CC BY
71
© Коллектив авторов, 2013 УДК 578.833:57.083.33(470.63)
СЕРОЛОГИЧЕСКИЙ МОНИТОРИНГ АРБОВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ НА ТЕРРИТОРИИ СТАВРОПОЛЬСКОГО КРАЯ
Н. Ф. Василенко \ О. В. Малецкая \ А. В. Ермаков 2, Н. Г. Варфоломеева \ А. Н. Куличенко 1
1 Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт
2 Управление Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека по Ставропольскому краю
Арбовирусы, циркуляция которых поддерживается путем биологической трансмиссии членистоногими переносчиками позвоночным хозяевам, являются этиологическими агентами заболеваний людей и сельскохозяйственных животных [5, 6]. В настоящее время в Российской Федерации наблюдается расширение ареала возбудителей некоторых арбовирус-ных инфекций.
Незначительные колебания климатических условий приводят к увеличению численности носителей и переносчиков арбовирусов, повышению их активности и степени инфицированности. Этот фактор может способствовать увеличению эпидемического потенциала существующих природных очагов арбо-вирусных инфекций и формированию новых очагов на неэндемичных территориях [6, 7, 9].
Природно-климатические условия, разнообразие видового состава членистоногих и позвоночных животных обусловливают возможность распространения арбовирусов на территории Ставропольского края. Комплексное энтомолого-эпизоотологическое обследование, проводимое в течение последних лет (2000-2012 гг.), позволило выявить антигены вирусов Крымской-Конго геморрагической лихорадки (ККГЛ), Западного Нила (ЗН), клещевого энцефалита (КЭ), Батаи, Калифорнийской серогруппы (Тягиня, Инко), что свидетельствует о циркуляции указанных возбудителей инфекционных болезней в данном регионе [1, 2, 3].
Одним из факторов, подтверждающих цирку-
Василенко Надежда Филипповна,
доктор биологических наук, ведущий научный сотрудник лаборатории эпидемиологии Ставропольского научно-исследовательского противочумного института; тел. 89282933505; е-mail: nfvasilenko@mail.ru
Малецкая Ольга Викторовна,
доктор медицинских наук, профессор, заведующая лабораторией эпидемиологии Ставропольского научно-исследовательского противочумного института; тел.: (8652)260383; e-mail: snipchi@mail.stv.ru
Ермаков Александр Викторович,
руководитель Управления Роспотребнадзора, Главный государственный санитарный врач по Ставропольскому краю; тел.: (8652)298639; e-mail: Ermakov_AV@26.rospotrebnadzor.ru
Варфоломеева Наталия Геннадьевна,
научный сотрудник лаборатории вирусологии Ставропольского научно-исследовательского противочумного института; тел.: (8652)261578; e-mail: virusologia1@rambler.ru
Куличенко Александр Николаевич,
доктор медицинских наук, профессор,
директор Ставропольского научно-исследовательского
противочумного института;
тел.: (8652) 260312; e-mail: snipchi@mail.stv.ru
ляцию арбовирусов на определенной территории, является выявление антител к возбудителю арбо-вирусной инфекции в сыворотках крови людей, проживающих на этой территории, а также в сыворотках крови доноров [8, 9].
Ранее при исследовании сывороток крови жителей региона Кавказских Минеральных Вод Ставропольского края были выявлены специфические антитела к вирусам ККГЛ, ЗН и КЭ [4].
Целью настоящей работы явилось изучение уровня иммунной прослойки к арбовирусам среди людей, проживающих в различных природно-климатических зонах Ставропольского края.
Материал и методы. Объектом исследования служили сыворотки крови доноров, полученные из ГУЗ «Ставропольская краевая станция переливания крови» в 2008-2010 гг. Специфические антитела к арбовирусам в сыворотках крови людей определяли методом иммуноферментного анализа (ИФА) тест-системами «ВектоКрым-КГЛ-IgG», «Векто-Нил-IgG» и «ВектоНил IgG-авидность», «ВектоВКЭ-IgG» производства ЗАО «ВекторБест» (Кольцово, Новосибирской обл.). Результаты ИФА учитывали на регистрирующем фотометре Stat Fax 2100 (США).
Результаты и обсуждение. Специфические антитела (иммуноглобулины класса G (IgG)) к вирусу ККГЛ появляются на 7-10 день от начала заболевания, достигают пика к концу второго месяца, держатся в высоких титрах в течение 6-8 месяцев. К концу первого года титр IgG снижается, и невысокие титры у некоторых переболевших Крымской геморрагической лихорадкой (КГЛ) сохраняются годами. У некоторых реконвалесцентов к концу первого года IgG полностью исчезают из периферической крови, у других - сохраняются до 5-8 лет, а в единичных случаях - до 10 и 20 лет, возможно, за счет повторного инфицирования при постоянном проживании на эндемичной территории [8].
В течение трех лет (2008-2010 гг.) на наличие специфических антител к вирусу ККГЛ исследованы 825 сывороток крови доноров, полученных из 13 административных районов края и четырех городов, в том числе - краевого центра. Положительные результаты получены в образцах из четырех районов (Благодарненского, Изобильненского, Минерало-водского, Ипатовского), а также из двух городов (Ставрополя, Невинномысска). Наибольшее количество положительных проб выявлено в Минераловод-ском районе в 2010 г.: 10 (8 %) из 125 исследованных, где зарегистрированы 6 случаев заболевания КГЛ. В образцах из г. Ставрополя из 325 исследованных положительными были 4 (1,2 %), причем два из них с высокими титрами IgG (1:3200). Величина титров
МЕДИЦИНСКИЙ ВЕСТНИК СЕВЕРНОГО КАВКАЗА. 2013. Т. 8. № 1
скую оптическую плотность (ОП) и индекс авидности по отношению ОП денатурирующего ИФА к ОП прямого ИФА (согласно инструкции по применению тест-системы). Если индекс авидности составляет менее 50 %, то исследуемая сыворотка крови содержит низ-коавидные антитела, что указывает на текущую либо недавно перенесенную инфекцию (заболевание было 2-3 мес. назад). Если же индекс авидности более 70 %, то сыворотка крови содержит высокоавидные антитела, что свидетельствует о постинфекции.
На наличие 1дО к вирусу ЗН выявлены 23 (2,8 %) положительных образца, из них в Минераловодском районе - 9, в Ипатовском районе и Ставрополе - по 4, в Благодарненском районе - 3 и по одному в Красногвардейском, Туркменском районах и г Невинно-мысске.
В 2008 г. низкоавидные 1дО (индекс авидности 12-42 %) выявлены в трех сыворотках крови доноров: одна - в Туркменском районе, две - в Благодарненском. При проведении ИФА в 2010 г. (во время эпидемического подъема заболеваемости ЛЗН в Российской Федерации) оказалось, что в 4 пробах сывороток крови доноров из Минераловодского района 1дО выявлялись в довольно Таблица высоких титрах (1:6400-1:51200). Выявление антител к арбовирусам в сыворотках крови доноров При исследовании их на авидность
оказалось, что высокотитражные сыворотки крови содержали низ-коавидные антитела (индекс авид-ности 36-40 %), свидетельствующие о недавно перенесенной болезни.
Таким образом, на основании полученных данных ретроспективно установлено, что в 2008 и 2010 гг. в Ставропольском крае имели место случаи заболевания ЛЗН.
В 1,9 % исследованных сывороток крови доноров получены положительные результаты на наличие 1дО к вирусу клещевого энцефалита. Результаты исследования сывороток крови доноров на наличие специфических антител к арбовирусам представлены в таблице.
Положительные результаты установлены при исследовании сывороток крови, полученных от доноров, проживающих в лесостепной, степной и предгорной ландшафтных провинциях, примерно в равных количествах. При исследовании сывороток крови людей, проживающих в районах, относящихся к лесостепной зоне, выявлено 18 (5 %) положительных проб из 357, из которых по 4 (1,1 %) содержали антитела к вирусам ККГЛ и ЗН, 10 (2,8 %) - к ВКЭ. В степной ландшафтной зоне зарегистрировано 20 (6,3 %) положительных проб, из них 1дО к вирусу ККГЛ - 6 (1,9 %), к вирусу ЗН - 10 (3,1 %), к ВКЭ - 4 (1,3 %). Наибольший процент положительных сывороток крови доноров
в образцах из других административных территорий составила 1:100-1:400.
В целом уровень иммунной прослойки населения Ставропольского края к возбудителю КГЛ составил 2,4 %. Выявление антител в сыворотках крови доноров - практически здоровых людей, проживающих в крае, - является косвенным подтверждением существования природного очага КГЛ в активном состоянии на данной территории.
Эти же сыворотки крови исследованы на наличие специфических антител к возбудителям лихорадки Западного Нила (ЛЗН) и клещевого энцефалита. Исследования на 1дО к вирусу ЗН проводили в два этапа. Вначале методом ИФА определяли наличие антител класса О, которые появляются у больных ЛЗН уже на 4-5-й день болезни. При положительном результате далее измеряли авидность специфических к вирусу ЗН 1дО, позволяющую определить период времени, прошедший после первичного инфицирования. Так, 1дО, наработанные в первые 3-5 месяцев после первичного инфицирования, имеют низкую авидность, в то время как 1дО в более поздние сроки показывают высокую авидность. После этого определяли критиче-
Кол-во Результаты исследования ИФА (1дО)
Год Административная иссле- КГЛ ЛЗН КЭ
территория (город, район) дованных проб кол-во пол. проб титр |дс кол-во пол. проб титр |дс кол-во пол. проб титр 1дО
2008 Ставрополь 225 1 1:100 2 1:200 1 1:400
Благодарненский 54 1 1 1:400 1:100 1 1 1 1:200 1:3200 1:100 0
Красногвардейский 1 0 1 1:200 1 1:200
Ипатовский 3 0 0 0
Шпаковский 32 0 0 0
Труновский 2 0 0 0
Петровский 2 0 0 0
Грачевский 4 0 0 0
Туркменский 1 0 1 1:200 0
Новоселицкий 2 0 0 0
Кочубеевский 3 0 0 0
Изобильненский 5 0 0 0
Левокумский 22 0 0 0
Невинномысск 2 0 0 0
Кисловодск 1 0 0 0
Железноводск 1 0 0 0
2009 Изобильненский 80 2 1:100 0 1 1 1:200 1:12800
Ставрополь 20 1 1:100 0 1 1:100
Невинномысск 80 1 1:100 1 1:100 1 1:6400
2010 Минераловодский 125 7 3 1:100 1:200 5 1 3 1:100 1:6400 1:51200 1 1 1:100 1:3200
Ипатовский 80 1 1:200 2 1 1 1:200 1:400 1:51200 1 1 1:3200 1:51200
Ставрополь 80 1 1 1:3200 1:100 2 1:100 1 1 1 1 1 1 1:100 1:200 1:400 1:1600 1:25600 1:51200
Итого 825 20 23 16
установлен в предгорной ландшафтной провинции: 21 (16,5 %) проба из 127 исследованных.
Антитела к вирусу ККГЛ выявлены в 10 (7,9 %) образцах, к вирусу ЗН - в 9 (7,1 %), к вирусу КЭ - в двух (1,6 %). В 22 сыворотках крови, доставленных из полупустынной зоны, антител к арбовирусам не обнаружено.
До настоящего времени на территории Ставропольского края случаи заболевания клещевым энцефалитом не регистрировались. Что касается лихорадки Западного Нила, то кроме ретроспективно установленных случаев заболевания в 2008 и 2010 гг., в августе 2012 г первые два случая зарегистрированы в Советском районе, из них один - летальный.
Результаты серологического мониторинга свидетельствуют о циркуляции возбудителей ЛЗН и КЭ и возможном заражении людей, что, скорее всего, связано с активизацией природных очагов этих инфекций на сопредельных с краем территориях. В связи с этим актуален вопрос о внедрении в практику здравоохранения Ставропольского края диагностики ар-бовирусных инфекционных заболеваний, в том числе лихорадки Западного Нила и клещевого энцефалита.
Заключение. Анализ полученных данных показал наличие иммунной прослойки среди населения края к арбовирусам ККГЛ, ЗН, КЭ. Впервые при проведении серологических исследований сывороток крови людей (доноров), проживающих, в основном, в лесостепной и предгорной ландшафтно-географических зонах, выявлены специфические антитела к вирусу клещевого энцефалита, что, наряду с обнаружением антигена вируса КЭ у клещей [1], указывает на возможную циркуляцию этого возбудителя в отдельных районах края. Наличие специфических антител к арбовирусам у местного населения свидетельствует о бессимптомно протекающей инфекции с трансмиссивным механизмом передачи кровососущими членистоногими.
Литература
1. Варфоломеева, Н.Г. Эпидемиологическая обстановка по природно-очаговым вирусным инфекциям на территории Ставропольского края / Н.Г. Варфоломеева, А.В.Ермаков,
СЕРОЛОГИЧЕСКИЙ МОНИТОРИНГ
АРБОВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ
НА ТЕРРИТОРИИ СТАВРОПОЛЬСКОГО КРАЯ
Н. Ф. ВАСИЛЕНКО, О. В. МАЛЕЦКАЯ,
А. В. ЕРМАКОВ, Н. Г. ВАРФОЛОМЕЕВА,
А.Н. КУЛИЧЕНКО
Н.Ф. Василенко [и др.] // Пробл. особо опасных инфекций. - 2011. - № 2. - Т. 108. - С. 16-18.
2. Василенко, Н.Ф. Зараженность клещей Hy-alomma marginatum вирусом Крымской геморрагической лихорадки на Юге России в 2001 г. / Н.Ф. Василенко, И.Н. Емельянова, Е.Н. Афанасьев [и др.] // Пробл. особо опасных инфекций. - Саратов, 2002. - Вып. 1. - Т. 83. - С. 124128.
3. Василенко, Н.Ф. Особенности эпидемиологической обстановки по Крымской геморрагической лихорадке в Российской Федерации в 2011 г. / Н.Ф. Василенко, В.Ю. Смоленский, А.С. Волынкина [и др.] // Проблемы особо опасных инфекций. - 2012. - Вып. 1. - Т. 111. -С. 22-25.
4. Ермаков, А.В. Иммунологический мониторинг за трансмиссивными природно-очаговыми инфекциями на территории Кавказских Минеральных Вод / А.В. Ермаков, Н.Ф. Василенко, Н.Г. Варфоломеева [и др.] // Медицинский вестник Северного Кавказа. - 2012. - Т. 25. -№ 1. - С. 43-46.
5. Львов, Д.К. Арбовирусы и арбовирусные инфекции / Д.К. Львов, С.М. Клименко, С.Я. Гай-дамович. - М. : Медицина, 1989. - 336 с.
6. Медицинская вирусология : руководство / под ред. Д.К. Львова. - М., 2008. - 565 с.
7. Онищенко, Г.Г. Обстановка по Крымской геморрагической лихорадке в Южном федеральном округе / Г.Г. Онищенко, В.И. Ефременко, А.П. Бейер [и др.] // Журн. микробиол., эпиде-миол. и иммунобиол. - 2005. - № 4 (Приложение). - С. 5-12.
8. Смирнова, С.Е. Крымская-Конго геморрагическая лихорадка: этиология, эпидемиология и лабораторная диагностика / автореф. дис. ... д-ра мед. наук. - М., 2003. - 121 с.
9. Титенко, А.М. Факторы, способствующие появлению и обнаружению новых вирусных инфекций / А.М. Титенко // Эпидемиол. и инфекц. бол. - 2004. - № 1. - С. 51-55.
SEROLOGICAL MONITORING OF ARBOVIRUS INFECTIONS IN STAVROPOL REGION
VASILENKO N. F., MALETSKAYA O. V., ERMAKOV A. V., VARFOLOMEYEVA N. G., KULICHENKO A. N.
В данной работе представлены результаты ис- The paper presents the results of blood sera tests
следований сывороток крови людей (доноров крови), of persons (blood donors), which reside in various
проживающих в различных природно-климатических natural and climatic zones of Stavropol Territory, for the
зонах Ставропольского края, на наличие антител клас- presence of class G antibodies to the causative agents
са G к возбудителям арбовирусных инфекций, свиде- of arbovirus infections. The results revealed cases of
тельствующие о существовании иммунной прослойки immunity to Crimean hemorrhagic fever, West Nile
среди людей к возбудителям Крымской геморрагиче- encephalitis, tick-born encephalitis among population.
ской лихорадки, лихорадки Западного Нила, клеще- The presence of specific antibodies to the arboviruses in
вого энцефалита. Наличие специфических антител к the local population proves the occurrence of inapparent
арбовирусам у местного населения свидетельствует infections with transmission mechanism involving blood-
о бессимптомно протекающей инфекции с трансмис- sucking arthropods.
сивным механизмом передачи кровососущими чле- Key words: arboviruses, Crimean hemorrhagic fever,
нистоногими. West Nile encephalitis, tick-born encephalitis, antibodies,
Ключевые слова: арбовирусы, Крымская ге- immune stratum моррагическая лихорадка, лихорадка Западного Нила, клещевой энцефалит, антитела, иммунная прослойка
