CC BY
72
ИММУНОЛОГИЯ № 3, 2014
© ЮРЧИНСКИй в.я., ЕРОФЕЕВА Л.М., 2014 УДК 612.438.014.2:612.42].084
Юрчинский В.Я.1, Ерофеева Л.М.2
роль лимфоидного компонента в формировании ключевых макро-и микроморфологических характеристик тимуса позвоночных животных и человека
1ФГБОУ ВПО «Смоленский государственный университет», 214000, Смоленск; 2ФГБОУ ВПО «Московский государственный медико-стоматологический университет им. А.И. Евдокимова» Минздрава России, 127473, Москва
На примере представителей 4 классов наземных позвоночных животных, включая человека, проведено сравнительное изучение комплекса морфологических параметров тимуса, которые напрямую зависят от процессов пролиферации и дифференцировки лимфоцитов. Обнаружены сходство и различия в строении вилочковой железы у позвоночных животных, отличающихся уровнем организации, особенностями биологии, степенью специализации в различных условиях среды. Определена зависимость морфологии тимуса от емкости энергетического обмена организма, а также выявлены последствия воздействия антропогенной среды на морфологию тимуса человека.
Ключевые слова: позвоночные животные; тимус; гистология; Т-лимфоциты; митотический индекс; корковомозговой индекс.
Yurchinskiy V.Ya.1, ЕrоfееvaL.M.2
the role of lymphoid component in forming the main macro-micromorphological
PARAMETERS of THYMUS of vERTEBRAL ANIMALS AND HUMAN.
Smolensk State University, SmolSU, 214000, Smolensk; 2of A.I.Evdokimov Moscow State University of Medicine and Dentistry, 127473, Moscow
The purpose of this investigation was in the comparative morphological studying of thymus of four classes of vertebral animals (Chordata, Tetrapoda): Amphibia, Reptilia, Aves, Mammalia. Using light microscopy and morphometry the article show the analysis of complex of thymus' macro- and micromorfological parameters which is directly depends on the processes of proliferation and differentiation of lymphocytes: the index of weigh of thymus and cortico-medullare, the number of thymocites and mitotical index. It has revealed the similarities and the differences in the structure of thymus gland of vertebral animals which are remarkable for the organization level, biological features and for their adaptation to the habitat. The dependence of the morphology of the thymus on the capacity of energy metabolism of the organism was shown in article. The article also show results of the anthropogenic environment's influence on the morphology of human thymus.
Key words: vertebrate animals; thymus, histology; T cells; cortico-medullare index; mitotic index
Тимус общеизвестен как центр, где происходит пролиферация и дифференцировка предшественников Т-лимфоцитов [1-3]. Характеристики этого процесса в значительной степени определяют ряд важнейших макро- и микроморфологических параметров данного органа: массу долей, соотношение коркового и мозгового вещества, степень наполнения лимфоцитами, а также митотический индекс (МИ). Дефицит сравнительно-морфологических исследований в этой области существенно сужает наши представления о зависимости некоторых ключевых процессов, протекающих в рамках лимфоидной системы, от возраста, уровня организации, специфических особенностей среды обитания позвоночных.
Цель работы - изучение основных морфологических характеристик тимуса, связанных с состоянием его лимфоидного компонента у наземных позвоночных животных в сравнении с человеком.
Материал и методы
Исследование тимуса проводили на примере 15 видов позвоночных, относящихся к 4 классам: классу земноводных (Amphibia): Rana esculenta (n = 36), R. temporaria (n = 28), R. terrestris (n = 36); пресмыкающихся (Reptilia): Lacerta agi-lis (n = 36), Vipera berus (n = 24), Natrix natrix (n = 36); птиц (Aves): Columba livia (n = 36), Scolopax rusticola (n = 24),
Для корреспонденции: Юрчинский Владислав Янович, e-mail: Zool72@mail.ru
For correspondence: Yurchinskiy Vladislav Yanovich, e-mail: Zool72@mail.ru
Muscicapa striata (n = 16); классу млекопитающих (Mammalia): Sorex araneus (n = 36), S. caecutiens (n = 24), Clethriono-mys glareolus (n = 40), Mus musculus (n = 24), Sylvimus major (n = 24), Homo sapiens (n = 65).
Исследование выполняли на неполовозрелых особях второй стадии зрелости. Рамки соответствующего возраста человека определяли согласно классификации, принятой на 7-й Всесоюзной конференции по возрастной морфологии, физиологии и биохимии в 1965 г Возраст животных эквивалентно соответствовал возрасту человека и определялся по общепринятым методикам [4]. Всего изучено 224 препарата неполовозрелых и 250 препаратов половозрелых позвоночных.
Для исследования тимуса человека использовали материал, набранный на базе отделения клинической патологии при Смоленском областном институте патологии. Весь секционный материал тщательно отбирали по анамнезу с целью исключения причин смерти, которые могли бы повлиять или резко изменить структуру тимуса. Эвтаназию животных осуществляли передозировкой эфирным наркозом (ЗАО “Вектон”) в соответствии с требованиями Министерства здравоохранения Российской Федерации к работе экспериментально-биологических клиник, а также Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в научных целях (Страсбург, 1986). Тимус, изъятый сразу после эвтаназии, взвешивали и измеряли. Доли тимуса фиксировали 10% нейтральным формалином, обезвоживали и заливали в парафин по стандартной методике. Срезы тимуса толщиной 5 мкм окрашивали гематоксилином и эозином, пикрофуксином по Ван-Гизону, альдегид-фуксином и смесью Halmi по Габу-Дыбану. Ми-
- 134 -
КЛЕТОЧНАЯ ИММУНОЛОГИЯ
кроскопическое строение тимуса изучали при помощи бинокулярных микроскопов МБС-9 и МБР-3 (лОмО, СССР).
Для получения микрофотографий использовали цифровой аппарат Nicon CoolPix 7900 (“Nicon”, Япония). Полученные изображения экспортировали в компьютер и измеряли абсолютные площади коркового и мозгового вещества тимуса с помощью программы ImageJ 1.38 (National Institutes of Health, Bethesda, США, свободный доступ в интернете).
Для суждения о морфофункциональном состоянии тимуса определяли индекс массы тимуса (ИМТ), корково-мозговой индекс (КМИ), который рассчитывали как отношение коркового вещества к мозговому. Измерение площади коркового и мозгового вещества тимуса проводили при увеличении окуляра *8, объектива *4 (МБС-9), а также окуляра *7 и объектива *8 (МБР-3). При изучении цитоконструкции тимуса общее количество тимоцитов в корковом и мозговом веществе тимуса подсчитывали на условной единице площади 100 мкм2 (окуляр *15, объектив х60 под масляной иммерсией) на цифровых фотографиях, а также с использованием окулярмикрометра МОВ-1-15х и окулярной сетки Г.Г. Автандилова [5]. Для каждого препарата оценивали 10 полей зрения. Количество митозов в субкапсулярной зоне коры и мозговом веществе (МИ) определяли на 1000 зарегистрированных клеток (окулярх15, объектив х90 под масляной иммерсией).
Результаты обрабатывали статистически с вычислением среднего арифметического, стандартной ошибки, дисперсии. Значимость различий между сравниваемыми группами оценивали методами параметрической и непараметрической статистики (/-критерий Стьюдента, Н-критерий Манна-Уитни и тест Краскела-Уоллиса). Анализ распределения признаков на нормальность проводили с использованием критериев Лиллиефорса и Шапиро-Уилка, а условие равенства дисперсий выборок проверяли по критерию Левена.
Результаты и обсуждение
На примере неполовозрелых представителей сравнительно-морфологического ряда прослеживается зависимость морфологии тимуса от уровня организации позвоночных. Выявлено, что холоднокровные животные закономерно уступают более развитым классам позвоночных в величинах
всех изученных морфологических показателей (см. таблицу). Особенно отчетливо такая закономерность проявляется по ИМТ, который у земноводных и пресмыкающихся снижен в 3 раза и более по сравнению с птицами и млекопитающими. Также существенно снижено содержание тимоцитов в корковом и мозговом веществе тимуса, что особенно заметно при сравнении земноводных с другими позвоночными.
Особенно сильно по КМИ и МИ холоднокровные позвоночные уступают насекомоядным млекопитающим. С момента возникновения истинной наземности (пресмыкающиеся) у неполовозрелых позвоночных макроморфологические характеристики тимуса (ИМТ и КМИ) изменяются мало, вместе с этим происходит увеличение (практически двукратное) плотности локализации тимоцитов как в корковом, так и в мозговом веществе тимуса. Для пресмыкающихся по сравнению с земноводными характерно увеличение количества митозов в коре и снижение их числа в мозговом веществе. Возникновение теплокровности неоднозначно сказывается на состоянии изучаемых морфологичекских параметров тимуса. Отчетливо прослеживается сходство ИМТ, КМИ и количества тимоцитов коры и мозгового вещества у птиц и грызунов. Вместе с тем для человека в сравнении с другими млекопитающими характерны самые низкие показатели ИМТ и КМИ тимуса. По этим характеристикам человек проявляет сходство с холоднокровными позвоночными. Только по количеству тимоцитов на единицу площади и их МИ показатели тимуса человека выходят на уровень, характерный для теплокровных животных. В свою очередь землеройки-бурозубки (насекомоядные млекопитающие) отличаются стабильно повышенными значениями всех изученных морфологических параметров тимуса, что особенно сильно проявляется на примере ИМТ и КМИ. По количеству тимоци-тов бурозубки уже мало отличаются от грызунов, человека и птиц. Величина МИ насекомоядных млекопитающих и грызунов сходна (см. таблицу).
У всех позвоночных независимо от уровня организации с возрастом наблюдается снижение показателей исследуемых морфологических параметров тимуса. Исключение составляет только степень инфильтрации тимоцитами коркового и мозгового вещества тимуса у земноводных, пресмыкающих-
Морфометрические показатели коркового и мозгового вещества тимуса позвоночных животных и человека (х ± Sх)
ИМТ, % от массы тела Количество тимоцитов коры (S = 100 мкм2) Количество тимоцитов в мозговом веществе (S = 100 мкм2) МИ, % на 1000 тимоцитов
Группа КМИ кора мозговое вещество
Неполовозрелые
Amphibia 0,089 ± 0,02*, c, d, e, f 2,43 ± 0,3*, b, c, d, e, f 308,12 ± 29,9*, c, d, e, f 139,54 ± 21,6 b, c, d, e, f 1,74 ± 0,34 c, d, e, f 1,83 ± 0,32 d, e, f
Reptilia 0,099 ± 0,01*, c, d, e, f 3,23 ± 0,5*, a, d, e, f 466,69 ± 34,8 c, d, e, f 267,35 ± 27,6 a, c, d, e, f 2,19 ± 0,29*,c,d,',f 1,45 ± 0,31 c, d, e, f
Aves 0,381 ± 0,08*, a, b, d, f 3,68 ± 0,8*a, d, e, f 652,88 ± 48,24 a, b, d 338,91 ± 38,27*, a, b, f 2,79 ± 0,42*, a, b, d, e 1,86 ± 0,22*, b, d, e, f
Insectivora 0,631 ± 0,12*, a, b, c, ', f 7,15 ± 1,5*, a, b, c, e, f 759,89 ± 61,6*, a, b, c, e 356,29 ± 35,4*, a, b, f 3,88 ± 0,53*, a, b, c, f 3,11 ± 0,49*, a, b, c, f
Rodentia 0,373 ± 0,07*, a, b, d, f 3,6 ± 0,7*, a, b, c, d, f 644,74 ± 54,5*, a, b, d 318,33 ± 29,3*, a, b, f 3,67 ± 0,45*, a, b, c, f 3,03 ± 0,41*, a, b, c, f
Homo 0,034 ± 0,07*, a, b, c, d, e 2,87 ± 0,3*, a, b, c, d 679,95 ± 46,9*, a, б 403,61 ± 18,9*, a, b, c, d, e 2,69 ± 0,36*, a, b, d, e 2,55 ± 0,41*, a, b, c, d, e
sapiens
Половозрелые
Amphibia 0,033 ± 0,008*, c, d, * f 1,07 ± 0,1*, b, c, d, e 260,79 ± 23,7*, b, c, d, ', f 143,27 ± 16,4 b, c, d, e f 0,81 ± 0,21*, d,e 1,59 ± 0,31 b, f
Reptilia 0,039 ± 0,01*, c,d,',f 1,42 ± 0,3*,a,c,d 481,18 ± 41,9 a, c, d 273,80 ± 37,6 a, c, d, f 0,92 ± 0,15*, d,',f 1,19 ± 0,25 a, f
Aves 0,107 ± 0,02*, a, b, d, f 0,66 ± 0,2*, a, b, d, e, f 654,26 ± 56,7 a, b, e, f 418,61 ± 49,6*, a, b, e 0,79 ± 0,11*, d,e 1,38 ± 0,17*, a, f
Insectivora 0,279 ± 0,05*, a, b, c, e, f 4,22 ± 0,8*, a, b, c, e, f 611,37 ± 59,0*, a, b, e 467,01 ± 52,9*, a, b, e, f 1,55 ± 0,33*, a, b, c, f 1,49 ± 0,31*, b, f
Rodentia 0,084 ± 0,02*, a, b, d, f 1,69 ± 0,3*, a, c, d, f 513,00 ± 27,9*, a, c, d 266,40 ± 23,2*, a, c, d, f 1,51 ± 0,24*, a, b, c, f 1,39 ± 0,34*, a, f
Home sapiens 0,016 ± 0,04*, a, b, c, d, e 1,26 ± 0,2*, c, d, e 553,49 ± 54,6*, a, c 346,48 ± 38,3*, a, b, d, e 0,67 ± 0,12*, b, d, e 0,73 ± 0,15*, a, b, c, d, e
Примечание. * - достоверность возрастных различий (р < 0,05); достоверность различий (р < 0,05) по сравнению с: a - земноводными, b - рептилиями, c - птицами, d - насекомоядными млекопитающими, e - грызунами, f - человеком; S - условная единица площади.
- 135 -
ИММУНОЛОГИЯ № 3, 2014
ся и птиц. У большинства исследованных групп ИМТ падают вдвое, тогда как у птиц и грызунов наблюдается 4-кратное их снижение. У всех позвоночных, за исключением пресмыкающихся и птиц, при переходе к зрелому возрасту наблюдается двукратное снижение КМИ. При этом у пресмыкающихся такое снижение незначительно, тогда как у птиц оно оказывается максимальным (в 6 раз и более). Согласно полученным результатам у всех амниот с возрастом происходит одинаково сильное (двукратное) снижение МИ тимоцитов коры. При этом у половозрелых птиц МИ коры ниже соответствующего показателя у неполовозрелых представителей в 3,5 раза, в то время как у человека такое снижение оказывается уже почти 5-кратным. В мозговом веществе тимуса холоднокровных позвоночных с возрастом темпы пролиферации лимфоцитов изменяются мало (недостоверные различия). Данный показатель у птиц, хотя и незначительно (в 1,3 раза), но достоверно уменьшается, тогда как у млекопитающих (грызуны и землеройки-бурозубки) его значения снижены уже вдвое. Для человека характерно самое существенное снижение темпов пролиферации лимфоцитов в мозговом веществе тимуса (МИ уменьшается в 3,5 раза).
Проведено сопоставление МИ тимоцитов коры и мозгового вещества тимуса позвоночных животных разного возраста. У всех неполовозрелых позвоночных, за исключением земноводных и человека, МИ тимоцитов коры превышает аналогичный показатель мозгового вещества тимуса в 1,3 (грызуны и землеройки-бурозубки) и 1,5 раза (птицы, пресмыкающиеся). Во второй стадии зрелости у человека и млекопитающих животных различий МИ в коре по сравнению с мозговым веществом тимуса не наблюдается, тогда как у пресмыкающихся и птиц МИ тимоцитов мозгового вещества незначительно преобладает над соответствующим показателем тимоцитов коры. Только у половозрелых земноводных МИ мозгового вещества практически вдвое выше аналогичного показателя тимоцитов коры тимуса.
Плотность расположения тимоцитов в корковом веществе тимуса с возрастом снижается только у млекопитающих, включая человека. У земноводных, пресмыкающихся и птиц возрастных изменений этого показателя не зафиксировано. Вместе с этим при переходе от неполовозрелой стадии жизненного цикла к зрелому возрасту степень инфильтрации тимоцитами мозгового вещества тимуса либо не изменяется (земноводные, пресмыкающиеся, грызуны, человек), либо незначительно возрастает (птицы и землеройки-бурозубки).
Во второй стадии зрелости обнаружены существенные отличия млекопитающих, включая человека, от других групп позвоночных животных, в том числе теплокровных (птиц). Однако эти отличия оказываются значимыми и закономерными только по морфологическим признакам, зависящим от клеточного уровня организации (количество тимоцитов на единицу площади и МИ). Только для млекопитающих характерно снижение степени инфильтрации тимоцитами коркового вещества тимуса, а также отсутствуют различия МИ коры и мозгового вещества, величина которого при переходе к зрелому возрасту значительно снижается. Вместе с тем в зрелом возрасте птицы проявляют большее сходство с холоднокровными позвоночными, чем с млекопитающими.
Морфометрическое изучение клеток лимфоидного ряда в тимусе показало существование возрастных различий между изученными группами позвоночных животных. По этому признаку всех изученных представителей сравнительноморфологического ряда можно разбить на 2 группы. В одну группу входят млекопитающие, включая человека, в другую - холоднокровные позвоночные и птицы. У представителей первой группы с возрастом снижается плотность расположения тимоцитов в коре тимуса и существенно падает МИ как мозгового вещества, так и коры. У человека такое снижение оказывается более выраженным, чем у млекопитающих животных. У представителей второй группы с возрастом не изменяется плотность расположения тимоцитов как в коре, так и в мозговом веществе. МИ существенно снижается только в коре. Снижение интенсивности деления лимфоцитов в моз-
говом веществе у холоднокровных позвоночных оказывается незначительным (см. таблицу).
Изученные в данной работе морфологические параметры тимуса зависят от процессов, связанных с поступлением предшественников тимоцитов в кору тимуса, их созреванием, селекцией, а также выходом зрелых Т-лимфоцитов в кровеносное русло [6].
На основе полученных результатов можно утверждать, что повышение уровня энергообмена (переход к теплокровности) оказал существенное влияние на скорость данных процессов. Поэтому у теплокровных позвоночных показатели изученных морфологических параметров закономерно повышены в сравнении с земноводными и пресмыкающимися. Связь морфологического состояния тимуса и энергообмена очевидна и опосредована через гормональные воздействия гипоталамо-гипофизарной системы, которая задействует целый комплекс желез внутренней секреции, так или иначе влияющих на тимус [3, 7, 8]. Наглядной иллюстрацией такой зависимости является морфология тимуса землероек-бурозубок (повышены значения всех изученных морфологических параметров), энергетический обмен которых отличается максимальной емкостью в силу особого образа жизни [9]. Следует ожидать, что у людей тяжелого физического труда, а также спортсменов должно наблюдаться более активное поступление предшественников лимфоцитов в тимус и как следствие - возрастание ИМТ, КМИ и МИ. Последнее подтверждается результатами работ, посвященных изучению последствий воздействия умеренной физической нагрузки на организм [10, 11]. Противоположная ситуация характерна для холоднокровных позвоночных, у которых на фоне пассивности и замедленного обмена веществ показатели, связанные с лимфоцитарным компонентом тимуса, закономерно снижены. Следует учитывать, что аналогичная ситуация возникает в тимусе у теплокровных позвоночных в рамках экспериментов по влиянию гиподинамии [12]. Не случайно сопоставление человека и других позвоночных свидетельствует о большом сходстве характеристик тимуса человека и холоднокровных позвоночных (ИМТ, КМИ, МИ у половозрелых). Причиной этого, вероятно, является выраженная гиподинамия большинства людей в условиях современной жизни.
Согласно одной из гипотез, тимоциты мозгового вещества представляют собой клетки, прошедшие позитивную селекцию, и составляют примерно 5% от всех поступивших в тимус предшественников [13-15]. Полученные данные позволяют утверждать, что в неполовозрелой стадии жизненного цикла количество аутотолерантных клеток (относительно числа недифференцированных тимоцитов коры) у всех позвоночных сходно. Во второй стадии зрелости только у теплокровных представителей возрастает количество тимо-цитов, проходящих позитивную селекцию в коре. Результат - отсутствие снижения плотности расположения тимоцитов в мозговом веществе на фоне уменьшения данного показателя в коре (грызуны, человек). Более того, у теплокровных, отличающихся наиболее энергозатратным образом жизни (птицы и землеройки-бурозубки), гибель тимоцитов в коре оказывается наиболее низкой. Очевидно, выработка адаптаций к гиперактивному образу жизни и повышенным энергозатратам вынуждает все звенья лимфоидной системы более экономно расходовать клеточный материал, повышая его функциональное качество. Кроме того, созревающие лимфоциты животных данных групп могут отличаться степенью экспресии определенных мембранных белков-рецепторов, что позволяет повысить устойчивость к действию глюкокортикоидов во время стрессового воздействия, а также дает возможность формировать популяцию клеток с достаточно высокой степенью аутотолерантности. Возможность таких клеточных перестроек доказана [16]. Следует предположить, что укрепление иммунитета человека в условиях умеренной физической нагрузки в своей основе может иметь, помимо прочего, и эти механизмы.
Неоднократно подтверждена высокая чувствительность
- 136 -
КЛЕТОЧНАЯ ИММУНОЛОГИЯ
тимуса к различным воздействиям внешней среды [16-18]. Исследованные группы животных являются обитателями экологически чистых биотопов в отличие от человека, организм которого испытывает воздействие широкого спектра агрессивных факторов антропогенной среды. Результатом таких отличий является более выраженное возрастное снижение скорости созревания тимоцитов человека в сравнении с млекопитающими (соответственно в 3,5 и 2 раза).
Возрастная инволюция тимуса не только заключается в снижении объемов поступающих в тимус предшественников Т-лимфоцитов, но и вызывает замедление их созревания [19, 20]. На примере позвоночных животных изученного сравнительно-морфологического ряда выявлено, что в разных зонах тимуса темпы созревания лимфоцитов снижаются неравномерно. Полученные нами данные свидетельствуют о выраженном снижении пролиферативной активности (МИ) клеток коры, что может быть связано со свойствами самих предшественников, не прошедших позитивную селекцию, а также определяется утратой функционального потенциала клеток ретикулярного эпителия, которые, как известно, активно влияют на пролиферацию и дифференцировку лимфоцитов [1, 6]. Практически полное сохранение МИ в мозговом веществе тимуса земноводных, пресмыкающихся и птиц может указывать на отличительные особенности зрелых аутотолерантных тимоцитов у этих групп позвоночных либо является свидетельством сохранения потенциала эпителия мозгового вещества тимуса. Однако у млекопитающих, включая человека, темпы пролиферации одинаково сильно снижаются как в коре, так и в мозговом веществе.
Жировое перерождение тимуса в рамках возрастной инволюции расценивается как одно из ведущих тканевых изменений данного органа, что доказано на примере человека и лабораторных грызунов, которых объединяют гиподинамия и специфическая антропогенная среда [21, 22]. В более ранних наших исследованиях у животных, обитающих в естественной (дикая природа) среде, жирового замещения не обнаружено [23]. Вместе с тем сопоставление возрастных изменений КМИ и ИМТ позвоночных показало, что, несмотря на жировое перерождение (повышенная объемная доля жировой ткани), изменение массы тимуса человека соответствует по своим масштабам аналогичному процессу у представителей животного мира и даже уступает птицам. На основании этого можно утверждать, что снижение массы тимуса позвоночных с возрастом происходит прежде всего по причине снижения общего количества тимоцитов в его дольках.
Таким образом, характеристики морфологии тимуса в значительной степени зависят от ключевых процессов, связанных с пролиферацией, созреванием и рециркуляцией лимфоцитов, что в равной степени справедливо для всех представителей сравнительно-морфологического ряда. Тимус представляет собой звено сложной системы, на морфофункциональное состояние которой существенный отпечаток накладывают уровень организации и специфические особенности среды обитания. Обнаруженные отличия морфологии тимуса у исследованных групп позвоночных животных и человека являются свидетельством пластичности лимфоидной системы в целом и тимуса в частности, что обеспечивает поддержание иммунных функций.
ЛИТЕРАТУРА
1. Старская И.С., Полевщиков А.В. Морфологические аспекты атрофии тимуса при стрессе. Иммунология. 2013; 5: 271-7.
2. Mori К., Itoi M., Tsukamoto N. The perivascular spaceasa path of hematopoetic progenitor cells and mature T cells between the blood circulation and thymic parenchyma. Int. Immunol. 2007; 19(6): 745-53.
3. Pearse G. Normal structure, function and histology of the thymus. Toxicol. Pathol. 2006; 34 (5): 504-14.
4. Клевезаль ГА. Принципы и методы определения возраста млекопитающих. М.: КМК; 2007.
5. Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия: Руководство.
М.: Медицина; 1990.
6. Харченко В.П., Саркисов Д.С., Ветшев П.С., Галил-Оглы ГА., Зайратьянц О.В. Болезни вилочковой железы. М.: Триада-Х; 1998.
7. Кветной И.М., Ярилин А.А., Полякова В.О., Князькин И.В. Нейроиммуноэндокринология тимуса. СПб.: ДЕАН; 2005.
8. Brever J.A., Kanagava О., Sleckman B.P. Thymocyte apoptosis induced by T cell activation is mediated by glucocorticoids in vivo. J. Immunol. 2002; 169 (4): 1837-43.
9. Зотин А. И., Владимирова И. Г., Кирпичников А. А. Энергетический метаболизм и направление эволюционного прогресса в классе млекопитающих. Журнал общей биологии. 1990; 51(6): 760-7.
10. Вихрук Т. И., Ткачук М. Г. Двигательная активность как фактор, определяющий морфофункциональное состояние органов иммунной системы. Морфология. 1996; 109 (2): 41.
11. Ткачук М.Г Тимус при различных физических нагрузках. Морфология. 2008; 133 (4): 96.
12. Агеева А.В., Самусев Р.П., Щербакова Л.В. Морфология тимуса неполовозрелых крыс под влиянием длительных сроков ограничения двигательной активности. Астраханский медицинский журнал. 2007; 1: 13.
13. Dominanguez-Gerpe L., Rey-Meandez M. Role of pre-T cells and chemoattractants on stress-associated thymus involutions. Scand. J. Immunol. 2000; 52 (5): 470-6.
14. Ivanov V.N., Nicolic-Zugic J. Biochemical and kinetic characterization of the glucocorticoid-induced apoptosis of immature CD4+CD8+ thymocytes. Int. Immunol. 1998; 10(12): 1807-17.
15. Scollary R.G., Godfrey D.I. Thymic emigration: conveyor belts or lucky dips? Immunol. Today. 1995; 16 (6): 268-73.
16. Brever J.A., Sleckman B.P., Swat W. Green fluorescent protein-glucocorticoid receptor knocking mice reveal dynamic receptor modulation during thymocyte development. J. Immunol. 2002; 169 (3): 1309-18.
17. Ерофеева Л.М. Сравнительная характеристика морфологических изменений в тимусе после облучения гамма лучами и ускоренными ионами углерода. Морфология. 2008; 133(2): 45.
18. Капитонова М.Ю., Кузнецова С.Л., Калучек С.В., Мохд Исмаил З.И., Улла М., Федорова О.В. Акцидентальная инволюция тимуса в растущем организме при воздействии различных видов стрессоров. Морфология. 2006; 130 (6): 56-61.
19. Savino W., Dardene M., Velloso L.A. The thymus is a common target in malnutrition and infection. Br. J. Nutr. 2007; 98 (1): 11-6.
20. Shanley D.P., Manley A.D. An envolutionary perspective on the mechanisms of immunosenescence. Trends Immunol. 2009; 30(7): 374-81.
21. Забродин В. А. Топография структурных компонентов тимуса взрослого человека. Иммунология. 2006; 126(4): 49.
22. Raica M., Cimpean A.M., Encica S. Involution of the thymus: a possible diagnostic pitfall. J. Morphol. Embriol. 2007; 48 (2): 101-6.
23. Юрчинский В. Я. Основные особенности морфологии тимуса позвоночных животных и человека. В кн.: Современные проблемы гуманитарных и естественных наук: Материалы IX Международной научно-практической конференции. М.: Спецкнига; 2011: 72-6.
Поступила 12.02.14
REFERENCES
1. Starskaya I.S., Polevshchikov A.V. Morphological aspects of thymus’ atrophy during stress. Immunologiya. 2013; 5: 271-7. (in Russian)
2. Mori K., Itoi M., Tsukamoto N. The perivascular spaceasa path of hematopoetic progenitor cells and mature T cells between the blood circulation and thymic parenchyma. Int. Immunol. 2007; 19(6): 745-53.
3. Pearse G. Normal structure, function and histology of the thymus. Toxicol. Pathol. 2006; 34 (5): 504-14.
- 137 -
ИММУНОЛОГИЯ № 3, 2014
4. Klevezal’ G.A. Principles and Methods of Determining the Age of Mammals. [Printsipy i metody opredeleniya vozrasta mlekopi-tayushchikh]. Moscow: KMK; 2007. (in Russian)
5. Avtandilov G.G. Medical Morphometry: Guide. [Meditsinskaya morfometriya: Rukovodstvo]. Moscow: Meditsina; 1990. (in Russian)
6. Kharchenko VP., Sarkisov D.S., vetshev P.S., Galil-ogly G.A., Zayrat’yants o.v. Diseases of Thymus. [Bolezni vilochkovoy zhelezy]. Moscow: Triada-Kh; 1998. (in Russian)
7. Kvetnoy I.M., Yarilin A.A., Polyakova vo., Knyaz’kin I.v. Neuroimmunoendocrinology of Thymus. [Neyroimmunoendokri-nologiya timusa]. Saint-Petersburg: DEAN; 2005. (in Russian)
8. Brever J.A., Kanagava o., Sleckman B.P. thymocyte apoptosis induced by T cell activation is mediated by glucocorticoids in vivo. J. Immunol. 2002; 169 (4): 1837-43.
9. Zotin A.I., vladimirova I.G., Kirpichnikov A.A. Energy metabolism and the direction of evolutionary progress in the class of mammals. Zhurnal obshchey biologii. 1990; 51(6): 760-7. (in Russian)
10. vikhruk T. I., Tkachuk M. G. Locomotor activity as a factor determining the morphology and function of the immune system. Morfologiya. 1996; 109(2): 41. (in Russian)
11. Tkachuk M.G. Thymus at various physical activities. Morfologi-ya. 2008; 133 (4): 96. (in Russian)
12. Ageeva A.v., Samusev R.P., Shcherbakova L.v. Thymus’ morphology of immature rats under the influence of long periods of limited physical activity. Astrakhanskiy meditsinskiy zhurnal. 2007; 1: 13. (in Russian)
13. Dominanguez-Gerpe L., Rey-Meandez M. Role of pre-T cells and chemoattractants on stress-associated thymus involutions. Scand. J. Immunol. 2000; 52 (5): 470-6.
14. Ivanov v.N., Nicolic-Zugic J. Biochemical and kinetic characterization of the glucocorticoid-induced apoptosis of immature CD4+CD8+ thymocytes. Int. Immunol. 1998; 10(12): 1807-17.
15. Scollary R.G., Godfrey D.I. Thymic emigration: conveyor belts or lucky dips? Immunol. Today. 1995; 16 (6): 268-73.
16. Brever J.A., Sleckman B.P., Swat W. Green fluorescent protein-glucocorticoid receptor knocking mice reveal dynamic receptor modulation during thymocyte development. J. Immunol. 2002; 169 (3): 1309-18.
17. Erofeeva L.M. Comparative characteristics of morphological changes in the thymus after irradiation of gamma rays and accelerated carbon ions. Morfologiya. 2008; 133(2): 45. (in Russian)
18. Kapitonova M.Yu., Kuznetsova S.L., Kaluchek S.V, Mokhd Ismail Z.I., Ulla M., Fedorova O.v. Accidental involution of the thymus in the growing organism affected by different types of stressors. Morfologiya. 2006; 130 (6): 56-61. (in Russian)
19. Savino W., Dardene M., velloso L.A. The thymus is a common target in malnutrition and infection. Br. J. Nutr. 2007; 98 (1): 11-6.
20. Shanley D.P., Manley A.D. An envolutionary perspective on the mechanisms of immunosenescence. Trends Immunol. 2009; 30(7): 374-81.
21. Zabrodin v.A. The topography of the structural components of adult’s thymus. Immunologiya. 2006; 126 (4): 49. (in Russian)
22. Raica M., CimpeanA.M., Encica S. Involution ofthe thymus: a possible diagnostic pitfall. J. Morphol. Embriol. 2007; 48 (2): 101-6.
23. Yurchinskiy v. Ya. The main morphological features of the thymus of vertebrate animals and human. In: [Sovremennyye prob-lemy gumanitarnykh i estestvennykh nauk: Materialy IX Mezh-dunarodnoy nauchno-prakticheskoy konferentsii]. Moscow: Spetskniga; 2011: 72-6. (in Russian)
Received 12.02.14
РЕГУЛЯЦИЯ ИММУНИТЕТА
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2014 УДК 612.017.1.063:615.322].083.3
Шукшина О.Г.1, Масная Н.В.1, Исайкина Н.В.2, Шерстобоев Е.Ю.1, Калинкина Г.И.2 ВЛИЯНИЕ РАСТИТЕЛЬНЫХ ПОЛИФЕНОЛЬНЫХ КОМПЛЕКСОВ НА
функциональную активность иммунокомпетентных клеток in VITRO
1ФГБУ «Научно-исследовательский институт фармакологии» СО РАМН, 634028, г Томск; 2ГБОУ ВПО Сибирский государственный медицинский университет Минздрава России, 634050, г Томск
В опытах in vitro выявлено дозозависимое влияние полифенольных комплексов календулы лекарственной (Calendula officinalis), крапивы двудомной (Urtica dioica) и рябины обыкновенной (Sorbus aucuparia) на индуцированный синтез цитокинов и иммуноглобулинов. Культивирование митогенстимулированных мононуклеарных клеток с полифенольным комплексом календулы в дозе 500 мкг/мл приводило к снижению синтеза интерлейкина (IL)-2, интерферона-Y (IFNy), IgM и IgG, тогда как в дозе 50 мкг/мл не влияло на данные показатели. Аналогичное действие наблюдали при применении полифенольных соединений (ПС) крапивы. Однако инкубация клеток с изучаемыми ПС в дозе 50 мкг/мл вызывала снижение уровня IgG. ПС рябины в обеих концентрациях оказывали выраженное подавляющее действие на выработку IL-2, IFNy, IgM и IgG митогенактивированными клетками. Изучаемые полифенольные комплексы в выбранных концентрациях не влияли на спонтанную и стимулированную продукцию IL-4.
Ключевые слова: полифенольные соединения; активность иммунокомпетентных клеток.
Shukshina O.G.1, Masnaya N.V.1, Isaykina N.V.2, Sherstoboev E.Yu.1, Kalinkina G.I.2
INFLUENCE OF VEGETATIVE POLYPHENOLIC COMPLEXES ON THE FUNCTIONAL ACTIVITY OF IMMUNOCOMPETENT CELLS IN VITRO
1State establishment Scientific-research institute of pharmacology of Tomsk scientific center of Siberian department of RAMS, 634028, Tomsk; 2Siberian state medical university, 634050, Tomsk
Для корреспонденции: Шукшина Ольга Геннадьевна, e-mail: olya.lya@mail.ru For correspondence: Shukshina Olga Gennadievna, e-mail: olya.lya@mail.ru
- 138 -
