CC BY
32
ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
Педиатрия
ORiGiNAL RESEARCH
^m Pediatrics
© Коллектив авторов, 2015
УДК 616.6-007-053.2-07:575 (470.342)
DOI - http://dx.doi.org/10.14300/mnnc.2015.10052
ISSN - 2073-8137
РОЛЬ ПОЛИМОРФИЗМА СИСТЕМЫ HLA В РЕЗИСТЕНТНОСТИ К РАЗВИТИЮ УРОЛОГИЧЕСКОЙ ПАТОЛОГИИ У ДЕТЕЙ КИРОВСКОЙ ОБЛАСТИ
М. П. РАЗИН1, Г. А. ЗАЙЦЕВА2, Н. К. СУХИХ1
1 Кировская государственная медицинская академия, Россия
2 Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови, Россия
THE ROLE OF HLA-POLYMORPHISM IN RESISTANCE TO THE DEVELOPMENT OF UROLOGICAL PATHOLOGY IN CHILDREN OF KIROV REGION OF RUSSIA FEDERATION
RAZIN M. P.1, ZAITSEVA G. A.2, SUKHIKH N. K.1
1 Kirov State Medical Academy, Russia
2 Kirov Research Institute of Hematology and Blood Transfusion, Russia
Наблюдались 143 русских ребенка 5-15 лет с различными формами врожденных обструктив-ных уропатий. Всем больным помимо стандартного урологического обследования проводилось иммуногенетическое обследование для выяснения факторов устойчивости к развитию патологии. Было выяснено, что резистентностью к развитию врожденных обструктивных уропатий обладают индивидуумы с HLA-аллелями DRB1*07, DRB1*15 (2), DQB1*0302; фенотипами A1, А9; A9, А11 и гаплотипическими сочетаниями A3, B7; A11, B35; A19, B27. Врожденной устойчивостью к развитию вторичного пиелонефрита обладают индивидуумы с антигенами главного комплекса гистосовме-стимости DRB1*07, DRB1*09, DRB1*15 (2); фенотипом A9, А11, гаплотипическими комбинациями A2, B12; A3, B7; A11, B35. Протективную роль в развитии врожденного гидронефроза у индивидов играют специфичности HLA-системы A11 и DQB1*0302; фенотипические сочетания A2, А9; A9, А11 и гаплотипические - A2, B7; A2, B12. Резистентностью к наличию пиелоэктазии как минорной аномалии мочевой системы обладают индивидуумы с аллелями HLA DRB1*01, DRB1*11 (5) и гаплоти-пической комбинацией антигенов A3, B7.
Ключевые слова: врожденные обструктивные уропатии, иммуногенетика, дети
143 children of Russian ethnic group aged 5 - 15 years with various forms of congenital obstructive uropathy were observed. All patients underwent standard urological and immunogenetic examination to determine the factors of resistance to the development of pathology. In the study it was found that resistance to the development of congenital obstructive uropathies presents in individuals with HLA-alleles DRB1*07, DRB1*15 (2), DQB1*0302; phenotypes A1, A9; A9, A11 and haplotype combinations A3, B7; A11, B35; A19, B27. Congenital resistance to the development of secondary pyelonephritis was in individuals with HLA-antigens DRB1*07, DRB1*09, DRB1*15 (2); phenotype A9, A11 and haplotype combinations A2, B12; A3, B7; A11, B35. Protective role in the development of congenital hydronephrosis in individuals was played by a specificities of HLA-system A11 and DQB1*0302; phenotypic combinations A2, A9; A9, A11 and haplotypes A2, B7; A2, B12. Resistance to the presence of pyeloectasia (minor anomalies of the urinary tract) was in individuals with alleles HLA DRB1*01, DRB1*11 (5) and haplotype combination of antigens A3, B7.
Key words: congenital obstructive uropathy, immunogenetics, children
В последнее время отмечается заметное увеличение удельного веса врожденных заболеваний в педиатрии и стойкий рост патологии мочевыделительной системы у детей [1], что придает высокую актуальность вопросам изучения этиологии, патогенеза, диагностики, дифференциальной
диагностики и лечения данной патологии, а также факторов устойчивости индивидов к ней вообще и к врожденным обструкциям мочевой системы в частности [2, 3, 4]. Причем на последнее обстоятельство до настоящего времени не обращалось должного внимания.
МЕДИЦИНСКИЙ ВЕСТНИК СЕВЕРНОГО КАВКАЗА
2015. Т. 10. № 3
MEDICAL NEWS Of NORTH CAUCASUS
2015. Vol. 10. Iss. 3
Цель исследования: определение иммуноге-нетических детерминант резистентности в развитии врожденных обструктивных уропатий у детей на основании HLA-титрования.
Материал и методы. Под нашим наблюдением находились 143 русских ребенка (83 мальчика и 60 девочек) в возрасте от 5 до 15 лет с различными формами врожденных обструктивных уропатий (четверо больных с синдромом Фрелея, 31 пациент с пиелоэктазией, 96 детей с врожденным гидронефрозом, семь больных с первичным пузырно-мочеточниковым рефлюк-сом, четверо больных с врожденным мегауре-тером, один мальчик с синдромом врожденной инфравезикальной обструкции), осложненных и не осложненных вторичным хроническим обструктивным пиелонефритом (ОП) с сохранной функцией почек. Все дети проживали в г. Кирове и Кировской области. Нами изучались особенности распределения антигенов ИЬА, их фенотипических и гаплотипических комбинаций. Идентификацию антигенов локу-сов ИЬА-А, ИЬА-В, ИЬА-С проводили в двухступенчатом микролимфоцитотоксическом тесте по Terasaki Р. et а1., 1970, локусов HLA-DRВ1 и HLA-DQВ1 - с помощью полимеразной цепной реакции с набором специфических праймеров. При этом в локусе HLA-A определяли 15 спе-цифичностей, в локусе HLA-B - 28, в локусе HLA-C - 4, в локусе HLA-DR - 14 и в локусе HLA-DQ - 12 специфичностей.
Частоту встречаемости изучавшихся антигенов определяли как % индивидов, несущих антиген, к общему числу обследованных в группе. Частоту фенотипических сочетаний антигенов находили отдельно для локусов HLA-A и HLA-B; частоту гаплотипических сочетаний антигенов рассчитывали по формуле МаМи Р. Для установления существенности различий в характере распределения антигенов в сравниваемых группах определяли критерий согласия (х2) с поправкой на непрерывность вариаций; х2 переводили в коэффициент достоверности различий (Р). Для определения степени ассоциации различных форм врожденных обструктивных уропатий (ВОУ) с иммуногенетическими параметрами по формуле Sweigaard А. [12] вычисляли критерий относительного риска (Яя), который обнаруживает, как часто данное заболевание или состояние развивается у лиц, имеющих определенный HLA-антиген, по сравнению с теми, у кого его нет. Принято считать, что при ЯЯ > 2,0 существует положительная ассоциация признака с заболеванием, тогда как значения ЯЯ меньше 1,0 указывают соответственно на резистентность индивида к данной патологии. Чтобы количественно охарактеризовать силу такой отрицательной HLA-ассоциации, мы вычисляли величину превентивной фракции (PF). Данный показатель характеризовал превентивные свойства определенного HLA-маркера (антигена или аллеля) на популяционном уровне и также за-
висил от показателя RR и от частоты встречаемости данного маркера в исследуемой группе. Превентивную фракцию (PF), характеризующую силу отрицательной HLA-ассоциации, рассчитывали по формуле (при значении критерия относительного риска менее 1,0)
(1 - RR) х F , RR х (1 - F) + F
где F - частота антигена, выраженная в десятичных дробях.
Контрольную группу составили 253 здоровых ребенка исследуемой популяционной группы.
Результаты и обсуждение. При иммуногене-тическом обследовании больных с врожденными обструктивными уропатиями (ВОУ) на основании полученных нами данных [6, 7] было выявлено наличие достоверной отрицательной ассоциативной связи ВОУ с наличием в тканях индивидуумов (рис. 1) аллелей HLA DRB1*07 (19,17 % против 30,1 % в контрольной группе, %2=4,2; р<0,05; RR=0,39; PF=0,26); DRB1*15 (2) (25,0 % против 37,0 % в контрольной группе, %2=4,3; р<0,05; RR=0,38; PF=0,33) и DQB1*0302 (9,9 % против 19,4 % в контрольной группе, %2=3,97; р<0,05; RR=0,47; PF=0,08); а также фенотипических сочетаний антигенов A1, А9 (0,7 % против 3,9 % в контрольной группе, %2=4,6; р<0,05; RR=0,25); A9, А11 (0,7 % против 4,6 % в контрольной группе, х2=5,5; RR=0,22) и гаплотипических комбинаций A3, B7 (8,1 % против 84,1 % в контрольной группе, p<0,01; RR=0,02); A11, B35 (2,9 % против 29,9 % в контрольной группе, p<0,01; RR=0,08); A19, B27 (1,5 % против 13,4 % в контрольной группе, p<0,01; RR=0,12). Носительство этих им-муногенетических детерминант снижало риск развития ВОУ от 2 до 50 раз.
ñ
□ здороиьк И больньБ ВОУ
1 1
- - i?
i fi® ГЬг I- т_ ж1
ЕКВ1*07 ЕВВ1Ч5С2) DQBWBOB ALAS .ЭДА11 А1& A1LB35 A19ÍQ7
** - р<0,05 * - р<0,01
Рис. 1. Частота встречаемости антигенов, фенотипических и гаплотипических сочетаний системы HLA, не характерных для больных с врожденными обструктивными уропатиями по сравнению со здоровыми детьми
В течении ВОУ, в выраженности клинических проявлений заболевания наблюдается явная зависимость от осложнённости основной патологии вторичным инфекционным процессом. Поэтому представлялось важным выяснить, можно ли прогнозировать присоединение вто-
ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
Педиатрия
oRiGiNAL RESEARCH
Pediatrics
ричной инфекции и устойчивость к ней? С этой целью мы провели типирование в группе детей с ВОУ, осложненными пиелонефритом. Для больных с ОП выявлены признаки главного комплекса гистосовместимости, свидетельствующие о резистентности индивидуумов к данной патологии (рис. 2): наличие в тканях антигенов HLA DRB1*07 (16 % против 30,1 % в контрольной группе, х2=6,5; р<0,05; RR=0,45; PF=0,16); DRB1*09 (0 % против 2 % в контрольной группе, х2=4,4; р<0,05; RR=0,21; PF=0); DRB1*15 (2) (22,0 % против 36,9 % в контрольной группе, х2=6,15; р<0,05; RR= 0,49; PF=0,19), а также внутрилокусного антигенного сочетания А9, А11 (0,85 % против 7 % в контрольной группе, х2=4,6; р<0,05; RR=0,25) и гаплотипических комбинаций А2, В12 (8,6 % против 62,1 % в контрольной группе, RR=0,06); А3, В7 (7,7 % против 84,1 % в контрольной группе, RR=0,02); А11, В35 (2,6 % против 29,9 % в контрольной группе, RR=0,07). Носительство данных иммуногенетических признаков снижало риск развития ОП от 2 до 50 раз.
□ здоровые □ больные ОП
1 1_
В12 (5,4 % против 62 % в контрольной группе, р<0,001; RR=0,04). Носительство приведенных иммуногенетических критериев снижало риск развития гидронефротической трансформации от 3 до 25 раз.
** - р<0,05 * - р<0,01
Рис. 2. Частота встречаемости антигенов, фенотипов и гаплотипических комбинаций системы Н1_А, не характерных для больных обструктивным пиелонефритом, по сравнению со здоровыми детьми
В ходе исследования нами была предпринята попытка выяснить, имеются ли особенности в представительстве иммуногенетических маркеров в зависимости от нозологической формы патологии. В группе больных с врожденным гидронефрозом (ВГ) - наиболее часто встречающейся ВОУ [8, 9] - установлена возможная протективная роль отдельных Н_А-антигенов в отношении развития врожденного гидронефроза (рис. 3). Выяснено, что существует достоверная отрицательная ассоциативная связь с антигенами А11 (4,3 % против 11,7 % в контрольной группе, х2 =4,9; р<0,05; RR=0,37; PF=0,06) и DQB1*0302 (6,8 % против 19,4 % в контрольной группе, х2=4,7; р<0,05; RR=0,34; PF=0,05). Также резистентность к данной патологии выявлена у носителей фенотипического сочетания антигенов А2, А9 (4,3 % против 11,8 % в контрольной группе, х2=4,9; р<0,05; RR=0,37) и гаплотипических комбинаций А2, В7 (7,5 % против 33,9 % в контрольной группе, р<0,01; RR=0,17); А2,
** - р<0,05 * - р<0,01
Рис. 3. Частота встречаемости антигенов Н_А, фенотипических и гаплотипических комбинаций, не характерных для больных с врожденным гидронефрозом, по сравнению со здоровыми детьми
Нас интересовало, имеются ли отличия в полиморфизме антигенов Н_А у больных пиелоэк-тазией, которая долгое время ассоциировалась некоторыми исследователями с первой степенью развития гидронефроза [4, 10, 11]. Были установлены своеобразные маркеры резистентности индивидуумов к данной патологии (рис. 4). Таковым оказалось носительство антигенов Н_А DRB1*01 (9,7 % против 31,1 % в контрольной группе, х2=6,8; р<0,01; RR=0,27; PF=0,08), DRB1*11 (5) (9,7 % против 25,2 % в контрольной группе, х2=4,37; р<0,05; RR=0,36; PF=0,05) и гаплотипической комбинации антигенов А3, В7 (9,7 % против 84,1 % в контрольной группе, RR=0,02). Наличие приведенных выше имму-ногенетических детерминант снижало риск но-сительства пиелоэктазии как самостоятельной аномалии в диапазоне от 3 до 50 раз.
** - р<0,05 * - р<0,01
Рис. 4. Частота встречаемости не характерных для пиелоэктазии Н_А-антигенов и межлокусной комбинации по сравнению со здоровыми детьми
Таким образом, наличие определенных им-муногенетических детерминант резистентно-
МЕДИЦИНСКИЙ ВЕСТНИК СЕВЕРНОГО КАВКАЗА MEDicAL NEws of NoRTH cAucAsus
2015. Т. 10. № 3 2015. Vоl. 10. iss. 3
сти к развитию патологии у детей с различными формами ВОУ определяет возможность использования методов HLA-типирования для дифференциальной диагностики врожденных обструкций со схожими заболеваниями и состояниями, для определения риска прогрессирования ги-дронефротической трансформации и риска осложнения течения обструктивной патологии вторичным инфекционным процессом.
Выводы
1. Резистентностью к развитию ВОУ обладают индивидуумы с аллелями HLA йЯВ1*07, йЯВ1*15 (2), й0В1*0302; фенотипами А1, А9; А9, А11 и гаплотипическими сочетаниями А3, В7; А11, В35; А19, В27.
2. Врожденной устойчивостью к развитию ОП обладают индивидуумы с антигенами главного комплекса гистосовместимости йЯВ1*07, йЯВ1*09, йЯВ1*15 (2); фенотипом А9, А11, гаплотипическими комбинациями А2, В12; А3, В7; А11, В35.
3. Протективную роль в развитии ВГ у индивидов играют специфичности системы HLA А11 и й0В1*0302; фенотипические сочетания А2, А9; А9, А11 и гаплотипические - А2, В7; А2, В12.
4. Резистентностью к наличию пиелоэктазии как минорной аномалии мочевой системы обладают индивидуумы с аллелями HLA йЯВ1*01, йЯВ1*11 (5) и гаплотипической комбинацией антигенов А3, В7.
Литература
1. Исаков, Ю. Ф. Детская хирургия. Национальное руководство / под ред. акад. РАМН проф. Ю. Ф. Исакова, проф. А. Ф. Дронова - М. : ГЭОТАР-Медиа, 2009. -1168 с.
2. Минаев, С. В. Проявление дисплазии соединительной ткани у детей с врождённой патологией почек и мочевыводящей системы / С. В. Минаев, И. В. Павленко, П. И. Чумаков и др. // Медицинский вестник Северного Кавказа. - 2014. - Т. 9, № 3. -С. 273-274.
3. Разин, М. П. Врожденные обструктивные уропатии и вторичный пиелонефрит у детей (клинические проявления, иммуногенетические параметры, иммунные нарушения и их коррекция) : автореф. дис. ... д-ра мед. наук / Разин М. П. - Киров, 2007. - 48 с.
4. Разин, М. П. Врожденные обструкции мочевого тракта (уропатогенез, клиника, диагностика и лечение) / М. П. Разин. - Saarbrücken, Deutschland : «LAMBERT Academic Publishing», 2013. - 184 с.
5. Разин, М. П. Детская урология-андрология : учебное пособие / М. П. Разин, В. Н. Галкин, Н. К. Сухих. - М. : ГЭОТАР-Медиа, 2011. - 128 с.
6. Разин, М. П. Иммуногенетика врожденных обструк-тивных уропатий у детей / М. П. Разин, Г. А. Зайцева, Я. Ю. Иллек // Урология. - 2007. - № 2. - С. 71-76.
7. Разин, М. П. Возможности иммуногенетики в диагностике врожденных обструктивных уропатий у детей / М. П. Разин, Г. А. Зайцева, Я. Ю. Иллек, М. А. Бату-ров // Вятский медицинский вестник. - 2012. - № 1. -С. 31-35.
8. Разин, М. П. Иммуногенетика врожденного гидронефроза / М. П. Разин, Я. Ю. Иллек, Г. А. Зайцева и др. // Детская хирургия. - 2003. - № 1. - С. 20-22.
9. Разин, М. П. Иммуногенетические параметры в дифференциальной диагностике врожденного гидронефроза / М. П. Разин, Я. Ю. Иллек, Г. А. Зайцева, А. П. Разин // Фундаментальные исследования. -2005. - № 6. - С. 103-104.
10. Сухих, Н. К. Опыт оперативного лечения гидронеф-ротической трансформации у новорожденных / Н. К. Сухих, М. П. Разин // Детская хирургия. - 2004. -№ 4. - С. 46-47.
11. Razin, M. P. Immunogenetic markers of predisposition and resistance to the obstructive pyelonephritis at children / M. P. Razin, I. V. Zykova, A. P. Razin, V. A. Makh-neva // European journal of natural history. - 2009. -№ 5. - Р. 50-51.
12. Sweigaard, A. HLA and disease associations: Detecting the strongest association / A. Sweigaard, L. P. Ryder // Tissue Antigens. - 1994. - № 43. - Р. 18-27.
References
1. Isakov Ju. F., Dronova A. F. Detskaja hirurgija. Nacio-nal'noe rukovodstvo. M.: «GEOTAR-Media»; 2009. 1168 P.
2. Minaev S. V., Pavlenko I. V., Chumakov P. I., Timo-feev S. I., Evsevyeva M. E. Medicinskij Vestnik Sever-nogo Kavkaza. - Medical News of North Caucasus. 2014;9 (3):273-274.
3. Razin M. P. Vrozhdennye obstruktivnye uropatii i vtorichnyj pielonefrit u detej (klinicheskie projavlenija, immunoge-neticheskie parametry, immunnye narushenija i ih korrek-cija): Autoref. dis. ... d-ra med. nauk. Kirov; 2007. 48 p.
4. Razin M. P. Vrozhdennye obstrukcii mochevogo trakta (uropatogenez, klinika, diagnostika i lechenie). Saarbrücken, Deutschland:«LAMBERT Academic Publishing»; 2013. 184 p.
5. Razin M. P., Galkin N. K., Suhih V. N. Detskaja urologi-ja-andrologija: Uchebnoe posobie. M.:«GEOTAR-Me-
dia»; 2011. 128 p.
6. Razin M. P., Zajceva G. A., Illek Ja.Ju. Urologija. - Urology. 2007;2:71-76.
7. Razin M. P., Zajceva G. A., Illek Ja. Ju., Baturov M. A. Vjatskij medicinskij vestnik. - Medical newsletter of Vyatka. 2012;1:31-35.
8. Razin M. P., Illek Ja. Ju., Zajceva G. A., Galkin V. N., Skobelev V. A. Detskaja hirurgija. - Pediatric surgery. 2003;1:20-22.
9. Razin M. P., Illek Ja. Ju., Zajceva G. A., Razin A P. Fun-damental'nye issledovanija. - The fundamental researches. 2005;6:103-104.
10. Suhih N. K., Razin M. P. Detskaja hirurgija. - Pediatric surgery. 2004;4:46-47.
11. Razin M. P., Zykova I. V., Razin A. P., Makhneva V. A. Eur. J. Nat. Hyst. 2009;5:50-51.
12. Sweigaard A., Ryder L. P. Tissue Antigens. 1994;43:18-27.
Сведения об авторах:
Разин Максим Петрович, доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой детской хирургии Кировской государственной медицинской академии; тел.: (8332)714321; e-mail: mprazin@yandex.ru
Зайцева Галина Алексеевна, доктор медицинских наук, профессор, руководитель лаборатории иммуногематологии, заместитель директора по научной работе ФГБУН КНИИГиПК ФМБА России; тел.: (8332)646903
Сухих Николай Константинович, кандидат медицинских наук, доцент кафедры детской хирургии Кировской государственной медицинской академии; тел.: (8332)714321; e-mail: mprazin@yandex.ru
