CC BY
21
Химия растительного сырья. 2019. №3. С. 119-127. DOI: 10.14258/jcprm.2019035110
УДК 582.669.26 : 547.92 С-/0-ГЛИК03ИЛФЛАВ0НЫ SILENE ITALICA (CARYOPHYLLACEAE)
© Д.Н. Олейников1", Н.И. Кащенко1, Н.К. Чирикова2
1 Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН,
ул. Сахьяновой, 6, Улан-Удэ, 670047 (Россия), e-mail: [email protected]
2 Северо-Восточный федеральный университет имени М.К. Аммосова, ул. Белинского, 58, Якутск, 677000 (Россия)
Химические исследования рода Silene ориентированы на изучение терпеновых соединений, том числе экдисте-роидов и тритерпеноидов. Малоизученными метаболитами рода являются флавоноиды, а именно С-/0-гликозилфла-воны, широко представленные в семействе Caryophyllaceae. Объектом настоящего исследования явился вид& itálico (L.) Pers., в ходе ранних исследований которого было выявлено присутствие некоторых С-гликозилфлавонов (Земцова, Джу-мырко, 1976; Darmograi, 1977), однако подробное изучение флавоноидов данного вида не проводилось. С применением высокоэффективной хроматографии с диодно-матричным и масс-спектрометрическим (ионизация элекгрораспылением) детектированием (ВЭЖХ-ДМД-ИЭР-МС) в надземной части S. itálico, произрастающей в Грузии, было установлено наличие 14 флавоноидов, представляющих собой С-, О- и С,0-гликозиды флавонов, десять из которых - впервые для вида. Идентифицированные С-гликозиды включали моногликозиды изоориентин, изовитексин, изоскопарин (хризо-эриол-6-С-глюкозид), и ди-гликозиды карлинозид (лютеолин-6-С-глюкозид-8-С-арабинозид), шафтозид (апигенин-6-C-глюкозид-8-С-арабинозид), изошафтозид (лютеолин-6-С-арабинозид-8-С-глюкозид) и генкванин-6-С-глюкозид-8-С-арабинозид. Два О-гликозида космосиин и цинарозид и смешанные С,0-гликозиды сапонарин, изовитексин-2"-0-ара-бинозид, изовитексин-6"-0-арабинозид и О-гексозиды шафтозида и генкванин-6-С-глюкозид-8-С-арабинозида были выявлены впервые для рода Silene. Известные сведения литературы (Mamadalieva et al., 2014) и полученные в настоящей работе данные свидетельствуют о том, что С-/0-гликозилфлавоны могут быть полезны для систематики рода Silene.
Ключевые слова: Silene italic, Caryophyllaceae, гликозилфлавоны, ВЭЖХ, масс-спектрометрия.
Введение
Род Silene L. является одним из крупнейших в семействе Caryophyllaceae, включая более 700 видов. Химические исследования указывают на присутствие в представителях рода различных классов соединений, в том числе экдистероидов, moho-, сескви- и тритерпеноидов, простых фенолов, флавоноидов, TV-содержащих соединений и других [1]. Известные наукометрические данные о химическом составе видов Silene указывают на большую изученность терпеновых соединений: из 453 соединений, описанных в работе [1], более половины являлись терпеноидами. Подобный крен в исследовании химического профиля рода обусловлен широким распространением экдистероидов и тритерпеновых сапонинов и их выраженной биологической активностью [2].
До 2014 года из 28 исследованных видов Silene было выделено 25 флавоноидов, в том числе 19 фла-воновых производных апигенина и лютеолина, два флавонола (кемпферол, кверцетин) и 4 антоциана [1]. В частности, многолетний вид S. italica (L.) Pers., широко распространенный в луговых и лесных ценозах
_ Крыма и Кавказа [3] и подвергавшийся ранее ис-
следованию экдистероидов [4, 5], содержит флаво-
Оленников Даниил Николаевич - доктор фармацевтических наук, ведущий научный сотрудник
лаборатории медико-биологических исследований, ноиды, состав которых изучен недостаточно [6].
e-mail: [email protected] В ходе продолжающегося исследования растений
Кащенко Нина Игоревна - кандидат фармацевтических рода Ште 8] „ щмкак настоящей работы нами наук, научный сотрудник лаборатории медико-
биологических исследований, e-mail: [email protected] были изучены флавоноиды S. italica, произрастаю-
Чирикова Надежда Константиновна - доктор щей в Грузии, с применением ВЭЖХ-ДМД-ИЭР-
фармацевтических наук, доцент кафедры биохимии МС и других хроматографических методов, и биотехнологии, e-mail: [email protected]
* Автор, с которым следует вести переписку.
Экспериментальная часть
Растительное сырье. Образцы надземной части S. italica были собраны в пос. Местиа (Местийский муниципалитет, провинция Самегрело-Верхняя Сванетия, Грузия, 43°2'35.88" N, 42°42'41.23" Е, 1435 м в.у.м.). Видовая принадлежность определена д.фарм.н. Т.А. Асеевой (ИОЭБ СО РАН). Сырье высушивали в конвекционной печи (40 °С) до значений влажности <5%.
Общие экспериментальные условия. Для колоночной хроматографии (КХ) применяли полиамид (Sigma-Aldrich, St. Louis, МО, USA). Препаративную ВЭЖХ осуществляли на жидкостном хроматографе Summit (Dionex, Sunnyvale, CA, USA). Спектрофотометрические исследования проводили на спектрофотометре СФ-2000 (ОКБ Спектр, Санкт-Петербург, Россия), масс-спектрометрический анализ - на TQ-масс-спектрометре LCMS-8050 (Shimadzu, Columbia, MD, USA). Спектры ЯМР регистрировали на ЯМР-спектро-метре VXR 500S (Varian, Palo Alto, CA, USA). В работе использованы коммерческие образцы веществ сравнения: апигенин-6-С-глюкозид-8-С-арабинозид (шафтозид, >90%), лютеолин-6-С-глюкозид (изоориентин, >99%), лютеолин-7-О-глюкозид (цинарозид, >90%), апигенин-6-С-глюкозид (изовитексин, >99%), апиге-нин-7-О-глюкозид (космосиин, >99%) (Extrasynthese, Lyon, France); апигенин-6-С-глюкозид-7-0-глюкозид (сапонарин, >98%), лютеолин-6-С-глюкозид-8-С-арабинозид (карлинозид, >98%), апигенин-6-С-глюкозид-2"-0-арабинозид (изовитексин-2"-0-арабинозид, >98%), апигенин-6-С-арабинозид-8-С-глюкозид (изошафтозид, >98%), хризоэриол-6-С-глюкозид (изоскопарин, >98%) (ChemFaces, Wuhan, Hubei, P.R. China); цитизозид (акацетин-8-С-глюкозид, >94%; Finipharma Ltd, Nantong, P.R. China).
Экстракцию и фракционирование S. italica проводили, как описано ранее [5]. Для этого измельченное растительное сырье (610 г) экстрагировали 70% этанолом (1 : 15) в УЗ-ванне (100 Вт, частота 35 кГц) при 40 °С в течение 3 ч дважды. Спиртовые извлечения отфильтровывали, объединяли и концентрировали в вакууме досуха. Полученный сухой остаток (146 г) суспендировали в воде (1 : 5) и далее экстрагировали гек-саном и н-бутанолом. В результате получены гексановая (12 г) и бутанольная фракции (73 г). Бутанольную фракцию (70 г) смешивали с полиамидом (1.5 кг), который элюировали водой (12 л), 40% этанолом (20 л) и 95% этанолом (10 л). Фракцию, полученную при элюировании полиамида 40% этанолом (37 г), рехромато-графировали на полиамиде (0.7 кг), прекондиционированном водой, используя 60% этанол в качестве элюента. Полученная фракция SPE-2 (32 г), по данным ВЭЖХ, содержала флавоноиды и была использована для анализа методом ВЭЖХ-ДМД-ИЭР-МС и выделения индивидуальных соединений.
ВЭЖХ-ДМД-ИЭР-МС. Анализ осуществляли на жидкостном хроматографе LCMS-8050 (Shimadzu, Columbia, MD, USA), соединенном с диодно-матричным детектором (ДМД) и 3Q детектором с ионизацией электрораспылением (ИЭР/МС; electrospray ionization, ESI), используя колонку GLC Mastro С18 (150x2.1 мм, О 3 мкм; Shimadzu, Kyoto, Japan). Условия ВЭЖХ: подвижная фаза, элюент А - вода, элюент В - ацетонитрил; программа градиента - 0-10 мин 10-20% В, 10-30 мин 20-100% В, 30-32 мин 100% В; инжектируемый объем
- 1 мкл; скорость потока - 200 мкл/мин, температура колонки - 30°С; диапазон сканирования спектров поглощения - 200-600 нм. Условия ИЭР-МС: режим ионизации - электрораспыление; температура интерфейса ИЭР
- 300 °С; температура линии десольватации - 250 °С; температура нагревательного блока - 400 °С; скорость газа-распылителя (N2) - 3 л/мин; скорость газа-нагревателя (воздух) - 10 л/мин; давление газа, используемого для диссоциации, индуцируемой соударением (CID gas, Ar) - 270 кПа; скорость Ar - 0.3 мл/мин; напряжение на капилляре - 3 кВ; диапазон сканирования масс (m/z) - 100-1900. Образец фракции SPE-2 (2 мг) растворяли в 1 мл 70% ацетонитрила, после чего центрифугировали (6000 g, 20 мин), фильтровали через мембранный фильтр (0.45 мкм) и использовали для анализа (1 мкл).
Выделение б и 12. Фракцию SPE-2 разделяли с использованием препаративной ВЭЖХ [колонка Li-Chrospher® 100 RP-18 (250x10 мм, 0 10 мкм; Dionex, Sunnyvale, CA, USA); элюент А - вода, элюент В -ацетонитрил; программа градиента - 0-20 мин 10-20% В, 20-60 мин 20-100% В, 60-64 мин 100% В; скорость потока - 2 мл/мин, температура колонки - 30 °С] порциями по 0.5 г, собирая фракции с временами выхода 12.0-12.5 мин (фракция f-24) и 14.5-15.0 (фракции f-29), которые рехроматографировали в тех же условиях дважды. В результате из фракций f-24 и f-29 были выделены соединения 6 (20 мг) и 12 (39 мг), соответственно.
Апигенин-б-С-глюкозид-б"-0-арабинозид (6). С26Н28О14. УФ-спектр (МеОН, Хтгх, нм): 267, 330. ИЭР-МС, m/z: таблица. Спектр ЯМР 13С (125 Гц, MeOH-ö?4, 8, м.д.): 163.2 (С-2), 102.5 (С-3), 181.5 (С-4), 160.3 (С-5), 108.6 (С-6), 163.4 (С-7), 94.1 (С-8), 158.4 (С-9), 103.1 (С-10), 121.2 (С-Г), 128.6 (С-2', С-6'), 115.4 (С-3', С-
5'), 161.5 (С-4'); 6-С-(3-0-глюкопираноза: 73.4 (C-l"), 71.2 (С-2"), 78.9 (С-3"), 70.3 (С-4"), 80.9 (С-5"), 67.4 (С-6"); 6"-<9-а-Ь-арабинопираноза: 105.7 (С-1'"), 67.8 (С-2'"), 74.6 (С-3'"), 69.5 (С-4'"), 64.9 (С-5'").
Генкванин-б-С-глюкотд-8-С-арабинотд (12). С27Н30О14. УФ-спектр (МеОН, ).,Т1;|Х. нм): 267, 337. ИЭР-МС, miz. таблица. Спектр ЯМР 13С (125 Гц, МеОН-А, 5, м.д.): 163.5 (С-2), 102.1 (С-3), 181.3 (С-4), 160.1 (С-5), 107.3 (С-6), 164.8 (С-7), 103.1 (С-8), 159.3 (С-9), 102.9 (С-10), 121.0 (С-1'), 128.4 (С-2', С-6'), 115.9 (С-3', С-5'), 161.2 (С-4'), 56.7 (7-0-СНз); б-С-р-О-глюкопираноза: 73.3 (С-1"), 71.0 (С-2"), 78.7 (С-3"), 70.1 (С-4"), 81.3 (С-5"), 60.5 (С-6"); 8-С-а-Ь-арабинопираноза: 72.5 (С-1'"), 68.4 (С-2'"), 75.2 (С-3'"), 69.0 (С-4'"), 70.6 (С-5'").
Обсуждение результатов
Анализ фракции SPE-2 из травы Silene italica осуществляли методом ВЭЖХ-ДМД-ИЭР-МС, используя для идентификации данные о хроматографической подвижности, УФ- и масс-спектрах в сравнении с известными соединениями и сведениями литературы. Всего в SPE-2 было обнаружено 14 компонентов (1-14), отнесенных на основе УФ-спектров к группе флавоноидов, в том числе к производным апигенина С/-,Т1;|Х 267, 330 нм; 1, 3, 4, 6, 7, 9, 11, 13), лютеолина (А.тах 256, 272, 347 нм; 5, 8, 10) и их метоксилированным производным (2,12,14) (рис. 1, табл.).
Рис. 1. Хроматограммы фракции SPE-2 травы Silene italica; детектирование диодно-матричным детектором при 330 нм (I - полный вид, II - фрагмент 8.5-17.5 мин) и масс-спектрометрическим детектором в режиме мониторинга выделенных ионов (III; в рамках указано значение m/z выбранного иона). Числами указано положение соединений 1-14 согласно таблице. На рисунке 1, II показано положение фракций f-24 и f-29, использованных для выделения соединений 6 и 12 соответственно
Хроматографические (ti<) и масс-спектрометрические данные (ИЭР-МС) компонентов фракции SPE-2 из травы Silene italica
№ tR, Соединение* ИЭР-МС, m/z
МИН [М-Н]- Дочерние ионы
1 9.18 Апигенин-С-гексозид-С-пен-тозид-О-гексозид 725 635 [(М-Н)-90]-, 605 [(М-Н)-120]-, 563 [(М-Н)-Нех]-, 503 [(М-Н)-Нех-бО]-, 473 [(М-Н)-Нех-90]-, 443 [(М-Н)-Нех-120]-,413 [(М-Н)-Нех-60-90]-, 385 [(М-Н)-Нех-60-90-С0]-, 383 [(М-Н)-Нех-2x90]-и/или [(М-Н)-Нех-б0-120]-, 355 [(М-Н)-Нех-2х90-СС>]- и/или [(М-Н)-Нех-бО-Ш-СО]-, 353 [(М-Н)-Нех-90-120]-, 325 [(М-Н)-Нех-90-120- со]-
2 10.42 Апигенин монометиловый эфир-С-гексозид-С-пентозид-О-гексозид 739 649 [(М-Н)-90]-, 619 [(М-Н)-120]-, 577 [(М-Н)-Нех]-, 517 [(М-Н)-Нех-бО]-, 487 [(М-Н)-Нех-90]-, 457 [(М-Н)-Нех-120]-, 427 [(М-Н)-Нех-60-90]-, 399 [(М-Н)-Нех-60-90-С0]-, 397 [(М-Н)-Нех-2x90]-и/или [(М-Н)-Нех-б0-120]-, 369 [(М-Н)-Нех-2х90-СО]- и/или [(М-Н)-Нех-60-120-С0]-, 367 [(М-Н)-Нех-90-120]-, 339 [(М-Н)-Нех-90-120- со]-
3 10.98 Апигенин-6-С-глюкозид-7-0-глюкозид (сапонарин)** 593 473 [(М-Н)-120]-,431 [(M-H)-Glc]-, 341 [(М-Н)-Glc-90]-, 311 [(M-H)-Glc-120]-, 313 [(M-H)-Glc-90-С0]-, 283 [(M-H)-Glc-I20-C0]-
4 11.42 Апигенин-6-С-глюкозид-2 "-0-арабинозид (изовитексин-2"-0-арабинозид)** 563 443 [(M-H)-120]-,431 [(M-H)-Ara]-, 341 [(M-H)-Ara-90]-, 311 [(M-H)-Ara-120]-, 313 [(M-H)-Ara-90-C0]-, 283 [(M-H)-Ara-I20-C0]-
5 11.67 Лютеолин-6-С-глюкозид-8-С-ара-бинозид (карлинозид)** 579 519 [(M-H)-60]-, 489 [(M-H)-90]-, 459 [(M-H)-120]-, 429 [(M-H)-60-90]-, 401 [(M-H)-60-90-C0]-, 399 [(M-H)-60-120]- или [(M-H)-2x90]-, 371 [(M-H)-60-I20-C0]- или [(M-H)-2x90-C0]-, 369 [(M-H)-90-120]-, 341 [(M-H)-90-I20-C0]-
6 12.21 Апигенин-б-С-глюкозид-б "-0-арабинозид (изовитексин-6"-0-арабинозид) 563 443 [(M-H)-120]-,431 [(M-H)-Ara]-, 341 [(M-H)-Ara-90]-, 311 [(M-H)-Ara-120]-, 313 [(M-H)-Ara-90-C0]-, 283 [(M-H)-Ara-I20-C0]-
7 12.73 Апигенин-6-С-глюкозид-8-С-ара-бинозид (шафтозид)** 563 503 [(M-H)-60]-, 473 [(M-H)-90]-, 443 [(M-H)-120]-, 413 [(M-H)-60-90]-, 385 [(M-H)-60-90-C0]-, 383 [(M-H)-60-120]- или [(M-H)-2x90]-, 355 [(M-H)-60-I20-C0]- или [(M-H)-2x90-C0]-, 353 [(M-H)-90-120]-, 325 [(M-H)-90-I20-C0]-
8 13.47 Лютеолин-6-С-глюкозид (изоориентин)** 447 357 [(M-H)-90]-, 327 [(M-H)-120]-, 329 [(M-H)-90-CO]-, 299 [(М-Н)-Ш-СО]-
9 13.68 Апигенин-6-С-арабинозид-8-С-глюкозид (изошафтозид)" 563 503 [(M-H)-60]-, 473 [(M-H)-90]-, 443 [(M-H)-120]-, 413 [(M-H)-60-90]-, 385 [(M-H)-60-90-C0]-, 383 [(M-H)-60-120]- или [(M-H)-2x90]-, 355 [(M-H)-60-I20-C0]- или [(M-H)-2x90-C0]-, 353 [(M-H)-90-120]-, 325 [(M-H)-90-I20-C0]-
10 14.19 Лютеолин-7-О-глюкозид (цинарозид)** 447 285 [(M-H)-Glc]-
11 14.59 Апигенин-6-С-глюкозид (изовитексин)** 431 341 [(M-H)-90]-, 311 [(M-H)-120]-, 313 [(M-H)-90-CO]-, 283 [(M-H)-I20-C0]-
12 14.73 Генкванин-6-С-глюкозид-8-С-арабинозид 577 517 [(M-H)-60]-, 487 [(M-H)-90]-, 457 [(M-H)-120]-, 427 [(M-H)-60-90]-, 399 [(M-H)-60-90-C0]-, 397 [(M-H)-60-120]- или [(M-H)-2x90]-, 369 [(M-H)-60-I20-C0]- или [(M-H)-2x90-C0]-, 367 [(M-H)-90-120]-, 339 [(M-H)-90-I20-C0]-
13 15.05 Апигенин-7-О-глюкозид (космосиин)" 431 269 [(M-H)-Glc]-
14 15.37 Хризоэриол-6 -С-глюкозид (изоскопарин)" 461 371 [(M-H)-90]-, 341 [(M-H)-120]-, 343 [(M-H)-90-CO]-, 313 [(М-Н)-Ш-СО]-
* Ara - арабиноза, Hex - гексоза, Glc - глюкоза, Pent - пентоза. ** Соединения идентифицированы с использованием веществ сравнения.
С-Гликозилфлавоны. После анализа масс-спектров к данной группе было отнесено семь соединений. Два флавоновых моно-С-гликозида - изоориентин (лютеолин-6-С-глюкозид, 8) и изовитексин (апигенин-6-С-глюкозид, 11) были ранее показаны в S. italica [9], а изоскопарин (хризоэриол-6-С-глюкозид, 14) в данном виде не выявлялся. Присутствие четырех асимметричных ди-С-гликозидов, включая карлинозид (лютеолин-6-С-глюкозид-8-С-арабинозид, 5), шафтозид (апигенин-6-С-глюкозид-8-С-арабинозид, 7), изошафтозид (апигенин-6-С-арабинозид-8-С-глюкозид, 9) и генкванин-6-С-глюкозид-8-С-арабинозид (12), установлено для S. italica впервые. Идентификацию соединений 5, 7, 8, 9, 11 и 14 осуществляли на основании хромато-графических и спектральных данных с использованием веществ сравнения, а соединение 12 было выделено из фракции f-29 в ходе препаративной ВЭЖХ. Сведения УФ-спектроскопии и масс-спектрометрии указывали на то, что 12 являлось производным монометокси-апигенина.
В спектре ЯМР 13С, близком к таковому шафтозида (7) [10], у 12 присутствовали дополнительные сигналы метоксильной группы в сильном поле у 56.7 м.д., а также наблюдался слабопольный сдвиг сигнала С-7 (5с 162.1—>164.8) и сильнопольные сдвиги соседних с ним С-6 (5С 108.3^-107.3) и С-8 (5С 104.3^-103.1) относительно сигналов 7. Это свидетельствовало о присутствии у С-7 метоксильного заместителя и позволило охарактеризовать 12 как 7-0-метокси-шафтозид (генкванин-6-С-глюкозид-8-С-арабинозид), ранее выделенный из коры Conchocarpus guyanensis (Pulle) Kallunki & Pirani (A Imeidea guyanensis Pulle, Rutaceae) [11] и обнаруженный впервые в семействе Caryophyllaceae.
О-Гликозилфлавоны. Два соединения были идентифицированы как О-гликозиды, в том числе лютео-лин-7-О-глюкозид (цинарозид, 10) и апигенин-7-О-глюкозид (космосиин, 13). Несмотря на то, что оба компонента встречаются в семействе Caryophyllaceae, для видов Silene они ранее описаны не были.
С,0-Гликозилфлавоны. Пять соединений были охарактеризованы как смешанные гликозиды С,0-типа. Апигенин-6-С-глюкозид-7-0-глюкозид (сапонарин, 3) и апигенин-6-С-глюкозид-2"-0-арабинозид (изовитек-син-2"-0-арабинозид, 4) были идентифицированы с использованием веществ сравнения. Соединение 6 давало близкий к 4 набор ионов в масс-спектрах отрицательной ионизации, что указывало на его вероятное строение как изовитексин-0-арабинозида. После выделения 6 из фракции f-24 с применением препаративной ВЭЖХ и анализа его спектральных данных оно было определено как апигенин-6-С-глюкозид-6"-0-арабинозид (изови-тексин-6"-0-арабинозид), ранее обнаруженный в Swertiaperrenis L. (Gentianaceae) [12].
Согласно данным масс-спектрометрии, соединение 1 представляло собой С-гексозид-С-пентозид-0-гексозид апигенина. Основным фрагментом являлась дегексозилированная частица, указывающая на присоединение гексозы посредством О-гликозидной связи [13] (рис. 2а). Дальнейший распад частицы [(М-Н)-Нс\| сопровождался потерей фрагментов с miz 90 и 120, характерных для С-гексозидов, и фрагментов с miz 60 и 90, обусловленных присутствием С-связанной пентозы (рис. 2в) [14]. Общая картина масс-спектра 1 была близка к таковой шафтозида (апигенин-6-С-глюкозид-8-С-арабинозид, 7), что позволило предварительно охарактеризовать 1 как 0-гексозид шафтозида, исследование которого будет продолжено. К настоящему времени известно о существовании единственного соединения с близким строением - шафтозид-6"-О-глюкозида из Stellaria holostea L. (Caryophyllaceae) [13].
Соединение 2 обладало похожим масс-спектрометрическим профилем, однако значения miz всех характеристических ионов были на 14 а.е.м. больше, что указывало на наличие дополнительной метокси-функ-ции у агликона (рис. 26). Известно два монометоксилированных производных апигенина - генкванин (7-0-метоксиапигенин) и акацетин (4'-0-метоксиапигенин), масс-спектры гликозидов которых схожи [15], но отличаются особенностями спектров поглощения. Наличие метоксилирования по положению С-4' обычно приводит к большему коротковолновому сдвигу II полосы в УФ-спектре (328-332 нм), чем у 7-0-метоксиапи-генина (335-338 нм) [16]. Спектр поглощения 2, содержащий две полосы у 268 и 338 нм, повторял спектр генкванин-6-С-глюкозид-8-С-арабинозида (12) и отличался от такового цитизозида (акацетин-8-С-глюко-зида), полоса II которого находилась у 329 нм (рис. 2г). Таким образом, наиболее вероятно, что соединение 2 является О-гексозидом генкванин-6-С-глюкозид-8-С-арабинозида (12). Сведений о гликозилфлавонах с подобными особенностями строения в настоящее время нет, поэтому структура данного соединения будет установлена в ходе дальнейших исследований.
Ранее в S. italica были обнаружены гликозиды апигенина - изовитексин (11), виценин-2 (апигенин-6,8-ди-С-глюкозид), изосапонарин (апигенин-6-С-глюкозид-4'-0-глюкозид), и лютеолина - ориентин, изоориентин (8), адонивернит (лютеолин-6-С-глюкозид-2"-0-ксилозид) и изоадонивернит (лютеолин-8-С-глю-козид-2"-0-ксилозид) [9]. В ходе настоящего исследования было выявлено присутствие 14 соединений, среди которых преобладали С-/0-гликозиды апигенина, лютеолина, а также присутствовали производные генкванина и хризоэриола (рис. 3). Отсутствие флавоновых 8-С-гликозидов и О-ксилозидов в S. italica, собранной в Грузии, свидетельствовало о влиянии условий произрастания на химический профиль растения.
в г
Рис. 2. (я, б). Масс-спектры (ИЭР, отрицательная ионизация) соединений 1 (апигенин-С-гексозид-С-пентозид-О-гексозид) и 2 (апигенин-монометиловый эфир-С-гексозид-С-пентозид-О-гексозид). (в). Участки фрагментации молекул соединений 1 (Р1-=Н) и 2 (Р1-=СН;,) (г). Спектры поглощения соединений 2, 12 и цитизозида (Су, акацетин-8-С-глюкозид). Нех - гексоза
3: = Р-Б-аср; Я8 = Яз' = Яг» = Яо- = Н 4: = Яв = Яз' = = Н; Яг» = а-Ь-Агар 5: = Яг- = Яб- = Н; Я8 = <х-Ь-Агар; Яз' = ОН 6: = Яв = Яз' = Яг- = Н; Яб» = <х-Ь-Агар 7: = Яз' = Яг- = Яб- = Н; Я8 = а-Ь-Агар 8: = = Яг» = Яб» = Н; Яз' = ОН И: = = Яз' = Яг» = Яб» = Н 12: = СНз; Яз' = Яг- = Яб- = Н; Я8 = а-Ь-Агар 14: = Я8 = Яг» = Яб» = Н; Яз' = ОСНз
нйо
ОН о
он
он
I г '
нЙо
10: Яз' = ОН
9 13: Яз' = Н
Рис. 3. Структуры С-/0-гликозилфлавонов, идентифицированных в траве Л". ИаИса (а-Ь-Ага/? - а-Ь-арабинопираноза, (}-0-С1ф - (З-О-глюкопираноза)
Хемотаксономическое значение С-/0-гликозилфлавонов рода Silene. Гликозиды апигенина и лютеолина широко распространены в роде Silene L. и были обнаружены в 28 видах [1]. Наиболее часто встречающимися соединениями являются С-гликозиды витексин, изовитексин (11), ориентин и изоориентин (8). Асимметричный ди-С-гликозид шафтозид (7) обнаружен в S. schafta J.G.Gmel. ex Hohen. [17], а виценин-1 (апигенин-6-C-ксилозид-8-С-глюкозид) ивиценин-3 (апигенин-6-С-глюкозид-8-С-ксилозид) выявлены в 11 видах Silene [1, 6, 9]. Известные О-гликозиды С-гликозилфлавонов содержат углеводные заместители по положениям С-2" и С-4" глюкопиранозы [1]. Таким образом, основными флавоноидами рода Silene являются С-гликозиды (глюко-зиды, арабинозиды, ксилозиды) апигенина и лютеолина, которые могут содержать дополнительные 0-связан-ные фрагменты глюкозы, арабинозы, глюкозы и рамнозы. Учитьшая широкое распространение моно-С-глюко-зидов флавонов внутри рода, можно предположить, что они имеют маркерное значение. Несмотря на то, что вид S. italica принадлежит подсекции Italicae, флавоноиды которой ранее не изучались, для ряда видов других подсекций секции Siphonomorpha подобная информация известна [18]. Гликозилфлавоны С- и С,О-типов были обнаружены ранее в видах из подсекций Graminiformes (S. jenisseensis Willd.), Koreanae (S. foliosa Maxim.), Otites {5! cyri Schischk., S. wolgensis (Hornem.) Otth} [1, 6, 9] и Nutantes (S. nutans L.) [8]. Полученные нами данные о составе флавоноидов S. italica близки к имеющимся предположениям о таксономической роли фла-вонгликозидов апигенина и лютеолина внутри рода Silene.
Выводы
1. В надземной части Silene italica, произрастающей в Грузии, выявлено присутствие 14 флавоноидов, производных апигенина, лютеолина, генкванина и хризоэриола, в том числе 10 соединений обнаружено впервые для вида.
2. Впервые для рода Silene установлено наличие генкванин-6-С-глюкозид-8-С-арабинозида и его О-гексозида, изовитексин-6 "-О-арабинозида и О-гексозида шафтозида.
3. С-/0-гликозиды апигенина и лютеолина имеют хемотаксономическое значение внутри рода Silene.
Список литературы
1. Mamadalieva N.Z., Lafont R., Wink M. Diversity of secondary metabolites in the genus Silene L. (Caryophyllaceae) -Structures, distribution, and biological properties//Diversity. 2014. Vol. 6. Pp. 415^99. DOI: 10.3390/d6030415.
2. Mamadalieva N.Z. Phytoecdysteroids from Silene plants: Distribution, diversity and biological (antitumour, antibacterial and antioxidant) activities // Bol. Latinoamer. Caribe Plantas Med. Arom. 2012. Vol. 11. Pp. 474^97.
3. Флора СССР /ред. В. Л. Комаров. М.; Л.: АН СССР, 1936. Т. VI. С. 577-691.
4. Meng Y., Whiting P., Zibareva L., Bertho G., Girault J.-P., Lafont R., Dinan L. Identification and quantitative analysis of the phytoecdysteroids in Silene species (Caryophyllaceae) by high-performance liquid chromatography: Novel ecdysteroids fromS. pseudotites II J. Chromatogr. A. 2001. Vol. 935. Pp. 309-319. DOI: 10.1016/S0021-9673(01)00893-7.
5. Zibareva L. Distribution and levels of phytoecdysteroids in plants of the genus Silene during development // Arch. Insect. Biochem. Physiol. 2000. Vol. 43, no. 1. Pp. 1-8. DOI: 10.1002/(SICI)1520-6327(200001)43:1%3C1::AID-ARCH1%3E3,O.CO;2-D
6. Darmograi V.N. Flavonoids of plants of the genera Silene and Otites adans, family Caryophyllaceae // Chem. Nat. Сотр. 1977. Vol. 13. Pp. 102-103. DOI: 10.1007/BF00566187.
7. Olennikov D.N., Kashchenko N.I. Phytoecdysteroids of Silene jenisseensis // Chem. Nat. Сотр. 2017. Vol. 53. Pp. 1199-1201. DOI: 10.1007/s 10600-017-2239-1.
8. Olennikov D.N. Ecdysteroids, flavonoids and phenylpropanoids of Silene nutans // Chem. Nat. Сотр. 2019. Vol. 55. Pp. 107-110. DOI: 10.1009/sl 1720-012-2242-4.
9. Земцова Г.Н., Джумырко С.Ф. Флавоновые гликозиды видов Silene // Фармация. 1976. Т. XXV. №3. С. 26-29.
10. Siewek F., Herrmann К. Grotj ahn L., Wray V. Isomeric di-C-glycosylflavones in Fig (Ficus carica L.) // Z. Naturforsch. C. 1985. Vol. 40. Pp. 8-12. DOI: 10.1515/znc-1985-l-204.
11. Wirasutisna K.R., Gleye J., Moulis C., Stanislas E., Moretti C. Flavone C-glycosides of Almeidea guyanensis II Phyto-chemistry. 1986. Vol. 25. Pp. 558-559. DOI: 10.1016/S0031-9422(00)85531-4.
12. Hostettmann K., Jacot-Guillarmod A. Identification de xanthones et de nouveaux arabinosides de C-glucosides flavoniques dans Swertia perennis L. // Helv. Chim. Acta. 1976. Vol. 59. Pp. 1584-1591. DOI: 10.1002/hlca. 197605 90517.
13. Bouillant M.L., Ferreres de Arce F., Favre-Bonvin J., Chopin J., Zoll A., Mathieu G. Structural determination of 6-C-diglycosyl-8-C-glycosyl-flavones and 6-C-glycosyl-8-C-diglycosylflavones by mass spectrometry of their permethyl ethers //Phytochemistry. 1984. Vol. 23. Pp. 2653-2657. DOI: 10.1016/S0031-9422(00)84119-9.
14. Olennikov D.N., Chirikova N.K., Kashchenko N.I., Nikolaev V.M., Kim S.-W., Vennos C. Bioactive phenolics of the genus Artemisia (Asteraceae): HPLC-DAD-ESI-TQ-MS/MS profile of the Siberian species and their inhibitory potential against a-amylase and a-glucosidase // Front. Pharmacol. 2018. Vol. 9. Article 756. DOI: 10.3389/fphar.2018.00756.
15. Olennikov D.N., Kashchenko N.I., Chirikova N.K., Gornostai T.G., Selyutinal.Yu., Zilfikarov I.N. Effect of low temperature cultivation on the phytochemical profile and bioactivity of Arctic plants: A case of Dracocephalum palmatum //Int. J. Molec. Sei. 2017. Vol. 18. E2579. DOI: 10.3390/ijmsl8122579.
16. Li Q., Wang L., Dai P., Zeng X., Qi X., Zhu L., Yan Т., Wang Y., Lu L., Hu M., Wang X., Liu Z. A combined strategy of mass fragmentation, post-column cobalt complexation and shift in ultraviolet absorption spectra to determine the uridine 5'-diphospho-glucuronosyltransferase metabolism profiling of llavones after oral administration of a llavone mixture in rats//J. Chromatogr. A. 2015. Vol. 1395. Pp. 116-128. DOI: 10.1016/j.chroma.2015.03.069.
17. ChopinM.J., BouillantM.L., Wagner H., Galle К. Endgültige Struktur von Schaftosid msSilene schaftallPhytochem-istry. 1974. Vol. 13. Pp. 2583-2586. DOI: 10.1016/S0031-9422(00)86940-X.
18. Oxelman В., Rautenberg A., Thollesson M., Larsson A., Frajman В., Eggens F., Petri A., Aydin Z., Töpel M., Brandtberg-Falkman A. Sileneae taxonomy and systematics. 2013. URL: http://www.sileneae.info.
Поступила в редакцию 23 января 2019 г.
После переработки 18 февраля 2019 г.
Принята к публикации 15 апреля 2019 г.
Для цитирования: Олейников Д.Н., Кащенко Н.И., Чирикова Н.К. С-/0-гликозилфлавоны Silene italica (Caryophyllaceae) //Химия растительного сырья. 2019. №3. С. 119-127. DOI: 10.14258/jcprm.2019035110.
Olennikov D.N.1*, Kashchenko N.I.1, Chirikova NK.2 C-/0-GLYCOSYL FLAVONES OF SILENEITALICA 1 Institute of General and Experimental Biology, Siberian Branch, Russian Academy of Science, ul. Sakh 'yanovoy, 6, Ulan-Ude, 670047 (Russia), e-mail: [email protected] 2North-Eastern Federal University, ul. Belinskogo, 58, Yakutsk, 677027 (Russia)
Chemical research oiSilene genus focused on the study of terpene compounds including ecdysteroids and triterpenoids, to the detriment of other classes of compounds. One of these poorly estimated group of substances are llavonoids, namely C-/0-glycosyl llavones, widely represented within the family Caryophyllaceae. Early studies revealed the presence of some C-glycosyl llavones (Zemtsova, Dzhumyrko, 1976; Darmogray, 1977), but a detailed study of the llavonoids was not conducted. Application of high performance chromatography with diode-array detection and electrospray ionization mass-spectrometry detection (HPLC-DAD-ESI-MS) allowed to found 14 llavonoids, which are C-, O- and C,0-glycosyl llavones in the aerial part of S. italica of Georgia origin. Ten components were discovered in S. italica for first time. The identified C-glycosides included monoglycosides as isoorientin, isovitexin, isoscoparin (chrysoeryol-6-C-glucoside) and diglycosides as carlinoside (luteolin-6-C-glucoside-8-C-arabinoside), schaftoside (apigenin-6-C-glucoside-8-C-arabinoside), isoschaftoside (luteolin-6-C-arabinoside-8-C-glucoside) and genkwanin-6-C-glucoside-8-C-arabinoside. Two O-glycosides, cosmosiin and cynaroside, and mixed C,0-glycosides as sa-ponarin, isovitexin-2"-0-arabinoside, isovitexin-6"-0-arabinoside and O-hexosides od schaftosude and genkwanin-6-C-gluco-side- 8-C-arabinoside were not previously identified in Silene genus. The known literature data (Mamadalieva etal., 2014) and the present data demonstrate the useful role of C-/0-glycosyl llavones in the systematics of the genus Silene. Kewords: Silene italica, Caryophyllaceae, glycosylflavones, HPLC, mass-spectrometry.
References
1. MamadalievaN.Z., Lafont R., WinkM. Diversity, 2014, vol. 6, pp. 415^199. DOI: 10.3390/d6030415.
2. MamadalievaN.Z. Bol. Latinoamer. Caribe PlantasMed. Arom., 2012, vol. 11, pp. 474^197.
3. Flora SSSR [Flora of the USSR], ed. V.L. Komarov. Moscow, Leningrad, 1936, vol. VI, pp. 577-691. (inRuss.).
4. Meng Y., Whiting P., Zibareva L., Bertho G, Girault J.-P., Lafont R, Dinan L. J. Chromatogr. A., 2001, vol. 935, pp. 309-319. DOI: 10.1016/S0021-9673(01)00893-7.
5. Zibareva L. Arch. In-sect. Biochem. Physiol, 2000, vol. 43, no. 1, pp. 1-8. DOI: 10.1002/(SICI)l520-6327(200001 )43:1 %3C 1:: AID-ARCH1 %3E3,0.CO;2-D
6. Darmograi V.N. Chem. Nat. Comp., 1977, vol. 13, pp. 102-103. DOI: 10.1007/BF00566187.
7. Olennikov D.N, Kashchenko N1. Chem. Nat. Comp., 2017, vol. 53, pp. 1199-1201. DOI: 10.1007/sl0600-017-2239-l.
8. Olennikov D.N. Chem. Nat. Comp., 2019, vol. 55, pp. 107-110. DOI: 10.1009/sl 1720-012-2242-4.
9. Zemtsova G.N., Dzhumyrko S.F. Farmatsiya, 1976, vol. XXV, no. 3, pp. 26-29. (in Russ.).
10. SiewekF., HerrmannK. GrotjahnL., Wray V. Z. Naturforsch. C, 1985, vol. 40, pp. 8-12. DOI: 10.1515/znc-1985-l-204.
11. Wirasutisna K.R., Gleye J., Moulis C., Stanislas E., Moretti C. Phytochemistry, 1986, vol. 25, pp. 558-559. DOI: 10.1016/S0031 -9422(00)85 5 31-4.
12. Hostettmann K, Jacot-Guillarmod A. Helv. Chim. Acta, 1976, vol. 59, pp. 1584-1591. DOI: 10.1002/hlca. 197605 90517.
13. Bouillant M.L., Ferreres de Arce F., Favre-Bonvin J., Chopin J., Zoll A., Mathieu G. Phytochemistry, 1984, vol. 23, pp. 2653-2657. DOI: 10.1016/S0031-9422(00)84119-9.
14. Olennikov D.N., Chirikova N.K., Kashchenko N.I., Nikolaev V.M., Kim S.-W., Vennos C. Front. Pharmacol., 2018, vol. 9, article 756. DOI: 10.3389/fphar.2018.00756.
15. Olennikov D.N., Kashchenko N.I., Chirikova N.K., Gornostai T.G., Selyutina I.Yu., Zilfikarov I.N. Int. J. Molec. Sci., 2017, vol. 18, E2579. DOI: 10.3390/ijmsl8122579.
16. Li Q., Wang L., Dai P., Zeng X., Qi X., Zhu L., Yan T., Wang Y., Lu L., Hu M., Wang X., Liu Z. J. Chromatogr. A, 2015, vol. 1395, pp. 116-128. DOI: 10.1016/j.chroma.2015.03.069.
17. ChopinM.J., BouillantM.L., Wagner H, GalleK. Phytochemistry, 1974, vol. 13, pp. 2583-2586. DOI: 10.1016/S0031-9422(00)86940-X.
18. Oxelman B., Rautenberg A., Thollesson M., Larsson A., Frajman B., Eggens F., Petri A., Aydin Z., Topel M., Brandtberg-Falkman A. Sileneae taxonomy and systematics, 2013, URL: http://www.sileneae.info.
Received January 23, 2019 Revised February 18, 2019 Accepted April 15, 2019
For citing: Olennikov D.N., Kashchenko N.I., Chirikova N.K. Khimiya Rastitel'nogo Syr'ya, 2019, no. 3, pp. 119-127. (inRuss.). DOI: 10.14258/jcprm.2019035110.
* Corresponding author.
