CC BY
7Актуальность
Этиологическим фактором развития рака шейки матки (РШМ) является инфекция вирусом папилломы человека (ВПЧ) высокого канцерогенного риска. Благодаря эффективной работе иммунной системы после инфицирования происходит элиминация вируса и только в небольшом проценте случаев пер-систирующая инфекция приводит к развитию ВПЧ-ассоциированных поражений, которые прогрессируют до РШМ. Ключевым событием трансформации инфицированных клеток является увеличение экспрессии вирусных онкогенов Е6 и Е7 [1]. Изменение профиля экспрессии микроРНК может стать причиной как нарушения работы системы клеточного противовирусного ответа и снижения эффективности элиминации вируса, так и увеличения экспрессии вирусных онкогенов с последующей онкотрансформацией [2].
Цель
Исследование роли клеточных микроРНК в регуляции экспрессии вирусных онкогенов и генов клеточной системы противовирусной защиты при РШМ.
Материалы и методы
Уровень экспрессии микроРНК оценивали методом секвенирования нового поколения с последующим подтверждением количественной полимеразной цепной реакции (кПЦР). Влияние микроРНК на экспрессию вирусных и клеточных генов определяли с помощью кПЦР и Вестерн-блоттинга после транс-фекции синтетическими аналогами микроРНК клеток цервикальной ВПЧ 16-положительной клеточной линии SiHa и первичных культур опухоль-ассоцииро-ванных мезенхимальных стромальных клеток. Влияние метилирования ДНК на экспрессию микроРНК
оценивали после обработки клеток SiHa 5'-аза-2'-деоксицитидином.
Результаты
В результате данной работы выявлена микроРНК-135a, экспрессия которой значительно снижена в ин-вазивных карциномах шейки матки по сравнению с условно нормально прилежащим эпителием, а также в плазме крови пациентов с РШМ по сравнению со здоровыми донорами. Снижение экспрессии микроРНК может происходить за счет генетических и эпигенетических механизмов — аномального метилирования и потери гетерозиготности в участке, кодирующем ген MIR135A1. В экспериментах in vitro показано, что микроРНК-135а снижает экспрессию вирусного онкогена E6, а также увеличивает экспрессию интер-ферон-стимулируемых генов, вовлеченных в противовирусный ответ. Показано, что микроРНК-135а секре-тируется ВПЧ 16-положительными эпителиальными клетками в составе внеклеточных везикул, что указывает на потенциальную возможность воздействия на опухолевое микроокружение. В опытах in vitro показано, что трансфекция микроРНК-135а в мезенхи-мальные стромальные клетки приводит к увеличению экспрессии интерферона-альфа и интерферон-стиму-лируемых генов, а также секреции факторов, активирующих противовирусный ответ в эпителиальных клетках, трансформированных ВПЧ 16.
Выводы
Таким образом, микроРНК-135а является потенциальной противовирусной микроРНК, которая способна подавлять экспрессию онкогена E6 ВПЧ16 и увеличивать экспрессию генов противовирусной защиты.
Список литературы
1. zur Hausen H . Papillomaviruses and cancer: from basic studies to clinical application // Nat . Rev. Cancer. Nature Publishing
Group . 2002 . Vol . 2 . № 5 . P 342-350 . 2 . Fiorucci G . et al . MicroRNAs in virus-induced tumorigenesis and IFN system // Cytokine and Growth Factor Reviews . 2015 . № 2 (26) . P. 183-194.
Антидиабетические свойства изофлавонов из корней кудзу как потенциального средства профилактики рака молочной железы
Авторы
Елена Дмитриевна Ермакова, helenermakova@mail.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, ФГАОУ ВО «Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого», Санкт-Петербург
Арушанов Арташес Робертович, arushanov010602@mail.ru, ФГБУ «НМИЦ им. В.А. Алмазова» Минздрава России, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
Круглов Антон Сергеевич, toni.kruglov.97@mail.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
Дорофеева Анастасия Алексеевна, donastya94@mail.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, ФГАОУ ВО «Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого», Санкт-Петербург
Радецкая Екатерина Андреевна, radison-kat@mail.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
Вон Юлия Дюсековна, takeo_yuki@mail.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
Юрова Мария Николаевна, yumarni@gmail.com, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
Семенов Александр Леонидович, genesem7@gmail.com, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
Ключевые слова:
сахарный диабет 2-го типа, изофлавоны, рак молочной железы
Актуальность
Известно, что сахарный диабет 2-го типа (СД2) является фактором риска рака молочной железы (РМЖ) [1]. Имеются экспериментальные данные о влиянии высокожировой диеты на развитие РМЖ у грызунов. Апробирована модель СД2 у крыс для изучения потенциальных профилактических средств с целью последующей оценки их антиканцерогенного эффекта [2]. В данной работе представлены результаты первого этапа исследования применения поли-фенольных соединений, обладающих плейотропным действием.
Цель
Изучить влияние экстракта изофлавонов (ИЗФ) из корней кудзу на течение СД2 у крыс.
Материалы и методы
Исследование проведено на 30 самках и 30 самцах крыс линии Wistar, содержащихся в стандартных условиях вивария. Животные группы интактного контроля (ИК) получали стандартный корм и воду и не подвергались экспериментальным воздействиям. Животные опытной (СД2+ИЗФ) и контрольной (СД2) групп получали высокожировую и высокоуглеводную диету ad libitum на протяжении всего опыта. Через 14 дней диеты животным индуцировали поражение поджелудочной железы внутрибрюшинным введением стрептозоцина (35 мг/кг). После регистрации СД2 животным группы СД2+ИЗФ ежедневно в течение 28 дней per os вводили ИЗФ (200 мг/кг), животным контрольной группы (СД2) — воду. Экстракт ИЗФ был получен и предоставлен Уральским федеральным университетом им. Б.Н. Ельцина. Проводили биохимический анализ крови, морфологические и
иммуногистохимические исследования тканей поджелудочной железы. Для статистической обработки результатов использовали ANOVA.
Результаты
У крыс группы СД2 возрастал уровень глюкозы сыворотки крови до 19±1,5 ммоль/л по сравнению с группой ИК (8,8±0,3 ммоль/л; р <0,05). При использовании ИЗФ наблюдали тенденцию к снижению этого показателя на 10% относительно группы СД2. Также в группе СД2 повышался уровень триглицеридов в сравнении с ИК (3,77±0,27 vs 2,37±0,12 ммоль/л; p <0,05), а введение ИЗФ значимо понижало его (2,92±0,22 ммоль/л) в сравнении с группой СД2 (p <0,05). Уровень креатинина в группе СД2 был выше (73,09±2,92 мкмоль/л), чем в группе ИК (53,92±3,19 мкмоль/л; p <0,05). При этом введение ИЗФ способствовало нормализации этого показателя (56,74±4,19; p <0,05). Обнаружено, что поражалась эндокринная функция поджелудочной железы: количество инсулин-позитивных клеток снизилось в 3 раза при индукции СД2, а количество глюкагон-позитивных — в 1,5 раза в сравнении с ИК. Введение ИЗФ не влияло на гибель и восстановление инсулин-продуцирующих клеток, но повышало количество а-клеток поджелудочной железы.
Выводы
Введение экстракта ИЗФ способствует нормализации биохимических показателей сыворотки крови крыс с СД2 и сохранению количества а-клеток поджелудочной железы. Таким образом, растительный препарат перспективен для исследования антиканцерогенной активности. Исследование поддержано Российским научным фондом (грант № 20-65-47025).
Список литературы
1. Eketunde A . O . Diabetes as a risk factor for breast cancer // Cereus . 2020 . T 12 . № . 5 .
2 . Aupperlee M . D . et al . Puberty-specific promotion of mammary tumorigenesis by a high animal fat diet // Breast Cancer Research . 2015 . Т 17 . № . 1. С . 1-20 .
