CC BY
35
УДК: ГБ12.398.145.4-02:Б1Б.19-004.Б1+Б1Б-008.9 Код специальности ВАК: 14.03.03
роль КАЛЬЦИЙ-ФОСФАТНЫХ БИОНОВ В ПАТОГЕНЕЗЕ АТЕРОСКЛЕРОЗА: ОТСУТСТВИЕ ПРЯМОЙ КАЛЬЦИФИКАЦИИ ТКАНЕЙ И ИЗМЕНЕНИЯ КОНФОРМАЦИИ АНТИКАЛЬЦИФИЦИРУЮШИХ БЕЛКОВ
А.Г. Кутихин1, Е.А. Великанова1, Т.В. Глушкова1, Д.Е. Филипьев1, А.С. Головкин1,
А.А. Ломзов2, Д.В. Пышный2, Ю.А. Живодков3, Е.В. Григорьев1-4, Е.Б. Брусина14, О.Л. Барбараш14,
1ФГБНУ «Научно-исследовательский институт комплексных проблем сердечно-сосудистых заболеваний», г. Кемерово,
2ФГБУН «Институт химической биологии и фундаментальной медицины Сибирского отделения Российской академии наук»,
3Центр коллективного пользования «Технологии наноструктурирования полупроводниковых, металлических, углеродных, биоорганических
материалов и аналитические методы их исследования на наноуровне» федерального государственного бюджетного учреждения науки
«Институт физики полупроводников им. А.В. Ржанова» Сибирского отделения Российской академии наук, г. Новосибирск,
4ГБОУ ВПО «Кемеровская государственная медицинская академия»
Кутихин Антон Геннадьевич - e-mail: [email protected]
В данной работе изучена способность кальций-фосфатных бионов вызывать прямую кальцифи-кацию тканей и изменять конформацию антикальцифицируюших белков. В экспериментах in vitro и in vivo показано, что кальций-фосфатные бионы не кальцифицируют бычий и свиной перикард и брюшную аорту крыс соответственно. При помоши спектроскопии кругового дихроизма и анализа антикальцифицируюшей функции продемонстрировано, что кальций-фосфатные бионы не изменяют конформацию бычьего сывороточного альбумина и человеческого сывороточного фетуина-А. Таким образом, токсичность для эндотелиальных клеток является единственным механизмом патогенности кальций-фосфатных бионов, известным на настоящий момент времени.
Ключевые слова: бионы, кальцификация, конформация, альбумин, фетуин-А.
In this study, we investigated an ability of calcium phosphate bions to cause direct tissue calcification and change the conformation of anti-calcification proteins. Experiments in vitro and in vivo showed that calcium phosphate bions do not cause calcification of bovine and porcine pericardia and rat abdominal aorta. Circular dichroism and calcification propensity assay demonstrated that calcium phosphate bions do not change the conformation of bovine serum albumin and human serum fetuin-A. Therefore, endothelial toxicity is the only known mechanism of calcium phosphate bions pathogenicity.
Key words: bions, calcification, conformation, albumin, fetuin-A.
Введение
В 2013 г. научная группа из Тайваня синтезировала семейство минерало-органических наночастиц из различных солей и фосфатов [1]. Была выдвинута гипотеза, что данные биомиметические частицы, названные бионами, представляют собой часть физиологического механизма, регулирующего функцию, транспорт и выведение элементов и минералов в организме человека [1]. Кальций-фосфатные бионы (КФБ) формируются в биологических жидкостях при избытке преципитирующих ионов кальция и фосфора или их безуспешном выведении [1]. Эти образования представляют собой кальций-фосфатные частицы < 500 нм в диаметре [1] и могут быть визуализированы при помощи электронной или атомно-силовой микроскопии как сферические наночастицы, формирующие агрегаты и состоящие из углерода, азота, кислорода, водорода, кальция и фосфора [1]. Кроме того, они содержат некоторые белки [1].
В пионерской работе было показано, что КФБ идентичны между собой при выделении из различных биологических жидкостей [1]. В нашей недавней работе также было продемонстрировано, что КФБ, выделенные из кальци-фицированных атеросклеротических бляшек, и искусственно синтезированные КФБ имеют практически одинаковую морфологию и химический состав [2]. Было обнаружено, что факторы риска развития атеросклероза и
кальцификации клапанов сердца аналогичны тем, что способствуют формированию КФБ в крови [2]. Это указывает на их возможную патогенность и роль в сердечнососудистой кальцификации. В то же время остается не вполне ясным, являются ли КФБ патогенными частицами и истинной причиной сердечно-сосудистой кальцификации или это всего лишь безвредный продукт фосфорно-кальциевого гомеостаза. Ранее в нашей работе было показано, что КФБ обладают токсическим действием на эн-дотелиальные клетки [3]. Они способствуют их апоптозу, снижают их жизнеспособность, а также индуцируют синтез проатеросклеротических цитокинов интерлейкина-6 и интерлейкина-8 in vitro и вызывают гиперплазию интимы in vivo [3]. Причиной этому может являться интернализа-ция КФБ эндотелиальными клетками [3].
В то же время теоретически возможны еще два механизма патогенного действия КФБ: прямая кальцификация тканей и конформационные изменения антикальцифици-рующих белков.
Цель исследования: оценить, вызывают ли КФБ прямую кальцификацию тканей и конформационные изменения антикальцифицирующих белков.
Материал и методы
Искусственный синтез КФБ
Готовились базовые растворы CaCl2 (0,45М, Sigma-Aldrich) и Na2HPO4*12H2O (0,2M, Sigma-Aldrich), которые
МЕДИЦИНСКИЙ
АЛЬМАНАХ
далее разбавлялись до равных концентраций в 1 мМ во флаконе с 10 мл культуральной среды (среда DMEM, 10% фетальная бычья сыворотка, 1% раствор L-глутамина-пенициллина-стрептомицина и 0,4% раствор амфотери-цина B, Gibco) и инкубировались при 37°C, 5% CO2 и высокой влажности (MCO-18AIC, Sanyo). Для искусственного синтеза КФБ, содержащих исключительно бычий сывороточный альбумин (БСА-КФБ), или человеческий сывороточный фетуин-А (ЧСФ-КФБ) разбавляли базовые растворы CaCl2 и Na2HPO4*12H2O в DMEM до равных концентраций в 1 мМ и затем добавляли БСА (500 мкг/мл, Sigma-Aldrich) и ЧСФ (10 мкг/мл, Sigma-Aldrich) соответственно. Все процедуры осуществлялись в стерильных условиях. Длительность культивирования составила 6 недель, после чего растворы инкубировались в течение 3 дней при 4°C, центрифугировались при 200000 x g (Optima MAX-XP Ultracentrifuge, Beckman Coulter) в течение 1 ч при 4°C, осадок растворялся в бидистиллированной воде или 0,9% растворе NaCl. Количество КФБ в растворе определялось измерением оптической плотности (ОП) на длине волны 650 нм в соответствии со стандартами МакФарлан-да (0,5, 1 и 2 МкФ с соответствующими значениями ОП 0,08-0,10, 0,14-0,17 и 0,27-0,31). Во всех экспериментах для измерения ОП использовался микропланшетный ри-дер «Униплан» (Пикон, Россия).
Животные
Четырнадцать крыс-самцов породы Wistar (вес 250-300 г, возраст 12-14 недель) использовались для экспериментов на животных. Животные содержались в полипропиленовых клетках (пять крыс на клетку), выстланных деревом, и имели доступ к воде и пище ad libitum. В течение всего времени эксперимента поддерживались стандартные условия температуры (24±1°C), относительной влажности (55±10%) и 12-часовые циклы света и темноты. Осмотр крыс проводился ежедневно. Все процедуры осуществлялись в соответствии с Европейской конвенцией о защите позвоночных животных и были одобрены этическим комитетом ФГБНУ «Научно-исследовательский институт комплексных проблем сердечно-сосудистых заболеваний».
Животная модель
После введения в анестезию 3% изофлураном все животные получали ингаляционную анестезию 1,5% изофлу-раном в течение всего времени операции. Использовалась оригинальная экспериментальная модель ангиопластики аорты крысы с применением баллона для коронарной ангиопластики [4]. Аорта пунктировалась в проксимальном направлении иглой 21G, баллонный катетер DIOR 2.0x15 мм вставлялся в просвет аорты при помощи 0.014-дюймового проводника, и проводилась ангиопластика с давлением 10 атмосфер в течение 10 секунд. Катетер выводился, и процедура повторялась трижды для повреждения эндотелия. Все процедуры проводились в асептических условиях. Раствор КФБ (700 мкл, 0,5 МкФ) или такой же объем 0,9% NaCl (Gibco) вводился в кровеносное русло опытных и контрольных крыс соответственно (по 7 животных) путем инъекции в хвостовую вену.
Забор тканей, окраска и гистологический анализ
Спустя пять недель после операции все животные умерщвлялись передозировкой углекислого газа. Сегменты брюшной аорты крыс (> 2,5 см) иссекались, фиксиро-
вались в 10% забуференном формалине (Electron Microscopy Sciences), заключались в парафин (Electron Microscopy Sciences) и производились срезы (3 мкм). После окраски по Коссу и ализариновым красным в соответствии с общепринятой методикой срезы с каждой аорты оценивались световой микроскопией (Axioscop 40 Lab Microscope, Carl Zeiss) для оценки гиперплазии интимы и отношения интимы к медии. Ширина интимы и медии оценивалась с использованием программы ImageJ (National Institutes of Health). На каждую окраску оценивалось по три среза с каждой крысы, и вычислялось среднее значение для статистического анализа.
Модель кальцификации in vitro
Сегменты бычьего и свиного перикарда (НеоКор, Россия), зафиксированные в 0,625% растворе глютарового альдегида в течение 1 месяца, инкубировались в культуральной среде при 37°C, 5% CO2 и высокой влажности (MCO-18AIC, Sanyo). Инкубация проводилась в 6-луноч-ных планшетах, по четыре сегмента перикарда на лунку. Все образцы делились на четыре группы, экспонированные КФБ (200 мкл, 2 МкФ), CaCl2 и Na2HPO4*12H2O в равных концентрациях (1 мМ или 10 мМ) или 200 мкл стерильного ФСБ. Все измерения проводились в дублях. Гистологическая оценка различных сегментов из одной лунки проводилась на 3-й и 6-й неделе инкубации. Образцы ткани нарезались на криотоме, окрашивались ализариновым красным и оценивались на наличие отложений солей кальция (AxioImager.A1, Carl Zeiss).
Пробоподготовка образцов к спектроскопии кругового дихроизма и анализу антикальцифицирующей функции белков
БСА (45 мл, 50 мг/мл в стерильной бидистиллированной воде) инкубировался с 5 мл раствора БСА-КФБ (2 МкФ) или стерильной бидистиллированной воды. Смесь помещалась в пробирки Falcon при 37°C, 5% CO2 и высокой влажности (MCO-18AIC, Sanyo) на 1 неделю. ЧСФ (9 мкл, 1 мкг/мкл в стерильной бидистиллированной воде) инкубировался с 1 мкл раствора ЧСФ-КФБ (2 МкФ) или стерильной бидистиллированной воды. Смесь помещалась в 1.66 мл пробирки при 37°C, 5% CO2 и высокой влажности (MCO-18AIC, Sanyo) на 1 неделю. Затем все растворы замораживались при -40°C в течение суток и далее лиофилизи-ровались в течение суток (FreeZone Plus 2.5 Liter Cascade Benchtop Freeze Dry System, Labconco). После лиофилиза-ции приблизительно половина порошка подвергалась де-кальцификации 0.5M дигидратом динатриевой соли эти-лендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА) в течение 6 ч при комнатной температуре, снова замораживалась в течение суток при -40°C и далее лиофилизировалась в течение суток. Все образцы приготавливались в дублях.
Спектроскопия кругового дихроизма
Спектры записывались при 20°C на спектрометре кругового дихроизма Jasco J-600 (Jasco) с использованием кварцевых кювет толщиной 1 мм. Спектры БСА измерялись на длине волны между 185 и 270 нм со скоростью сканирования 50 нм/мин., разрешении и ширине полосы пропускания 1 нм и чувствительности 50 миллиградусов. Спектры ЧСФ измерялись при тех же самых настройках, исключая чувствительность, которая составила 5 миллиградусов. Каждый спектр представляет собой среднее
3 или 5 последовательных сканирований для БСА и ЧСФ соответственно. Концентрации БСА и ЧСФ составили 0,01 мкг/мкл и 0,055 мкг/мкл соответственно. Анализ преципитации белка из раствора Нативный БСА (45 мл, 50 мг/мл в стерильном 0,9% растворе NaCl) инкубировался с 5 мл раствора БСА-КФБ (2 МкФ) или стерильного 0,9% раствора NaCl. Смесь помещалась в пробирки Falcon при 37°C, 5% CO2 и высокой влажности (MCO-18AIC, Sanyo) на 1 неделю. Концентрация растворимого белка оценивалась сразу же после раскапывания, на 1-, 3-, 5- и 7-й день по методу Брэдфорда (спектрофотометр GENESYS 6 UV-Vis, Thermo Scientific) в соответствии с традиционным протоколом. Все измерения проводились в дублях, и средние значения использовались для последующего анализа. Анализ антикальцифицирующей функции белков Лиофилизированный БСА, инкубированный с раствором БСА-КФБ (2 МкФ) или со стерильной бидистиллиро-ванной водой с или без последующей декальцификации, растворялся в DMEM до концентрации 500 мкг/мл, и базовые стерильные растворы CaCl2 и Na2HPO4*12H2O затем разбавлялись в этом растворе до равных концентраций в 0,1; 0,2; 0,5; 1 и 2 мМ. Аналогичная процедура проводилась с лиофилизированным ЧСФ (10 рг/мл). Спустя 48 ч инкубации при 4°C измерялась ОП на длине волны 650 нм для оценки антикальцифицирующей способности опытного и контрольного БСА и ЧСФ. Все измерения проводились в дублях, и средние значения использовались для последующего анализа. Статистический анализ
Статистический анализ проводился при помощи программы MedCalc (MedCalc Software). Оценка нормально-
сти распределения оценивалась по критерию д'Агостино-Пирсона. Данные представлялись с помощью медианы, межквартильного расстояния (25 и 75 процентили), среднего и доверительных интервалов (ДИ) для медианы и среднего. В зависимости от типа распределения, две независимые группы сравнивались по U-критерию Манна-Уитни или t-критерию Стьюдента, три и более независимые группы сравнивались по критерию Краскелла-Уоллиса или однофакторным дисперсионным анализом (ОДА) с последующим попарным сравнением по U-критерию Манна-Уит-ни или t-критерию Стьюдента в том случае, если статистически значимые различия были выявлены критерием Кра-скелла-Уоллиса или ОДА соответственно. Поправка на множественные сравнения проводилась вычислением средней доли ложных отклонений гипотез (false discovery rate). P-значения или q-значения в случае вычисления средней доли ложных отклонений гипотез (q-значения - это P-значения после поправки с использованием этого метода) <0,05 признавались статистически значимыми.
Результаты исследования
Для оценки способности КФБ вызывать кальцификацию напрямую были проведены эксперименты на модели кальцификации перикарда in vitro. Не удалось обнаружить кальцификации как бычьего, так и свиного перикарда, экспонированного КФБ; в то же время экспозиция CaCl2 и Na2HPO4*12H2O в равной концентрации 1 или 10 мМ вызывала образование отложений солей кальция (рис. 1). Для подтверждения этих результатов была проведена окраска по Коссу и ализариновым красным срезов тканей брюшной аорты крыс из животной модели, что использовалось для оценки гиперплазии интимы (рис. 2) [3]. Отложений солей кальция обнаружено не было.
РИС. 1.
Кальций-фосфатные бионы не вызывают кальцификацию перикарда in vitro
Примечание: окраска ализариновым красным выявила отложения кальция в бычьем (сверху) и свином (снизу) перикарде, экспонированном перенасыщенным раствором CaCl2 и Na2HPO4*12H2O (справа), но не фосфатно-солевом буфере (контроль) и КФБ (слева).
РИС. 2.
Кальций-фосфатные бионы не вызывают кальцификацию брюшной аорты т то
Примечание: окраска ализариновым красным (справа) и по Коссу (слева) не выявила отложений кальция в брюшных аортах крыс, экспонированных КФБ.
МЕДИЦИНСКИЙ
АЛЬМАНАХ
РИС. 4.
Кальций-фосфатные бионы не изменяют конформацию БСА и ЧСФ. Примечание: А) Спектроскопия кругового дихроизма БСА и ЧСФ, инкубированных с БСА-КФБ, ЧСФ-КФБ или бидистиллированной водой с или без последующей декальцификации, не выявила структурных изменений данных белков после экспозиции КФБ. Б) Анализ антикальцифицирующей функции БСА и ЧСФ, инкубированных с БСА-КФБ, ЧСФ-КФБ или бидистиллированной водой с или без последующей декальцификации, не выявил функциональных изменений данных белков после экспозиции КФБ. В) Анализ преципитации не выявил снижения концентрации БСА в процессе инкубации с БСА-КФБ.
Для оценки способности КФБ изменять конформацию антикальцифицирующих белков был проведен ряд экспериментов с КФБ, содержащих только БСА или ЧСФ. Сканирующая электронная микроскопия выявила, что морфология БСА-КФБ и ЧСФ-КФБ сходна с морфологией обычных КФБ (рис. 3). Для оценки конформации были измерены спектры кругового дихроизма БСА и ЧСФ, инкубированных с раствором БСА-КФБ, ЧСФ-КФБ или стерильной бидистиллированной водой с или без последующей декальцификации. Не было выявлено значимых различий между спектрами (рис. 4A). Далее была изучена антикальцифицирующая функция БСА и ЧСФ. Ее анализ также не выявил какого-либо значимого различия между образцами (рис. 4Б). Наконец, было исследовано, способны ли КФБ индуцировать преципитацию БСА из раствора. Не было выявлено каких-либо значимых различий между образцами (рис. 4В).
Обсуждение
В данном исследовании впервые изучена способность КФБ вызывать кальцификацию напрямую как in vitro, так и in vivo. Не удалось обнаружить кальцификации, связанной с КФБ; в то же время, перенасыщенные растворы CaCl2 и Na2HPO4*12H2O в равных концентрациях 1 или 10 мМ вызывали значительное отложение солей кальция. Поэтому было предположено, что именно гиперкальциемия и гиперфосфатемия, а не КФБ, вызывают прямую сердечно-сосудистую кальцификацию. Более того, именно КФБ способны нейтрализовывать вредоносные эффекты перенасыщения солями кальция и фосфора. Это подтверждает гипотезу Wu, Young и их соавторов [1], которые предположили, что КФБ, образующиеся в биологических жидкостях в результате перенасыщения ионами кальция и фосфора, могут быть частью физиологического механизма, регулирующего функции, транспорт и выведение этих элемен -тов в организме человека. Также можно предположить, что кальций-фосфатные частицы, которые были обнаружены в тканях органов сердечно-сосудистой системы рядом научных групп [5-12], формируются там как результат гиперкальцие-мии и гиперфосфатемии и поэтому должны рассматриваться как предшественники, а не как индукторы кальцификации.
Также было исследовано, способны ли КФБ изменять конформацию антикальцифицирующих белков. Для этой цели были выбраны БСА и ЧСФ, поскольку они представляют два различных механизма связывания кальция [13]. Антикальци-фицирующее действие ЧСФ обусловлено отрицательными зарядами р-слоя домена D1, которые занимают места фосфатных группировок в кристаллах гидроксиапатита, что приводит к высокоаффинному связыванию кальция [13]. В то же время БСА связывает ионизированный кальций посредством множественных отрицательно заряженных аминокислот на своей поверхности [13]. Таким образом, ЧСФ связывает фосфат кальция с высокой аффинностью, в то время как БСА связывает свободный кальций с низкой аффинностью [13]. В данной работе не было выявлено никаких структурных или функциональных изменений в БСА или ЧСФ после экспозиции КФБ. Поэтому можно предположить, что КФБ не изменяют конформацию антикальцифицирующих белков.
Тем не менее, должно быть отмечено, что КФБ способны обладать другими патогенными эффектами, такими, как токсичность для эндотелиальных клеток. Поэтому они в любом случае не являются «невинными свидетелями» развития атеросклероза.
Выводы
1. КФБ не вызывают прямую кальцификацию;
2. КФБ не изменяют конформацию антикальцифициру-ющих белков;
3. единственным на данный момент выявленным механизмом патогенности КФБ является токсичность для эндо-телиальных клеток.
литература
1. Wu C.Y., Young L., Young D. et al. Bions: a family of biomimetic mineralo-organic complexes derived from biological fluids. PLoS One. 2013. Vol. 8. № 9. 75501 р.
2. Кутихин А.Г., Великанова Е.А., Глушкова Т.В. и др. Сходство минерало-органических наночастиц, выделенных из атеросклеротических бляшек, и искусственно синтезированных минерало-органических наночастиц. Медицина в Кузбассе. 2015. T. 15. № 4. С. 57-63.
Kutikhin A. G, Velikanova E.A., Glushkova T.V. i dr. Skhodstvo mineralo-organicheskikh nanochastits, vydelennykh iz ateroskleroticheskikh blyazhek, i iskusstvenno sintezirovannykh mineralo-organicheskikh nanochastic. Medicina v Kuzbasse. 2015. T. 15. № 4. S. 57-63.
3. Кутихин А.Г., Великанова Е.А., Филипьев Д.Е. и др. Роль кальций-фосфатных бионов в патогенезе атеросклероза: токсичность для эндотелия. Пермский медицинский журнал. 2015. Т. 32. № 6. C. 57-63.
Kutikhin A.G., Velikanova E.A., Filip'ev D.E. i dr. Rol' kal'ciy-fosfatnykh bionov v patogeneze ateroskleroza: toksichnost' dlya endoteliya. Permskiy medicinskiy zhurnal. 2015. T. 32. № 6. S. 57-63.
4. Sin'kov M. A., Filip'ev D. E., Sevost'yanova V. V. et al. Experimental model of rat aorta angioplasty with a Paclitaxel releasing balloon catheter. Bull Exp Biol Med. 2014. Vol. 156. № 3. P. 413-415.
5. Miller V. M., Rodgers G., Charlesworth J. A. et al. Evidence of nanobacterial-like structures in calcified human arteries and cardiac valves. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 2004. Vol. 287. № 3. P. 1115-1124.
6. Pusk s L. G, Tiszlavicz L., R zga Z. et al. Detection of nanobacteria-like particles in human atherosclerotic plaques. Acta Biol Hung. 2005. Vol. 56. № 3-4. P. 233-245.
7. Lee Y. S. Morphogenesis of calcification in porcine bioprosthesis: insight from high resolution electron microscopic investigation at molecular and atomic resolution. J Electron Microsc (Tokyo). 1993. Vol. 42. № 3. P. 156-165.
8. Delogne C., Lawford P. V., Habesch S. M. et al. Characterization of the calcification of cardiac valve bioprosthesis by environmental scanning electron microscopy and vibrational spectroscopy. J Microsc. 2007. Vol. 228. P. 62-77.
9. Weska R. F., Aimoli C. G., Nogueira G. M. et al. Natural and prosthetic heart valve calcification: morphology and chemical composition characterization. Artif Organs. 2010. Vol. 34. № 4. P. 311-318.
10. Schlieper G., Grotemeyer D., Aretz A. et al. Analysis of calcifications in patients with coral reef aorta. Ann Vasc Surg. 2010. Vol. 24. № 3. P. 408-414.
11. Schlieper G., Aretz A., Verberckmoes S. C. et al. Ultrastructural analysis of vascular calcifications in uremia. J Am Soc Nephrol. 2010. Vol. 21. № 4. P. 689-696.
12. Bertazzo S., Gentleman E., Cloyd K. L. et al. Nano-analytical electron microscopy reveals fundamental insights into human cardiovascular tissue calcification. Nat Mater. 2013. Vol. 12. № 6. P. 576-583.
13. Heiss A., DuChesne A., Denecke B. et al. Structural basis of calcification inhibition by alpha 2-HS glycoprotein/fetuin-A. Formation of colloidal calciprotein particles. J Biol Chem. 2003. Vol. 278. № 15. P. 13333-13341.
УДК: Б1Б.03:Б1Б.831-001:Б1Б-00Б.1 Код специальности ВАК: 14.03.03
фармакологическая коррекция изменений сосудисто-тромбоцитарного гемостаза при черепно-мозговой травме
г.А. Бояринов1, Л.в. Бояринова1, А.в. Дерюгина2, P.P. Зайцев1, о.Д. Соловьева1, Е.И. Яковлева1,
1ГБОУ ВПО «Нижегородская государственная медицинская академия»,
2Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского»
Бояринов Геннадий Андреевич - e-mail: [email protected]
Результаты экспериментально-клинического исследования показали, что формирующиеся при черепно-мозговой травме гипоциркуляция кровообращения, гипоксия, ацидоз и повышенное образование свободных радикалов вызывают нарушение цитоскелета эндотелиальных клеток и микроциркуляции в микрососудах миокарда. Эти изменения сопровождаются развитием тром-боцитопении. Применение мексикора в посттравматическом периоде сдерживает интенсивность формирования неспецифических факторов активации сосудисто-тромбоцитарного гемостаза и оказывает стабилизирующее воздействие на мембраны эндотелиоцитов, тромбоцитов и эритроцитов.
Ключевые слова: черепно-мозговая травма, состояние сосудисто-тромбоцитарного
гемостаза, цитопротектор мексикор.
The results of experimental and clinical studies have shown that gipocirculation, hypoxia, acidosis and increased production of free radicals formed by traumatic brain injury cause disruption of the cytoskeleton of endothelial cells and microcirculation in the microvessels of the myocardium. These changes are accompanied by the development of thrombocytopenia. The use of mexicor in the posttraumatic period constrains the intensity of the formation of nonspecific activation of vascular-platelet hemostasis and provides a stabilizing influence on the membranes of endothelial cells, platelets and red blood cells.
Key words: traumatic brain injury, the state of the vascular-platelet hemostasis,
cytoprotector mexicor.
