CC BY
166УДК 619:576.809.7.852
САП: ОСОБООПАСНОЕ ИНФЕКЦИОННОЕ ЗАБОЛЕВАНИЕ, ЕГО ХАРАКТЕРИСТИКА, ЭПИЗООТОЛОГИЯ И ДИАГНОСТИКА
1Л.А.Мельникова - кандидат ветеринарных наук, вед.научный сотрудник;
2Н.К.Букова - доктор биологических наук, профессор;1.Х.Н.Макаев - доктор ветеринарных наук, профессор; 1С.В.Иванова - кандидат биологических наук, ст. научный сотрудник;
1Э.Н.Мустафина - кандидат ветеринарных наук, вед. научный сотрудник;
3М.Г.Савкова - ветеринарный врач.
1ФГБНУ«Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности», г. Казань (420075, г.Казань, Научный городок-2, тел.+7(843) 239-53-20,
e-mail: vnivi@mail.ru).
2ФГБУ «Всероссийский государственный Центр качества и стандартизации лекарственных
средств для животных и кормов» Россельхознадзора, Москва (123022, г. Москва Звенигородское шоссе, 5, e-mail: bukova@vgnki.ru).
3ГУ «Забайкальская краевая ветеринарная лаборатория», г. Чита (672010, г.Чита, ул.Н.Островского, 33, e-mail: oblvetlab@chitaonline.ru).
Сап опасное инфекционное заболевание, которое поражает непарнокопытных животных и людей, протекает в хронической форме, поэтому разработка средств и методов для своевременного установления источника инфекции, определения за короткие сроки вида микроорганизма с использованием методов диагностики, обеспечивающих выявление и идентификацию возбудителя с высокой точностью, является актуальной проблемой ветеринарной, медицинской наук и практики. Для ее решения на современном этапе уделяют большое внимание разработке новых надежных диагностикумов. При их изготовлении используют штамм 5584 возбудителя сапа, который хранится и поддерживается во Всероссийской коллекции микроорганизмов возбудителей особо опасных инфекций. В работе приведен анализ возникающих ситуаций при подозрении на сап в различных регионах Российской Федерации и, по его результатам, рекомендованы мероприятия по предупреждению заноса, распространения, а при возникновении заболевания - его диагностики и ликвидации. Для анализа эпизоотической ситуации по сапу в мире были использованы данные Международного Эпизоотического Бюро, а также данные собственных исследований, полученные при выезде в регионы РФ в спорных случаях при подозрении на сап и при исследовании присланного патматериала с мест. Основное распространение сапа приходится на регионы Юго-Восточной Азии и Тихого океана. При плановых исследованиях на сап имеют случаи ложноположительных реакций, происхождение их можно объяснить тем, что возбудитель сапа имеет общие антигены со многими представителями рода Burkholderia и других микробных видов, что обуславливает положительные результаты пластинчатой РА с сапным цветным антигеном и проявление местной реакции при проведении подкожной малеиновой пробы.
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: сап, эпизоотология, аллергические и серологические реакции, сенсибилизация.
Сап - особо опасное инфекционное заболевание, поражающее непарнокопытных животных и человека. Возбудителем болезни является палочковидный микроорганизм Burkholderia mallei, который был открыт в 1882 году Леффлером и Шютцем и до 1996 года, назывался Pseudomonas mallei.
Возбудитель сапа во многом уникален. Это касается, в частности, его экологии (зооноз), структуры (атрих), ограниченной метаболической активности (наиболее прихотлив к фак-
торам роста). Можно считать, что особенность морфологии клеток и их обмен веществ является следствием эволюционного перехода к обли-гатному паразитизму. Естественной средой его обитания является только организм животных, а резервуаром возбудителя - однокопытные.
Однако известно большое количество животных, инфицированность которых возбудителем сапа была выявлена в естественных и лабораторных условиях. Систематизированные данные об этом приведены в работе А.А.Дорофеева (1941),
НА ЕТЕРМНЛРНЫЙ
Врач
в соответствии с которыми в природных условиях к сапу восприимчивы осел, мул, лошак, кошка, пантера, леопард, степная кошка, барсук. Исключительно редко в природных условиях сапом болеют коза, собака, бурый и белый медведи. В лабораторных условиях наиболее чувствительны к сапу кролик, еж, хорек, хомяк, лесная мышь. При заражении большими дозами возбудителя можно вызвать сапную инфекцию у белой мыши, белой крысы, домашней свиньи, крупного рогатого скота. Невосприимчивы к сапу птицы, хладнокровные и насекомые, у которых возбудитель только сохраняется в течение 2-65 суток. Поэтому, организм всех перечисленных животных, за исключением однокопытных, следует отнести к дополнительной или случайной среде обитания. Это свидетельствует о том, что эволюционный переход к паразитическому образу жизни одновременно сопровождается и узкой специализацией специфических (основных) хозяев. Ими являются однокопытные животные, которые заражаются при взаимном контакте, в условиях совместного содержания и выпаса, при кормлении из общих кормушек, на водопое. С механизмом заражения связана клиническая картина болезни. По локализации процесса у животных дифференцируют легочной, носовой и кожный сап. По течению болезни выделяют острую и хроническую инфекцию. У лошадей, чаще всего, поражаются задние конечности. В тяжелых случаях кожная форма осложняется септицемией или острым носовым сапом, которые чаще всего заканчиваются летально. При латентном хроническом течении инфекции в основном поражаются слизистые оболочки, что сопровождается появлением узелков, язв, гнойных истечений, подчелюстных лимфоденитов [2].
Ареал сапа ранее занимал значительные территории, где имелись однокопытные. До второй половины 20-ого века его регистрировали на всех континентах за исключением Антарктиды и Австралии. На Азию приходилось 98,26% вспышек болезни, на Европу 1,05%, на Южную Америку 0,52% и на Африку 0,17%. По данным МЭБ за последние 10-15 лет заболевание диагностировали в странах Азии (Индии, Индонезии, Иране, Китае, Лаосе, Монголии, Мьянме и Пакистане) и Африки (Анголе, Камеруне, Эритрее и Эфиопии). Спорадические случаи болезни отмечали в некоторых государствах Южной Америки (Бразилии) [3].
Неблагополучие по сапу некоторых государств, имеющих границу с Россией, например
Монголии и Китая, где происходят неучтенные случаи обмена скота и импортируемого животноводческого сырья, влекут за собой не всегда предсказуемую эпизоотическую ситуацию, вследствие чего существует опасность заноса сапа на территорию Российской Федерации. Широкие международные контакты, связанные со многими областями человеческой деятельности, где задействованы животные восприимчивые к сапу (торговля, гастроли цирков и театров зверей, конно-спортивные соревнования, международные аукционы и т.д.), также могут способствовать распространению инфекции.
В современных условиях в арсенале разных стран, в том числе в России имеются специфичные стандартные сапные диагностикумы для исследования животных.
На территории России сап ликвидирован в конце 50-х годов прошлого столетия, однако опасность проникновения возбудителя этой болезни в страну из неблагополучных по этой инфекции территорий не может быть полностью исключена, что подтверждают целенаправленные исследования, проведенные сотрудниками Волгоградского НИПЧИ на мясокомбинате г. Улан-Удэ в 1984-1985 гг. При этом исследованием материала от 200 убитых лошадей, импортированных из Монголии, в трех случаях обнаружили специфические сапные антигены и антитела, а в одном случае был выделен типичный вирулентный штамм возбудителя сапа. Данный факт дает основание полагать, что диагностика сапа находится не на должном уровне, так как всех лошадей из Монголии официально подвергали обязательной трехкратной аллергической пробе с маллеином и постановкой РСК [5]. Другими важными моментами, требующими внимание к этой инфекции, являются: 1) возможность использования возбудителя как агента оружия массового поражения, так как во многих зарубежных военных бактериологических лабораториях США, Великобритании, Франции, Германии усиленно занимаются отбором высоковирулентных штаммов возбудителя сапа; 2) отсутствие специфических способов ее профилактики и эффективных средств лечения [4]. Изложенное диктует необходимость постоянного внимания к этой инфекции. Учитывая это, в приложении к приказу по Минсельхозу РФ от 19.12.2011 г. №476 в перечне болезней животных, по которым могут устанавливаться ограничительные мероприятия (карантин), сап относят
к особо опасным заболеваниям, и работа с этой инфекцией проводится согласно санитарным правилам [1]. Мероприятия против сапа заключаются в предупреждении заноса возбудителя в страну, систематическом контроле благополучия поголовья лошадей (ослов, мулов), недопущении распространения болезни и ликвидации ее в случае появления. Диагноз на сап устанавливают на основании результатов клинического осмотра, серологических, аллергических, патолого-анатомических, а также бактериологических и гистологических исследований с учетом эпизоотических данных. Для контроля благополучия страны по сапу необходимы активные специфичные эффективные диагностические препараты. В связи с этим особую важность приобретает полноценность штаммов возбудителя сапа, использующихся для производства диагностических средств. Хранение штаммов возбудителя сапа осуществляется во Всероссийской коллекции микроорганизмов (ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ»), где созданы оптимальные условия длительного хранения возбудителей сапа для сохранения их основных биологических свойств.
В нашей стране для изготовления препаратов (маллеин, антиген, сыворотка для РСК, цветной антиген для пластинчатой РА) применяется единственный производственный штамм Burkholderia mallei №5584, выделенный Д.С.Руженцевым в 1917 году от больной лошади, у которой сап проявлялся во всех трех формах: носовой, легочной, кожной. Штамму присвоен статус Master seed и составлен стандарт организации, который введен в действие 22.03.2011г.
Для массовой диагностики сапа в мировой практике используют рекомендованные МЭБ тесты - РСК, малеиновая проба. В России, наряду с этими тестами, с 1977 года при плановых массовых исследованиях лошадей на сап применяют пластинчатую реакцию агглютинации с сапным цветным антигеном. Несмотря на высокую специфичность этих средств диагностики, в различных регионах страны периодически регистрируются единичные случаи в подозрении на зараженность лошадей возбудителем сапа. Однако положительные результаты серологических и (или) аллергических исследований на сап не подтверждаются патологоанатомическими, бактериологическими и биологическими исследованиями. В таких случаях принимаются все меры в соответствии с действующей инструкцией по предупреждению и ликвидации сапа. В сомни-
тельных случаях выделенные культуры или патологический материал, отобранный у животных, убитых с диагностической целью, направляют в учреждения, работа которых регламентирована соответствующими инструкциями и правилами, в частности, ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ», которое проводит работу по оказанию консультативной и практической помощи регионам, где существует угроза заноса возбудителя с неблагополучной территории по этому заболеванию (южные и юго-восточные районы страны). Многократными исследованиями установлено, что во всех случаях присланные культуры и выделенные из патматериала, не соответствовали по биологическим свойствам возбудителю сапа. Сотрудники Центра, выезжая в различные регионы РФ по заданию Департамента Ветеринарии РФ для уточнения диагноза на сап, также устанавливали случаи ложноположительных результатов. В таких случаях в пластинчатой РА при исследовании сыворотки крови наблюдали мгновенное (в течение 2-3 секунд) формирование крупно-хлопчатого агглютината, тогда как при постановке РА со специфической сывороткой анти-В. mallei с гомологичным антигеном, реакция наступала не ранее чем через 10-15 секунд с образованием более мелкозернистого агглютината. Для подтверждения истинного положения по сапу проводили подкожную маллеинизацию. На основании результатов серологического и аллергического исследований, а в отдельных случаях экспертизой материала от вынужденно убитых животных исключали наличие сапа у данных животных. Учитывая частоту проявления ложноположительных реакций, можно предположить, что организм животных, проявляющих ложноположительную реакцию сенсибилизирован микроорганизмами, имеющими антигенное сходство с Burkholderia mallei, которое обуславливает положительные результаты пластинчатой РА с сапным цветным антигеном и проявление местной реакции при проведении подкожной малеиновой пробы.
Заключение. Вероятность заноса сапа в страну не исключена, поэтому необходим строгий систематический контроль благополучия поголовья лошадей (ослов, мулов) по этому заболеванию.
Ложноположительные результаты при серологических и аллергических исследованиях лошадей на сап, требуют обратить особое внимание не только на порядок проведения, но и на оценку, интерпретацию полученных при
ЕТЕРМНЛРНЫЙ
Врач
этом данных. При установлении диагноза на сап результаты клинического, серологического, аллергического и патологоанатомического исследований следует подтверждать положительными данными бактериологического
Литература
исследования и (или) биологической пробой. Для диагностики сапа животных необходимо проводить анализ эпизоотологических данных и учитывать результаты гистологических исследований патологического материала.
1. Безопасность работы с микроорганизмами 1-11 групп патогенности // СП.1.2.011-94.
2. Беляков, В.Д. Псевдомонады и псевдомонозы / В.Д. Беляков, Л.А.Ряпис, В.И.Илюхин // М.-«Медицина».- 1990.- 224 с.
3. Букова, Н.К. Неспецифические реакции при диагностике сапа лошадей/ Н.К. Букова, К.П. Юров, Л.А. Мельникова //Ветеринария.- 2009.-№9. -С. 21-24.
4. Ковалев Г.К. Сап (обзор) // ЖМЭИ.- 1971.- №1.- С.63-69.
5. Мельников, Б.И. К вопросу о выделении возбудителя сапа от монгольской лошади на Улан-У-денском мясокомбинате / Б.И.Мельников, Н.Н.Пивень и др. // В Кн.: Вопросы противоэпидемической защиты.- Москва, 1987. - НИИЭМ им. Н.Ф.Гамалея. - Вып. 33.- С.49-54.
GLANDERS - PARTICULARLY DANGEROUS DISEASE: CHARACTERIZATION, EPIZOOTOLOGY, AND DETECTION
1Melnikova L.A. - Candidate of Veterinary Sciences; 2Bukova N.K. - Doctor of Biological Sciences,
professor; Makaev Kh.N. - Doctor of Veterinary Medicine, professor; 1Ivanova S.V. - Candidate of Biological Sciences; Mustafina I.N. - Candidate of Veterinary Sciences; 3Savkova M.G. -
director.
1Federal Center for Toxicological, Radiation and Biological Safety, Kazan (e-mail: vnivi@mail.ru).
2The All-Russian State Centre for Quality and Standardization of Veterinary Drugs and Feed
(VGNKI), Moskow (e-mail: bukova@vgnki.ru).
3Transbaikalskaya edge veterinary laboratory (e-mail: oblvetlab@chitaonline.ru).
Glanders is a particularly dangerous infectious affecting the solid-hoofed animals and human. The infection proceeds in chronic form, therefore timely and accurate identification of the infection source and microorganism species is a crucial issue in Animal Health and Medicine. In this regard, the development of novel reliable detection means and methods are required. Most of the available diagnostic means are based on glanders agent 5584 strain deposited in the National collection of particularly dangerous pathogens. Our work provides the analysis of glanders epizootic situation in different parts of the world and using best practices and measures to prevent its introduction, spread, and in case of the infection emergence its diagnosis and elimination in Russia. The data from the International Epizootic Bureau and our research data of cases of suspicion for glanders and examination of pathologic material send from the infected loci were used as material for review. The major places of glanders spread are the regions of South-East Asia and the Pacific Ocean. The scheduled routine examinations sometimes reveal false positive responses at serological and skin tests. This can be explained by the fact that the glanders causative agent has common antigens with many species of Burkholderia genus and other microbial species.
KEYNWORDS: glanders, epizootology, skin allergic and serological tests, sensibilization.
References
1. Bezopasnost raboty s microorganizmami I-II gruppy patogennosti [Safety rules at handling the microorganisms of I and II groups of pathogenicity] // Sanitarniye pravila - Sanitation regulations 1.2.011-94.
