CC BY
15
«Дни иммунологии в СПб 2017» Immunology Days in St. Petersburg 2017
Медицинская Иммунология Medical Immunology (Russia)/Meditsinskaya Immunologiya
исходит без физических повреждений. Использовали непредсказуемый мягкий стресс (НМС) включающий наклон клетки, лишение пищи или воды до 12 часов, ограничение подвижности на 1 час, тряска в вибрирующей установке 1 час, изъятие подстилки или мокрая подстилка. Ранее показано, что такой стресс провоцирует развитие депресивноподобного статуса у мышей и крыс. В результате было показано, что у мышей подвергшихся НМС, число метастазов опухоли Льюис в легких увеличено в 2 раза, по сравнению с контролем. Таким образом, сдвиг психоэмоционального состояния в негативную сторону оказывает влияние на процесс метастазирования. Это надо учитывать при ведении онкологических больных в клинике.
РОЛЬ ТРОФОБЛАСТИЧЕСКОГО р-ГЛИКОПРОТЕИНА В РЕГУЛЯЦИИ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ Т-КЛЕТОК ИММУННОЙ ПАМЯТИ
Раев М.Б.1, 3, Литвинова Л.С.2, Юрова К.А.2, Дунец Н.А.2, Хазиахматова О.Г.2, Тимганова В.П.1, Бочкова М.С.1, Храмцов П.В.1, 3, Заморина С.А.1, 3
1ФГБУН«Институт экологии и генетики микроорганизмов» УрО РАН, Пермь, Россия
2 ФГАОУ ВО «Балтийский федеральный университет им. И. Канта, Калининград, Россия
3 ФГБОУВПО «Пермский государственный национальный исследовательский университет», Пермь, Россия
Трофобластический pi-гликопротеин (ТБГ) является одним из наиболее информативных маркеров формирования и функционирования фетоплацентарной системы. Невзирая на очевидный иммунорегуляторный потенциал ТБГ, его роль в регуляции Т-клеток иммунной памяти остается неизвестной. В то же время, присутствие фетоплацентарных антигенов в период беременности, модулирует Т-клеточную память, что имеет значение для формирования иммунной толерантности, а также для последующей беременности (Keiffer T.E. et al., 2016). Можно предположить, что ТБГ регулирует функциональную активность циркулирующего пула T-клеток памяти, потенциально способных к осуществлению антиген-специфических цитотоксических реакций в отношении антигенов эмбрионального происхождения.
Цель. Оценка роли ТБГ в регуляции экспрессии маркеров активации (CD25, CD28, CD71) и продукции IL-2 изолированной субпопуляцией Т-клеток памяти в системе in vitro.
Материалы и методы. Аутентичный нативный ТБГ человека получали авторским методом (Патент РФ № 2367449, Раев М.Б.). Монокультуры Т-клеток памяти (CD45RO+) получали методом иммуномагнитной сепарации с использованием технологии MACS® ("Miltenyi Biotec", Германия) из суспензии МПК здоровых доноров (n = 8). Выделенные клетки с фенотипом CD45RO+ (1 х 106кл/мл) культивировали в 48-луночных планшетах в полной питательной среде в течение 48 ч при 37 °С, 5% С02. В качестве активатора Т-лимфоцитов использовали T-Cell Activation/Expansion Kit human (анти-CD2/CD3/CD28 комплекс) (Miltenyi Biotec, Германия). Определение поверхностных молекул костимуляции и активации (CD71 FITC, CD8 PE, CD25 PE-Cy 5.5, CD28PE Cy7, CD4 APC, Miltenyi Biotec, Германия) на CD45RO+Т-клетках проводили на проточном цитофлуо-
риметре MACS Quant (Miltenyi Biotec, Германия). Содержание IL-2 в культуральных супернатантах оценивали иммуноферментным методом при помощи тест-систем «Вектор-Бест» (Россия). Статистическая обработка данных проводилась с помощью парного ¿-критерия Стью-дента.
Результаты. Первым этапом анализа данных стала оценка дифференцировки Т-клеток памяти (CD45RO+) по субпопуляциям CD4+ и CD8+. Установлено, что изолированные СD45RA-клетки в контрольных пробах имели следующее соотношение: CD4+ 68,12±4,11; CD8+ 25,95±5,32; CD4+CD8+ 0,549±0,161. Установлено, что ТБГ (10, 100 мкг/мл) снижал экспрессию CD25 в гейте CD45RO+CD4+ лимфоцитов, активированных анти-CD2/CD3/CD28 комплексом, но не влиял на экспрессию CD28 и CD71 этими клетками. Как известно, CD25 (а-цепь рецептора для IL-2) представляет собой маркер активации и тесно связан с продукцией IL-2. Одновременно ТБГ стимулировал аутокринную продукцию IL-2 CD45RO+ клетками, но это не приводило к усилению экспрессии CD25. IL-2 необходим для развития Т-регуляторных лимфоцитов, увеличение количества которых ассоциировано с успешной беременностью (Shumacher A et.al., 2009) и, возможно, именно они являются «мишенью» для IL-2, продуцируемого CD45RO-клетками под воздействием ТБГ. Важно отметить, что депрессивные эффекты ТБГ реализовались только на уровне CD4+ лимфоцитов, не затрагивая субпопуляцию CD8+, что согласуется с данными Keiffer T.E. (2016).
Таким образом, впервые установлена роль ТБГ в регуляции активности Т-клеток иммунной памяти, ассоциированная с подавлением экспрессии активационного маркера CD25 и стимуляцией продукции этими клетками IL-2. Полученные данные расширяют представления о роли ТБГ в формировании иммунной толерантности в период беременности.
Исследование поддержано грантом РФФИ 16-44-0049 и программой повышения конкурентноспособности («дорожной карты») и субсидии «Организация проведения научных исследований 20.4986.2017/ВУ» БФУ им. И. Канта.
СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ГЛИКАН-СВЯЗЫВАЮЩЕГО ПАТТЕРНА ДЕНДРИТНЫХ КЛЕТОК МЫШИ И ЧЕЛОВЕКА
Рапопорт Е.М., Моисеева Е.В., Хайдуков С.В., Аронов Д.А., Пазынина Г.В., Цыганкова С.В., Бовин Н.В.
ФГБУН «Институт биоорганической химии
им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова»
РАН, Москва, Россия
Введение. В последнее время все большее значение приобретают исследования по созданию универсальных вакцин, направленных на активацию дендритных клеток (ДК). Особенно привлекательно использовать ДК в качестве мишени в вакцинах для терапии инфекционных заболеваний, вызванных бактериями и вирусами, которые характеризуются высокой генетической изменчивостью. У вирусов и бактерий ДК распознают патоген-ассоции-рованные молекулярные структуры (ПАМС). Дополнительная нагрузка вакцин лигандами лектинов, связывание последних с соответствующими ПАМС может при-
