CC BY
12
ИССЛЕДОВАНИЕ АНТИМЮЛЛЕРОВА ГОРМОНА У СОБАК
Хуснетдинова Н.Ф., Ипполитова Т.В. Резюме
По количеству антимюллерова гормона можно определить отсутствие или наличие яичников у самок. Показаны достоверные различия содержания АМГ у самок интактных и стерилизованных. Содержание АМГ у самок в разные периоды полового цикла не одинаковы. У собак с овариореминантным синдромом уровень АМГ не всегда различается от уровня АМГ у стерилизованных.
RESEARCH OF ANTIMULELLER HORMONE IN DOGS
Khusnetdinova N.F., Ippolitova T.V.
Summary
The presence or absence of ovaries in females may be told by the quantity of anti-Mullerian hormone. The evidential differences between the quantities of AMH in untreated and neutered females have been demonstrated. The quantity of AMH in females in different periods of genesial cycle is not the same. The level of AMH in dogs with Ovarian remnant syndrome is not always different from the level of AMH in neutered ones.
DOI 10.31588/2413-4201-1883-242-2-202-206 УДК 591.111.7
СЕЗОННЫЕ КОЛЕБАНИЯ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ФАГОЦИТОЗА ЯДЕРНЫХ ЭРИТРОЦИТОВ И ЛЕЙКОЦИТОВ GALLUS DOMESTICUS
Чернявских С.Д. - к.б.н., доцент, Рыжкова Ю.П. - к.б.н.
ФГАОУ ВО «Белгородский государственный национальный исследовательский
университет»
Ключевые слова: эритроциты, лейкоциты, фагоцитарная активность, фагоцитарный индекс, циркануальные колебания
Keywords: erythrocytes, white blood cells, phagocytic activity, phagocytic index, circannu-al fluctuations
Система крови является одной из реактивных систем, активно включающейся в реакции адаптации на различные воздействия окружающей среды. Реакции, происходящие на клеточном уровне, являются типичным отражением проявлений нарушений на уровне целого организма и служат порогом, за пределами которого изучение изменений на молекулярном уровне является малопроизводительным
[4].
Благодаря функциональной системе крови, в организме имеется гомеостатиче-ский потенциал, который помогает противостоять экстремальным факторам среды,
вследствие наличия совершенных механизмов регуляции физиологических функций. К числу таких механизмов относятся генетический консерватизм рецепторов и пластичность исполнительного аппарата. Кровь мгновенно включает ответные реакции на воздействующие факторы изменением наборов специфических и неспецифических компонентов. К выше названным факторам, которые способны влиять на изменения свойств крови, относятся температура, влажность, давление, длина светового дня и другие. Согласно литературным данным, формой приспособления организмов к циклическим колебаниям
окружающей среды у животных являются сезонные ритмы, которые характерны для всех уровней биологической организации [1]. Несмотря на разную трактовку авторами термина «сезонные ритмы», все признают важную роль изучения функционального состояния организма в разные сезоны года [9].
В настоящее время сезонные изменения зарегистрированы и описаны по многим показателям системы крови и иммунитета у млекопитающих животных и человека. Вместе с тем, хронобиологиче-ские исследования практически не содержат сведений о сезонных изменениях фагоцитарной активности гемоцитов у представителей класса Птицы. Общеизвестно, что птицеводство является одной из динамично развивающихся отраслей животноводства. В этой связи, подобные исследования обусловлены не только теоретическим, но также и практическим интересом [10].
Целью работы было изучение сезонных колебаний фагоцитарной активности гемоцитов у Gallus domesticus.
Материал и методы исследований. Опыты были выполнены с использованием периферической крови курицы домашней (Gallus domesticus). В качестве объектов исследования были использованы красные и белые клетки крови.
Исследования проводили в разные сезоны года на кафедре биологии Белгородского государственного национального исследовательского университета.
Кровь для исследований брали из крупных вен крыла у предварительно наркотизированной птицы. С целью предотвращения свёртывания крови использовали гепарин до 10 ед. на 1 мл крови. Более высокая концентрация данного антикоагулянта ведет к его многопрофильному взаимодействию с нейтрофилами и селективному лейкоцитарному хемотаксису [7]. Полученная кровь подвергалась центрифугированию в течение 10 мин при 400 г. По окончании центрифугирования собирали нижнюю часть плазмы, богатую лейкоцитами и лейкоцитарное кольцо. Фракцию, обогащенную лейкоцитами, а
также эритроциты разбавляли изотоническим раствором (0,9 % раствор NaCl) [3].
Исследование поглотительной способности клеток крови проводили с помощью клеток дрожжей (Saccharomyces cerevisiae), частиц агломерированного латекса (D 0,8 мкм) и сенной палочки (Bacillus subtilis) [8]. Суспензии белых и красных клеток крови с объектами фагоцитоза в соотношениях 1:50 помещались в пробирки и инкубировались в условиях комнатной температуры в течение 30 мин. Встряхивание пробирок с гемоконцентра-том проводилось через каждые 5 мин. Затем делали мазки, фиксировали клетки спиртом, окрашивали азур-эозином по Романовскому. Подсчитывали процент фагоцитирующих эритроцитов и лейкоцитов (фагоцитарная активность) и среднее число объектов фагоцитоза, поглощенных одним фагоцитом (фагоцитарный индекс) [2]. Подсчет поглощенных частиц проводили с помощью иммерсионного увеличения -объектив х 90 МИ, окуляр х 15. Полученный цифровой материал был обработан статистически с использованием компьютерных программ IBM SPSS Statistics 22.
Вычисляли значение средней арифметической выборочной совокупности (M) и стандартной ошибки среднего значения (m). При определении достоверности разницы между группами был использован аргумент Стъюдента и таблицы Фишера-Снедекора. Результаты рассматривали как достоверные, начиная со значения р<0,05.
Результаты исследований. Полученные результаты поглотительной способности эритроцитов Gallus domesticus представлены в таблице 1.
Как видно из таблицы, фагоцитарная активность красных клеток крови испытуемых животных в зимний период по сравнению с осенним сезоном в отношении частиц латекса была выше на 32,4 %. В весенний период, по сравнению с осенним, показатель, характеризующий фагоцитарную активность красных клеток крови Gallus domesticus, был ниже в отношении Saccharomyces cerevisiae на 56,13 %, в отношении частиц латекса - на 29,28 % и в отношении сенной палочки - на 60,8 %.
Таблица 1 - Поглотительная способность эритроцитов Gallus domesticus
Период исследования Показатель фагоцитоза, ед. изм. Объект фагоцитоза
Дрожжи Латекс Сенная палочка
Осенний ФА,% 38,75±1,79 30,40±2,25 ß 33,80±4,22
ФИ, отн. ед. 1,05±0,02 1,02±0,07 1,02±0,04
Зимний ФА,% 34,66±2,33 40,25±3,35* 32,40±1,36 у
ФИ, отн.ед. 1,07±0,02 1,09±0,05 1,01±0,02 ß
Весенний ФА,% 17,00±2,04*# 21,50±2,50*# 13,25±1,49*# y
ФИ, отн.ед. 1,00±0,04 1,00±0,02 1,06±0,02 y
Летний ФА,% 28,20±3,2* а 19,66±1,20*# ß 34,20±5,2 а y
ФИ, отн.ед. 1,03±0,06 1,00±0,02 1,02±0,05
Примечание: достоверность различий по сравнению с: * риодом, а - весенним периодом, в - клетками дрожжей,
- осенним периодом, # - зимним пе-у- латексом (Р<0,05).
В весенний сезон года фагоцитарная активность эритроцитов была также ниже по сравнению с зимним периодом: к клеткам дрожжей - на 50,95 %, к частицам латекса - на 46,58 %, к сенной палочке -на 59,1 %. Данный показатель в летний сезон года был ниже в отношении Saccharomyces cerevisiae на 27,23 %, в отношении частиц латекса - на 35,33 % по сравнению с осенним периодом. Летом по сравнению с весенним сезоном фагоцитарная активность эритроцитов была, напротив, выше к дрожжевым клеткам на 65,88 %, к Bacillus subtilis - в 2,5 раза. Интерпретируя полученные данные, можно косвенно предположить, что причиной дезактивации фагоцитарной активности в весенний период является усиление весеннего гемопоэза, результатом которого является повышенное содержание незрелых гемоцитов, которые не способны к фагоцитозу [5].
В осенний и летний периоды фагоцитарная активность эритроцитов в отношении частиц латекса была ниже соответственно на 21,55 % и 30,28 % по сравнению с Saccharomyces cerevisiae. Известно, что для дрожжевых клеток характерным является то, что они очень часто встречаются на поверхностях плодов и листьев, которые входят в рацион птиц. Это может способствовать формированию у них приобретенного иммунитета. К Bacillus subtilis, по сравнению с латексом, фагоцитарная активность была ниже в зимний период на 19,5 %, в весенний - на 38,37 % и
выше в летний - на 73,96 %. Причиной этому может быть большая распространённость сенной палочки в окружающей среде в более теплый сезон года [6].
Фагоцитарный индекс эритроцитов в отношении сенной палочки в зимний период был на 7,34 % ниже, в весенний - на 6 % выше по сравнению с латексом.
Наряду с поглотительной способностью эритроцитов нами была изучена поглотительная способность лейкоцитов Gallus domesticus. Полученные результаты представлены в таблице 2. Показатель фагоцитарной активности белых клеток крови Gallus domesticus в зимний сезон года по сравнению с осенним периодом в отношении частиц латекса был выше на 18,37 %. В весенний период, по сравнению с осенним, показатель, характеризующий фагоцитарную активность лейкоцитов Gallus domesticus, был ниже в отношении Saccharomyces cerevisiae на 62,35 %, в отношении частиц латекса -на 64,02 % и в отношении сенной палочки - на 67,11 %. В весенний период фагоцитарная активность белых клеток крови была также ниже по сравнению с зимним сезоном: к Saccharomyces cerevisiae - на 69,23 %, к частицам латекса - на 69,60 %, к Bacillus subtilis - на 70,47 %. Данный показатель в летний сезон года был ниже по сравнению с осенним и зимним периодами в отношении Saccharomyces cerevisiae на 50,12 % и 59,23 %, в отношении частиц латекса на 55,83 % и 62,69 %, в отношении сенной палочки на 52,63 % и 57,48 %.
Таблица 2 - Поглотительная способность лейкоцтов Gallus domesticus
Период исследования Показатели фагоцитоза, ед. изм. Объект фагоцитоза
Дрожжи Латекс Сенная палочка
Осенний ФА,% 21,25±1,49 26,40±1,40 ß 22,80±1,82
ФИ, отн.ед. 1,03±0,02 1,02±0,01 1,00±0,02
Зимний ФА,% 26,00±2,00 31,25±1,18* ß 25,40±1,02 у о
ФИ, отн.ед. 1,01±0,01 1,03±0,02 1,02±0,01
Весенний ФА,% 8,00±1,10*# 9,50±0,50*# 7,50±2,53*#
ФИ, отн.ед. 1,04±0,01# 1,00±0,05 1,03±0,03
Летний ФА,% 10,60±1,40*# 11,66±1,76*# 10,80±0,08*#
ФИ, отн.ед. 1,04±0,01 1,03±0,02 1,02±0,08
Осенью и зимой фагоцитарная активность белых клеток крови в отношении частиц латекса выше на 24,24 % и 20,19 % соответственно по сравнению с Saccharomyces cerevisiae.
Фагоцитарный индекс лейкоцитов в отношении Saccharomyces cerevisiae в весенний период на 2,97 % выше, по сравнению с зимним сезоном.
Заключение. В осенне-зимний период на фоне напряжения адаптационных реакций, вызванных изменениями температурного режима, регистрируется увеличение поглотительной способности красных и белых клеток крови Gallus domesticus к Saccharomyces cerevisiae (в среднем на 27,23-69,23 %), частицам латекса (в среднем на 29,28-69,60 %) и Bacillus subtilis (в среднем на 59,10-70,47 %) по сравнению с весенне-летним сезоном.
Весенняя дезактивация фагоцитоза у Gallus domesticus, независимо от объекта фагоцитарной реакции, является следствием снижения иммунитета в данный период года, что необходимо учитывать при кормлении и содержании кур.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Агаджанян, Н.А. Экологическая физиология: проблема адаптации и стратегия выживания / Н.А. Агаджанян // Материалы X Международного симпозиума «Эколого-физиологические проблемы адаптации». - М.: Изд. «РУДН», 2001. - С. 5-12.
2. Александров, М.Т. Метод вычисления абсолютных показателей фагоцитоза / М.Т. Александров, А.И. Кудрявицкий, Е.Г. Румянцева [и др.] // Лабораторное дело. - 1988. - № 9. - С. 30-32.
3. Алмазов, В.А. Методы функционального исследования системы крови / В.А. Алмазов, С.И. Рябов. - Л.: Изд. «Медицинская литература», 1963. - 131 с.
4. Васильев, Н.В. Система крови и неспецифическая резистентность в экстремальных климатических условиях / Н.В. Васильев, Ю.М. Захаров, Т.И. Коляда. -Новосибирск: Изд. «Наука», 1992. - 257 с.
5. Гаврилов, О.К. Клетки костного мозга и периферической крови / О.К. Гав-рилов, Г.И. Козинец, И.Б. Черняк. - М.: Изд. «Медицина», 1987. - 274 с.
6. Глик, Б. Молекулярная биотехнология / Б. Глик, Д. Пастернак. - М.: Изд. «Мир», 2002. - 27 с.
7. Дуглас, С.Д. Исследование фагоцитоза в клинической практике / С.Д. Дуглас, П.Г. Куи. - М.: Изд. «Медицина», 1983. - 112 с.
8. Иванова, Е.Ю. Микробиология / Е.Ю. Иванова. - Воронеж: Изд. «ВГУ», 2004. - 23 с.
9. Маянский, А.Н. Фагоцитоз: проблемы и перспективы / А.Н. Маянский // Вестник РАМН. - 1993. - №4. - С. 52-55.
10. Федорова, М.З. Реактивность лейкоцитов крови при различных функциональных нарушениях: монография. Москва-Ярославль, 2001. - 68 с.
СЕЗОННЫЕ КОЛЕБАНИЯ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ФАГОЦИТОЗА ЯДЕРНЫХ ЭРИТРОЦИТОВ И
ЛЕЙКОЦИТОВ GALLUS DOMESTICUS
Чернявских С.Д., Рыжкова Ю.П.
Резюме
Изучены особенности сезонных колебаний фагоцитарной активности и фагоцитарного индекса у ядерных эритроцитов и лейкоцитов Gallus domesticus в отношении клеток дрожжей Saccharomyces cerevisiae, частиц латекса и сенной палочки Bacillus subtilis.
Установлено, что частицы латекса эритроцитами поглощаются менее активно по сравнению с дрожжевыми клетками в осенний и летний периоды. В отношении сенной палочки, по сравнению с частицами латекса, показатель фагоцитарной активности эритроцитов был ниже в зимний и весенний сезоны и выше в летний период. Фагоцитарная активность белых клеток крови к частицам латекса выше в осенние-зимние периоды по сравнению с Saccharomyces cerevisiae.
Фагоцитарный индекс эритроцитов к частицам латекса в зимний период выше, в весенний - ниже по сравнению с сенной палочкой. Среднее число дрожжевых клеток, поглощенных одним лейкоцитом, в весенний период выше, по сравнению с зимним сезоном.
В целом, в осенний и зимний периоды происходит усиление фагоцитарной активности как красных, так и белых клеток крови Gallus domesticus к изучаемым объектам фагоцитоза по сравнению с весенним и летним сезонами.
SEASONAL VIBRATIONS OF INDICATORS OF PHAGOCYTOSIS OF NUCLEAR ERYTHROCYTES AND LEUKOCYTES GALLUS DOMESTICUS
Chernyavskikh S.D., Ryzhkova Yu.P.
Summary
The features of seasonal fluctuations in phagocytic activity and phagocytic index in nuclear erythrocytes and white blood cells of Gallus domesticus in relation to yeast cells Saccharomyces cerevisiae, latex particles and hay bacillus Bacillus subtilis were studied.
It was found that latex particles by red blood cells are absorbed less actively compared to yeast cells in the autumn and summer periods. In relation to hay bacillus, in comparison with latex particles, the indicator of red blood cell phagocytic activity was lower in winter and spring seasons and higher in summer. The phagocytic activity of white blood cells to latex particles is higher in the autumn-winter periods compared to Saccharomyces cerevisiae.
The phagocytic index of red blood cells for latex particles is higher in winter and lower in spring compared to hay bacillus. The average number of yeast cells absorbed by one leukocyte in the spring is higher compared to the winter season.
In general, in the autumn and winter periods there is an increase in the phagocytic activity of both red and white blood cells of Gallus domesticus to the studied objects of phagocytosis compared with the spring and summer seasons.
