CC BY
40
УДК 597.587.9-12 (234.24)
САНИТАРНО-МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЕ СОСТОЯНИЕ РЕЧНОЙ КАМБАЛЫ (PLATICHTHYSFLESUSL.) БАЛТИЙСКОГО МОРЯ
А.Е. Семенова, магистрантка, alexsdelfin@gmail.com О.В. Казимирченко, канд. биол. наук, доцент, okazimirchenko@gmail.com ФГБОУ ВО «Калининградский государственный технический университет»
Проведен санитарно-микробиологический анализ речной камбалы Балтийского моря. В результате анализа изучена микрофлора, включающая группы условно-патогенных, сани-тарно-показательных и сапрофитных бактерий. В составе бактериофлоры рыбы с язвенными и опухолевыми наростами на кожных покровах идентифицированы потенциально опасные бактерии видов P. putida, P. putrefaciens, P. diminuta и A. hydrophila.
Балтийское море, речная камбала, лимфоцистис, язвенное поражение, условно-патогенные бактерии
Получение высококачественной рыбной продукции во многом зависит от изначального состава микрофлоры рыбы и санитарного состояния районов промысла. В настоящее время в результате загрязнения водных экосистем в популяциях рыб возможна вспышка инфекционных заболеваний за счет патогенных вирусов и бактерий, среди которых могут находиться опасные для здоровья человека виды. В связи с этим мониторинг концентрации в ихтиофауне патогенных и санитарно-показательных микроорганизмов - актуальное направление в экологическом анализе водных экосистем.
Речная камбала - ценный промысловый вид рыбы Балтийского моря. В течение длительного периода у речной камбалы регистрируют специфичное вирусное заболевание -лимфоцистис, характеризующееся образованием опухолевых наростов [1, 2], и язвенное поражение кожи [3, 4].
Объектом наших исследований послужила микрофлора речной камбалы Балтийского моря. Санитарно-микробиологические исследования были начаты в лаборатории ихтиопато-логии в 2014 г.
При изучении состава микрофлоры речной камбалы использовали стандартные методы, принятые в ихтиобактериологии и санитарной микробиологии [5, 6, 7].
При клиническом исследовании у речной камбалы на поверхности тела нами выявлены опухоли в виде узелков или нодул, располагающихся одиночно или группами, собранных в «гроздья». Подобный тип опухолей характерен для лимфоцистиса [8] (рис. 1).
Рисунок 1 - Опухоли на брюшной стороне тела речной камбалы
У камбалы также регистрировали язвы бледно-красного или светло-коричневого цвета с красноватым ободком. Язвы размером 2-4 см обычно располагались на брюшной стороне тела, в районе боковой линии или вблизи хвостового плавника (рис. 2).
Рисунок 2 - Язва на теле речной камбалы
У некоторых экземпляров рыбы фиксировали обесцвечивание кожных покровов вдоль боковой линии.
В составе микрофлоры речной камбалы Балтийского моря было обнаружено 14 родов бактерий, в большинстве своем относящихся к грамотрицательным палочковидным бактериям, входящим в две большие таксономические группы. Из группы 4 «Грамотрицательные аэробные или микроаэрофильные палочки и кокки», подгруппы 4А нами были выделены бактерии родов Acinetobacter, Alcaligenes, Moraxella и Pseudomonas. Из группы 5 «Факультативные анаэробные грамотрицательные палочки», подгруппы 1 «Семейство Enterobacteria-сеае» в микрофлоре рыбы обнаружили бактерий, относящихся к четырем родам: Citrobacter, Edwardsiella, Escherichia, Klebsiella.
Остальные выделенные нами штаммы бактерий относились к грамположительным бактериям и входили в три большие таксономические группы. Из группы 17 «Грамположи-тельные кокки» нами были определены бактерии родов Micrococcus, Planococcus и Staphylo-coccus; из группы 18 «Грамположительные палочки и кокки, образующие эндоспоры» - палочковидные бактерии рода Bacillus; из группы 20 «Грамположительные не спорообразую-щие палочки неправильной формы» - бактерии рода Microbacterium.
В составе микрофлоры речной камбалы почти в равном соотношении доминировали морские палочковидные неподвижные бактерии рода Moraxella (24 % от всех выделенных нами штаммов бактерий) и условно-патогенные палочковидные подвижные ферментирующие глюкозу бактерии рода Pseudomonas (21 % от всех выделенных штаммов бактерий).
В среднем количественном диапазоне всех обнаруженных в микрофлоре рыбы бактерий преобладали палочковидные бактерии родов Aeromonas и Escherichia. Лидирующими среди кокковых форм были бактерии родов Planococcus и Micrococcus.
В единичных количествах в микрофлоре речной камбалы были обнаружены санитар-но-значимые бактерии родов Citrobacter, Edwardsiella и Klebsiella, сапрофитные палочковидные бактерии родов Alcaligenes и Acinetobacter, грамположительные палочки рода Micro-bacterium, кокковые бактерии рода Staphylococcus и споровые палочковидные бактерии рода Bacillus.
Условно-патогенная группа бактерий в наибольшем количественном соотношении была представлена палочковидными бактериями родов Aeromonas и Pseudomonas. Эти бактерии отличались видовым разнообразием, но в микрофлоре рыбы преобладали неферменти-рующие глюкозу бактерии P. pseudoalgaligenes и P. alcaligenes и ферментирующие углеводы бактерии A. hydrophila. Идентифицированные виды псевдомонад и аэромонад известны как возбудители бактериальных заболеваний промысловых видов рыб.
Среди санитарно-показательных микроорганизмов фекальной группы более 50 % штаммов приходилось на кишечные палочки E. coli. Часто высеваемым видом из микрофлоры рыбы были также сероводородобразующие C. freundi. Наличие бактерий фекальной группы указывает на санитарное неблагополучие среды обитания речной камбалы.
Сапрофитная группа бактерий, изолированная из микрофлоры речной камбалы, включала как морские виды, среди которых преобладали M. athlantae и M. lacunata, так и пресноводные виды при доминировании M. varians и А. fecalis. Обнаруженные виды сапрофитных бактерий входят в состав нормального микробиоценоза рыб и среды их обитания.
При проведении санитарно-микробиологических исследований нами был проанализирован состав микрофлоры и циркуляция бактерий в органах и тканях внешне здоровых рыб и рыб с патологическими изменениями на коже.
Циркуляция видов условно-патогенных бактерий у внешне здоровой рыбы представлена в табл. 1.
Таблица 1 - Циркуляция условно-патогенных бактерий у внешне здоровой речной камбалы
Виды бактерий Ткани и органы
Кожа Жабры Мышцы Почки Кишечник
A. salmonicida + - - - -
A. media - - - + +
A. trota - + - - -
A. popofii - - - - +
A. culicicola + + - - -
E. tarda - + - - -
P. pseudoalcaligenes - - + - -
Условно-патогенная микрофлора внешне здоровой рыбы была представлена тремя родами бактерий - Aeromonas, Pseudomonas и Edwardsiella, среди которых по количеству видов доминировали аэромонады. В микрофлоре кожных покровов нами были обнаружены условно-патогенные бактерии видов A. culicicola и A. salmonicida, известные как возбудители фурункулеза промысловых видов рыб. Жабры речной камбалы были контаминированы как видами аэромонад (A. culicicola, A. trota), так и бактериями вида E. tarda - возбудителя эд-вардсиеллеза промысловых рыб. Микрофлора мышц была представлена неферментирующи-ми бактериями P. pseudoalcaligenes, известными как бактерии порчи рыбного сырья. В микробиоценозе кишечника нами были определены A. popofii и A. media, этиологические агенты аэромоноза рыб. Кроме того, A. media также обсеменяла почки.
Условно-патогенные бактерии, обнаруженные у рыб с язвенными поражениями, представлены в табл. 2.
Таблица 2 - Условно-патогенные бактерии, обнаруженные у речной камбалы с язвенными поражениями_
Виды бактерий Ткани и органы рыбы
Язвы на коже Опухоли на коже Жабры Мышцы Почки Кишечник
P. putida + - - - - +
P. putrefaciens + + - - - -
P. pseudoalcaligenes + + + + + +
P. diminuta - + - - - -
A. hydrophila - + + - - -
В составе микрофлоры язвенных поражений были обнаружены только условно-патогенные бактерии рода Pseudomonas. Этиологическая структура псевдомонад включала три вида бактерий - ферментирующие глюкозу P. putida, P. putrefaciens и неферментирую-щие углеводы P. pseudoalсaligenes. Эти виды псевдомонад были зарегистрированы и в микрофлоре клинически здоровой рыбы.
В составе микрофлоры опухолей были выявлены два рода условно-патогенных бактерий - Pseudomonas и Aeromonas. По видовому составу преобладали псевдомонады тех же видов, что и в микрофлоре язвенных поражений. В основном встречали ферментирующих глюкозу и некоторые другие углеводы бактерий P. putrefaciens и P. diminuta и неферменти-рующих P. pseudoahaligenes. Все обнаруженные виды псевдомонад относятся к амонифици-рующим бактериям, которые обладают активными ферментами протеазами, расщепляющими белок. Кроме того, бактерии P. putrefaciens расщепляют серосодержащие аминокислоты с образованием сероводорода, что приводит к быстрой порче рыбы.
Потенциально-опасные для морских рыб бактерии рода Aeromonas были представлены одним видом - A. hydrophila, ферментирующим глюкозу с образованием газа и расщепляющим белки с образованием сероводорода.
Жабры были обсеменены ранее изолированными нами бактериями A. hydrophila и P. pseudoa^aligenes, которые также были обнаружены в составе микрофлоры мышц, почек и кишечника камбалы.
Таким образом, санитарно-микробиологический анализ речной камбалы Балтийского моря выявил присутствие в составе ее микрофлоры как потенциально-опасных бактерий, способствующих развитию язвенного поражения на коже, так и санитарно-значимых бактерий фекальной группы, которые относятся к индикаторам санитарного неблагополучия водной среды и в ассоциации с опасными бактериями могут осложнять течение бактериальной инфекции.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Гаевская, А.В. Справочник основных болезней и паразитов промысловых видов рыб Атлантического океана / А.В. Гаевская, А.А. Ковалева. - Калининград: Книжное издательство, 1991. - 208 с.
2. Родюк, Г.Н. Лимфоцистис речной камбалы (Platichthys flesus L.) в российских водах Южной Балтики: динамика встречаемости заболевания в 2005-2010 гг. / Г.Н. Родюк, С В. Иванов // Вопросы рыболовства. - 2013. - Т. 14, №2 (54). - С. 353-363.
3. Wiklund, T., Bylund G. Skin ulcer disease of flounder Platichthys flesus in the northern Baltic Sea / T. Wiklund, G. Bylund // Diseases of aquatic organisms, 1993. - Vol. 17. - P. 165-174.
4. Родюк, Г.Н. Результаты мониторинга язвенного поражения кожи речной камбалы (Platichthys flesus L.) в российских водах Южной Балтики в 2005-2008 гг. / Г.Н. Родюк // Гидробиология и ихтиопатология: сб. науч. тр., посвященный 120-летию со дня рождения Н С. Гаевской. - Калининград: Издательство ФГОУ ВПО «КГТУ», 2009. - С. 81-87.
5. Практикум по ихтиопатологии: учебное пособие / Н.А. Головина [и др.]; под ред. Н.А. Головиной. - Москва: МОРКНИГА, 2016. - 417 с.
6. Общая и санитарная микробиология с техникой микробиологических исследований / под ред. А.С. Лабинской, Л.П. Блинковой, А.С. Ещиной. - Москва: Медицина, 2004. - 576 с.
7. Методы общей бактериологии / под ред. Ф. Герхардта. - Москва: Мир, 1984. - Т. 3. -
264 с.
8. Ихтиопатология / Н.А. Головина [и др.]; под ред. Н.А. Головиной, О.Н. Бауера. -Москва: Мир, 2003. - 448 с.
SANITARY AND MICROBIOLOGICAL STATUS OF FLOUNDER FROM THE BALTIC SEA
A.E. Semenova, Graduate student, alexsdelfin@gmail.com O.V. Kazimirchenko, Candidate of Biological Sciences, Associate Professor,
okazimirchenko@gmail.com FGBOU VO "Kaliningrad State Technical University"
The sanitary-microbiological analysis of flounder (Platichthys flesus L.) from the Baltic Sea has been carried out. Fish microflora including group of facultative pathogenic, sanitary-indicative and saprophytic bacteria was analyzed. The potentially dangerous bacteria of P. putida, P. putrefa-ciens, P. diminuta and A. hydrophila species were identified as a part of skin ulcer and tumors microflora.
Baltic Sea, flounder, limfotsistis, ulcerative lesion, facultative pathogenic bacteria
