Сhlamydophilia pneumoniae и Mycoplasma pneumoniae: связь с атеросклерозом Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

12. Bogousslavsky J. On behalf of the European stroke initiative. Stroke prevention by the practitioner // Cerebrovasc. dis. — 1999. — № 9. — P. 1-63.

13. Clinical Manual on Mild Cognitive Impairment / J. Golomb, A. Kluger, P. Garrard, S. Ferris // London: Science Press Ltd., 2001. — 367 p.

14. Kaste M., Fogelholm R., Rissanen A. Economic

burden of stroke and evaluation of new therapies. // Publ. Health. — 1998. — № 112. — P. 103-112.

15. Treatment of mild cognitive impairment: Value of citicoline / F. Abad-Santos, J. Novalbos-Reina, S. Gallego-Sandin, A.G. Garcia // Rev. Neurol. — 2002. — Vol. 35. — № 7. — P. 675-682.

Поступила 06.06.2005

УДК 616. 1 - 004. 6 - 022

CTLAMYDOPHILIA PNEUMONIAE И MYCOPLASMA PNEUMONIAE:

СВЯЗЬ С АТЕРОСКЛЕРОЗОМ

Е.Е. Линкевич Гомельский государственный медицинский университет

Проведен анализ влияния хламидийной и микоплазменной инфекции на развитие атеросклероза. В исследование включены образцы сосудов от 89 человек (35,2+9,8 лет) и сыворотки крови 98 доноров (35,1+7,9 лет). В результате полимеразной цепной реакции (ПЦР) атеросклеротически измененных образцов сосудов геном C.pneumoniae был выявлен в 45,2%, M.pneumoniae — в 67,9% случаев. Показатели определения ДНК C.pneumoniae и M.pneumoniae для умерших от проявлений атеросклероза (n=25) и от случайных причин (n=64) находились на одном уровне (Р>0,05), антигенный материал изучаемых патогенов достоверно чаще выявляли в эндотелии у умерших от атеросклероза (Р<0,05). В результате ежемесячного мониторинга специфического иммунного ответа были установлены высокие показатели активации (4 и более раз за год) хламидийной и микоплазменной инфекции у доноров — 55,1% и 79,59% соответственно. Полученные результаты согласуются с инфекционно-воспалительной концепцией атеросклероза.

Ключевые слова: атеросклероз, воспаление, хламидийная инфекция, микоплазма.

CTLAMYDOPHILIA PNEUMONIAE И MYCOPLASMA PNEUMONIAE: ASSOCIATION WITH ATHEROSCLEROSIS

E.Ye. Linkevitch Gomel State Medical University

There was performed the analysis of chlamydial and mycoplasmic infections on atherosclerosis development. Vessels samples of 89 corpses (35,2±9,8 years old) and blood serum of 98 donors (35,1±7,9 years old) were included into the investigation. As the result of PCR analysis of atheroscle-rotically changed vessels samples C.pneumoniae genom was revealed in 45,2%, M.pneumoniae — 67,9% of cases. Revelation indices of DNA C.pneumoniae and M.pneumoniae for died of atherosclerosis manifestations (n = 25) and from accidental causes (n = 64) were approximately at the same level (P > 005). Antigen material of the studied pathogens was reliably more often revealed in the endothelium of people died of atherosclerosis (P < 0,05). As the result of every month monitoring of the specific immune response there were determined high indices (4 and more times a year) of chlamydial and mycoplasmic infections activation in donors — 55,1% and 79,6%, respectively. The received data correspond with infectious inflammatory conception of atherosclerosis.

Key words: atherosclerosis, inflammation, chlamydial and mycoplasmic infections

Введение

Сердечно-сосудистые заболевания (ССЗ) атеросклеротического генеза являются основной причиной смерти трудоспособного

населения. Для выработки стратегии индивидуального лечения и профилактики различных клинических проявлений атеросклероза (АС) как болезни необходимо

иметь универсальное представление о механизмах его возникновения и развития.

Важным направлением научных исследований последних десятилетий явилось изучение роли иммунного воспаления в развитии и прогрессировании АС [4, 11, 14]. В рамках иммунно-воспалительной концепции атерогенеза интенсивно изучается роль микроорганизмов, тропных к клеткам сосудистой стенки и способных устанавливать пер-систентную инфекцию. К настоящему времени накоплены фактические данные о таких возможных механизмах патогенного действия возбудителей как специфическое повреждение клеток сосудистой стенки, запуск аутоиммунных процессов, извращение клеточного метаболизма липидов и белков, индукция патологической пролиферации и трансформации клеток, потенциирование ге-мокоагуляционных нарушений и свободнора-дикальных процессов [1, 6, 8, 9]. Наиболее широко обсуждаются атерогенные потенции облигатного внутриклеточного паразита Chlamydophilia pneumoniae (СР) [2, 5, 12].

Цель исследования — изучить закономерности распределения локальных маркеров СР и Mycoplasma pneumoniae (MP) в эндотелии брюшного сегмента аорты с учетом ее морфологической характеристики, изучить динамику циркуляции специфических сывороточных маркеров СР- и МР- инфекции в популяции населения Гомельской области.

Материал и методы исследования

Брюшной сегмент аорты получен от 89 человек (35,15+9,84 лет), вскрытых в течение 24 часов после констатации смерти в судебно-медицинском порядке. В качестве критериев атеросклеротических из-

ДНК СР была выявлена в 45,2% случаев, МР — в 67,9% случаев, что согласуется с данными других авторов, использовавших для детекции указанных микроорганизмов ПЦР [3, 7, 10, 13]. Прослеживается тенденция к увели-

менений использовались рекомендации Комитета экспертов ВОЗ.

Геном СР (фрагмент гена 448 п.н.) и МР (фрагмент гена 316 п.н.) выявляли в соскобе эндотелия коммерческими тест-системами фирмы «Biocom» (РФ). Цепную реакцию с Taq-полимеразой проводили на амплификаторе «Perkin Elmer 2400» (Франция). Антигенные маркеры СР и МР определяли тест-системами фирмы Lab-Diagnostika (РФ). Специфические IgM, IgA и IgG к СР и МР в сыворотке крови доноров определяли ИФА тест-системами EQUIPAR-SRL-Diagnos-tici (Италия).

Результаты исследований обработаны с применением пакета прикладных программ Statistica 6.0. Данные представлены в виде средних и относительных величин, стандартной ошибки показателя. Использованы критерий t Student, непараметрические критерии z и х2, точный критерий Фишера. Достоверным считали уровень значимости Р<0,05.

Результаты и обсуждение

При морфометрическом исследовании 89 образцов брюшного сегмента аорты в 84 (94%) были обнаружены проявления ате-росклеротического процесса на разных стадиях его развития — от липидных пятен и полосок до фиброзных бляшек, осложненных поражений и кальциноза.

В результате ПЦР исследования сосудов с морфологическими признаками АС был установлен высокий уровень их общей инфициро-ванности. Геномный материал СР и/или МР был выявлен в 71 (84,5%) из 84 изучаемых образцов аорты. При этом одновременное присутствие двух возбудителей отмечено в 28,6% случаев. Показатели обнаружения ДНК СР и МР представлены в таблице 1.

Таблица 1

чению показателя инфицированности МР с возрастом, однако достоверных различий между показателями инфицированности СР и МР образцов аорты для сравниваемых возрастных групп установлено не было (Р>0,05).

Выявление ДНК СР и МР в атеросклеротически измененных образцах аорты

Возраст, годы N сосудов Частота выявления ДНК

Chl. pneumoniae Myc. pneumoniae

абс. Р+Sp абс. Р+Sp

20-29 23 13 56,5+10,3 13 56,5+10,3

30-39 26 9 34,6+9,3 18 69,2+9,1

40-49 35 16 45,7+8,4 26 74,3+7,4

Всего 84 38 45,2+5,4+ 57 67,9+5,1

В результате исследования 5 образцов аорты без признаков АС было установлено, что все они инфицированы каким-либо из изучаемых возбудителей. В одном случае имела место ассоциированная СР / МР-инфекция — у мужчины 23 лет. У двух мужчин 20 и 23 лет зарегистрирована ми-коплазменная, у двух женщин 25 и 34 лет — хламидийная инфекция. Полученные результаты свидетельствуют в пользу того, что колонизация сосудистой стенки троп-ными к ней возбудителями, способными устанавливать персистентную инфекцию, может происходить еще задолго до формирования морфологических проявлений АС.

В ходе сравнительного анализа данных на установление зависимости между обнаружением ДНК изучаемых патогенов и возрастом, общей площадью атеросклеротического поражения были получены следующие результаты. Не установлена зависимость между фактом инфицированности сосудов и возрастом умерших (для СР: г = -0,807, Р=0,422; для МР: г = 1,535, Р=0,129). Не выявлена зависимость между показателем общей площади повреждения аорты и фактом ее инфициро-ванности (для СР ъ = 0,623, Р=0,533; для МР ъ = 1,011, Р=0,312). Полученные результаты могут быть обусловлены сложными мо-лекулярно-генетическими механизмами циркуляции возбудителей в организме хозяина, зависеть от концентрации возбудителя в ткани, его метаболической активности и установленных взаимоотношений с иммунной системой.

Установлена значимость ассоциативного взаимодействия СР и МР в атерогенезе. Так, в образцах аорты с признаками ранней стадии АС, характеризующейся наличием липоидоза, показатели выявления ДНК 1

возбудителя (СР или МР) и микст инфекции находились приблизительно на одном уровне: 51,1% и 54,2%. В сосудах с морфологическими признаками поздних стадий ате-рогенеза, характеризующихся наличием возвышающихся поражений (ВП), процент выявления ассоциированной инфекции был достоверно выше соответствующего показателя для 1 возбудителя: 75% против 48,9% (Х2 = 4,823, Р = 0,028).

Для того, чтобы выяснить, изменяется ли уровень экспрессии генома изучаемых патогенов в эндотелии с развитием патологического процесса, сравнили показатели частоты обнаружения геномного и антигенного материала СР и МР в эндотелии аорты с учетом причины смерти. Секционный материал был разделен на две группы (табл. 2). Согласно приведенным в таблице данным показатели выявления ДНК как СР, так и МР в сосудах сравниваемых групп находятся приблизительно на одном уровне (для СР: у2 = 0,359, Р = 0,549; для МР: %2 = 0,686, Р = 0,409). В то же время антигенный материал изучаемых патогенов достоверно чаще был выявлен в эндотелии сосудов у группы лиц, умерших от различных проявлений АС (для СР: х2 = 4,916, Р = 0,027; для МР: Х2 = 4,23, Р = 0,042). Можно заключить, что в эндотелии сосудов, которые были получены от умерших при манифестации АС, возбудители присутствовали в метаболически активном состоянии, в то время как в эндотелии сосудов, полученных при аутопсии умерших от случайных причин, — в латентной форме существования. Следовательно, патогенетическое значение имеет не просто факт присутствия патогена в сосудистой стенке, а его активная форма существования.

Таблица 2

Выявление ДНК СР и МР в АС-ки измененных сосудах в зависимости от причины смерти

Возбудитель Показатель Частота выявления показателя в группах Р

Умершие от проявлений АС (п=25) Умершие от случайных причин (п=64)

абс. Р+Sp абс. Р±Sp

Chlamydophilia рпеишошае ДНК 13 52,0±9,9 28 43,8±6,2 0,549

Антиген 14 56,0±9,9* 18 28,1±5,6 0,027

Mycoplasma pneumoniae ДНК 19 76,0±8,5 41 64,1±5,9 0,409

Антиген 18 72,0±8,9* 29 45,3±6,2 0,042

Примечание: *

— различие показателей достоверно, уровень значимости Р<0,05.

В ходе одномоментного серологического исследования сывороток крови 243 человек (35,41+8,18 лет) был установлен высокий уровень инфицированности СР- и МР-инфекциями. Показатель обнаружения специфических антител к СР составил 97,5%, маркеры МР-инфекции были выявлены у всех включенных в исследование лиц.

Для изучения динамики циркуляции специфических маркеров СР и МР в течение календарного года было проведено серийное ежемесячное исследование сывороток крови

98 доноров (35,1+7,9 лет). Результаты ежемесячного мониторинга показали, что у 97,96% доноров в сыворотке присутствовали анти-хламидийные 1§0 и/или За весь период наблюдения маркеры активной СР- инфекции были выявлены, как минимум, однократно у 96,94+1,74% доноров (табл. 3). Реактивация МР- инфекции в течение годового периода зарегистрирована у всех взятых в исследование доноров (100%) на фоне постоянного присутствия противомикоплазменных 1§0 и/или 1§А (табл. 4).

Таблица 3

Частота определения маркеров активной СР-инфекции у доноров за годовой период

Возраст N Реактивировали СР Частота реактиваций в году (от количества обследованных)

1-3 4-6 7 и более

абс. Р+8р абс. Р+8р абс. Р+8р абс. Р+8р

20-29 27 26 96,29+3,64 14 51,85+9,62 9 33,33+9,07 3 11,11+6,05

30-39 37 35 94,59+3,72 14 37,84+7,97 17 45,95+8,19 4 10,81+5,11

40-49 34 34 100,0 13 38,24+8,33 19 55,88+8,52 2 5,88+4,04

Всего 98 95 96,94+1,74 41 41,84+4,98 45 45,92+5,03 9 9,18+2,92

Таблица 4

Частота определения маркеров активной МР-инфекции у доноров за годовой период

Возраст N Реактивировали МР Частота реактиваций в году (от количества обследованных)

1-3 4-6 7 и более

абс. Р+8р абс. Р+8р абс. Р+8р абс. Р+8р

20-29 27 27 100,0 10 37,04+9,29 13 48,15+9,62 4 14,82+6,84

30-39 37 37 100,0 7 18,92+6,44 23 62,16+7,97 7 18,92+6,44

40-49 34 34 100,0 3 8,82+4,86 21 61,77+8,33 10 29,41+7,81

Всего 98 98 100,0 20 20,41+4,07 57 58,16+4,98 21 21,43+4,15

Установлены высокие показатели частоты активаций изучаемых инфекций за годовой период. Так, сывороточные маркеры активной СР-инфекции определялись с кратностью 4 и более раз более чем у половины обследованных доноров — в 55,1% случаев. МР-инфекция активировалась 4 и более раз в 79,59% случаев. При этом кратность обострений инфекционного процесса не зависела от средней величины показателя титра 1§0. Колебание значений титров 1§0 носило сугубо индивидуальный характер. Показатели частоты выявления активной СР- и МР-инфекции были относительно равномерно распределены среди обследуемых различных возрастных

групп (Р > 0,05). Не было выявлено статистически достоверных различий между показателями кратности реактивации для СР и МР с учетом половой принадлежности доноров (для СР: х2 = 0,927, Р = 0,629; для МР: х2 = 0,821, Р = 0,663).

Заключение

Таким образом, полученные результаты подтверждают гипотезу о латентной форме существования инфекционного агента в сосудистой стенке, которая может устанавливаться в раннем возрасте еще задолго до формирования морфологических проявлений АС. Активация же латентной инфекции, сопровождаемая включением метаболической активности

возбудителя, может провоцировать и поддерживать хроническое иммунное воспаление в сосудистой стенке. Следовательно, частоту активаций персистентных инфекций, по отношению к которым установлены атероген-ные потенции и пермиссивность клеток сосудистой стенки, можно рассматривать в качестве фактора, определяющего развитие атеро-склеротического процесса, и, соответственно, одного из дополнительных критериев прогнозирования течения АС. В то же время остается открытым вопрос о возможности его профилактики, так как эпидемиологический процесс в сосудистой стенке носит не контролируемый характер.

ЛИТЕРАТУРА

1. Вотяков В.И., Амвросьева Т.В. О роли вирусных агентов в индукции атерогенеза с позиций этиопатогенетических аспектов медленных инфекций и ассоциации атеросклероза с вирусами // Вестн. АМН СССР. — 1991. — № 5. — С. 59-64.

2. Нге Дж., Гупта С. Chlamydia pneumoniae и атеросклероз: совпадение или закономерная связь? // Клин. микробиол. и антимикр. химиотер. — 2001. — Т. 3. — № 2. — С. 104-110.

3. Роль микоплазменных инфекций в развитии острого инфаркта миокарда: факты и предположения / И.П. Арлеевский, О А. Чернова, Л.А. Ганеева и др. // Российск. кардиол. журн. — 2000. — Т. 24. — № 4. — С. 28-30.

4. Титов В.Н. Общность атеросклероза и воспаления: специфичность атеросклероза как воспалительного процесса (гипотеза) // Клин. лаб. диагн. — 2000. — № 4. — С. 3-10.

5. Chlamydia pneumoniae как патогенетический фактор риска в развитии атеросклероза и его осложнений / В А. Нагорнев, С.В. Мальцева, В.Г. Селиверстова и др. // Арх. пат. — 2004. — № 2. — С. 52-60.

6. Chlamydia pneumoniae and Chlamydial Heat Shock Protein 60 stimulate proliferation of human vascular smooth muscle cells via Toll-like receptor4 and p44/p42 mitogen-activated protein kinase activation / S.Sasu, D.La Verda, N.Qureshi et al. // Circ. Res. — 2001. — № 89. — Р. 244-250.

7. Endovascular presence of Chlamydia pneumoniae DNA is a generalized phenomenon in atherosclerotic vascular disease / M. Maass C. Bartels, S. Kruger et al. // Atherosclerosis. — 1998. — Vol. 140. — № 1. — P. 25-30.

8. Libby P., Simon D.I. Inflammation and trombosis the clot thickens // Circulation. — 2001. — Vol. 103. — № 13. — Р. 1718-1720.

9. Pesonen E., Paakkari I., Rapola J. Infection-associated intimal thickening in the coronary arteries of children // Atherosclerosis. — 1999. — Vol. 142. — P. 425-429.

10. Relation between direct detection of Chlamy-dia pneumoniae DNA in human coronary arteries at postmortem examination and histological severity (Stary grading) of associated atherosclerotic plaque / M.Tomas, Y.Wong, D.Thomas et al. // Circulation. — 1999. — Vol. 99. — P. 2733-2736.

11. Relation of inflammation to vascular function in patients with coronary heart disease / J. Sinisalo, J. Par-onen, K.J. Matilla et al. // Atherosclerosis. — 2000. — Vol. 149. — № 2. — Р. 403-411.

12. Saikku P. Chlamydia pneumoniae in atherosclerosis // J. Intern. Med. — 2000. — Vol. 247. — P. 391-396.

13. Specificity of detection of Chlamydia pneu-moniaein cardiovascular atherona: Evaluation of the innocent bystander hypothesis / L.A. Jackson, L.A. Campbell, R.A. Schmidt et al. // Am. J. Pathol. — 1997. — Vol. 150. — P. 1785-1790.

14. Zhdanov В.С., Чумаченко П.В., Дробкова И.П. Воспалительно-иммунологическая реакция в интиме аорты и легочной артерии и развитие атеросклероза // Кардиология. — 2003. — Т. 44. — № 2. — С. 40-44.

Поступила 30.08.2005

УДК 616.1 - 092+616.132.2 - 002 - 07 РЕЗУЛЬТАТЫ КОРОНАРОАНГИОГРАФИИ У ПАЦИЕНТОВ ГОМЕЛЬСКОГО ОБЛАСТНОГО КЛИНИЧЕСКОГО КАРДИОДИСПАНСЕРА С РАЗЛИЧНЫМИ ФОРМАМИ СЕРДЕЧНО-СОСУДИСТОЙ ПАТОЛОГИИ

С.Ю. Гороховский Гомельский областной клинический кардиологический диспансер

Представлен анализ результатов коронарографии у пациентов с сердечно- сосудистой патологией, определена частота встречаемости различных видов поражения коронарных артерий. У ряда пациентов выявлено несоответствие данных неинвазивных исследований и коронароангиографии, что свидетельствует о необходимости использования дополнительных методов исследования.

Ключевые слова: коронароангиография, стенокардия напряжения, инфаркт миокарда, коронарные артерии.