CC BY
137
МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ ПРОБЛЕМЫ СПОРТА
СДВИГИ В ПОПУЛЯЦИОННОМ СОСТАВЕ И ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ ЛИМФОЦИТОВ, ПРОДУКЦИИ ЦИТОКИНОВ И ИММУНОГЛОБУЛИНОВ У СПОРТСМЕНОВ ПРИ СИНДРОМЕ ПЕРЕТРЕНИРОВАННОСТИ
И.А. АФАНАСЬЕВА, Национальный государственный университет физической культуры, спорта и здоровья им. П.Ф. Лесгафта, г. Санкт-Петербург
Аннотация
Цель работы - оценить состояние иммунной системы и характер происходящих в ней изменений как вследствие высоких спортивных физических нагрузок в целом, так и под влиянием избыточных напряжений, ведущих к перетренированности. В исследовании принимали участие 129 мужчин -высококвалифицированных спортсменов в период интенсивных тренировок подготовительного периода тренировочного цикла (основная группа) и 17 практически здоровых мужчин того же возраста, не занимающихся спортом (контрольная группа). Средний возраст обследуемых составлял 18,5±2,3 года, средний стаж занятий спортом -9,8±2,1 года. Низкие показатели индекса анаболизма выявлены у одной трети спортсменов (35,2%). Исследование состояния Т- и В-систем иммунитета показало, что частота различных субпопуляций лимфоцитов не отличается в группах спортсменов с перетренированностью и при ее отсутствии.
Однако в группах спортсменов с перетренированностью снижен иммунорегуляторный индекс за счет повышения количества цитотоксических лимфоцитов. В этой же группе спортсменов наблюдается снижение резервной функциональной активности Т- и В-лимфоцитов. Полученные данные позволяют более детально оценить состояние иммунной системы и характер происходящих в ней изменений вследствие высоких спортивных физических нагрузок.
Ключевые слова: перетренированность, функциональная активность лимфоцитов, спортсмены.
Abstract
The purpose of work is to estimate a state of immune system and character of changes in it as due to high sports exercise stresses as a whole, and under influence of the superfluous strains leading to overtraining. 129 elite athletes took part in research during intensive trainings the preparatory season of a training cycle (experimental group) and practically able-bodied 17 men of the same age who are not going in for sports (control group).
Middle age was 18,5±2,3 year, the average experience in sports - 9,8±2,1 year. Low parameters of an index of an anabolism are taped at one third of athletes (35,2 %). Research of state T- and B-system immunodefence has shown, that frequency of various subpopulations of lymphocytes does not differ in groups of athletes with overtraining and without it. However in group of overtrained athletes the immunoregulatory index due to rising quantity of cytotoxic lymphocytes is lowered. In the same bunch of sportsmen depression of reserve functional activity T- and B-lymphocytes is observed. Obtained data allow to estimate in more details a state of immune system and character of its changes due to high sports exercise stresses.
Key words: overtraining, functional activity of lymphocytes, athletes.
Спорт высоких достижений связан с перенапря- недостаточно четко определенный комплекс психо-
жениями и развитием состояния, названного перетре- физиологических ответных реакций организма на:
нированностью. Синдром перетренированности - это 1) чрезмерную тренировочную нагрузку; 2) слишком
плотный график соревнований; 3) недостаточное время для восстановления после интенсивной рабочей нагрузки или любое сочетание вышеуказанных обстоятельств [5]. Конкуренция между спортсменами и интенсификация методов спортивной подготовки, программы подготовки, не адекватные физиологическим и нервно-психическим возможностям спортсменов, уменьшают время отдыха и со временем приводят к перетренированности атлетов [1]. Элитный спортсмен с высоким уровнем подготовки и сильной мотивацией постоянно балансирует на тонкой грани между оптимальным уровнем тренировки и «пере-тренированностью»[8, 9, 10].
Большую роль в возникновении состояния перетре-нированности играют изменения в эндокринной сфере, главным образом в коре надпочечников и гипофизе. В связи с этим перетренированность предлагают определять по индексу анаболизма (ИА) - соотношению количества тестостерона к кортизолу, регулирующему анаболические процессы во время восстановления [Roberts, 1993]. По существующим представлениям, отношение количества тестостерона к количеству кортизола регулирует анаболические процессы во время восстановления, поэтому изменение этого соотношения считают важным показателем, а возможно, и причиной возникновения синдрома перетренированности у спортсменов. Снижение индекса анаболизма рассматривают как признак перетренированности [Roberts, 1993; Уилмор Дж., Костил Д.Л., 1997; Трухина Л.В. и др., 1999).
Единого диагностического теста для определения перетренированности не существует. Для распознавания этого состояния необходимо выявление индикторов стресса, которые не возвращаются к норме после периода отдыха. Упражнения высокой интенсивности, подобно другим видам стресса, могут влиять и на функции иммунной системы. Указанием на супрессию иммунной функции при перетренированности является повышение заболеваемости инфекциями верхних дыхательных путей. Однако характер влияния перетренированности на функциональную активность иммунной системы изучен далеко не полностью. Некоторые авторы указывают на то, что перетренированность не влияет на функции иммунной системы - не изменяет пролиферацию Т-лимфоцитов и уровни ИЛ-1 и ИЛ-6 в плазме [8, 13].
Целью настоящего исследования было изучение характера влияния перетренированности на основные показатели иммунной защиты спортсменов - фагоцитарную и метаболическую активность лейкоцитов крови, соотношение субпопуляций и пролиферативную активность лимфоцитов.
Материалы и методы
В период с 2004 по 2007 г. были обследованы 129 мужчин - спортсменов высокой спортивной квалификации в период интенсивных тренировок подготовительного периода тренировочного цикла (основная группа) и 17 практически здоровых мужчин того же возраста, не занимающихся спортом (контрольная группа). Средний возраст обследуемых составлял 18,5±2,3 года, а средний стаж занятий спортом - 9,8±2,1 года. В исследовании
принимали участие только активно тренирующиеся и выступающие спортсмены высокой спортивной квалификации: кандидаты в мастера спорта, мастера спорта, мастера спорта международного класса. Спортсмены были представителями скоростно-силовых видов спорта.
Для выявления перетренированности использовали индекс анаболизма (ИА), рассчитываемый по соотношению уровня тестостерона к уровню кортизола в крови. Концентрации кортизола и тестостерона в крови определяли на анализаторе Boehringer Mannheim Im-munodiagnostics ES 300 (Германия) с использованием реактивов этой же фирмы (Enzyme Immunological Test in vitro “Boehringer Mannheim”).
Определение числа лимфоцитов крови с разным фенотипом проводили в микролимфоцитотоксическом тесте с моноклональными антителами к CD3, CD4, CD8, CD16, CD20, CD25, CD95 фирмы “Ortho” (США) и НПО «МедБиоСпектр» (Москва) и кроличьим комплементом. Реакцию проводили в планшетах Терасаки с окраской убитых клеток 5% раствором эозина и учетом под световым микроскопом.
Функциональную активность лимфоцитов оценивали в планшетной модификации реакции бласттрансфор-мации [3]. Оценивали спонтанную пролиферативную активность лимфоцитов после культивирования в течение 72 ч при 37°С в атмосфере с 5% СО2 в воздухе в 96-луночных U-образных планшетах («Медполимер», г. Санкт-Петербург) в среде RPMI-1640 с добавлением 10% эмбриональной телячьей сыворотки и 80 мкг/мл гентамицина и пролиферативный ответ лимфоцитов на стимуляцию Т- или В-митогенами (фитогемагглю-тинином (ФГА) и митогеном лаконоса (МЛ). Уровень пролиферации лимфоцитов оценивали по интенсивности включения 3Н-тимидина с помощью сцинтилляционно-го счетчика “Rak-Beta” и выражали числом импульсов в 1 мин. Индексы стимуляции рассчитывали из соотношения показателей митогениндуцированной и спонтанной бласттрансформации лимфоцитов.
Определение содержания цитокинов в сыворотке крови определяли иммуноферментным методом с помощью наборов реагентов на ИЛ-1-бета, ФНО-а, ИЛ-4 и ИЛ-8 производства фирм ООО «Протеиновый контур» и ООО «Цитокин» [4].
Измерение концентрации иммуноглобулинов IgG, IgM, IgA, IgE в сыворотке крови и слюне проводили иммуноферментным методом с помощью наборов реагентов фирмы ООО «Полигност» (г. Санкт-Петербург), в соответствии с инструкцией фирмы-производителя.
Статистическую обработку данных выполняли с помощью программы “Microsoft Office Excel”. Достоверность различий между средними величинами и их стандартными ошибками оценивали с помощью t-критерия Стьюдента.
Результаты и обсуждение
При сборе анамнеза выявлено, что в группе спортсменов встречаются следующие заболевания: частые ОРЗ (более 6 раз в год, со слов обследованных), воспалительные заболевания пародонта (ВЗП, по данным
(Ш)
обследования врачом-стоматологом) и, по данным врача-кардиолога, сердечно-сосудистая патология (ССП, на-
рушения процессов реполяризации и сердечного ритма) (рис. 1).
ССП
ОРЗ Ц мужчины
ВЗП
I женщины
Рис. 1. Частота наиболее часто встречающихся заболеваний в группе высококвалифицированных спортсменов (%)
О частоте перетренированности у спортсменов дает представление показатель ИА (рис. 2), характер распределения которого в группе спортсменов и в контрольной группе достоверно различается (р < 0,05). По результатам исследований все спортсмены (129 чел.) были разделены по значениям ИА на 2 группы: 1) в состоянии
% 100 90 -80 -70 -60 -50 -40 -30 -20 -10 -0
перетренированности, определяемом по ИА менее 3% (преобладание катаболических процессов над анаболическими), - 42 чел.; 2) без перетренированности при ИА более 3% (преобладание анаболических процессов над катаболическими) - 87 чел.
76,5
17,6
5.9
Спортсмены Контроль
□ > 5 ■ 3-5 П<3
Рис. 2. Соотношение разных значений показателей индекса анаболизма у спортсменов и в контрольной группе
В двух группах спортсменов, с перетренирован-ностью и без, было исследовано относительное число В-лимфоцитов (CD20+), Т-лимфоцитов (CD3+) и субпопуляций Т-лимфоцитов (CD4+, CD8+, CD16+, CD25+, CD95+) (табл. 1). У спортсменов с перетренированностью показатели субпопуляций лимфоцитов достоверно не отличаются от групп спортсменов без перетренирован-ности (р > 0,05). Вместе с тем как в той, так и в другой группе имеет место повышение CD16+, CD20+ и CD95+ и снижение CD4+ по сравнению с контрольной группой, что свидетельствует о том, что данные изменения характерны для всей группы спортсменов.
Как у спортсменов с перетренированностью, так и при ее отсутствии в большинстве случаев определялись нормальные показатели иммунорегуляторного индекса (ИРИ, отношения чисел клеток CD4/CD8) (рис. 3). Однако в группе спортсменов с перетренированностью частота низких значений ИРИ почти в 2 раза выше, чем в группе спортсменов без перетренированности (35,7 против 18,6% при р < 0,05, рис. 3), что указывает на возможность возникновения у них иммунодефицитных состояний. Вместе с тем в группе спортсменов без перетренированности в 18,6% случаев выявляется повышение ИРИ, что может способствовать развитию аутоиммунных реакций.
СЯ
1
Таблица 1
Сравнительная характеристика субпопуляций лимфоцитов в группах спортсменов с перетренированностью и при ее отсутствии
Группы обследованных Относительное число, %
CD3+ CD4+ CD8+ CD16+ CD20+ CD25+ CD95+
1 Спортсмены с перетренированностью (п = 42) 56,2±1,9 28,6±2,1 23,6±1,2 25,9±1,3 26,2±1,4 25,9±1,7 26,3±1,9
2 Спортсмены без перетренированности (п = 87) 55,7±1,2 28,9±1,1 22,0±1,0 25,0±0,9 27,6±0,9 25,9±1,4 27,5±1,3
Р > 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05
Контроль (п = 17) 59,9±1,2 33,5±1,0 25,0±0,56 19,8±0,5 18,9±0,9 23,5±0,52 14,9±0,6
Р с 1-к > 0,05 < 0,05 > 0,05 < 0,01 < 0,01 > 0,05 < 0,01
Р с 2-к < 0,02 < 0,01 < 0,01 < 0,01 < 0,01 > 0,05 < 0,01
Спортсмены Спортсмены
с перетренированностью без перетренированности
Рис. 3. Сравнительная частота низких, средних и высоких значений ИРИ в группах спортсменов с перетренированностью и при ее отсутствии (%)
(по оси абсцисс - подгруппы спортсменов с перетренированностью и без нее, по оси ординат- процент лиц)
Как видно из табл. 2, спортсмены с перетренированностью и без нее имеют одинаковый уровень спонтанной пролиферативной активности лимфоцитов, но их лимфоциты по-разному отвечают на стимуляцию. При наличии перетренированности Т- и В-лимфоциты менее активно отвечают на действие митогенов, т.е. имеет место
снижение резервной функциональной активности лимфоцитов. Индексы стимуляции лимфоцитов с ФГА и МЛ при перетренированности составляют соответственно 24,5±1,54 и 9,9±0,8 против 31,6±1,7 и 12,5±0,4 в группе сравнения (р < 0,01).
Таблица 2
Сравнительная характеристика активности Т- и В-лимфоцитов в группе спортсменов с перетренированностью и при ее отсутствии
Группы обследованных РБТЛ спонтанная (имп./мин) ФГА (Т-лим< юциты) МЛ (В-лимфоциты)
РБТЛ (имп./мин) ИС РБТЛ (имп./мин) ИС
1 Спортсмены с перетренированностью (п = 42) 1594±107 37542±2143,2 24,5±1,54 13628±761,7 9,9±0,8
2 Спортсмены без перетренированности (п = 87) 1812±87 47331±1488 31,6±1,7 20516±879 12,5±0,4
Окончание табл. 2
Группы обследованных РБТЛ спонтанная (имп./мин) м и ч Н Ї © юциты) МЛ (В-лимфоциты)
РБТЛ (имп./мин) ИС РБТЛ (имп./мин) ИС
Р > 0,05 < 0,01 < 0,01 < 0,01 < 0,01
Контроль (п = 17) 1225,8±102 30272±1597 25,99±1,1 15076±1238 12,63±0,9
Р с 1-к > 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05
Р с 2-к < 0,01 > 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05
Спортсмены в состоянии перетренированности и при ее отсутствии достоверно различались по уровню основных провоспалительных цитокинов в сыворотке крови и слюне (табл. 3). В целом в группе спортсменов уровни ФНО-а, ИЛ-1, ИЛ-4 в крови были достоверно повышены по сравнению с контрольной группой, что указывает на активацию иммунной системы спортсменов при высоких
физических нагрузках. В то же время спортсмены в состоянии перетренированности имели достоверно более низкие уровни всех изученных цитокинов, чем спортсмены без перетренированности. Это свидетельствует о том, что перетренированность оказывает негативное влияние на работу иммунной системы, снижая ее функциональные возможности.
Таблица 3
Сравнительная характеристика средних значений цитокинов в сыворотке крови и слюне в группах спортсменов мужчин с перетренированностью и при ее отсутствии (пг/мл)
А. Сыворотка крови
Группа обследованных ФНО-а ИЛ-1 ИЛ-4 ИЛ-8
1 Спортсмены с перетренированностью (п = 42) 50,3±10,3 163,1±19,6 25,7±1,9 3,6±0,7
2 Спортсмены без перетренированности (п = 87) 103,2±22,6 197,7±43,4 46,3±10,0 5,9±1,73
Р < 0,05 > 0,05 < 0,05 > 0,05
Контроль (п = 17) 15,9±5,6 103,7±32,3 15,06±7,2 63,63±2,9
Р с 1-к < 0,01 > 0,05 > 0,05 < 0,01
Р с 2-к < 0,01 > 0,05 < 0,01 < 0,01
Б. Слюна
Группа обследованных ФНО-а ИЛ-1 ИЛ-4 ИЛ-8
1 Спортсмены с перетренированностью (п = 42) 5,9±1,9 165,3±28,5 11,5±3,2 516,0±64,2
2 Спортсмены без перетренированности (п = 87) 12,6±2,8 192,1 ±28,2 7,8±1,7 433,0±139
Р < 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05
Контроль (п = 17) 79,4±20,0 833,1±172 1,68±1,08 276,5±41,5
Р с 1-к < 0,01 < 0,01 < 0,01 < 0,01
Р с 2-к < 0,01 < 0,01 < 0,01 < 0,01
В отличие от сыворотки крови концентрация про-воспалительных цитокинов ФНО-а и ИЛ-1 в слюне спортсменов по всей группе в целом была значительно ниже, чем у не спортсменов (табл. 3, р < 0,05-0,01), а концентрация противовоспалительного цитокина ИЛ-4 и хемокина ИЛ-8, наоборот, достоверно выше, чем в контроле (табл. 3). Однако и при анализе ротовой жидкости видно, что спортсмены в состоянии перетренированности демонстрируют еще более глубокое снижение уровней цитокинов (ФНО-а, ИЛ-1, р<0,01), чем спортсмены без перетренированности. Прежде всего эти данные указывают на то, что для спортсменов вообще характерно общее снижение провоспалительного потенциала местной мукозальной иммунной системы, защищающей
ротовую полость и ее слизистые оболочки. С другой стороны, они свидетельствуют о том, что состояние перетренированности накладывает дополнительный негативный отпечаток на местные иммунные функции, что может повышать (и повышает, как было показано выше, рис. 1) риск заболеваемости спортсменов.
Вместе с тем, как видно из табл. 4, в группе спортсменов с перетренированностью в целом определяются достоверно более высокие значения иммуноглобулинов ^А и ^М по сравнению с группой спортсменов без перетренированности (соответственно < 0,01 и < 0,05). Это обстоятельство, по-видимому, отражает действие компенсаторных механизмов, купирующих недостаточность других иммунологических функций.
(шШ>
Таблица 4
Сравнительная характеристика содержания иммуноглобулинов в крови и слюне в группах спортсменов с перетренированностью и при ее отсутствии
Группы Кровь, г/л Слюна, мкг/мг
обследованных IgG IgM IgA IgG IgM sIgA
1 Спортсмены с перетренированностью (n = 42) 19,1±1,5 2,26±0,14 З,0±0,17 2,З2±0,29 1,ЗЗ±0,2 78,4±7,5
2 Спортсмены без перетренированности (n = 87) 19,8±1,0 1,85±0,1З 2,З±0,1 1,9±0,1З 1,45±0,2 69,6±4,6
P > 0,05 < 0,05 < 0,01 > 0,05 > 0,05 > 0,05
Контроль (n = 17) 11,0±1,З 2,56±0,46 2,З5±0,4 1,7±0,49 0,86±0,15 29,З±6,4
P с 1-к < 0,01 > 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 < 0,01
P с 2-к < 0,01 > 0,05 > 0,05 > 0,05 < 0,01 < 0,01
Таким образом, у всех спортсменов нами проведено исследование уровня кортизола и тестостерона, и по их показателям рассчитывался индекс анаболизма. Снижение индекса анаболизма является одним из основных показателей состояния перетренированности спортсменов. Низкие показатели индекса анаболизма выявлены у одной трети спортсменов (35,2%).
Исследование состояния Т- и В-систем иммунитета показало, что частота различных субпопуляций лимфоцитов (CD3+, CD4+, CD8+, CD16+, CD20+, CD25+ и CD95+) не отличается в группах спортсменов с перетренированностью и при ее отсутствии. Однако в группах спортсменов с перетренированностью снижен иммунорегуляторный индекс за счет повышения количества цитотоксических лимфоцитов, что может быть
причиной иммунодефицитного состояния. В этой же группе спортсменов наблюдается снижение резервной функциональной активности Т- и В-лимфоцитов.
Полученные данные позволяют более детально оценить состояние иммунной системы и характер происходящих в ней изменений как вследствие высоких спортивных физических нагрузок в целом, так и под влиянием избыточных напряжений, ведущих к развитию перетренированности. Результаты нашего исследования привлекают внимание к недостаточно освещенной проблеме перетренированности, показывают важность дальнейшего углубленного изучения механизмов и возможных последствий состояния перетренированности спортсменов.
Литература
1. Исаев А.П., Кабанов С.А., Ненашев А.В. Иммунология в спорте // Вестник спортивной медицины России. -1999. - Т. 24. - № 3. - С. 29.
2. Исаев А.П., Пичагина С.Г., Потапов Т.В. Стратегии адаптации человека: учеб. пособие. - Тюмень, - 2003. -248 с.
3. Назаров П.Г., Пуринь В.И. Реакция бласттрансфор-мации лимфоцитов в культурах цельной крови. Количественная оценка с помощью сцинтилляционного счетчика // Лабор. дело. - 1975. - № 4. - С. 195-198.
4. Симбирцев А.С. Цитокины - новая система регуляции защитных реакций организма // Цитокины и воспаление. - 2002. - Т. 1. - № 1. - С. 9-16.
5. Спортивная медицина: справочное издание. - М.: «Терра-спорт», 1999. - 240 с.
6. Трухина Л.В., Павлова ТЛ, Костина Л.В. и соавт. Состояние функции щитовидной железы у спортсменов // Вестник спортивной медицины России. - 1999. -Т. 24.- № 3.- С. 56.
7. Уилмор Дж., Костил Д.Л. Физиология спорта и двигательной активности: пер. с англ. - Киев: Олимпийская литература, 1997. - 504 с.
8. Генинг Т.П. Перекисное окисление липидов и функциональное состояние нейтрофилов периферической
крови у спортсменов на различных этапах годичного цикла / Т.П. Генинг [и др.] // Вестник спортивной науки. -2011. - № 2. - С. 39-44.
9. Таймазов В.А. Повышение эффективности прогнозирования успешности спортсменов-единоборцев с учетом генетических основ родовой, межвидовой и внут-риродовой ориентации / В.А. Таймазов, С.Е. Бакулев,
В.А. Чистяков // Вестник спортивной науки. - 2011. -№ 2. - С. 35-39.
10. Левандо В.А. Экспериментальное изучение механизмов иммунной защиты полиэнзимных препаратов при спортивной деятельности / В.А. Левандо [и др.] // Вестник спортивной науки. - 2003. - № 1. - С. 28-31.
11. Parry-Billings M, Budgett R, Koutedakis Y. et al. Plasma amino acid concentrations in the overtraining syndrome: possible effects on the immune system // Med. Sci. Sports Exerc. - 1992. - Vol. 24. - № 12. - P. 1353-1358.
12. Roberts A.S., Mc Clure R.D., Weiner G.A. Overtraining affects male reproductive status // Fertil. Steril. - 1993. -Vol. 60. - P. 686-692.
13. Walsh N.P., Blannin A.K., Robson P.J., Gleeson M. Glutamine, exercise and immune function. Links and possible mechanisms // Sports Med. - 1998. - Vol. 26. - № 3. -P. 177-191.
m
i
References
1. Isaev A.P., Kabanov S.A., Nenashev A.V. Immunology in sports: bulleten sportivnoi medicini Rossii. - 1999. -V. 24. - № 3. - P. 29.
2. Isaev A.P., Pichagina S.G., Potapov T.V. Strategy of acclimatization of the person: manual. - Tyumen, 2003. - 248 p.
3. Nazarov P.G., Purin V.I. Blastogenic response of lymphocytes in cultures of an integral blood. A quantitative assessment by means of scintillation counter // Laboratornoe delo. - 1975. - № 4. - P. 195-198.
4. Simbirtzev A.S. Cytokine - new system of a regulation of defense reactions of an organism // Cytokines and an inflammation. - 2002. - Vol. 1. - № 1. - P. 9-16.
5. Sports medicine: reference manual. - M.: «Terra-sports», 1999. - 240 p.
6. Truhina L.V., Pavlova T.L., Kostina L.V. et al. A state of function of a thyroid gland at sportsmen // Bulleten sportivnoi medicini Rossii. - 1999. - V. 24. - № 3. - P. 56.
7. Willmore J, Costill D.L. Physiology of sports and a motor performance. - Kiev: Olympic literature. - 1997. - 504 p.
8. Gening T.P. Lipids peroxidation and functional state of peripheral blood neutrophils in athletes at different stages
of training process / T.P.Gening et al. // Vestnik sportivnoi nauki. - 2011. - № 2. - P. 39-44.
9. Taimazov V.A. Improvement of success prognosis efficacy in combat arts athletes taking into account genetic basis of ring, interkind and disciplinary orientation / V.A.Taimazov, S.E. Bakulev, V.A. Chistyakov // Vestnik sportivnoi nauki. - 2011. - № 2. - P. 35-39.
10. Levando V.A. Experimental investigation of immune protection mechanisms by polyenzime preparations in sports activity / V.A. Levando et al. // Vestnik sportivnoi nauki. -2003. - № 1. - P. 28-31.
11. Parry-Billings M, Budgett R, Koutedakis Y. et al. Plasma amino acid concentrations in the overtraining syndrome: possible effects on the immune system // Med. Sci. Sports Exerc. - 1992. - Vol. 24. - № 12. - P. 1353-1358.
12. Roberts A.S., Mc Clure R.D., Weiner G.A. Overtraining affects male reproductive status // Fertil. Steril. - 1993. -Vol. 60. - P. 686-692.
13. Walsh N.P., Blannin A.K., Robson P.J., Gleeson M. Glutamine, exercise and immune function. Links and possible mechanisms // Sports Med. - 1998. - Vol. 26. - № 3. -P. 177-191.
ШШ)
