CC BY
21
№ 11 (65)
ноябрь, 2019 г.
СКРИНИНГ МИКРООРГАНИЗМОВ-БИОСИНТЕТИКОВ ОРГАНИЧЕСКИХ КИСЛОТ ДЛЯ ОБРАБОТКИ КАОЛИНОВ С ЦЕЛЬЮ УЛУЧШЕНИЯ ИХ КАЧЕСТВА
Исматов Азамат Муйдинжонович
ст. преп. Наманганского Университета, РУз, Узбекистан, г. Наманган E-mail: [email protected]
Зайнитдинова Людмила Ибрахимовна
д-р биол. наук, профессор, зав. лабораторией Института микробиологии АН РУз,
Узбекистан, г. Ташкент E-mail: zajn-lyudmila@yandex. ru
Куканова Светлана Ивановна
канд. биол. наук, ст. науч. сотр. Института микробиологии АН РУз,
Узбекистан, г. Ташкент E-mail: [email protected]
SCREENING OF MICROORGANISMS-BIOSYNTHESIZERS OF ORGANIC ACIDS FOR KAOLINS' TREATMENT TO IMPROVE THEIR QUALITY
Azamat Ismatov
Senior teacher of Namangan University, Uzbekistan, Namangan
Lyudmila Zaynitdinova
Doctor of Biological Sciences, Professor, Chief of the lab Institute of microbiology AS RUz,
Uzbekistan, Tashkent
Svetlana Kukanova
Candidate of Biological Sciences, Senior scientists, Institute of microbiology AS RUz,
Uzbekistan, Tashkent
АННОТАЦИЯ
Получены микроорганизмы, синтезирующие лимонную кислоту: Aspergillus niger шт.2 - 64 мг/мл и Aspergillus terreus шт.1 - 33 мг/мл. Составлена дешевая питательная среда на основе компонентов растительных отходов для культивирования силикатразрушающих микроорганизмов. Показана возможность использования данных микроорганизмов для обработки каолинов с целью повышения их качества.
ABSTRACT
Microorganisms synthesizing citric acid were obtained: Aspergillus niger 2 - 64 mg/ml and Aspergillus terreus 1 -33 mg/ml. The cheap nutrient medium for cultivation of silicate destructing microorganisms was composed on basis of components of plants wastes. The possibility of use of these microorganisms for kaolins' treatment to improve their quality was revealed.
Ключевые слова: микроорганизмы, лимонная кислота, биосинтез, каолин.
Keywords: microorganisms, citric acid, biosynthesis, kaolin.
Узбекистан располагает богатейшими залежами первичных и вторичных каолинов и занимает третье место среди стран СНГ после Украины и России [1]. Разведанные запасы каолина в республике сосредоточены на крупнейшем Ангренском комплексном месторождении, которое является единственным столь крупным месторождением в Центральной
Азии [2,3]. В то же время, есть ряд причин сдерживающих комплексное использование глинистого сырья республики, к ним относится недостаточность фундаментальных исследований по улучшению его качества. Повысить характеристики глин и керамических масс позволяют как традиционные (механическое измельчение каолиновой породы и сепарат-
Библиографическое описание: Исматов А.М., Зайнитдинова Л.И., Куканова С.И. Скрининг микроорганизмов -биосинтетиков органических кислот для обработки каолинов с целью улучшения их качества // Universum: Химия и биология : электрон. научн. журн. 2019. № 11(65). URL: http://7universum.com/ru/nature/archive/item/7922
№ 11 (65)
ное разделение в вихревых гидромельницах (гидроциклонах) дезинтеграцию, электромагнитную сепарацию и др.,) так и новые методы воздействия, к которым можно отнести биотехнологические методы обработки каолинов [4]. Суть этих методов состоит в обработке каолинов культуральной жидкостью бактерий [5]. Такой нетрадиционный подход к решению вопросов обогащения каолинов представляет определенный интерес. Кроме всего прочего, он является приемлемым как в плане экологии, так и экономичности и успешно сочетает как обезжелез-нение каолинов, так улучшение его белизны.
Работы по обезжелезнению каолинов имеют место в мировой практике [6] однако, применительно к местным каолинам до сих пор не разработана технология и проблема остается открытой.
В связи с вышесказанным, целью данной поиск микроорганизмов, активных продуцентов органических кислот с целью их использования для обезже-лезнения и улучшения качества каолинов Ангрен-ского месторождения.
Известно, что белизна каолинов зависит от многих показателей и, в том числе, от соотношения окислов железа и титана [7]. Так, при содержании в фарфоре 0,5% Fe2Oз, она не влияет на цвет черепка при отсутствии ТО2, который будучи бесцветным, влияет на окраску изделий только в присутствии оксида железа. Даже 1% TiO2 в сочетании с 0,4 % Fe2Oз окрашивает фарфоровый черепок также интенсивно, как 0,7% Fe2Oз без TiO2 [8]. Таким образом, проблема обезжелезнения каолинов тесно связана с содержанием в продукте окислов железа и титана, что учитывалось нами в проведении лабораторных опытов по отработке некоторых параметров выщелачивания.
Известно, что после обработки тионовыми же-лезоокисляющими бактериями происходит образование на поверхности многих минералов довольно прочных пленок гидроокислов железа [9]. Оттирка от них возможна как за счет абразивного действия, так и в присутствие различных органических кислот или соляной кислоты, причем применение последней очень эффективно. Однако применение соляной кислоты требует значительных расходов (кислотоустойчивое оборудование и природоохранные меро-
ноябрь, 2019 г.
приятия). В связи с этим применение силикатных микроорганизмов, способных синтезировать органические кислоты, способствует эффективному растворению вторичных образований железа в виде выпавших гидроокислов железа после обработки ассоциацией железоокисляющих микроорганизмов [10].
В процессах деструкции силикатных и алюмо-силикатных минералов участвуют представители различных физиологических групп микроорганизмов. Это и автотрофные микроорганизмы родов Acidithiobacillus и Thiobacillus. Среди гетеротрофных микроорганизмов активными в деструкции силикатных минералов являются представители микроскопических грибов, относящиеся к родам Aspergillus, Fuzarium, Mucor, Pénicillium, Trichoderma. Как известно многие из этих микроорганизмов являются активными продуцентами минеральных и органических кислот, полисахаридов, а также активных комплексообразователей, что, очевидно, можно связать с активизацией процессов деструкции силикатных минералов в присутствии микроорганизмов и предположить косвенность механизма микробиологической деструкции минералов [4, 11]. Вместе с тем, из проведенных до настоящего времени исследований не ясно, как влияют условия культивирования на количество и состав этих метаболитов, имеющиеся данные разрознены и порой противоречивы. Задача наших исследований заключалась в установлении влияния условий культивирования на свойства культуральной жидкости, свидетельствующей о накоплении метаболитов.
Исходя из вышеизложенного, в коллекции лаборатории были отобраны различные штаммы микроорганизмов, обладающие способностью к синтезу органических кислот. Данные микроорганизмы исследовались нами на способность синтезировать органические кислоты как на питательной среде, так и на среде с добавлением каолина (табл.1).
Исследуемые нами микроорганизмы обладали различной степенью активности в отношении синтеза лимонной кислоты. Наиболее активными оказались штаммы Aspergillus niger шт. 1 и шт.2, а также и Aspergillus terreus шт. 1 и шт. 2, которые были отобраны для следующих экспериментов.
Таблица 1.
Способность микроорганизмов к образованию органических кислот
№ Наименование микроорганизмов Количество лимонной кислоты, мг/мл
На питательной среде На среде с каолином
1. Aspergillus niger шт. 1 42,24 ± 0,04 30,0 ± 0,05
2. Aspergillus niger шт. 2 52,48 ± 0,02 50,4 ± 0,04
3. Aspergillus niger шт. 3 29,31 ± 0,03 21,12 ± 0,03
4. Aspergillus niger шт.4 12,9 ± 0,02 13,6 ± 0,02
5. Aspergillus terreus шт. 1 35,1 ± 0,04 28,5 ± 0,03
6. Aspergillus terreus шт. 2 19,3 ± 0,02 18,9 ± 0,04
7. Bacillus subtilis шт. к-9 8,9 ± 0,02 9,9 ± 0,05
8. Bacillus subtilis шт. кс-1 11,4 ± 0,01 11,8 ± 0,02
9. Bacillus mucilaginosus шт. l-1 7,8 ± 0,01 7,7 ± 0,01
№ 11 (65)
ноябрь, 2019 г.
10. Bacillus mucilaginosus шт. l-2 7,7 ± 0,02 9,9 ± 0,03
11. Bacillus mucilaginosus шт. l-3 7,7 ± 0,04 9,9 ± 0,05
12. Bacillus subtilis var.mycoides 8,1 ± 0,02 9,5 ± 0,01
13. Bacillus megaterium 7,8 ± 0,04 7,7 ± 0,04
14. Bacillus sp. 7,7 ± 0,05 7,7 ± 0,03
15. Penicillium orizae 19,7 ± 0,03 20,1 ± 0,01
16. Thrichodßrma harzianum шт. 24 12,0 ± 0,01 13,7 ± 0,04
17. Trichoderma harzianum шт. 4 12,4 ± 0,04 11,3 ± 0,03
Проведенные исследования по накоплению органических кислот в динамике установили, что максимальное его количество на элективной среде Чапека-Докса проявляется на 3-4 сутки культивирования и составляет 64 мг/мл для Aspergillus niger шт. 2 и 33 мг/мл для Aspergillus terreus шт. 1 (рис. 1).
1 2
Рисунок 1. Динамика накопления лимонной кислоты культурами Aspergillus niger (1)
и Aspergillus terreus (2)
Одна из особенностей микроорганизмов - их необычайная зависимость от условий окружающей среды. Известно, что соотношение и количество компонентов питательной среды могут оказать большое влияние на рост бактерий и их способность к синтезу различных метаболитов, в частности органических кислот [6, 12]. Нами был предпринят поиск дешевых компонентов питательной среды для культивирования гетеротрофных микроорганизмов - различных растительных отходов и предлагается оригинальный подход для культивирования сили-катразрушающих микроорганизмов с использованием растительных отходов.
Влияние содержания ВВР на
В качестве растительных отходов нами были взяты отработанная биомасса высших водных растений и растительная масса кукурузы. Были приготовлены питательные среды на основе минеральной среды Мандельса с содержанием растительных отходов 2, 3 и 4%, на которых культивировались отобранные нами микромицеты Aspergillus niger шт.2 и Aspergillus terreus шт.1.
Полученные результаты свидетельствуют, что максимальная активность проявляется при 3% растительной биомассы кукурузы и 3-4% отработанной биомассы высших водных растений (табл. 2,3).
Таблица 2.
опление лимонной кислоты
Наименование микромицетов Количество лимонной кислоты, мг/мл
1%ВВР 1%ВВР 1%ВВР 1%ВВР
Aspergillus niger шт.2 19,2±0,04 20,4±0,02 35,0±0,05 27,0±0,01
Aspergillus terreus шт.1 14,0±0,03 22,0 ± 0,05 31,0±0,02 31,0±0,01
Таблица 3.
Влияние содержания растительная биомасса кукурузы на накопление лимонной кислоты
Наименование микромицетов Количество лимонной кислоты, мг/мл
1% растительная биомасса кукурузы 1% растительная биомасса кукурузы 1% растительная биомасса кукурузы 1% растительная биомасса кукурузы
Aspergillus niger шт.2 17,0 ± 0,03 19,0 ± 0,05 27,0 ± 0,02 22,0 ± 0,025
Aspergillus terreus шт.1 12,0 ± 0,04 15,0 ± 0,02 19,0 ± 0,01 20,0 ± 0,04
№ 11 (65)
Таким образом, проведенный скрининг микроорганизмов по способности синтезировать органические кислоты позволил отобрать микроорганизмы, обладающие высокой активностью синтеза лимонной кислоты - микроскопические грибы Aspergillus niger шт.2 и Aspergillus terreus шт.1. Данные микро-
ноябрь, 2019 г.
организмы обладают высоким потенциалом для использования их в обработке каолинов с целью повышения их качества. Использование питательной среды на основе растительных отходов для культивирования данных микроорганизмов позволяет существенно удешевить процесс.
Список литературы:
1. Горбачев Б.Ф. Среднеазиатская каолиновая территория. // В кн. «Месторождения каолинов в СССР». -Москва. - Недра .- 1974 . - 248с.
2. Ситнова М. Обзор рынка каолина в СНГ // Ситнова М. - Доклад на семинаре № 24 симпозиума «Неделя горняка-2006» - «Инфомайн». - Москва. - 2007.
3. Гончаренко А.И. Каолиновые глины. // В кн. «Минерально-сырьевые ресурсы Узбекистана»; под ред. В. И. Попова, Х. Т. Туляганова. - Ташкент. - Фан. - 1977. — Ч. 2. — 271с.
4. Platova R.G., Platov Yu.T. Application of biotechnology for the ceramic industry. // «Глины и глинистые минералы». - Пущино. - 2006. - 106 с.
5. Лелеко А.И., Ахунов А.И., Куканова С.И. Биотехнология обогащения каолинов: проблемы и перспективы. // «Горный вестник Узбекистана». - 1998. - №1. - с.60-64.
6. Styriakova I., Styriak I., Nandakumar M.P., Mattiasson В. Bacterial destruction of mica during bioleaching of kaolin and quartz sand by Bacillus cereus // World J. Microbiol. and Biotechnol. - 2003. - V.19. - № 6. - P.583-590.
7. Платов Ю.Т., Платова Р.А. Способ отбеливания каолина. // (20.04.2016) Российская федерация. - Федеральная служба по интеллектуальной собственности (19) - RU(11) - 2582164(13)C1.
8. Каравайко Г.И. Микробная деструкция силикатных минералов. // Труды Института микробиологии им. С.Н.Вернадского. - Вып.12. - Юбилейный сборник к 70-летию института. - М. - 2004.-с.172-196.
9. Наймарк Е.Б., Ерощев-Шак В.А., Чижикова Н. П., Компанцева Е.И. Взаимодействие глинистых минералов с микроорганизмами: обзор экспериментальных данных. // Журнал общей биологии. - Том 70. - № 2. - 2009. - с. 155-167.
10. Maurice P.A., Vierkorn M.A., Hersman L.E., Fulghum J.E., Ferryman A. Enhancement of kaolinite dissolution by an aerobic Pseudomonas mendocina bacterium // Geomicrobiol. J. - 2001. - V.18. - № 1. - Р.21-35.
11. Mera M.U., Beveridge T.J., Mechanism of silicate binding to the bacterial cell wall in Bacillus subtilis. // J. Bacte-riol. - 1993. - V. 175. - № 7. - P. 1936-1945.
12. Tyriakov I., Tyriak I., Nandakumar M.P., Mattiasson B. Bacterial destruction of mica during bioleaching of kaolin and quartz sandsby Bacillus cereus. // World Journal of Microbiology and Biotechnology. - 2003. -V.19. -№ 6, Р. 583-590.
