all., 1976. Определение сывороточных иммуноглобулинов классов А, М, G определяли спектрофотометрическим методом. Моноцитарно-фагоцитарное звено иммунитета оценивали с учетом фагоцитарной и метаболической активности лейкоцитов крови с помощью определения фагоцитарного числа (ФЧ), спонтанного и индуцированного НСТ-теста. Для оценки цитокинового статуса у обследованных больных определяли уровни ИЛ-1Р и ИЛ-6 в сыворотке крови «сэндвич»-методом твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА) с использованием моноклональных антител с использованием набора реагентов фирмы «Цитокин» (Санкт-Петербург, Россия).
Определение степени нарушений микробиоценоза толстой кишки проводилось на основании приказа МОЗ Украины от 29.01.2013 №59 «Ушфшований клшчний протокол медично! допомоги дгам iз захворюваннями оргашв травлення», по трем степеням:
• I степень (компенсаторная): снижение на 1 - 2 порядка бифидобактерий и лактобактерий, эшерихий; возможное повышение количества эшерихий.
• II степень (субкомпенсированная): повышение количества или одного представителя условно-патогенной микрофлоры до уровня 10А5 - 10А7 КОЕ/г, или ассоциаций условно-патогенной микрофлоры до уровня 10А4 - 10А5 КОЕ/г.
• III степень (декомпенсированная): значительный дефицит бифидо- и лактобактерий, значительное увеличение ассоциаций условно-патогенной микрофлоры в количестве 10А6 -10А7 КОЕ/г и больше.
Материалом для изучения явились фекалии, взятые из последней порции калового цилиндра. Для этого использовали тщательно вымытые, без остатков дезсредств судна или горшки. На дно клали чистый лист бумаги. Материал собирали стерильным шпателем и помещали в стерильную посуду. Отобранный материал доставлялся не позднее 2 часов после забора, упакованный и оформленный в соответствии с требованиями Государственных
санитарных правил. Отобранный материал был доставлен не позже 2х часов после сбора, упакованый и оформленный согласно с требованиями Государственных санитарных правил «Правил влаштування i безпеки роботи в лабораторiях (вщдшах, вщделеннях) мшробюлопчного профшю. ДСП 9.9.5.-080-2002 », затверджених постановою головного державного санiтарного лiкаря Украши вiд 28.01.2002 № 1. Направлення на мiкробiологiчне (бактерiологiчне) дослiдження та № 205/0 «Направлення на саштарно-мшробюлопчне дослщження i результати саштарно-мшробюлопчного дослщження», затверджених наказом МОЗ вщ 04.01.2001 №1.
Оценка результатов проведенных исследований проводилась с помощью программы STATISTICA для Windows (версия 10.0), Microsoft Excel 2012, MATLAB 2015a.
Результаты исследования и их обсуждение. У детей больных РеА в остром периоде микробиологические исследования кала позволили выявить различные нарушения в составе микробной флоры кишечника. Выявлено снижение титров основных показателей кишечной флоры в виде снижения полноценной кишечной палочки у 32,5%, снижение количества бифидобактерий на 1-2 порядка у 37,5% и выраженного дефицита бифидобактерий у 62,5%. Отмечалось значительное снижение лактобактерий у 75%, а у 15% они отсутствовали. На фоне угнетения нормальной микрофлоры кишечника наблюдалась пролиферация условно-патогенных микроорганизмов в 57,5% случаев, таких как Klebsiella pneumoniae, Enterobacter aerogenes Citrobacter freundii Enterobacter cloaca. Выявлены следующие деффектные формы E. Coli: кишечные палочки со слабовыраженными ферментативными свойствами - 30%, гемолизирующие кишечные палочки - 30%. Повышение кокковых форм в общей сумме отмечены у 27,5% (Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium, Staphylococcus epidermidis), грибы рода Candida у 22,5%, патогенный стафилококк у 12,5% (рис.1).
Патогенный стафилококк
Бифидобактерии
Лактобактерии
Норма (10*6-10*9); 0%
Не
выделены; __—д„ 15% ^'llllll
Норма (10*8-10л10); 0%
Снижены (до10*8-10*7); 37.50%
A. 'SSSSSSSSSSSSSSSSS/SSSSSSSSSSSSSSSSSSSSSS'. -1, 'tf •Ss'SSSSSSSS'SSSSSSSSS/SSSSSSSSSSSSSSSfSSSSSi.
С ннжеНы''^ '^/^^/^//^•'''''•'//''/''•'■''•'''■''/•'''■'//i
,<f '■'SSSSSSSSS/SSSSSSSSSSS/SSS/SSSSSS^^^k
(до 10л7 Й 'tj. '¿ff' ■'S/SSSSSSS'SSSSSSSSSS ннже); ''''S,,,'"'"". 62.50%
Грибы рода Candida
4
. Норма
(<10*3); 77.50%
Условно-патогенная флора
Протей
Повышена (> 10Л5) (Klebsiella pneumoniae; Enterobacter aerogenes; Citrobacter freundii; Enterobacter cloacae): 57.5%
Повышен (>10*3); 0%
Норма (< 10л5); 42,5%
Рис. 1. Показатели микрофлоры в содержимом толстой кишки у больных РеА, острое течение.
Норма (< 10*3); 100%
Таким образом, выявленные изменения микробного пейзажа кишечника в пользу его заселения потенциально патогенных микроорганизмов объясняется снижением колонизационной резистентности нормальной микрофлоры. При этом заселение организма больного посторонними микробами приводит к их транслокации через стенку кишечника и возникновению эндогенной инфекции или суперинфекции различной локализации. Повышенная проницаемость при дисбиозе сквозь кишечную стенку антигенов бактерий и их токсинов выступает в качестве важного фактора сенсибилизации организма к микробным антигенам и развития РеА.
Учитывая характер микробной флоры кишечника у 15 (37,5±8,7%) детей больных РеА с острым течением была установлена I степень дисбиоза, а у 25 (62,5±8,7%) - II степень дисбиоза.
Учитывая, что микрофлора кишечника является одним из ключевых регуляторов иммунной системы организма проведен анализ иммунологических показателей в зависимости от степени дисбиоза у больных с острым течением РеА (табл. 1).
Как видно из представленной таблицы в остром периоде РеА у детей установлено депрессия Т-системы на фоне активации В-системы иммунитета в виде достоверного снижения относительного и абсолютного содержания Т-лимфоцитов-супрессоров (СБ8), относительного числа активных Т-лимфоцитов (СБ25) и увеличения относительного содержания В-лимфоцитов (СБ21). Выявлено повышение по сравнению с нормативом провоспалительного цитокина ИЛ-6. Что касается функциональной активности фагоцитирующих клеток крови в остром периоде РеА, то установлено достоверное увеличение фагоцитарного числа, спонтанного НСТ-теста.
Таблица1
Показатели иммунитета у больных с острым течением РеА в зависимости от степени _дисбиоза_
Показатель Контрольная группа n=23 Острое течение p* Статистика x2
Степень дисбиоза I n=15 Степень дисбиоза II n=25
CD8, % 28,0 (26,0; 33,0) 26,0 (24,0; 29,2) 25,0 (23,1; 28,8) p<0,01 10,16
CD21, % 18,0 (13,0; 21,0) 20,5 (18,0; 24,0) 20,0 (16,8; 24,1) p<0,01 12,39
T-лимфоциты, CD 25, тыс. 0,86 (0,46; 1,33) 0,62 (0,39; 1,34) 0,52 (0,4; 0,7) p<0,01 9,8
Фагоцитарнон число 3,3 (1,8; 3,9) 3,5 (2,6; 4,1) 3,9 (3,2; 4,2) p<0,01 30,94
НСТ спонтанный,% 9,7 (8,0; 11,0) 31,0 (22,7; 33,9) 31,0 (25,0; 35,0) p<0,01 30,9
Индекс активности нейтрон-филов спонтанный, ед. 0,12 (0,11; 0,19) 0,62 (0,45; 0,76) 0,57 (0,47; 0,78) p<0,01 30,94
НСТ стимулированный,% 70,0 (49,0; 77,0) 70,5 (56,0; 75,0) 74,0 (63,0; 78,0) p<0,01 5,1
Индекс активности нейтрон-нилов стимулированный, ед. 1,4 (0,9; 1,5) 1,5 (0,9; 1,6) 1,5 (1,3; 1,5) p<0,01 7,74
ИЛ-6, пкг/мл 2,07 (0,65; 5,71) 3,74 (1,55; 40,2) 6,22 (1,24; 31,4) p<0,01 6,09
Примечание: р* - достоверность различия между контрольной группой, группой с острым течением со степенью дисбиоза I и группой с острым течением со степенью дисбиоза II.
Это свидетельствует о том, что несмотря на высокую функциональную активность фагоцитарного звена иммунитета, его резервы недостаточны для полноценной элиминации организма от антигенной нагрузки. Эти изменения более выражены у детей со II степенью дисбиоза (p<0,01). Проведен
корреляционный анализ. Установлена обратная корреляционная связь между лактобактериями и НСТ-тестом, спонтанным (r=-0,49, р<0,05), общим количеством кишечной палочки и ИЛ-6 (r=-0,5, р<0,05).
Прямая корреляционная связь была отмечена между грибами рода Candida и фагоцитарным числом (r=0,47, p<0,05) и грибами рода Candida и CD21 (r=0,51, p<0.05) (рис.2). Полученные результаты подтверждают важную иммуннорегулирующую роль микрофлоры кишечника у детей больных РеА.
Рис. 2. Корреляционные связи иммунитета и микрофлоры кишечника.
между показателями
1. У всех (100%) детей больных РеА в остром периоде установлены нарушения кишечного микробиоценоза кишечника. II степень дисбиоза (субкомпенсированная) определена у 62,5%, а I степень (компенсированная) - у 37,5%.
2. Острое течение РеА у детей характеризуется изменениями иммунологического гомеостаза в виде снижения относительного содержания CD8, CD25 и повышением уровня CD21, ИЛ-6, фагоцитарного числа и НСТ-теста, спонтанного и эти изменения более выражены у детей со II степенью дисбиоза
3. У больных РеА отмечены достоверные связи между состоянием микробиоценоза в толстом кишечнике и иммунологическим гомеостазом, а именно: прямые - содержание грибов рода Candida с фагоцитарным числом и CD21; обратные - между общим количеством кишечной палочки и ИЛ-6, числом лактобактерий и спонтанным НСТ-тестом.
Перспективы дальнейших исследований в данном направлении. Установленные достоверные связи между состоянием микробиоценоза в толстом кишечнике больных и иммунологическим гомеостазом в перспективе позволят клиницисту осуществить косвенную диагностику последнего не прибегая к инвазивному иммунологическому обследованию больных.
1. Гапонова Т.В. Клинико-иммунологические взаимосвязи при реактивных артритах различной этиологии. Дис. канд. мед. наук: спец. 14.00.05. / Т.В. Гапонова.-Санкт-Петербург, 2009.- С. 5.
2. Квашнша Л.В. Стан мжробюценозу та мюцевого iмунiтету кишечника у здорових д^ей раннього вжу: результати дослщження / Л.В. Квашнша, I.M. Матвieнко // Здоровье ребенка.-2014.-№6.-С. 38-42.
3. Коваленко В.М. Нацюнальний тдручник з ревматологи /В.Н. Коваленко, Н.М. Шуба.-К.: МОРЮН, 2013.-672с.
4. Копанев Ю.А. Взаимосвязь функции местного иммунитета и микробиоценоза кишечника, возможности иммунокоррекции дисбактериоза / Ю.А. Копанев // Лечащий врач. - 2009. - № 9. - С. 66-69.
5. Марушко Т.В. Реактивш артропатн у дтей / Т.В. Марушко // Здоров'я Укра'ши. - 2012.-№2.-С. 43-44.
6. Омельченко Л.И. Актуальные вопросы вторичной профилактики суставного синдрома у детей / Л.И. Омельченко, Е.А. Ошлянская // Современная педиатрия.-2010.-№1 (29).-С.43-47.
7. Родюнов В.П., Матвieнко I.M., Квашнiна Л.В., Кравченко О.М. Вплив кисломолочно! продукцп на мжробюценоз та мiсцевий iмунiтет кишечника у дтей раннього вiку: результати дослщження/ В.П. Родiонов, I.M. Матвieнко, Л.В. Квашнша, О.М. Кравченко // Современная педиатрия.-2014.-№1.-С. 113-121.
8. Савво В.М. Реактивные артриты у детей, связанные с носоглоточной инфекцией / В.М. Савво, Ю.В. Сороколат // Международный медицинский журнал.-2003.-Т.9,№2.-С.128-131.
9. Шадрин О.Г. К вопросу формирования эубиоза кишечника при искусственном вскармливании детей грудного возраста / О.Г. Шадрин, В.П. Мисник, И.Г. Пономарева, Л.А. Клименко // Современная педиатрия.-2014.-№ 1(57).-С. 122-126.
10. Янковский Д.С. Место дисбиоза в патологии человека / Д.С. Янковский, Р.А. Моисеенко, Г.С. Дымент // Современная педиатрия.-2010.-№1 (29).-С.154-167.
11. Hannu T. Reactive arthritis / T. Hannu // Best Practice & Research Clinical Rheumatology. - 2011.- №25. - P.347-357.
СТАН М1КРОБ1ОЦЕНОЗУ КИШЕЧНИКА I 1МУН1ТЕТУ У Д1ТЕЙ ХВОРИХ РЕАКТИВНИМИ АРТРИТАМИ В ГОСТРОМУ ПЕР1ОД1 Твердохлеб Т.А.
Визначено частоту i стутнь порушень мкробюценозу кишечника у дтей хворих на РеА в гострому перюдг II стутнь дисбюзу встановлено у 62,5%, I стутнь - у 37,5% дтей. Встановлено особливост порушень iмунологiчного гомеостазу хворих в гострому перiодi РеА у виглядi депресп Т-системи i активiзацii В -системи, процеав фагоцитозу, продукцii !Л-6. Виявленi достовiрнi прямi зв'язки мiж вмiстом грибiв роду Candida, фагоцитарно! ланки i СD21, а також зворотш кореляцii мiж кiлькiстю кишково! палички i рiвнем IЛ-6, змютом лактобактерiй i спонтанним НСТ-тестом. Отримаш результати пiдтверджують важливу iмунорегулюючу роль мiкрофлори кишечника у хворих на РеА.
Ключовi слова: дт, реактивнi артрити, мiкрофлора кишечника, iмунiтет.
Стаття надiйшла 27.02.2016 р.
CONDITION GUT MICROBIOTA AND THE IMMUNE SYSTEM IN CHILDREN WITH REACTIVE ARTHRITIS IN THE ACUTE PERIOD Tverdohleb T. A.
Determined the frequency and extent of violations of the intestinal microbiota in children with CEA in the acute period. Grade II dysbiosis set to 62,5%, I degree - in 37.5% of children. The peculiarities of immunological homeostasis disorders patients in acute depression CEA as T-Systems and activation of B -system processes of phagocytosis, production of IL-6. Identified reliable direct connections between the content of fungi of the genus Candida, phagocytic links and SD21 and inverse correlation between the number of E. coli and the level of IL-6 content of lactobacilli and spontaneous NBT-test. These results confirm the important role of immune-regulating intestinal microflora in patients with CEA.
Key words: children, reactive arthritis, intestinal microflora, immunity.
Pe^roeHT noxH^bKO B. I.
УДК 616.716.1/.4-053.4/.5-006.03
ОСТЕОБЛАСТОКЛАСТОМА ЩЕЛЕП У Д1ТЕИ: КЛ1Н1КО-МОРФОЛОГ1ЧНА
ХАРАКТЕРИСТИКА
Остеобластокластоми щелепних исток у д^ей найчастше зустрiчаються у вжовш грут вщ 8 до 16 роюв, мають своерщну клшжо-морфолопчну картину i потребують радикального хiрургiчного лжування для запобшання розвитку рецидивiв. Наведений матерiал може стати тдгрунтям для подальших поглиблених науково-практичних дослщжень по вивченню ролi провокуючих дизонтогенетичних процеав й застосування високоiнформативних методiв ранньо! дiагностики остеобластокластом у д^ей для визначення оптимальних тактичних варiантiв по !х лiкуванню в залежност вiд класифiкацiйноi приналежностi.
Ключов! слова: д1ти, остеобластокластома, щелепш истки.
Робота е фрагментом НДР "1нтегративно-диференцшоване обгрунтування вибору оптимальных методик оперативних втручань та обсягу л^вальних заходiв при хiрургiчнiй патологи щелепно-лицевоI дшянки ", державний реестрацшний номер 011би003821.
Остеобластокластома (ОБК) (остеобластома, остеокластома, пгантокттинна пухлина, центральна пгантокл1тинна гранульома, пгантокл1тинна репаративна гранульома) - доброяюсна
