CC BY
130
УДК 576.8.06:636.22/.28+636.3:611.31
СЕЗОННАЯ ВАРИАБЕЛЬНОСТЬ ВИДОВОГО СПЕКТРА МИКРОФЛОРЫ РОТОВОЙ ПОЛОСТИ КРУПНОГО И МЕЛКОГО
РОГАТОГО СКОТА
Покровская Е.С., Малев А.А.*, Гильмутдинов Р.Я.,
Хуснутдинов Н.Н.**, Караганова Н.С.**, Замалтдинов А.А.
ФГБОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана»
ГОУ ДПО «Казанская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»* МУЗ «Городской диагностический центр по лабораторной диагностике инфекционных заболеваний», г. Казань**
Ключевые слова: бактериология, полость рта, коровы, овцы, сезонность, половые различия.
Key words: bacteriology, oral cavity, cattle, sheeps, season, sexual distinctions.
Полость рта млекопитающих представляет собой уникальную открытую экосистему разнообразных микроорганизмов, обсеменяющих ее с первых дней жизни. Описано несколько сотен видов, входящих в нормальную микрофлору полости рта, среди них примерно 30 относятся к резидентам, из которых около половины являются факультативными и облигатными анаэробными стрептококками (mutans, mitis и sanguis; пепто-и R-гемолитические и др.). Другая половина представлена примерно в равных пропорциях вейллонеллами и дифтероидами. Стафилококки, лактобациллы, жгутиковые микроорганизмы, спирохеты, лептоспиры, фузобактерии, бактероиды, нейссерии, грибы и простейшие, присутствуют в полости рта постоянно, но в гораздо меньшем количестве. В зависимости от вида животного скорее может меняться количество микробных групп, но не видовой их состав (Боровский Е. В., Леонтьев В. К., 1991; Bourgault
A., Rosenblatt J., 1979; 1986; Rayan G. et al., 1991; Thompson J. et al., 2007 и др.).
Сосуществование микроорганизмов широкого видового спектра предполагает различные формы их взаимодействия на метаболическом и генетическом уровнях. В определенной степени качественный и количественный состав микрофлоры характеризует состояние местного иммунитета и резистентности организма. Исходя из вышеизложенного, целью наших исследований явилась идентификация микрофлоры полости рта коров и овец в разные сезоны года.
Материалы и методы. Исследования проводили на пятнадцати овцах и пятнадцати баранах романовской породы в возрасте 2-х лет, тридцати коровах черно-пестрой породы в возрасте 5 лет. Изучали количественный и качественный состав микрофлоры полости рта, используя бактериоскопический и бактериологический методы. Материал для исследования брали с участка слизистых оболочек и поверхности языка жвачных площадью 1 см2 с помощью бактериологического набора (тампон на металлическом стержне в среде Amies с углем) фирмы «Himedia» и высевали на специальные питательные среды.
Для оценки общего микробного обсеменения применяли 5 %-ый кровяной агар; для подсчета стафилококков - желточно-солевой агар; для лактобактерий - растительно-молочную среду; для других бактерий -сахарный бульон и колумбийский агар; для грибов рода Candida - среду Сабуро с полимиксином. Бак. посевы инкубировались в термостате 24 ч, посевы для идентификации грибов рода Candida - около 5 суток (Приказ Минздрава СССР от 22.04.85 № 535).
Выделенные штаммы микроорганизмов окрашивали по Граму и идентифицировали на основании морфологических, культуральных и биохимических признаков по D. Bergey (1988).
Результаты исследования и обсуждение. Результаты высевов микроорганизмов на питательные среды представлены в таблице 1.
Многие из выявленных микробов относятся к транзиторным. У крупного рогатого скота - это Pantoea agglomerans, Citrobacter sp., Proteus mirabilis, Staphylococcus lentus, Streptococcus agalactie; у мелкого рогатого скота - E. coli, Alcaligenes faecalis, Enterococcus faecalis, Staphylococcus sciuri, lentus и gallinarum. Проникают они в ротовую полость оральным путем и инфицирование животных происходит за счет выделения возбудителя во внешнюю среду, некоторые из них обитают в почве и воде. Выявленные микробы условно-патогенны и являются представителями нормальной микрофлоры кишечника, мочеполовой системы, дыхательных путей, кожи и ее производных. Попадая в организм человека, они могут вызывать оппортунистические инфекции и воспаление слизистой ротовой полости.
Отдельные виды этих микроорганизмов являются облигатными представителями полости рта животных. У крупного рогатого скота - это Candida albicans и crusei; у мелкого рогатого скота - Streptococcus viridians и salivarius, Stomatococcus mucilaginosis. Streptococcus viridians представляет также нормальную микрофлору глотки, дыхательных путей и половых органов человека и животных. Между тем его патогенные штаммы могут быть причиной эндокардита, кариеса зубов, фарингита, поражения кожи и мягких тканей. Комменсал ротовой полости и верхних дыхательных путей, Stomatococcus mucilaginosis, проявляет патогенное действие только при снижении иммунитета, способствуя развитию гнойно-
воспалительных процессов. Микроорганизмы рода Candida в качестве условно-патогенных входят в состав нормальной микрофлоры рта, влагалища и толстой кишки большинства животных и людей. Кандидоз же обусловлен их размножением в большом количестве и/или наличием патогенных штаммов.
1. Микробиология ротовой полости коров и овец в зависимости от сезона
года
Сезон года Крупный рогатый скот Овцы
Микроорганизм Встречаемость % Микроорганизм Встречаемость %
1 2 3 4 5
лето Citrobacter sp. 25 Enterococcus faecalis 25
Pantoea agglomerans 25 Escherichia coli 25
Candida crusei 25 Alcaligenes faecalis 25
Candida albicans 25 Staphylococcus sp. 25
Этиологически значимый рост отсутствовал 50 Streptococcus viridans 50
осень Streptococcus agalactie 75 Этиологически значимый рост отсутствовал 100
Этиологически значимый рост отсутствовал 25
зима Streptococcus agalactie 50 Stomatococcus mucilaginosis 50
Streptococcus galloliticus ssp. macedonicus 25
Этиологически значимый рост отсутствовал 50 Kocuria kristinae 25
Staphylococcus schleiferi ssp. schleiferi 25
весна Этиологически значимый рост отсутствовал 50 Staphylococcus lentus 75
Proteus mirabilis 50 Staphylococcus sciuri ssp. sciuri 25
Staphylococcus lentus 50 Staphylococcus gallinarum 25
У крупного и мелкого рогатого скота признаки стоматита наименее выражены осенью-зимой, что, возможно, объясняется поеданием ими в
этот период свежезаготовленных грубых кормов, а также низкими температурами среды, губительными для большинства микробов. К тому же свежезаготовленное сено является более мягким кормом, менее травмирующим слизистую оболочку рта. Весной ослабляется общая резистентность организма. Высокая же заболеваемость коров стоматитом в летний период связана с изменением способа их содержания - выгулом в специальных загонах, что ведет к скученности животных и неконтролируемому их перемещению; несвоевременной уборкой навоза, пользованием общими кормушками и поилками.
Нами выявлены половые различия в микрофлоре ротовой полости у мелкого рогатого скота (таблица 2).
2. Гендерные особенности микрофлоры слизистой оболочки ротовой
полости мелкого рогатого скота
Овцы Бараны
Встречаемость, %
50 25 25
Streptococcus viridans Escherichia coli Alcaligenes faecalis
Enterococcus faecalis
Kocuria kristinae
Stomatococcus mucilaginosis Streptococcus galloliticus ssp. macedonicus
Streptococcus salivarius Staphylococcus schleiferi ssp. schleiferi, sciuri ssp. sciuri gallinarum
Staphylococcus lentus
Как видно из таблицы 2, у овец стрептококки полости рта в 50 % случаев представлены видом viridans и в 25 % - salivarius, тогда как у баранов в 25 % случаев встречается вид galloliticus ssp. macedonicus. Последний является представителем комплекса стрептококков лошадей/коров, часто колонизирующего желудочно-кишечный тракт людей и вызывающего эндокардит. Некоторые серотипы могут продуцировать бактериоцины (мацедоцины) активные против стрептококков agalactiae, dysgalactiae subsp. dysgalactiae, uberis, а также стафилококков aureus и epidermidis.
Стафилококки овец в 50 % случаев представлены видом lentus; у баранов же их видовой состав намного шире (schleiferi, sciuri, gallinarum) и встречаются они с частотой в 25 %. По данным О.В. Добровольского, С.Ю. Сереброва (2007), в норме стафилококки встречаются на всем протяжении желудочно-кишечного тракта млекопитающих. Staphylococcus sciuri может быть изолирован с кожных покровов грызунов, реже от других животных и человека, а также из водных источников. Относящийся к этой же группе
Staphylococcus lentus обычно обнаруживают на коже молочной железы овец и коз. Оба вида очень редко проявляют себя как патогены. Staphylococcus gallinarum обитает на коже кур.
Помимо этого только у овец в 50 % случаев выделен Stomatococcus mucilaginosis и в 25 % - Escherichia coli. Авирулентные штаммы последней являются частью нормальной флоры кишечника человека и животных. Данный микроб способен выживать в окружающей среде. Вирулентные штаммы вырабатывают факторы, губительные для организма хозяина. Разные штаммы E. coli зачастую специфичны к определенным хозяевам, что делает возможным определение источника фекального заражения в образцах. Первичными резервуарами E. coli O157:H7, патогенной для человека, является мясной и молочный скот, который может переносить бактерии бессимптомно.
Только у баранов (25 %) в мазках обнаруживались Alcaligenes faecalis, Enterococcus faecalis, Kocuria kristinae. Первый из них, являясь условно-патогенным, изолируется из фекалий; обитает в почве и воде. Может быть причиной септицемии и менингита у новорождённых, интраабдоминальных инфекций у взрослых; заболеваний домашней птицы. Enterococcus faecalis входит в состав нормальной микрофлоры пищеварительного тракта млекопитающих многих видов, в том числе человека и домашней птицы, но может вызывать патологию мочевыводящих путей, органов малого таза, эндокарда и др. Enterococcus faecalis - один из наиболее патогенных видов энтерококков и по данным
В.М. Бондаренко, А.Н. Суворова (2007), он часто бывают причиной оппортунистических инфекций. Kocuria kristinae - коагулазанегативный стафилококк-сапрофит, изолируемый с кожных покровов и слизистых оболочек, также может вызывать оппортунистические инфекции.
Выводы. Качественный и количественный состав транзиторной микрофлоры жвачных имеет гендерные различия и сезонную зависимость, что, скорее всего, связано с рационом питания, способом содержания и температурой окружающей среды. Каждый из рассмотренных микробов может выступать в качестве ассоцианта, проявляя синергизм действия, усугублять течение воспалительного процесса и поражать особей ослабленных другими заболеваниями, а также животных как в неонатальный, так и постнатальный период, вызывая развитие менингитов, абсцессов головного мозга, бактериемии, отитов, остеомиелитов, эндокардитов, поражений дыхательных, моче- и желчевыводящих путей.
ЛИТЕРАТУРА: 1. Бондаренко, В. М. Симбиотические энтерококки и проблемы энтерококковой оппортунистической инфекции / В. М. Бондаренко, А. Н. Суворов. - М., 2007. - С. 30. 2. Боровский, Е. В. Биология полости рта / Е. В. Боровский, В. К. Леонтьев. - М.: Медицина, 1991. - С. 304. 3. Добровольский, О.В. Терапия язвенной болезни и проблемы сохранения микроэкологии желудочно-кишечного тракта / О.В.
Добровольский, С.Ю. Сереброва // Русский Медицинский Журнал. - 2007. - Т. 15. - № 16. - С. 1193-1198. 4. Приказ Минздрава СССР от 22.04.85 № 535 «Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений». 5. Bergey, D. Bergey’s manual of systematic bacteriology / D. Bergey.- Ed. Peter H.- Smeath., 1986.- V. 2. 6. Bourgault, A. First Isolation of Peptococcus indolicus from a Human Clinical Specimen / A. Bourgault, J. Rosenblatt // J. Clin. Microbiol.- 1979.- V. 9.-P.549-550. 7. Rayan, G. A comparison of human and animal mouth flora / G. Rayan, D. Downard, S. Cahill, D. Flournoy // J. Okla. State. Med. Assoc.-1991.-V.84.- P. 510-515. 8. Thompson, J. Genetic requirements for growth of Escherichia coli K-12 on methyl-alpha-D-glucopyranoside and the five alpha-D-glucosyl-D-fructose isomers of sucrose / J. Thompson, A. Pikis, S. Hess et al. // J. Biol. Chem.-2006. - V. 281.- P.17900-17908.
СЕЗОННАЯ ВАРИАБЕЛЬНОСТЬ ВИДОВОГО СПЕКТРА МИКРОФЛОРЫ РОТОВОЙ ПОЛОСТИ КРУПНОГО И МЕЛКОГО РОГАТОГО СКОТА
Покровская Е.С., Малев А. А., Гильмутдинов Р.Я., Хуснутдинов Н.Н., Караганова Н.С., Замалтдинов А.А.
Резюме
Изучен количественный и качественный состав микрофлоры полости рта овец и коров на основе бактериоскопического и бактериологического методов. Установлена сезонная вариабельность ее видового спектра у животных данных видов, а также половые различия в бактериологии рта овец. Предположена возможность передачи некоторых выявленных микробов от этих животных человеку.
SEASONAL VARIATIONS OF ORAL CAVITY MICROFLORA IN CATTLE AND SHEEPS
Pokrovskaya E.S., Malev A.A., Gilmutdinov R.J.,
Husnutdinov N.N., Karaganova N.S., Zamaltdinov A.A.
Summary
Quantitative and qualitative staff of oral cavity microflora in cattle and sheeps was studied using bacterioscopical and bacteriological methods. Seasonal variations of mouth flora in these animals and sexual distinctions at oral bacteriology in sheeps were determined. Transference opportunity of some revealed microbes from these animals to people was assumed.
