CC BY
13пациентов для прогнозирования эффективности терапии на основе метода FLIM (fluorescence lifetime imaging microscopy).
Материалы и методы
Клеточные линии колоректального рака человека (НТ29, НСТ116, СаСо-2). Переживающие тканевые культуры, полученные из образцов опухолей пациентов. Препараты оксалиплатин, 5-фторурацил и цетук-симаб. Мыши линии nude. Лазерный сканирующий микроскоп LSM880 (Carl Zeiss, Германия) с FLIM-модулем на основе время-коррелированного счета одиночных фотонов TCSPC. МТТ-тест, окрашивание на живое и мертвое с помощью флуоресцентных красителей и анализ колониеобразования для оценки выживаемости и активности клеток. Патоморфо-логический анализ с окрашиванием гематоксилином и эозином.
Результаты
По результатам in vitro исследования была определена лекарственная чувствительность клеточных
линий, а также выявлен наиболее чувствительный метаболический показатель, изменяющийся при лекарственном воздействии — это отношение вкладов свободного (а1) к связанному с белком (а2) НАД(Ф)Н а1/а2 [3]. In vivo была показана более высокая эффективность схемы FOLFOX для чувствительной клеточной линии НСТ116, что коррелировало с изменением метаболизма опухолевых клеток в составе тканевых слайсов. Кроме того, была продемонстрирована возможность оценки изменений метаболизма опухолевых клеток в составе тканевых слайсов, полученных из опухолей пациентов.
Выводы
Показана возможность прямой оценки лекарственной чувствительности опухолевых клеток, полученных из опухолей пациентов, по изменению их метаболического статуса при оценке методом FLIM. Работа выполнена в рамках государственного задания Минздрава РФ (рег. номер АААА-А20-120022590098-0).
Список литературы
1. А . Д . Каприн и др . Состояние онкологической помощи населению . М .: МНИОИ им . П А. Герцена — филиал ФГБУ
«НМИЦ радиологии» Минздрава России, 2020 . 239 с . : ил . 2 . Клинические рекомендации . Злокачественные новообразования ободочной кишки и ректосигмоидного отдела МКБ
10:C18, C19. Год утверждения 2020 . 3 . Shirmanova et al . Chemotherapy with cisplatin: insights into intracellular pH and metabolic landscape of cancer cells in vitro and in vivo // Sci Rep . 2017 . Aug . 21. Vol . 7 (1) . Р 8911.
Роль микроРНК-135а в регуляции экспрессии онкогенов ВПЧ 16-го типа и генов врожденной противовирусной
защиты при раке шейки матки
Авторы
Елкин Данила Сергеевич, yodanila@yandex.ru, НИИ канцерогенеза ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва
Фасхутдинов Радик Сяитович, rad.fasxutdinow@yandex.ru, НИИ канцерогенеза ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва
Елкина Надежда Вячеславовна, elkina.nv@mail.ru, НИИ канцерогенеза ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва
Берлина Дина Юрьевна, dberlina@mail.ru, НИИ канцерогенеза ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва
Павлова Лариса Сергеевна, larisamama@bk.ru, НИИ канцерогенеза ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва
Катаргин Алексей Николаевич, akatar@mail.ru, НИИ канцерогенеза «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва
Федорова Мария Дмитриевна, fedorova_maria@inbox.ru, НИИ канцерогенеза ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва
Винокурова Светлана Владимировна, vinokourova@mail.ru, НИИ канцерогенеза ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва
Ключевые слова:
рак шейки матки, вирусы папиллом человека, микроРНК, иммунитет
Актуальность
Этиологическим фактором развития рака шейки матки (РШМ) является инфекция вирусом папилломы человека (ВПЧ) высокого канцерогенного риска. Благодаря эффективной работе иммунной системы после инфицирования происходит элиминация вируса и только в небольшом проценте случаев пер-систирующая инфекция приводит к развитию ВПЧ-ассоциированных поражений, которые прогрессируют до РШМ. Ключевым событием трансформации инфицированных клеток является увеличение экспрессии вирусных онкогенов Е6 и Е7 [1]. Изменение профиля экспрессии микроРНК может стать причиной как нарушения работы системы клеточного противовирусного ответа и снижения эффективности элиминации вируса, так и увеличения экспрессии вирусных онкогенов с последующей онкотрансформацией [2].
Цель
Исследование роли клеточных микроРНК в регуляции экспрессии вирусных онкогенов и генов клеточной системы противовирусной защиты при РШМ.
Материалы и методы
Уровень экспрессии микроРНК оценивали методом секвенирования нового поколения с последующим подтверждением количественной полимеразной цепной реакции (кПЦР). Влияние микроРНК на экспрессию вирусных и клеточных генов определяли с помощью кПЦР и Вестерн-блоттинга после транс-фекции синтетическими аналогами микроРНК клеток цервикальной ВПЧ 16-положительной клеточной линии SiHa и первичных культур опухоль-ассоцииро-ванных мезенхимальных стромальных клеток. Влияние метилирования ДНК на экспрессию микроРНК
оценивали после обработки клеток SiHa 5'-аза-2'-деоксицитидином.
Результаты
В результате данной работы выявлена микроРНК-135a, экспрессия которой значительно снижена в ин-вазивных карциномах шейки матки по сравнению с условно нормально прилежащим эпителием, а также в плазме крови пациентов с РШМ по сравнению со здоровыми донорами. Снижение экспрессии микроРНК может происходить за счет генетических и эпигенетических механизмов — аномального метилирования и потери гетерозиготности в участке, кодирующем ген MIR135A1. В экспериментах in vitro показано, что микроРНК-135а снижает экспрессию вирусного онкогена E6, а также увеличивает экспрессию интер-ферон-стимулируемых генов, вовлеченных в противовирусный ответ. Показано, что микроРНК-135а секре-тируется ВПЧ 16-положительными эпителиальными клетками в составе внеклеточных везикул, что указывает на потенциальную возможность воздействия на опухолевое микроокружение. В опытах in vitro показано, что трансфекция микроРНК-135а в мезенхи-мальные стромальные клетки приводит к увеличению экспрессии интерферона-альфа и интерферон-стиму-лируемых генов, а также секреции факторов, активирующих противовирусный ответ в эпителиальных клетках, трансформированных ВПЧ 16.
Выводы
Таким образом, микроРНК-135а является потенциальной противовирусной микроРНК, которая способна подавлять экспрессию онкогена E6 ВПЧ16 и увеличивать экспрессию генов противовирусной защиты.
Список литературы
1. zur Hausen H . Papillomaviruses and cancer: from basic studies to clinical application // Nat . Rev. Cancer. Nature Publishing
Group . 2002 . Vol . 2 . № 5 . P 342-350 . 2 . Fiorucci G . et al . MicroRNAs in virus-induced tumorigenesis and IFN system // Cytokine and Growth Factor Reviews . 2015 . № 2 (26) . P. 183-194.
Антидиабетические свойства изофлавонов из корней кудзу как потенциального средства профилактики рака молочной железы
Авторы
Елена Дмитриевна Ермакова, helenermakova@mail.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, ФГАОУ ВО «Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого», Санкт-Петербург
Арушанов Арташес Робертович, arushanov010602@mail.ru, ФГБУ «НМИЦ им. В.А. Алмазова» Минздрава России, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
Круглов Антон Сергеевич, toni.kruglov.97@mail.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
Дорофеева Анастасия Алексеевна, donastya94@mail.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, ФГАОУ ВО «Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого», Санкт-Петербург
