CC BY
12УДК: 636.4:577.2:575:63 7.5.05
СКРИНИНГ АЛЛЕЛОФОНДА СТАД СВИНЕЙ ОРЛОВСКОЙ И ТУЛЬСКОЙ ОБЛАСТЕЙ ПО ГЕНУ РИАНОДИН-РЕЦЕПТОРНОГО БЕЛКА
'Чернуха И.М., 2Ковалева О.А., 2Крюков В.И.,2Друшляк Н.Г.,2Радченко М.В.
1ВНИИ мясной промышленности им. В.М. Горбатова, Москва, Российская Федерация;
2Орловский государственный аграрный университет, Орел, Российская Федерация
Целью работы было определение генотипической структуры по гену RYR1 в стадах чистопородных свиней крупная белая, йоркшир, ландрас, дюрок и гибридов йорк-ширхландрас, ландрасхйоркширхдюрок в хозяйствах Орловской и Тульской области. Исследование ДНК, выделенной из крови 1083 чистопородных и гибридных свиней 8 стран происхождения (23 стада), показало, что частота встречаемости нормального аллеля N и мутатного аллеля n, в исследованной выборке составляет 0,915 и 0,085 соответственно, что проявилось в высокой концентрации стресс-устойчивого генотипа NN - 87,4%. Таким образом, большинство животных генотипически устойчивы к стрессам. Частота встречаемости генотипа Nn в исследованной ваыборке составляет 8,3%. Эти животные фенотипически устойчивы к стрессу, но являются носителями дефектного аллеля. Стресс-чувствительный генотип nn во всей исследованной выборке встречается с частотой 4,3%, с разбросом от 0 до 14,3% в зависимости от породы и страны происхождения. Животные с этим генотипом гиперчувствительны к воздействию стресс-факторов и должны подлежать выбраковке и в промышленных, и в племенных хозяйствах, так как под действием стрессоров различного происхождения возможна смертность этих животных при выращивании, а также появление сырья с признаками PSE после убоя. Наибольшая частота встречаемости мутации выявлена среди гибридов йорк-ширхландрас - 0,106 и ландрасхйоркширхдюрок - 0,109. В породах крупная белая и ландрас частота встречаемости мутантного аллеля была менее значительной— 0,059. У свиней крупная белая и йоркшир этот ген встречается только в стадах отечественной селекции. В целом, результаты исследования свидетельствуют о значительной вариации частоты встречаемости генотипа Nn и стресс-чувствительного генотипа nn в зависимости от породы и страны происхождения животного.
Ключевые слова: чистопородные и помесные свиньи, чувствительность к стрессу, генетические маркеры
Проблемы биологии продуктивных животных, 2015, 4: 29-41
Введение
Проблема стрессов относится к числу актуальных биологических проблем в свиноводстве (Гуськов, 1994; Зиновьева, 2008; Максимов, 2010; Кудряшов и др., 2012, Лисицын и др., 2014). В соответствии со сложившейся концепцией, стрессоры, воздействуя через нервную и эндокринную системы, вызывают морфологические и функциональные изменения в органах и тканях, обусловленные усилением синтеза и секреции гормонов адаптации, в целом повышающие резистентность организма к воздействию негативных факторов внешней среды, но нередко способствующие возникновению аномальных биохимических сдвигов в организме животного (Schaefer et al., 2001; Wurtman, 2002; Miller, O'Callaghan, 2002).
Исследованиями зарубежных и отечественных ученых установлено, что аномальные биохимические процессы, приводящие к появлению мяса с признаками PSE (pale, soft, exudative - бледное, мягкое, водянистое), тесно сопряжены у свиней с развитием стрессового
синдрома (Porcine Stress Syndrome, PSS) (Fujii et al., 1991; Otsu et al. 1991, 1992; Рыжова, Калашникова, 2003; Черекаева, 2007; Зиновьева и др., 2008, 2010, 2012).
Главный ген, влияющий на предрасположенность свиней к стрессу — ген рианодин-рецепторного белка (HAL, CRC или RYR1) локализован на шестой хромосоме (6-PGD) (Рыжова, Калашникова, 2003;Черекаева, 2007). Обнаружено восемнадцать точковых мутаций, одна из которых, замена цитозина в позиции 1843 на тимин, приводит к изменению аминокислотной последовательности рианодин-рецепторного белка в положении 615 -аргинин заменяется цистеином. Это приводит к образованию белка RYR1, реагирующего на действие регуляторов кальциевого канала или на повышенную концентрацию метаболитов, образующихся в мышечной ткани при воздействии нейро-гуморальных стимулов, что и является одной из причин стресс-чувствительности свиней. Животные, имеющие по гену RYR1 генотип NN, являются устойчивыми к стрессам, генотип nn - стресс-чувствительными, гетерозиготы с генотипом Nn являются носителем гена стресс-чуствительности (Fujii et al., 1991).
В свиноводстве важное значение имеет ранняя генетическая диагностика стрессчувст-вительности (Зиновьева, 2008). Выявленная тенденция к повышению доли сырья, поступающего на переработку (Чернуха и др., 2013) с признаками PSE, свидетельствует о необходимости проведения скрининга по гену RYR1 аллелофонда стад основных пород свиней, разводимых в ведущих животноводческих хозяйствах страны, а также поставляемых из других стран.
Целью работы было определение генотипической структуры по гену RYR1 в стадах чистопородных свиней крупная белая, йоркшир, ландрас, дюрок и гибридов йорк-ширхландрас, ландрасхйоркширхдюрок в хозяйствах Орловской и Тульской областей.
Материал и методы
Исследования проведены на свиньях четырех основных наиболее часто встречающихся в России породах свиней: ландрас (Л), дюрок (Д), йоркшир (Й) и крупная белая (КБ), а также на свиньях двухпородного (ЙхЛ) и трехпородного (ЛхЙхД) скрещивания из животноводческих хозяйств Орловской и Тульской областей (табл. 1). Исследованы также животные из семи стран - основных поставщиков живых свиней в Россию.
Таблица 1. Характеристика животных
Породы и группы Происхождение Хозяйство n
КБ-1 Россия ОАО «Агрофирма «Ливенское мясо» 69
КБ-2 Канада ОАО «Озерский свинокомплекс» 71
Крупная белая КБ-3 КБ-4 Россия Ирландия СПССПК 2-го уровня «Единство» СПССПК 2-го уровня «Единство» 27 8
КБ-5 Франция ООО «Бекон» 12
КБ-6 Россия ОАО «Мясная компания 25
Й-1 Россия ОАО «Агрофирма «Ливенское мясо» 49
Йоркшир Й-2 Й-3 Канада Беларусь ОАО «Озерский свинокомплекс» ОАО «Мясная компания» 77 34
Й-4 Франция ООО «Бекон» 21
Л-1 Канада ОАО «Агрофирма «Ливенское мясо» 48
Л-2 Канада ОАО «Озерский свинокомплекс» 56
Ландрас Л-3 Бельгия ОАО «Бекон» 15
Л-4 Л-5 Германия Бельгия ИП Киреев ОАО «Мясная компания 6 19
Д-1 Канада ОАО «Агрофирма «Ливенское мясо» 48
Дюрок Д-2 Д-3 Канада Франция ОАО «Озерский свинокомплекс» ООО «Бекон» 56 18
Д-4 Канада ИП Киреев 7
ЙхЛ ЙхЛ-1 ЙхЛ-2 Канада Канада ОАО «Агрофирма «Ливенское мясо» ОАО «Озерский свинокомплекс» 98 58
ЛхЙхД ЛхЙхД-1 ЛхЙхД-2 Канада Канада ОАО «Агрофирма «Ливенское мясо» ОАО «Озерский свинокомплекс» 130 136
Генотипирование по локусу RYR1 осуществляли методом ПЦР-ПДРФ (полимеразной цепной реакции - полиморфизма длин рестриктных фрагментов) (Kaminski et al., 2002; Крюков и др., 2011). ДНК выделяли из крови с использованием набора реагентов DIAtom™ DNA Prep100 (БИОКОМ, Россия). Амплификацию проводили с набором реагентов GenPak PCR Core (БИОКОМ, Россия) в амплификаторе MyCycler (BioRad, США), в качестве стандарта использовали маркер молекулярной массы ДНК GenPak DNA Markers M50 (БИОКОМ, Россия). Детекцию продуктов амплификации осуществляли в системе гель-документирования GelDoc XR System (BioRad, США).
Частоту встречаемости генотипов рассчитывали по формуле: Р = n/N, где P - частота генотипа; n - количество животных, имеющих данный генотип; N - общее число животных. Частоту отдельных аллелей определяли по формулам:
РА = (2 nAA + nAB) / 2N;
Q = (2 nBB + nAB) / 2N,
где Р - частота аллеля А; Q - частота аллеля В; nAA, nAB, nBB - количество животных с данным генотипом; N - общее число животных (Меркурьева, Шангин-Березовский, 1983).
Исследования проведены в лаборатории ДНК-диагностики ЦКП «Идентификация, прослеживаемость и мониторинг растительного и животного сырья и продуктов питания» и в лаборатории генетики ЦКП «Генетические ресурсы животных и их использование» Инновационного научно-исследовательского испытательного центра Орловского ГАУ.
Результаты и обсуждение
Методом ПЦР-ПДРФ был получен специфический фрагмент гена RYR1, представляющий собой нормальные доминантные алели или аллели, в которых возможна искомая рецессивная мутация (рис. 1).
272 п.н.
149 п.н. 123 п.н.
М NN NN NN Nn NN NN NN nn NN Nn NN Nn NN NN NN nn NN NN NN
Рис. 1. Фрагмент электрофореграммы ПЦР-ПДРФ при генотипировании по гену RYR1 (М- маркер молекулярного веса, п.н. - пар нуклеотидов).
Фрагменты, полученные при ПЦР-ПДРФ анализе полиморфизма гена RYR1, соответствуют описанным ранее (Kaminski et al., 2002; Крюков и др., 2011). После рестрикции продуктов амплификации эндонуклеазой Hindi (Сибэнзим, Россия) на гель-электрофореграмме в рестриктах визуализированы две полосы длинной 149 и 123 пар нуклеотидов (п.н.). Это свидетельствует о том, что фермент расщепляет фрагмент гена на две части, что соответствует генотипу NN, не несущему генетический груз мутации. При наличии мутации, обуславливающей чувствительность к стрессам, эндонуклеаза не «режет» выделенный фрагмент в 272 п.н. Такой фрагмент также был обнаружен в нескольких исследованных рестриктах. Следовательно, среди исследуемых животных присутствуют особи с генотипом, гомозиготным по рецессивному признаку предрасположенности к стрессу. Генотип, в котором присутствует как нормальный аллель, имеющий сайт узнавания рестриктазы Hindi в позиции 1843, так и аллель с мутацией, не расщепляющейся эндонуклеазой, также присутствовал в исследованных выборках.
Скрининг аллелофонда десяти породных групп свиней крупная белая и йоркшир, используемых в промышленном производстве свинины в Орловской и Тульской областях, выявил существенную вариабельность частот встречаемости аллелей и генотипов по гену RYR1 (табл. 2).
В одной из исследованных выборок свиней породы крупная белая (КБ-6) выявлены животные — носители рецессивного гомозиготного генотипа пп с частотой встречаемости 4,0%. Животные с этим генотипом чувствительны к стрессам. Это может привести к повышенной смертности животных при выращивании и к появлению сырья с признаками PSE и DFD после убоя. Среди остальных исследованных стад свиней породы крупная белая животные с генотипом пп не обнаружены. Это может быть обусловлено начальным этапом проявления данной мутации в исследуемых стадах и гибелью этих животных в эмбриональный и ранний постэмбриональный период.
Таблица 2. Распределение аллелей и генотипов по гену RYR1 в исследованных стадах свиней крупная белая и йоркшир
Генотипируемые Частота встречаемости
породные группы* п генотипов, % аллелей
NN № пп N п
КБ-1 69 81,2 18,8 0,0 0,906 0,094
КБ-2 71 95,8 4,2 0,0 0,979 0,021
КБ-3 27 88,9 11,1 0,0 0,944 0,056
КБ-4 8 100 0,0 0,0 1,000 0,000
КБ-5 12 91,7 8,3 0,0 0,958 0,042
КБ-6 25 84,0 12,0 4,0 0,900 0,100
Итого по КБ 207 88,6 10,9 0,5 0,941 0,059
Й-1 49 81,6 14,3 4,1 0,887 0,113
Й-2 77 94,8 5,2 0,0 0,974 0,026
Й-3 34 85,3 8,8 5,9 0,897 0,103
Й-4 21 90,4 9,6 0,0 0,952 0,048
Итого по Й 181 88,9 8,8 2,2 0,934 0,066
Примечание: * данные по породам и странам происхождения приведены в табл. 1.
Стресс-устойчивые носители дефектного аллеля с генотипом Nn выявлены во всех исследованных выборках свиней породы крупная белая, кроме КБ-4. При этом в стадах свиней отечественной селекции КБ-1, КБ-3, КБ-6 частота встречаемости животных - носителей дефектного аллеля составляет 18,8, 11,1 и 12,0%, т.е. выше, чем в выборках КБ-2 и КБ-5 животных канадской и французской селекции - 4,2 и 8,3% соответственно. В стаде КБ-4 (ирландской селекции) все свиньи имели стресс-устойчивый генотип NN.
В целом по исследованным выборкам свиней породы крупная белая, генетический груз мутации, вызывающей стресс-синдром, невелик. Частота встречаемости дефектного аллеля п составляет - 0,059, а нормального аллеля N - 0,941. Схожие данные ранее получены при исследовании свиней породы крупная белая в хозяйствах Самарской и Московской областей (Марзанов и др., 2001), у свиней крупная белая в Чувашской республике частота встречаемости дефектного аллеля составляла 0,012, а в хозяйствах Ивановской области она варьировала от 0,033 до 0,059 (Рыжова, 2001), в племенных хозяйствах республики Удмуртия - от 0,010 до 0,020 (Гатчинкова и др., 2012).
Таким образом, частота встречаемости рецессивного аллеля у свиней породы крупная белая в различных регионах страны существенно вариабельна. Об этом свидетельствуют данные табл. 2 с учетом страны происхождения свиней. Так, в четырех стадах свиней КБ и Й из России и одном стаде из Беларуси животные с генотипом Nn обнаружены с частотой встречаемости от 11,1 до 18,8%. При этом в двух стадах, по одному — КБ и Й, встречаются и животные с генотипом пп, что не отмечено в стадах свиней из других стран. Наличие в значи-
тельных количествах генетической мутации, по всей видимости, связано с различиями в селекционных стратегиях, а также недостаточно квалифицированной селекцией и неразвитой системой генетического мониторинга в свиноводческих предприятиях России.
Исследование четырех стад свиней породы йоркшир, разводимых в Орловской и Тульской областях, показало, что из 181 особи случайной выборки 88,9% имеют гомозиготный доминантный генотип, 8,8% - гетерозиготный генотип и 2,2% — гомозиготный рецессивный генотип (табл. 2).
Животные с генотипом nn обнаружены в двух стадах йоркширов — Й-1 и Й-3 отечественной и белорусской селекции с частотой встречаемости 4,1 и 5,9% соответственно. В стадах Й-2 и Й-4, доставленных из нуклеуса компании International Genetics Ltd. (Канада) и нуклеуса компании Cooperl Arc Atlantique (Франция), рецессивный гомозиготный генотип обнаружен не был.
Животные — скрытые носители мутантного аллеля выявлены во всех исследованных стадах. При этом частота встречаемости генотипа Nn варьирует от 5,2% у животных канадской селекции (Й-2) до 14 у свиней отечественной селекции (Й-2) и в среднем по породе составляет 8,8%.
Частота аллелей N и n в целом по исследованным стадам свиней породы йоркшир составила 0,934 и 0,066 соответственно. Частота встречаемости мутантного аллеля n у свиней породы йоркшир, разводимых в Орловской и Тульской областях, на 11,9% выше, чем у свиней породы крупная белая. В ходе скрининга гена RYR1 у свиней породы йоркшир, разводимых в Беларуси, ранее был выявлен более высокий уровень частоты встречаемости рецессивного аллеля n - 0,17 (Епишко и др., 2008). Широкомасштабные исследования по контролю и элиминации рецессивных наследственных аномалий у сельскохозяйственных животных, проведенные специалистами ВИЖа, показали наличие мутантного аллеля RYR1 у всех основных пород свиней, используемых в промышленном производстве свинины, в том числе и у породы йоркшир — до 2% (Зиновьева и др. 2012).
При анализе полиморфизма гена RYR1 в пяти стадах свиней породы ландрас, установлено, что животные имеют в своем геноме ген, поврежденный мутацией и несущий предрасположенность к стрессам (табл. 3).
Таблица 3. Распределение аллелей и генотипов по гену RYR1 в исследованных стадах свиней ландрас и дюрок
Генотипируемые Частота встречаемости
породные груп- n генотипов, % аллелей
пы* NN Nn nn N n
Л-1 48 91,7 8,3 0,0 0,958 0,042
Л-2 56 92,8 5,4 1,8 0,955 0,045
Л-3 15 80,0 6,7 13,3 0,833 0,167
Л-4 6 83,3 16,7 0,0 0,868 0,132
Л-5 19 79,0 10,5 10,5 0,842 0,158
Итого по Л 144 88,9 7,6 3,5 0,927 0,059
Д-1 48 87,5 8,3 4,2 0,917 0,083
Д-2 56 89,2 5,4 5,4 0,920 0,080
Д-3 18 83,3 11,1 5,6 0,889 0,111
Д-4 7 85,7 0,0 14,3 0,857 0,143
Итого по Д 129 87,6 7,0 5,4 0,911 0,089
Примечание: * обозначение породных групп и страна происхождения приведены в табл. 1.
В стадах Л-2, Л-3 и Л-5 обнаружены животные с рецессивным гомозиготным генотипом. Частота его встречаемости у свиней канадской селекции (Л-2) относительно невелика -1,8%. Свиньи породы ландрас бельгийской селекции из хозяйств ОАО «Бекон» (Л-3) и ОАО «Мясная компания» (Л-5) имеет частоту встречаемости генотипа пп 11,3 и 10,5% соответст-
венно. Таким образом, наши данные могут стать основанием для свиноводческих хозяйств отказаться от свиней породы ландрас из Бельгии, либо перед покупкой тщательно изучить распределение аллелей и генов по генотипу RYR1.
Схожие данные ранее были получены при исследовании стресс-резистентности свиней породы бельгийский ландрас с помощью галотанового теста (Jablonski, Golemanov, 1983).
В стадах Л-1 и Л-4 (канадской и немецкой селекции) животные с генотипом nn обнаружены не были. Однако исследователями (Brenig, Brem, 1992) установлено, что до 70% свиней породы немецкий ландрас чувствительны к стрессам.
В среднем по породе ландрас частота встречаемости рецессивного гомозиготного генотипа составляет 3,5%, что на 1,3% больше чем у породы йоркшир и на 3,0% больше чем у породы крупная белая, разводимой в хозяйствах Орловской и Тульской области.
Гетерозиготный генотип выявлен во всех исследованных стадах свиней породы ландрас. Частота встречаемости генотипа Nn в стадах Л-2 и Л-3 варьирует от 5,4 до 6,7%, в стадах Л-5 и Л-4 - в пределах 10,5-16,7%, в среднем по породе она составляет 7,6%. Полученные нами данные значительно ниже результатов, выявленных в ходе ПЦР-ПДРФ тестирования свиней породы ландрас в Краснодарском крае (Ковалюк, 2002), где частота встречаемости генотипа Nn составила 39% среди хряков и 32% у свиноматок.
Наибольшая частота встречаемости аллеля n отмечается у животных бельгийской селекции в стадах Л-3 и Л-5, а также немецкой селекции Л-4. Наименьшая частота встречаемости дефектного аллеля выявлена в стадах канадской селекции Л-1 и Л-2.
В целом по породе ландрас частота встречаемости аллеля, несущего генетический груз мутации n, составляет 0,059, а нормального аллеля N - 0,927. Это сопоставимо с результатами, полученными нами по крупной белой породе. Частота встречаемости аллеля n му-тантного гена RYR1 у свиней породы ландрас в Кировской области несколько ниже — 0,013 (Рыжова, 2001). Частота встречаемости рецессивного аллеля у свиней породы ландрас, разводимых в республике Беларусь, варьирует от 0,10 до 0,17 (Епишко и др., 2008). Более высокая частота встречаемости аллеля n наблюдается в стадах свиней породы ландрас, разводимых за рубежом. Так, в Польше она составляет от 0,125 до 0,219 (Kmiec et al., 2000), в Германии — от 0,63 до 0,74 (Hardge et al., 1995), в Чехии — от 0,054 до 0,245 (Kahankova et al., 1996).
Значительные различия частоты встречаемости мутантного аллеля у свиней породы ландрас в отдельных регионах нашей страны и за рубежом связаны с интенсивным отбором в процессе селекции на увеличение количества мяса и уменьшение толщины шпика в туше.
Анализ частот генотипов по гену RYR1 в четырех стадах свиней породы дюрок выявил наличие гетерозиготного рецессивного генотипа во всех стадах (табл. 3). Наибольшая частота встречаемости генотипа nn характерна для свиней стада Д-4 - 14,3%, а в стадах Д-1, Д-2 и Д-3 частота встречаемости рецессивного генотипа варьирует от 4,2 до 5,6%.
В среднем по породе дюрок, частота встречаемости генотипа nn составляет 5,4%, что выше на 4,9% чем у свиней породы крупная белая и на 3,2 и 1,9% чем у свиней пород йоркшир и ландрас соответственно. Аналогичные данные получены по породе дюрок немецкой селекции (Otto et al., 2007), а также в Онтарио и Квебеке (Murray, Johnson, 1998). Однако исследования отечественных авторов не выявили наличия гомозиготного рецессивного генотипа у свиней породы дюрок в племенных хозяйствах Краснодарского края, Орловской области, Ставропольского края и Рязанской области (Ковалюк, 2002; Зиновьева и др., 2005; Кравченко, Селионова, 2007; Заболотная и др., 2011). Это связано с хорошо налаженным генетическим мониторингом по гену RYR1 всех животных, вводимых в стада этих хозяйств извне.
В стадах Д-1, Д-2 и Д-3 обнаружены стрессустойчивые носители дефектного гена с генотипом Nn, при этом его наибольшая частота встречаемости характерна для стад свиней французской селекции Д-3 - 11,1%. У свиней канадской селекции в стадах Д-2 и Д-1 частота генотипа Nn варьирует от 5,4% до 8,3% соответственно. В стаде Д-4, несмотря на наибольшую частоту встречаемости рецессивного гомозиготного генотипа, гетерозиготный генотип
обнаружен не был. Это можно объяснить недостаточно большим объёмом выборки животных из этого стада.
Наибольшая частота встречаемости аллеля п отмечена в стадах Д-4 и Д-3. Наименьшей частота встречаемости этого аллеля выявлена в стадах Д-2 и Д-1. Частота встречаемости аллеля п в целом по породе дюрок составляет 0,089, что выше, чем у остальных протестированных чистопородных животных.
Исследованиями, проведенными специалистами ВНИИМП, ВНИИплем, МГАВМиБ, Донского ГАУ, Кубанского ГАУ, установлено, что двухпородные гибриды Й*Л и трехпород-ные ЛхЙхД характеризуются высокими показателями мясной и откормочной продуктивности (Толоконцев, 2007; Кабанов, Титов, 2011; Колмацкий, 2012; Михайлов и др., 2012; Лисицын, 2013). Однако вследствие интенсивной селекции на мясность, эти животные имеют генетическую предрасположенность к стрессам (Лисицын, 2013). Это подтверждается данными, полученными нами в ходе генотипирования по гену RYR1 в стадах двух- и трехпородных гибридов, выращенных в условиях ОАО Агрофирма «Ливенское мясо» и ОАО «Озерский свинокомплекс» (табл. 4).
Таблица 4. Распределение аллелей и генотипов по гену RYR1 в группах гибридов йоркшир^ландрас и ландрас^-йоркширх-дюрок
Генотипируемые- Частота встречаемости
породные n генотипов, % аллелей
группы* NN Nn nn N n
ЙхЛ-1 98 86,7 6,1 7,2 0,898 0,102
ЙхЛ-2 58 84,5 8,6 6,9 0,888 0,112
Итого по И*Л 156 85,9 7,1 7,1 0,894 0,106
ЛхйхД-1 130 84,6 7,7 7,7 0,885 0,115
ЛхйхД-2 136 86,0 7,4 6,6 0,897 0,103
Итого по ЛхИхД 266 85,4 7,5 7,1 0,891 0,109
Примечание: * обозначение породных групп и страны происхождения приведены в табл. 1.
ДНК-диагностика 156 особей двухпородных гибридов ЙхЛ и 266 особей трехпородных гибридов ЛхЙхД показала, что частота встречаемости рецессивного гомозиготного генотипа nn для этих породосочетаний составляет 7,1%, что выше на 6,6, 4,9, 3,6 и 1,7%, чем у чистопородных свиней крупная белая, йоркшир, ландрас и дюрок соответственно. При этом частота встречаемости генотипа nn в стадах гибридов, выращенных в ОАО «Агрофирма «Ливенское мясо», составляет 7,2% для двухпородных гибридов (ЙхЛ-1) и 7,7% - для трехпородных гибридов (ЛхЙхД-1), что выше на 0,3% и 1,1%, чем у животных, выращенных в условиях ОАО «Озерский свинокомплекс» соответственно. Частота встречаемости генотипа nn у коммерческих гибридов за рубежом несколько ниже и составляет в Бразилии 5,6 (Bastos et al., 2001), в Латвии - 5,0 (Stira et al., 2003), в Аргентине - 4,2% (Marini et al., 2012). Однако при исследовании двух- и трехпородных гибридов в Польше и Китае не обнаружили рецессивного гомозиготного генотипа (Sieczkowska et al., 2009; Ruan et al., 2013), что может быть связано с различной интенсивностью селекции на мясность и хорошо налаженным генетическим контролем в этих хозяйствах.
Частота встречаемости стресс-устойчивого гетерозиготного генотипа Nn в стаде двухпородных гибридов ЙхЛ-1 (6,1%,) выше, чем в стаде ЙхЛ-2 (8,6%). В целом у двухпородных гибридов частота встречаемости генотипа Nn составляет 7,1%. У трехпородных гибридов в целом по протестированным особям генотип Nn встречается с частотой 7,5%, что на 0,4% выше чем у двухпородных гибридов ЙхЛ.
Аллель n, несущий генетический груз мутации, встречается с частой 0,102 в стаде ЙхЛ-1 и 0,112 в стаде ЙхЛ-2. В среднем по двухпородным гибридам частота аллеля n составляет 0,106, что выше на 79,7% выше, чем у наиболее стрессрезистентных свиней породы
крупная белая, разводимой в Орловской и Тульской областях. У трехпородных гибридов в стаде ЛхЙхД-1 аллель п встречается с частотой 0,115, в стаде ЛхЙхД-2 - 0,103. В целом по исследованным стадам трехпродных гибридов частота встречаемости аллеля п составляет
0.109. что выше на 65,2, 84,7 и 22,5% чем у протестированных нами свиней йоркшир, ландрас и дюрок соответственно.
Таким образом, в ходе скрининга аллелофонда по гену RYR1 в стадах свиней Орловской и Тульской областей установлена относительно высокая частота встречаемости стресс-чувствительного генотипа пп и мутантного аллеля п у свиней ландрас и дюрок, а также у гибридов ЙхЛ, ЛхЙхД, что будет приводить к прижизненному формированию сырья с признаками PSE.
Заключение
Исследования большой выборки свиней из хозяйств Орловской и Тульской областей, состоящей из 1083 чистопородных и гибридных животных из 8 стран происхождения (23 стада), показали, что частота встречаемости нормального аллеля N и мутантного аллеля п составляет 0,915 и 0,085 соответственно, что проявиляется в высокой концентрации стресс-устойчивого генотипа NN на уровне 87,4%. Таким образом, большинство протестированных животных генотипически устойчивы к стрессам.
Частота встречаемости генотипа Nn в целом по всем протестированным животным составила 8,3%. Эти животные фенотипически устойчивы к стрессу, но являются носителями дефектного аллеля. При крещивании гетерозиготных хряков с гетерозиготными свиньями, наряду с гомозиготным доминантными и гетерозиготными потомками, при наследовании по менделеевскому типу будут появляться гомозиготные рецессивные стресс-чувствительные особи пп в соотношении 1:2:1. Это будет сопряжено с сохранением и увеличениемчастоты встречаемости мутантного аллеля гена RYR1 в следующих поколениях животных.
Стресс-чувствительный генотип пп во всей исследованной выборке встречается с частотой 4,3%, с разбросом от 0 до 14,3% в зависимости от породы и страны происхождения; у свиней крупная белая и йоркшир этот ген встречается только в стадах отечественной селекции. Животные с этим генотипом гиперчувствительны к воздействию стресс-факторов и должны подлежать выбраковке и в промышленных, и в племенных хозяйствах, так как под действием стрессоров различного происхождения возможна смертность животных при выращивании, а также появление сырья с признаками PSE после убоя. Восприимчивые к стрессу свиньи отличаются и сниженными продуктивными признаками. Следовательно, хозяйствам-производителям свинины, в частности, в Орловской и Тульской областях, целесообразно вести отбор не только по комплексу фенотипических показателей, но также принимать во внимание результаты генотипирования животных по гену-маркеру RYR1 и учитывать страну происхождения животного.
ЛИТЕРАТУРА
1. Гатченкова Т.Б., Калашникова Л.А., Хабибрахманова Я.А. Полиморфизм генов эстрогенового, про-лактинового и рианодинового рецепторов у свиней // Материалы докл. конф. «Актуальные проблемы генетики и молекулярной биологии». — Уфа: Башкирский ГАУ, 2012. - С. 108-113.
2. Гуськов А.Н. Влияние стресс-фактора на состояние сельскохозяйственных животных - М.: Агро-промиздат, 1994. - 384 с.
3. Епишко Т.И., Ковальчук М.А., Журина Н.В., Епишко О.А., Мостовой Д.Е. Мониторинг генетической устойчивости пород свиней, разводимых в Белоруссии, к наследственным заболеваниям // Материалы международной конференции «Генетика и биотехнология XXI века. Фундаментальные и прикладные аспекты». - Минск: изд. БГУ, 2008. — С. 183-185.
4. Заболотная А.А., Сбродов С.С., Зиновьева Н.А. Влияние генотипа хряков по маркеру стрессоустой-чивости RYR1 на их воспроизводительные качества // Сибирский вестник сельскохозяйственной науки. - 2011. - № 5. - С. 51-54.
5. Зиновьева Н.А. Молекулярно-генетические методы и их использование в свиноводстве // Достижения науки и техники АПК - 2008. - № 10. - С. 34-36.
6. Зиновьева Н.А., Гладырь Е.А., Костюнина О.В., Харзинова В.Р., Покровская М.В., Друшляк Н.Г., Кабицкая Я. А. Роль ДНК-диагностики в контроле и элиминации рецессивных наследственных аномалий у сельскохозяйственных животных // Достижения науки и техники АПК. - 2012. - № 11. С. 37-40.
7. Зиновьева Н.А., Костюнина О.В., Гладырь Е.А., Банникова А.Д., Харзинова В.Р., Ларионова П.В., Шавырина К.М., Эрнст Л.К. Роль ДНК-маркеров признаков продуктивности сельскохозяйственных животных // Зоотехния. - 2010. - № 1. С. 8-10.
8. Зиновьева Н.А., Серов В.М., Шавырина К.М., Адаменко В.А. Внедрение системы маркерной селекции в свиноводство Орловской области // Животноводство России. - 2005. - № 2. - С. 28-30.
9. Кабанов В., Титов И. Йоркшир, ландрас, дюрок или гибриды? // Животноводство России. - 2011. -№ 9. - С. 37.
10. Ковалюк Н.В. Использование в селекции свиней генетических маркеров стрессустойчивости и многоплодия: автореф. дисс...к.б.н. - Боровск, 2002. - 26 с.
11. Комлацкий Г. Уроки «Пяточка» // Животноводство России. - 2012. - № 8. - С. 33-34.
12. Кравченко М.И., Селионова М.И. Откормочные и мясные качества свиней скороспелой мясной породы разных генотипов RYR1 локуса // Свиноводство. - 2007 - № 6 - С 13-15.
13. Крюков В.И., Пикунова А.В., Друшляк Н.Г. Использование ДНК-маркеров в селекции свиней // Вестник Орловского ГАУ. - 2011. - № 1. - С. 36-40.
14. Кудряшов Л.С., Кудряшова О.А. Влияние стресса животных на качество мяса // Мясная индустрия. - 2012. - № 1. - С. 8-11.
15. Лисицын А.Б., Чернуха И.М., Сусь И.В., Лисикова С.А Качество свинины. Новые требования рынка // Зоотехния. - 2014. - № 2. - С. 2-4.
16. Лисицын А.Б. Качество свинины: стандарты и методы оценки // Зоотехния. - 2013. - Спецвыпуск. -С. 35-36.
17. Максимов А.Г. Изменение гематологических, иммунологических и биохимических показателей крови у свиней при транспортном стрессе // Сельскохозяйственная биология. - 2010. - № 6. - С. 60-66.
18. Марзанов Н.С., Фролкин Д.А., Зиновьева Н.А., Попов А.Н., Данилин А.В. RYR1 ген у свиней отечественных и зарубежных пород // Доклады РАСХН. - 2001.- № 1. - С. 34-37.
19. Меркурьева Е.А., Шангин-Березовский Г.Н. Генетика с основами биометрии. - М.: Колос, 1983. -400 с.
20. Михайлов Н., Свинарев И., Гончаров А. Мясные качества трехпородных гибридов // Животноводство России. - 2012. - Спецвыпуск. - С. 45-46.
21. Рыжова Н.В. Полиморфизм гена RYR1 в популяциях свиней мясных пород: автореф. дисс.к.б.н. -Лесные Поляны, 2001. - 23 с.
22. Рыжова Н.В., Калашникова Л.В. Ген RIR 1 и продуктивность свиней мясных пород // Животноводство России. - 2003. - № 9. - С. 46-47.
23. Толоконцев А.И. Породные ресурсы свиней йоркшир, ландрас, дюрок канадской селекции и эффективность их использования в системах гибридизации: автореф. дисс. д.с.-х.н. - Лесные Поляны, 2007. - 50 с.
24. Черекаева Е.А. Эффективные технологии - качественное мясо // Животноводство России. - 2007. -Спецвыпуск. - С. 38-39.
25. Чернуха И.М., Шалимова О.А., Селеменев Г.Г., Макеева Ю.С., Радченко М.В. Изучение объемов PSE- и DFD-свинины, поступающей на мясоперерабатывающие предприятия Орловской области // Технология и товароведение инновационных пищевых продуктов. - 2013. - Т. 18. - № 1. -С. 24-30.
26. Bastos R.G., Federizzi J., Deschamps J.C., Cardellino R.A., Dellagostin O.A. Efeito do gene do estressesuímsobrecaracterísticas de quantidade e qualidade // Rev. Bras. Zootec. - 2001. - Vol. 30. - No. 1. - Р. 37-40.
27. Brenig B., Brem G. Genomic organization and analysis of the 5' end of the porcine ryanodine receptor gene (ryr-1) // FEBS Let. - 1992. - Vol. 298. - No. 2-3. - Р. 277-298.
28. Fujii J., Kinya O., Zorzato F., Leon S., Khanna V. K., Weiler J. E. Identification of a mutation in porcine ryanodine receptor associated with malignant hyperthermia // Science. - 1991. - Vol. 253. - P. 448-451.
29. Hardge T., Scholz A., Gregor Т. The influence of RYR1 genotype on male fertility in pigs // In: Proceedings of the 46th EAAP Annual Meeting. - Prague, Czech Republic. 1995, P. 268.
30. Jablonski C., Golemanov D. Halotan swinie testowe // Zywy inwentarz. - 1983. - Vol. 12. - Р. 48-51.
31. Kahankova L., Dvorak J., Nebola M., Vrtkova I., Hradil R. Diversity of the populations of Large White and Landrace breed in the Czech Republic in 1995 from the standpoint of genotypes RYR // Zivocisna vyroba. - 1996. - Vol. 41. -No. 7. - P. 285-289.
32. Kaminski S. Rusc A., Wojtasik K. Simultaneous identification of ryanodine receptor 1 (RYR1) and estrogen receptor (ESR) genotypes with the multiplex PCR-RFLP method in Polish Large White and Polish Landrace pigs // J. Appl. Genet. - 2002. - Vol. 43. - No. 3. - P. 331-335.
33. Kmiec M., Dwofák J., Vrtková I. Relations between the polymorphism in the ryanodine receptor gene (RYR1) and certain reproductive traits of sows in a herd of Polish Landrace pigs // Animal Science Papers and Reports. - 2000. - Vol. 18. - No. 4 - P. 277-283.
34. Marini S.J., Vanzetti L.S., Borelli V.S., Villareal A.O., Denegri G.D., Cottura G.A. RYR1 gene variability and effect on meat pH in Argentinean hybrids swines // InVet. - 2012. - Vol. 1. - P. 19-23.
35. Miller D. B., O'Callaghan J. P. Neuroendocrine aspects of the response to stress. // Metabolism. - 2002 -Vol. 51. -Suppl. 1. - P. 5-10.
36. Murray A. C., Johnson C. P. Impact of the halothane gene on muscle quality and pre-slaughter deaths in Western Canadian pigs // Canadian Journal of Animal Science. - 1998. - Vol. 78. - No. 4. - P. 543-548.
37. Otsu K., Khanna V. K., Archibald A. L., Mc Lennanc D. H. Cosegregation of porcine malignant hyperthermia and a probable causal mutation in the skeletal muscle ryanodine receptor gene in backcross families // Genomics - 1991. - V. 11. - P. 744-750.
38. Otsu K., Khanna V.K., Archibald A.L., McLennan D.H. Refinement of diagnostic assays for a probable causal mutation for porcine and human malignant hyperthermia // Genomics. - 1992. - Vol. 13. - P. 835837.
39. Otto G., Roehe R., Looft H., Thoelking L., Knap P.W., Rothschild M.F., Plastow G.S, Kalm E. Associations of DNA markers with meat quality traits in pigs with emphasis on drip loss // Meat Science. - 2007. -Vol. 70. - P. 185-195.
40. Ruan G.R., Xing Y.Y., Fan Y., Qiao R.M., He X.F., Yang B., Ding N.S., Ren J., Huang L.S., Xiao S.J. Genetic variation at RYR1, IGF2, FUT1, MUC13, and KPL2 mutations affecting production traits in Chinese commercial pig breeds // Czech J. Anim. Sci. - 2013. - Vol. 58. - P. 65-70.
41. Schaefer A.L., Dubeski P.L., Aalhus J.L., Tong A.K. Role of nutrition in reducing antemortem stress and meat quality aberrations // Journal of Animal Science. - 2001. - Vol. 79. - P. 91-101.
42. Sieczkowska H., Kocwin-Podsiadla M., Krz^cio E., Antosik K., Zybert A. Quality and technological properties of meat from Landrace-Yorkshire x Duroc and Landrace-Yorkshire x Duroc-Pietrain fatteners // Pol. J. Food Nutr. Sci. - 2009. - Vol. 59. - No. 4. - P. 329-333.
43. StiraA., Ramiod E., Nudiens J., Kaugers R., Veide Dz. Porcine stress syndrom (PSS) in purebred and crossbred Latvian pigs // In: Proceedings of the 9th Baltic animal breeding conference. - Sigulda: Latvia University of Agriculture, 2003. - P. 140-142.
44. Wurtman R. J. Stress and the adrenocortical control of epinephrine synthesis // Metabolism. - 2002. - Vol. 51. -Suppl. 1. - P. 11-14.
REFERENCES
1. Bastos R.G., Federizzi J., Deschamps J.C., Cardellino R.A., Dellagostin O.A. Efeito dogenedoe stresses uíno sobre características de quantidade e qualidade. Rev. Bras. Zootec. 2001, 30(1): 37-40.
2. Brenig B., Brem G. Genomic organization and analysis of the 5' end of the porcine ryanodine receptor gene (ryr-1;. FEBS Let. 1992, 298(2-3): 277-298.
3. Cherekaeva E.A. ZhivotnovodstvoRossii - Animal Husbandry in Russia. 2007, Special Issue: 38-39.
4. Chernukha I.M., Shalimova O.A., Selemenev G.G., MakeevaYu.S., Radchenko M.V. Tekhnologiya i tovarovedenie innovatsionnykh pishchevykh produktov - Technology and Innovative Food Merchandis-ing.2013, 18(1): 24-30.
5. Epishko T.I., Koval'chuk M.A., Zhurina N.V., Epishko O.A., Mostovoi D.E. [Monitoring of the genetic stability of breeds of pigs bred in Belarus, to hereditary diseases]. In: Materialy mezhdunarodnoi konferentsii: Genetika I biotekhnologiya XXI veka. Fundamental'nye I prikladnye aspekty (Proc. Intern. Conf.: Genetics and biotechnology in XXI century. Fundamental and applied aspects). Minsk: Izd. Tsentr BGU, 2008, P. 183-185. (In Russian).
6. Fujii J., Kinya O., Zorzato F., Leon S., Khanna V. K., Weiler J. E. Identification of a mutation in porcine ryanodine receptor associated with malignant hyperthermia. Science. 1991, 253: 448-451.
7. Gatchenkova T.B., Kalashnikova L.A., KhabibrakhmanovaYa.A. [Polymorphism of of estrogen, prolactin and ryanodine receptors genes in pigs]. In: Materialy dokladov konferenzii «Aktual'nyeproblem genetiki I molekulyarnoi biologii» (Proc. conf.: Actual problems of genetics and molecular biology). Ufa: Bashkirskii GAU, 2012, P. 108-111. (In Russian).
8. Guskov A.N. Vlijanie stress-faktora na sostojanies el'skohozjajstvennyh zhivotnyh (The impact of stress factors on farm animals). Moscow: Agropromizdat Publ., 1994, 384 p. (In Russian).
9. Hardge T., Scholz A., Gregor The influence of RYR1 genotype on male fertility in pigs. In: Proc. 46th EAAP Annual Meeting. Prague, 1995, P. 268.
10. Jablonski C., Golemanov D. Halotan swinie testowe. Zywy inwentarz. 1983, 12: 48-51.
11. KabanovV., Titov I. ZhivotnovodstvoRossii - Animal Husbandry in Russia. 2011, 9: 37.
12. Kahankova L., Dvorak J., Nebola M., Vrtkova I., Hradil R. Diversity of the populations of Large White and Landrace breed in the Czech Republic in 1995 from the standpoint of genotypes RYR. Zivocisna vyroba. 1996, 41(7): 285-289.
13. Kaminski S. Rusc A., Wojtasik K. Simultaneous identification of ryanodine receptor 1 (RYR1) and estrogen receptor (ESR) genotypes with the multiplex PCR-RFLP method in Polish Large White and Polish Landrace pigs. J. Appl. Genet. 2002, 43(3): 331-335.
14. Kmiec M., Dwofak J., Vrtkova I. Relations between the polymorphism in the ryanodine receptor gene (RYR1) and certain reproductive traits of sows in a herd of Polish Landrace pigs. Animal Science Papers and Reports. 2000, 18(4): 277-283.
15. Komlatskii G. ZhivotnovodstvoRossii - Animal Husbandry in Russia. 2012, 8: 33-34.
16. Kovalyuk N.V. Ispol'zovanie v selektsii svinei geneticheskikh markerov stressustoichivosti I mnogoplodiya (The use of genetic markers of stress resistance and multiple pregnancy in swine breeding). Extended Abstract of Diss., Borovsk, 2002, 26 p.
17. Kravchenko M.I., Selionova M.I. Svinovodstvo - Pig Breeding. 2007, 6: 13-15.
18. Kryukov V.I., Pikunova A.V., Drushlyak N.G. Vestnik Orlovskogo GAU - Herald of Orlov State Agricultutal University. 2011, 1: 36-40.
19. Kudryashov L.S., Kudryashova O.A. Myasnaya industriya - Meat Industry. 2012, 1: 8-11.
20. Lisitsyn A.B., Chernukha I.M., Sus' I.V., Lisikova S.A. Zootekhniya - Zootechnics. 2014, 2: 2-4.
21. Maksimov A.G. Sel'skokhosyaistvennaya biologiya - Agricultural Biology. 2010, 6: 60-66.
22. Marini S.J., Vanzetti L.S., Borelli V.S., Villareal A.O., Denegri G.D., Cottura G.A. RYR1 gene variability and effect on meat pH in Argentinean hybrids swines. InVet. 2012, 1: 19-23.
23. Marzanov N.S., Frolkin D.A., Zinov'eva N.A., Popov A.N., Danilin A.V. [RYR1 gene in pigs of russian and foreign breeds]. Doklady Rossiiskoi Academii Sel'skokhozyaistvennykh Nauk - Russian Agricultural Sciences. 2001, 1: 34-37. (In Russian).
24. Mikhailov N., Svinarev I., Goncharov A. Zhivotnovodstvo Rossii - Animal Husbandry in Russia.2012, Special Issue: 45-46.
25. Miller D.B., O'Callaghan J.P. Neuroendocrine aspects of the response to stress. Metabolism. 2002. 51(Suppl. 1): 5-10.
26. Murray A.C., Johnson C.P. Impact of the halothane gene on muscle quality and pre-slaughter deaths in Western Canadian pigs. Canadian Journal of Animal Science. 1998, 78(4): 543-548.
27. Otsu K., Khanna V.K., Archibald A.L., Mc Lennanc D.H. Cosegregation of porcine malignant hyperthermia and a probable causal mutation in the skeletal muscle ryanodine receptor gene in backcross families. Genomics.1991, 11: 744-750.
28. Otsu K., Khanna V.K., Archibald A.L., Mc Lennanc D.H. Refinement of diagnostic assays for a probable causal mutation for porcine and human malignant hyperthermia. Genomics. 1992, 13: 835-837.
29. Otto G., Roehe R., Looft H., Thoelking L., Knap P.W., Rothschild M.F., Plastow G.S, Kalm E. Associations of DNA markers with meat quality traits in pigs with emphasis on drip loss. Meat Science. 2007, 70: 185-195.
30. Ruan G.R., Xing Y.Y., Fan Y., Qiao R.M., He X.F., Yang B., Ding N.S., Ren J., Huang L.S., Xiao S.J. Genetic variation at RYR1, IGF2, FUT1, MUC13, and KPL2 mutations affecting production traits in Chinese commercial pig breeds. Czech J. Anim. Sci. 2013, 58: 65-70.
31. Ryzhova N.V. Polimorfizm gena RYR1 v populyatsiyakh svinei myasnykh porod (RYR1 gene polymorphism in populations of meat swine breeds). Extended Abstract of Diss. Cand. Sci., Lesnye Polyany, 2001, 23 p.
32. Ryzhova N.V., Kalashnikova L.V. Zhivotnovodstvo Rossii - Animal Husbandry in Russia. 2003, 9: 46-47.
33. Schaefer A.L., Dubeski P.L., Aalhus J.L., Tong A.K. Role of nutrition in reducing antemortem stress and meat quality aberrations. Journal of Animal Science. 2001, 79: 91-101.
34. Sieczkowska H., Kocwin-Podsiadla M., Krz^cio E., Antosik K., Zybert A. Quality and technological properties of meat from Landrace-Yorkshire x Duroc and Landrace-Yorkshire x Duroc-Pietrain fatteners. Pol. J. FoodNutr. Sci. 2009, 59(4): 329-333.
35. StiraA., Ramiod E., Nudiens J., Kaugers R., Veide Dz. Porcine stress syndrom (PSS) in purebred and crossbred Latvian pigs. In: Proc. 9th Baltic Animal Breeding Conference. Sigulda: Latvia University of Agriculture Publ., 2003, P. 140-142.
36. Tolokontsev A.I. Porodnye resursy svinei iorkshir, landras, dyurok kanadskoi selektsii I effektivnost' ikh ispol'zovaniya v sistemakh gibridizatsii (Breed resources of pigs Yorkshire, Landrace, Durocof Canadian selection and effectiveness of their use in hybridization). Extended Abstract of Diss. Cand. Sci. Agric., Lesnye Polyany, 2007, 50 p.
37. Wurtman R. J. Stress and the adrenocortical control of epinephrine synthesis. Metabolism. 2002, 51, Suppl. 1: 11-14.
38. Zabolotnaya A.A., Sbrodov S.S., Zinov'eva N.A. [Influence of RYRlgenotype of boars on their reproductive performance]. Sibirskii vestnik sel'skokhozyaistvennoi nauki - Siberian Herald of Agricultural Science. 2011, 5: 51-54. (In Russian).
39. Zinov'evaN.A. Dostizheniya nauki I tekhniki APK- Advances in Science and Technology in Agricultural Sector. 2008, 10: 34-36.
40. Zinov'eva N.A., Gladyr' E.A., Kostyunina O.V., Kharzinova V.R., Pokrovskaya M.V., Drushlyak N.G., KabitskayaYa. A. Dostizheniya nauki I tekhniki APK- Advances in Science and Technology in Agricultural Sector. 2012, 11: 37-40.
41. Zinov'eva N.A., Kostyunina O.V., Gladyr' E.A., Bannikova A.D., Khariznova V.R., Larionova P.V., Shavyrina K.M., Ernst L.K. Zootekhniya - Zootechnics.2010, 1: 8-10.
42. Zinov'eva N.A., SerovV.M., Shavyrina K.M., Adamenko V.A. Zhivotnovodstvo Rossii - Animal Husbandry in Russia. 2005, 2: 28-30.
Screening of allele pool in pig herds of Orel and Tula regions on the gene of ryanodine receptor protein
1Chemukha I.M., 2Kovaleva O.A., 2Kryukov V.I., 2Drushlyak N.G., 2Radchenko М.В.
1Gorbatov Institute of Meat Industry, Moscow, Russian Federation; 2Orel State Agrarian University, Orel, Russian Federation
ABSTRACT. The aim of the work was to determine the genotypic patterns of gene RYR1 in pigs of breeds Large White, Yorkshire, Landrace, Duroc and Landrace x Yorkshire hybrid, Landrace x Yorkshire x Duroc in herds of Orel and Tula region of RF. The study of DNA isolated from the blood of 1083 purebred and hybrid pigs of 8 countries of origin (23 herds), showed that the frequency of normal allele N and mutant allele n, across the studied sample is 0.915 and 0.085 respectively, which determined a high concentration of stress resistant genotype NN - 87.4%. Thus, the majority of animals tested have genotypic resistance to stress. The frequency of the genotype Nn in all tested sample is 8.3%. These animals are phenotypically resistant to stress, but are carriers of the defective allele. Stress sensitive nn genotype in all investigated samples occurs with a frequency of 4.3%, ranging from 0 to 14.3%, depending on the species and origin. Animals with this genotype are hypersensitive to the effects of stress factors, and should be subject to culling in industrial and breeding farms, since under the influence of stressors of various origins, the increased mortality of these animals is probable, as well as the increased fraction of meat with signs PSE and DFD after slaughter. The highest frequency of mutations was found among hybrids of Landrace x Yorkshire - .106 x Landrace and Yorkshire x Duroc - 0.109. In Large White and Landrace breeds, the frequency of mutant allele was less significant - 0,059. In Large White and Yorkshire pigs this gene was found only in herds of Russian breeding. Overall, the findings indicate a considerable variation in frequency of the genotype Nn and stress-sensitive genotype nn depending on the breed and the country of origin of the animal.
Keywords: pigs, breeds, hybrids, stress susceptibility, gene markers
Problemy biologii productivnykh zhivotnykh - Problems of Productive Animal Biology, 2015, 4: 29-41
Поступило в редакцию: 02.10.2015 Получено после доработки: 22.10.2015
Чернуха Ирина Михайловна, д.т.н., проф., зам. дир., imcher@inbox.ru; Ковалева Оксана Анатольевна, д.б.н., доц., iniic@mail.ru; Крюков Владимир Иванович, д.б.н., ст.н.с., проф., ecogenet@mail.ru; Друшляк Наталья Геннадьевна, к.б.н., iniic@mail.ru; Радченко Михаил Васильевич, соиск., mish100987@yandex.ru.
