CC BY
18__ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ
2017, том 20, №3
УДК 616.311.2-002:615.32-08-053.2/.6
СОСТОЯНИЕ ЛОКАЛЬНЫХ ЗАЩИТНЫХ СИСТЕМ ПОЛОСТИ РТА У ДЕТЕЙ ПРЕПУБЕРТАТНОГО ВОЗРАСТА ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ КАТАРАЛЬНОМ ГИНГИВИТЕ И ЕГО ЛЕЧЕНИИ
Довбня Ж. А.1, Колесник К. А.2, Головская Г. Г.3
Кафедра пропедевтики стоматологии 2кафедра детской стоматологии
Зкафедра биохимии, Медицинская академия имени С. И. Георгиевского ФГАОУ ВО «Крымский федеральный университет имени В. И. Вернадского», 295051, бульвар Ленина, 5\7, Симферополь, Россия
Для корреспонденции: Довбня Жанна Александровна, ассистент кафедры пропедевтики стоматологии, Медицинская академия имени С. И. Георгиевского ФГАОУ ВО «Крымский федеральный университет имени В. И. Вернадского», е-mail: [email protected]
For correspondence: Zhanna A. Dovbnya, assistant at Department of propedeutics of dentistry Medical Academy named after S. I. Georgievsky of Vernadsky CFU, Simferopol, Russia
Information about authors:
Dovbnya Zh. A., http:\\orcid.org\ 0000-0002-1544-2384 Kolesnik K. A., http:\\orcid.org\ 0000-0002-0116-6809 Golovskaya G. G., http:\\orcid.org\ 0000-0001-7060-9581
РЕЗЮМЕ
Исследовано влияние локальных защитных систем полости рта (уровня модифицированного альбумина и активности лизоцима) в ротовой жидкости детей препубертатного возраста с хроническим катаральным гингивитом в динамике лечения комбинацией эфирных масел мяты, сосны, фенхеля и эвкалипта в сочетании с бентонитовой глиной. При воспалительных заболеваниях пародонта отмечается изменение факторов неспецифической защиты полости рта, увеличивается количество патогенной микрофлоры. При этом снижается уровень лизоцима, что является результатом нашего исследования. При повреждении эпителиоцитов увеличивается количество патологических метаболитов, которые связываются с белком, и это приводит к увеличению модифицированного альбумина.
Проведенное лечение за счет антибактериальных свойств препаратов увеличивало количество пробиотической микрофлоры, способствовало выраженному повышению активации антимикробной защиты, увеличению лизоцима и снижению модифицированного белка, демонстрирующего нормализацию метаболитных процессов до показателей контрольной группы детей во всех сроках исследования. Процесс модификации альбумина характеризует степень активации неспецифической защиты полости рта.
Предложенное лечение оказывает выраженный лечебный эффект, длительную стабилизацию процесса за счет антибактериального, противовоспалительного, антиоксидантного, мембраностабилизирующего действия эфирных масел и бентонитовой глины, способствующие синтезу белков, активирующие метаболизм, микроциркуляцию и процессы регенерации и как следствие - активации защитных механизмов полости рта.
Ключевые слова: хронический катаральный гингивит; дети; модифицированный альбумин; лизоцим; эфирные масла; бентонитовая глина.
LOCAL PROTECTIVE SYSTEMS OF THE ORAL CAVITY IN CHILDREN OF PREPUBERTAL AGE WITH CHRONIC CATARRHAL GINGIVITIS AND ITS TREATMENT
Dovbnya Zh. A., Kolesnik K. A., Golovskaya G. G.
Medical Academy named after S. I. Georgievsky of Vernadsky CFU, Simferopol, Russia
SUMMARY
The influence of local protective systems of the oral cavity (the level of modified albumin and activity of lysozyme) in the saliva of prepubertal children with chronic catarrhal gingivitis in the dynamics of treatment with the combination of essential oils of mint, pine, fennel and eucalyptus in combination with bentonite clay. Inflammatory periodontal disease is a change of the factors of nonspecific protection of the oral cavity, increasing the number of pathogenic microorganisms. This reduces the levels of lysozyme, which is the result of our study. If the damage of epithelial cells increases the number of abnormal metabolites that bind to the protein and this leads to higher modified albumin.
The treatment due to the antibacterial properties of the drugs increased the number of probiotic microflora, contributed to a significant increase in the activation of antimicrobial protection, increase of lysozyme and the reduction of the modified protein showing the normalization of metabolic processes to the control group of children in all study periods.The process of modification of albumin characterizes the degree of activation of nonspecific protection of the oral cavity.
The proposed treatment has a pronounced therapeutic effect, long-term stabilization process due to the
antibacterial, anti-inflammatory, antioxidant, membrane-stabilizing action of essential oils and bentonite clay that promotes protein synthesis, activates the metabolism, microcirculation and regeneration processes and as a consequence the activation of protective mechanisms of the oral cavity.
Key words: chronic catarrhal gingivitis, children, modified albumin, lysozyme, essential oils, bentonite
Важнейшим пусковым механизмом воспалительной реакции при хроническом катаральном гингивите (ХКГ) является микробная инфекция и дисметаболическое повреждение эпителиоцитов за счет факторов, образованных вследствие вторичной альтерации, медиаторов воспаления, активацией свободнорадикального окисления, окислительной модификацией, ферментной агрессией лизосомальных протеаз, включением иммунных механизмов [1-3].
К защитным системам полости рта относится лизоцим - внеклеточный фермент, принадлежащий к группе веществ неспецифического иммунитета, который гидролизует гетерополисахарид -муреин в составе гликопротеина клеточной стенки бактерии, что приводит к изменению проницаемости мембраны, лизису и фагоцитозу. К другому неспецифическому фактору можно отнести альбумин (белок «острой фазы»), который наиболее четко реагирует на любые изменения организма. Присоединение продуктов обмена сопровождается гетерогенным конформационным переходом молекулы альбумина, что приводит к появлению структурно измененных молекул белка - модифицированных форм [4-7]. Гетерогенный конформационный переход является первой фазой неспецифической защитной реакцией организма, позволяющей организовать ее в минимальный срок с последующим развитием каскадных механизмов [8]. Известно, что модифицированные белки теряют функциональную активность, активируются стрессовые гены через систему убиквитина, катализирующего протеолиз этого белка и связывание поврежденных форм белка с макрофагами.
Целью работы явилось изучение влияния комплекса средств природного и минерального происхождения Крыма - эфирных масел и бентонитовой глины на уровень модифицированного альбумина и активность лизоцима в ротовой жидкости детей с хроническим катаральным гингивитом.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
В клинических исследованиях приняло участие 38 детей (21 мальчик, 17 девочек) в возрасте 8-11 лет с хроническим катаральным гингивитом, которые были разделены на 2 группы. Основной группе (п=18) назначали аппликации смеси эфирных масел мяты, сосны, фенхеля, эвкалипта в соотношении 1:1:1:1 в комплексе с бентонитовой глиной (1:10). Эфирным маслам присущий широкий спектр физиологического действия, который
создает дополнительные возможности влияния на организм [9]. Экспозиция аппликаций - 20 минут, курс лечения - 10 процедур ежедневно. В группе сравнения (n=20) детям проводили базовое лечение. Контрольную группу составили 15 детей с клинически здоровыми тканями пародонта.
Исследование было выполнено в соответствии со стандартами надлежащей клинической практики (Good Clinical Practice) и принципами Хельсинской декларации. Протокол исследования был одобрен Этическим комитетом Крымской медицинской академии имени С. И. Георгиевского. Родителей всех обследуемых детей информировали о проводимом исследовании, и они дали письменное добровольное согласие в соответствии со статьей 20 Федерального закона «Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации» от 21.11.2011 И0323-Ф3.
Для исследования ротовую жидкость собирали натощак после ополаскивания полости рта 0,9% изотоническим раствором NaCl. Оценку факторов неспецифической защиты полости рта осуществляли по содержанию лизоцима [10] и модифицированного альбумина (Ам) [11]. Контроль терапевтического воздействия на состояние пародонта у детей с ХКГ осуществляли после проведенного курса лечения (10 дней) и через 6 месяцев.
Статистическая обработка данных проводилась с использованием методов параметрической и непараметрической статистики. Для оценки степени взаимосвязей проводился корреляционный анализ с вычислением парных коэффициентов корреляции Спирмена (r).
РЕЗУЛЬТАТЫ
Данные исследования содержания лизоцима и модифицированного альбумина в ротовой жидкости детей с ХКГ в динамике лечения представлены в таблице 1.
Полученные результаты свидетельствуют, что у детей с хроническим катаральным гингивитом наблюдалось достоверное отличие (р<0,001) изучаемых показателей с данными, зафиксированными у детей контрольной группы. Активация неспецифического иммунитета более выражена у детей после лечения с применением комплекса эфирных масел с бентонитовой глиной (основная группа). Содержание лизоцима повышается по сравнению с исходными значениями, и результаты соответствуют показателям контрольной группы детей, оставаясь без изменения после проведенного лечения и в от-
2017, том 20, №3
Таблица 1
Влияние лечения на уровень маркеров неспецифического иммунитета в ротовой жидкости детей с ХКГ
Группы обследованных Кол-во Возраст Биохимические показатели
Лизоцим ед/мл Модифицированный альбумин %
Срок исследования
исходный 10 дней 6 мес исходный 10 дней 6 мес
Основная группа 18 8-11 лет 0,024± 0,004 0,040± 0,003 р<0,001 0,041± 0,004 р<0,001 18,52± 1,02 10,85± 0,83 р<0,001 11,10± 0,63 р<0,001
Сравнения 20 0,024±0,004 0,036± 0,005 р<0,01 р,>0,05 0,033± 0,003 р>0,05 р1<0,01 18,57±1,07 11,59± 0,96 р<0,001 р1>0,05 12,39±0,84 р<0,001 р1>0,05
Контроль 15 0,040±0,002 10,80±0,67
Примечание: р - достоверность отличий с исход] группами
даленные сроки. Наблюдается снижение содержания Ам до уровня значений у детей с интактным пародонтом, значения сохраняются такими же и на протяжении 6 месяцев после лечения, что демонстрирует нормализацию метаболитных процессов. При использовании медикаментозной терапии (группа сравнения) содержание лизоцима увеличивается по отношению к результатам до лечения с незначительным снижением через 6 месяцев, показатели не достигают контрольных величин. Наблюдается тенденция к нормализации показателей модифицированного белка, содержание которого снижается с некоторым повышением в отдаленные сроки и отличается от данных у здоровых детей.
ОБСУЖДЕНИЕ
Изучение основного антимикробного фактора ротовой полости - лизоцима - показало активность этого фермента на первичном этапе исследования, что указывает на снижение неспецифического иммунитета, однако после 10-дневного лечения в обеих изучаемых группах уровень лизо-цима достоверно повышается. Активация неспецифической резистентности более выражена у детей в основной группе, содержание лизоцима повышается в 1,7 раз по сравнению с результатами до лечения и достигли значений показателей контрольной группы детей. Показатели не изменились и в более длительные сроки - через 6 месяцев, тогда как в группе сравнения содержание лизоцима увеличилось в 1,5 раз и в 1,4 раза соответственно сроков исследования. Регулярное применение комбинации смеси эфирных масел с бентонитовой глиной способствовало более выраженному повышению активации антимикробной защиты полости рта детей при ХКГ, так как уровень лизоцима ротовой
м состоянием; р1 - достоверность отличий между
полости превышает в 1,2 раза соответствующее значение в группе сравнения и в 1,7 раз данных исходного уровня.
Наблюдаемое снижение содержание модифицированного альбумина в 1,7 раз, оставаясь в пределах значений контрольной группы и через 6 месяцев исследования в основной группе демонстрирует влияние эфирных масел на оральный биоценоз, так как использованные препараты обладают противовоспалительным, антиоксидант-ным, мембраностабилизирующим действием, способствуют синтезу белков, активируют метаболизм, микроциркуляцию и процессы регенерации. Положительная динамика отмечается и в группе сравнения, однако, несмотря на снижение уровня Ам в 1,6 раз по сравнению с исходным значением, не достигает контрольных величин в отдаленные сроки после лечения, превышая значение показателей в 1,2 раза в сравнении с группой.
Следует отметить выявленную нами корреляционную зависимость содержания лизоцима и модифицированных форм альбумина, особенно выраженную в основной группе, что обуславливает активность защитных механизмов при развитии патологии (рис. 1).
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
На основании проведенного исследования сделано заключение, что предложенное лечение эфирными маслами с бентонитовой глиной оказывает выраженный лечебный эффект и длительную стабилизацию процесса за счет активации защитных механизмов.
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Грудянов А. И., Фролова О. А, Исаджанян К. Е., Попова В. М. Состав микрофлоры полости рта у пациентов с начальными формами воспалительных заболеваний пародонта. Стоматология. 2016;2(6):67.
2. Галкина О. П. Распространенность воспалительных заболеваний пародонта у больных юве-нильным ревматоидным артритом. Пародонтоло-гия. 2016;80(3):53-56.
3. Horvath O.N, Kapser C, Sardy M. Inflammatory diseases of oral mucous membranes.Hautarzt. 2016;67(10):786-792.
4. Антонова И. Н., Косова Е. В., Останина О. Н. Связь показателей местной неспецифической и иммунной защиты с рН ротовой жидкости у молодых пациентов с воспалительными заболеваниями пародонта. Пародонтология. 2015;77(4): 45-48.
5. Attallah C, Etcheverrigaray M, Kratje R, Oggero M. A highly efficient modified human serum albumin signal peptide to secrete proteins in cells derived from different mammalian species. Protein Expr Purif. 2017;132:27-33.
6. Chung J, Ku SK, Lee S, Bae JS. Suppressive effects of lysozyme on polyphosphate-mediated vascular inflammatory responses. Biochem Biophys Res Commun. 2016;474(4):715-721.
7. Morzel M, Palicki O, Chabanet C, Lucchi G, Ducoroy P, Chambon C, Nicklaus S. Saliva electrophoretic protein profiles in infants: changes with age and impact of teeth eruption and diet transition. Arch Oral Biol. 2011;56(7):634-642.
8. Троицкий Г. В., Борисенко С. Н., Касымова Г. А. Инвертированный метод обработки электро-фореграмм для выявления модифицированного альбумина. Лаб. дело. 1986;4: 220-231.
эк 1
9. Патент 25592, Украша, МПК А 61 К 6/00 Спосiб лкування гшпвггу / Довбня Ж. О., Сисоев М. П., Деньга О. В. - № 25592; заявл. 18.04.2007; опубл. 10.08.2007; Бюл. № 12.
10. Ферментативный метод определения дис-биоза полости рта для скрининга про- и пребио-тиков: метод. рекомендации / сост. А. П. Левицкий, О. А. Макаренко, И. А. Селиванская и др. К.:ГФЦ. 2007:22.
11. Довбня Ж. А., Головская Г. Г. Уровень модифицированного альбумина в слюне у детей с хроническим катаральным гингивитом. Вкник стоматологи. 2011;2:98-100.
REFERENCES
1. Grudyanov A. I., Frolov O. A., Isajanian, K. E., Popova V. M. The composition of the microflora of the oral cavity in patients with primary forms of inflammatory periodontal diseases. Dentistry. 2016;2(6):67. (In Russ).
2. Galkina O. P. Prevalence of inflammatory periodontal diseases in patients with juvenile rheumatoid arthritis. Periodontics. 2016;80(3):53-56. (In Russ).
3. Horvath ON, Kapser C, Sardy M. Inflammatory diseases of oral mucous membranes.Hautarzt. 2016;67(10):786-792.
4. Antonova I. N., Kosova E. V., Ostanina O. N. The relationship of indicators of local and non-specific immune protection with a pH of oral fluid in young patients with inflammatory periodontal disease. Periodontics. 2015;77(4): 45-48. (In Russ).
5. Attallah C, Etcheverrigaray M, Kratje R, Oggero M. A highly efficient modified human serum albumin signal peptide to secrete proteins in cells derived from different mammalian species. Protein Expr Purif. 2017;132:27-33.
2017, TOM 20, №3
6. Chung J, Ku SK, Lee S, Bae JS. Suppressive effects of lysozyme on polyphosphate-mediated vascular inflammatory responses. Biochem Biophys Res Commun. 2016;474(4):715-721.
7. Morzel M, Palicki O, Chabanet C, Lucchi G, Ducoroy P, Chambon C, Nicklaus S. Saliva electrophoretic protein profiles in infants: changes with age and impact of teeth eruption and diet transition. Arch Oral Biol. 2011;56(7):634-642.
8. Troitskiy G. V., Borisenko S. N., Kasymova G. A. The inverted method processing electrophoregram for detecting modified albumin. Lab. business. 1986;4: 220 - 231. (In Russ).
9. Patent 25592 Ukraine, IPC A 61 K 6/00 А method for the treatment of gingivitis / Dovbnya J. A., Sysoev N. P., Denga O.V. - № 25592; Appl. 18.04.2007; published. 10.08.2007; bull. № 12. (In Ukr).
10. Enzymatic method for the determination of dysbiosis of the oral cavity for screening Pro - and prebiotics: method. recommendations / comp. A. P. Levitsky, O. A. Makarenko, I. A. Selivansky etc. K.:SPC. 2007:22. (In Russ).
11. Dovbnya J. A., Golovskaya G. G. Level of modified albumin in saliva of children with chronic catarrhal gingivitis. Stomatolog. 2011;2:98-100. (In Russ
