CC BY
55
УДК 616.61 -008.64-036.12-025.38.033.1
РОЛЬ ЭРИТРОПОЭТИНА В РЕАЛИЗАЦИИ МЕЖКЛЕТОЧНЫХ ВЗАИМОДЕЙСТВИЙ В КРОВИ У БОЛЬНЫХ С ТЕРМИНАЛЬНОЙ СТАДИЕЙ ХРОНИЧЕСКОЙ ПОЧЕЧНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТИ
М.В. Осипов*, Т.А. Гоигорьев, Н.П. Масленникова
*ЧелГМА; ГМЛПУЗ Челябинская областная клиническая больница,
г. Челябинск
Проведен анализ влияния эритропоэтина на межклеточные взаимодействия в крови у 50 больных с терминальной стадией хронической почечной недостаточности, находящихся на гемодиализе. У больных хронической почечной недостаточностью зафиксировано угнетение взаимодействий тромбоцитов друг с другом, с эритроцитами, с лимфоцитами и активация тромбоцитарно-нейтрофильных и тромбоцитарно-моноцитарных взаимодействий в периферической крови.
Ключевые слова: эритропоэтин, межклеточные взаимодействия в крови, хроническая почечная недостаточность, диализ.
Клеточные взаимосвязи в крови представлены при многих патологических ситуациях: воспалении, опухолевом росте, тромботических состояниях, атеросклерозе, аутоиммунных поражениях, сепсисе и его осложнениях и других, они определяют как типовые, так и специфические проявления болезни, в одних случаях могут иметь положительное значение, в других - инициировать или развивать патологический процесс. Межклеточные взаимодействия в крови оказывают влияние на проявления функциональной активности клеток и имеют значение в осуществлении защитных и восстановительных реакций. Реализация клеточных регуляторных влияний в одних случаях может быть обеспечена соединениями, высвобождаемыми клетками в окружающую среду, в других - требуется непосредственный контакт между клетками. Факторами, обеспечивающими межклеточные контакты, являются адгезивные молекулы, компоненты внеклеточного матрикса, растворимые медиаторы и онкогены.
У больных хронической почечной недостаточностью (ХПН) на феноменологическом уровне накоплено значительное количество данных об изменении рецепторного аппарата клеток крови. У пациентов с уремией отмечаются нарушения рецепторной функции комплекса гликопротеиновых рецепторов ІЬ, ІІЬ-ІПа, Р-селектина, что проявляется дефектом связывания фибриногена и фактора фон Виллебранда с тромбоцитами, тромбоцитов с лейкоцитами и эндотелиоцитами [10,14, 19, 23,26, 28]. Этот дефект частично обратим при лечении гемодиализом. Доказано, что у больных ХПН имеются изменения фосфолипидного состава мембран клеток крови, зависящие от степени уремической интоксикации и приводящие к экстернализации
фосфатидилсерина, это, в частности, изменяет кооперацию эритроцитов с другими клетками [1]. Расшифровка механизмов межклеточных взаимодействий в крови может прояснить развитие многих осложнений при ХПН, в том числе, тромбогеморрагических, инфекционных, анемии и др. [6,20,29].
Эритропоэтин (ЭПО), являющийся средством заместительной терапии у больных с терминальной стадией ХПН, в настоящее время рассматривается не только как регулятор активности гемо-поэтической ткани, ответственный за пролиферацию, дифференцировку, угнетение апоптоза в чувствительных к нему гранулоцитарно-моноцитарно-мегакариоцитарно-эритроцитарных колониеобразующих единицах и эритробластах, что приводит к увеличению количества эритроцитов в периферической крови [5]. Все большее внимание научной медицинской общественности привлекают плейо-тропные эффекты ЭПО. Показана способность ЭПО оказывать влияние на аффективный статус, функциональное состояние нервной системы при различной патологии человека в клинических и экспериментальных условиях [9, 15, 18, 26]. Эритропоэтин изменяет численный состав и функциональную активность лейкоцитов, оказывает влияние на гемореологию [2, 17, 21].
Представленные факты явились предпосылкой для проведения настоящего исследования, цель которого - исследовать факт и установить некоторые механизмы влияния эритропоэтина на межклеточные взаимодействия в крови у больных хронической почечной недостаточностью.
Материалы и методы исследования. Первоначально обследовано 160 больных с терминальной стадией ХПН в возрасте от 22 до 72 лет (средний
возраст 45,5 лет), находящихся на постоянном лечении в отделении диализа ГМЛПУЗ «Челябинская областная клиническая больница». После рандомизации в исследование включено 50 больных, из них 24 женщины и 26 мужчин. Критерии исключения: декомпенсация со стороны сердечнососудистой, дыхательной, пищеварительной систем; наличие в анамнезе туберкулеза, венерических заболеваний, гепатита, ВИЧ-инфекции, онкологической патологии; острые нарушения церебрального кровообращения; наличие острого воспалительного процесса; беременность; гемоглобин ниже 80 г/л; тромбоцитов менее 150-109/л. Все больные получали гемодиализную терапию на аппаратах «искусственная почка» 4008S/BIBAG фирмы «Fresenius» 2 раза в неделю сеансами по 5 часов, Kt/v 1,37 ± 0,06. Группа I - контроль (п = 10), здоровые люди - доноры областной станции переливания крови. Группа II - больные ХПН (п = 20). Группа III - больные ХПН (п = 30), получающие рекомбинантный человеческий эритропоэтин в составе препарата «Эпокрин» (ФГУП «НИИ особо чистых биопрепаратов ФМБА», Россия) 2 раза в неделю внутривенно в дозе 2000 ME в течение 2 месяцев. Суммарная доза введенного эритропо-этина составила около 40 000 ME. Кровь для исследований у больных ХПН забирали из артериального колена артерио-венозной фистулы до сеанса гемодиализа.
Обогащенную тромбоцитами плазму получали центрифугированием цельной крови и стандартизировали количество тромбоцитов в полученной плазме на гематологическом анализаторе «AST-diff» (Beckman Coulter, США). Тромбоцитарно-лейко-цитарную кооперацию исследовали на проточном цитофлюориметре «FACS Canto-II» (Becton Dickinson, США) с использованием моноклональных антител, меченных CD61+-FITC (флюоресцеинизо-тиоцианат) (Beckman Coulte, США); CD41+-FITC (Beckman Coulter, США); CD42b+-PE (фикоэрит-рин) (Becton Dickinson Pharmingen, США). Популяции лейкоцитов (лимфоциты, моноциты и гра-нулоциты) выделяли на основании определения в гейте С045-позитивных событий с использованием моноклональных антител к CD42b+-PE (Becton Dickinson Pharmingen США), а также по показателям светорассеивания. Оценка осуществлялась по относительному количеству (%) лимфоцитов, моноцитов и гранулоцитов, взаимодействующих с тромбоцитами. Эритроцитарно-тромбоцитарные взаимодействия исследовали после перемешивания и инкубации суспензии эритроцитов и тромбоцитов с концентрацией 300 10% и Ю1010/л соответственно, в камере Горяева подсчитывали количество эритроцитарно-тромбоцитарных коагрега-тов (ЭТК) в единице объема (8). Агрегацию тромбоцитов исследовали на лазерном агрегометре АЛАТ2-«Биола» (Россия). На поверхности тромбоцитов определяли экспрессию гликопротеидов тромбоцитов CD61+ (Gp Ilb/IIIa); CD41+; CD42b+
(Gp Ib/Ix). Кроме того, оценивали % тромбоцитов, экспрессирующих CD42b+. Оценивали среднепиковое значение в условных единицах (у.е.) флюоресценции.
Количество тромбоцитов определяли на гематологическом анализаторе фирмы «Orphee» (Япония) волюмометрическим методом. Уровень продукции эндогенного оксида азота (II) оценивали по концентрации конечных стабильных метаболитов NO с помощью реакции Griess в модификации Коробейниковой Э.Н. [4]. Результат выражали в мкмоль/л. Выраженность эндогенной интоксикации оценивали по содержанию веществ низкой и средней молекулярной массы (ВНиСММ) в плазме [8]. Концентрацию мочевины и креатинина в сыворотке определяли соответственно энзиматическим колориметрическим методом и кинетическим методом без депротеинизации на аппарате «Roki-бТ» (СПб., Россия) с использованием реактивов фирмы «Human» (Германия).
Статистическую обработку результатов проводили с использованием пакета прикладных программ «Statistica v. 6.0 for Windows» [3, И]. Для анализа вида распределения данных применяли критерий Шапиро-Уилка, для проверки равенства дисперсий в группах - критерий Левена. Учитывая, что большинство исследуемых показателей имели распределение признака в выборках, отличающееся от нормального, данные представляли в виде медианы (Me) и размаха квартилей (Q25 - Qts)- Проверку статистических гипотез в группах проводили с использованием критериев Манна-Уитни (U), Вальда-Вольфовитца (WW). Для оценки связи между показателями использовали методы корреляционного анализа с вычислением коэффициента корреляции Спирмена (R). Отличия считали статистически значимыми при р < 0,05.
Результаты исследования и их обсуждение. Установлено, что у больных ХПН снижается количество тромбоцитов в периферической крови (табл. 1). Полагают, что развитие тромбоцитопе-нии связано с угнетением тромбоцитопоэза и усилением тромбоцитодиэреза в условиях уремической интоксикации, дефицита эритропоэтина и тромбопоэтина при ХПН [22]. Содержание в плазме ВНиСММ, креатинина и мочевины у больных ХПН многократно возрастают (табл. 2). Межклеточные взаимодействия в крови у больных ХПН изменяются неоднозначно. Взаимодействие тромбоцитов друг с другом в ходе агрегации уменьшается, так как снижается скорость агрегации преимущественно за счет удлинения этого процесса. На этом фоне также угнетаются процессы взаимодействия тромбоцитов с эритроцитами, тромбоцитов с лимфоцитами. При этом отмечен рост тромбо-цитарно-нейтрофильных и тромбоцитарно-моноци-тарных коагрегатов в периферической крови.
До настоящего момента общепризнанной остается концепция о том, что нарушения функции тромбоцитов являются следствием их контакта с
Таблица 1
Влияние эритропоэтина на показатели межклеточной кооперации в крови и экспрессию тромбоцитарных рецепторов у больных хронической почечной недостаточностью
Показатели Группа 1 (контроль) п= 10 Группа 2 (больные ХПН) п = 20 Группа 3 (больные ХПН+ЭПО) п = 30
Ме СЬз-СЬ? Ме 0?.з - сы Ме С>25~С>75
Тромбоциты, • 109/л 230 229-252 167* 152-213 216* ** 189-243
ТЦ-НФ кооперация, % клеток 22,8 22,3-24,4 23,0* 19,1-37,6 26,9** 22,6-30,0
ТЦ-МЦ кооперация, % клеток 24,7 21,7-24,9 26,0* 20,7-58,4 26,8** 21,2-32,6
ТЦ-ЛЦ кооперация, % клеток 21,5 19,9-22,9 16,0* 13,7-17,6 20,95** 18,5-22,8
ТЭК, 1010/л 101,4 91,9-142,8 62,6* 49,8-82,5 87,6* ** 71,2-112,3
Амплитуда агрегации, % 75,4 44,7-160,9 129,3 65,6-127,4 111,1 86,5-136,9
Время агрегации, мин 1,48 0,88-1,55 4,23* 1,55-6,9 1,5** . 1,35-1,65
Скорость агрегации, %/мин 66,8 50,9-84,2 35,2* 27,9-42,3 70,2** 64,5-84,0
СБ61+, у. е. 1,59 1,56-1,66 1,34* 0,87-1,46 1,66** 1,40-1,81
СБ41+, у. е. 1,96 1,87-2,04 2,62* 2,39-3,10 2,46* ** 2,29-2,90
СБ42Ь+, у. е. 537 461-673 614* 566-969 644** 549-842
Тромбоциты С042Ъ+, % 78,0 72,1-94,6 74,9* 49,9-81,5 87,6** 78,1-94,1
Примечание. Здесь и в табл. 2 * - статистически значимые (р < 0,05) отличия с группой 1; ** - с группой 2.
Таблица 2
Влияние эритропоэтина на показатели эндогенной интоксикации и содержание стабильных метаболитов оксида азота (II) в плазме у больных хронической почечной недостаточностью
Показатели Группа 1 (контроль) п= 10 Группа 2 (больные ХПН) п = 20 Группа 3 (больные ХПН+ЭПО) п = 30
Ме С>25 - С?75 Ме С>25 ~ СЬз Ме СЬз - С?75
ЫОх, мкмоль/л 9,4 9,1-10,4 21,6* 14,5-26,8 12 9* ** 12,0-18,0
Ы02, мкмоль/л 2,5 2,2-2,9 5,6* 3,2-6,3 3 2* ** 2,8-4,2
N03, мкмоль/л 6,9 6,3-7,9 14,8* 8,2-22,8 Р £* ** 8,6-14,2
ВНиСММ, у. е. 0,6 0,57-0,69 1,63* 1,38-1,71 1,46* ** 0,84-1,55
Креатинин, мкмоль/л 73 67-82 947* 855-1256 841-917
Мочевина, ммоль/л 5,6 4,7-5,8 31,3* 28,2-38,3 28 9* ** 24,3-34,6
«уремическими токсинами», что приводит к структурным дефектам рецепторного аппарата [13].
Нами установлено, что у больных ХПН уменьшается экспрессия СОб1+ (Стр 11Ь/1Па) на поверхности тромбоцитов. Это приводит к нарушению связывания тромбоцитами фибриногена и фактора Виллебранда, опосредующих феномен тромбоцитарно-тромбоцитарного взаимодействия. Заслуживает внимания факт повышения экспрессии на поверхности тромбоцитов СБ41+; СВ42Ь+ (Ор 1Ь/1х), однако, % тромбоцитов, экспрессирующих СЮ42Ь+, статистически значимо снижался, что позволяет предположить компенсаторный характер гиперэкспрессии СВ42Ь+ Исследования дисфункции тромбоцитов при уремии группой итальянских ученых в течение 30 лет позволили установить, что механизм нарушения агрегации
тромбоцитов связан с эффектами гуанидинянтар-ной кислоты, накапливающейся в крови у больных с ХПН вследствие усиления метаболизма Ь-арги-нина по альтернативному пути [24]. Механизм опосредован активацией ИО-синтазы в тромбоцитах и повышением уровня внутриклеточного N0. Нами установлено, что в сыворотке у больных ХПН повышено общее содержание конечных метаболитов N0 за счет нитритов и нитратов (см. табл. 2).
Полагают, что изменение эршроцитарно-тром-боцитарной коагрегации при ХПН обусловлено подавлением активности тромбоцитов, однако точный механизм этого феномена, как и обеспечивающие его структурные элементы не установлены [25].
Отдельного обсуждения заслуживают разнонаправленные изменения тромбоцитарно-лейкоци-тарной кооперации в крови у больных ХПН.
теинов у больных ХПН (см. табл. 1). Скорость агрегации тромбоцитов увеличивается за счет укорочения процесса, восстанавливая, таким образом, тромбоцитарно-тромбоцитарные взаимодействия до уровня контрольной группы. Количество нейт-рофилов и моноцитов, взаимодействующих с тромбоцитами, уменьшается, а количество лимфоцитов - увеличивается, кроме того, возрастает представительство тромбоцитарно-эритроцитар-ных коагрегатов. На фоне применения эритропоэ-тина экспрессия тромбоцитарных гликопротеинов С061+ (Ор ПЬ/Ша) увеличивается, СБ41+; СБ42Ь+ (Ор 1ЬЛх) - уменьшается, а количество тромбоцитов, имеющих на поверхности СБ42Ь+ - увеличивается.
Изменение под влиянием эритропоэтина рецепторного состава тромбоцитов оказало влияние на тромбоцитарно-клеточные взаимодействия в крови у больных ХПН, так, уменьшение количества нейтрофилов и моноцитов, взаимодействующих с тромбоцитами, опосредовано уменьшением экспрессии С041+ и СБ42Ь+; активация тромбоци-тарно-лимфоцитарных взаимодействий зависит от экспрессии С061+.
Изменение межклеточной кооперации в крови опосредовано угнетением нитроксидергических процессов у больных ХПН, находящихся на заместительной терапии эритропоэтином. Обнаружена статистически значимая отрицательная связь между скоростью агрегации тромбоцитов, количеством тромбоцитарно-эритроцитарных коагрегатов, а также количеством лимфоцитов, взаимодействующих с тромбоцитами и содержанием продуктов N0 в сыворотке (табл. 3). Выявлено, что
Таблица 3
Корреляция между показателями межклеточной кооперации и показателями интоксикации, содержания метаболитов оксида азота (II), экспрессии тромбоцитарных рецепторов у больных ХПН в условиях применения эритропоэтина
Показатели CD61+ CD41+ CD42b+ CD42b+, % NOx no2 N03 ВНиСММ Креати- нин Моче- вина
ТЦ-НФ кооперация, % клеток 0,16 0,49 0,69 -0,97 0,64 0,39 0,53 0,67 0,55 0,60
тц-мц кооперация, % клеток 0,89 0,70 0,11 -0,60 0,86 0,36 0,95 -0,01 -0,06 -0,24
ТЦ-ЛЦ кооперация, % клеток 0,93 -0,32 0,53 0,12 -0,43 -0,84 -0,64 0,48 -0,42 -0,73
ТЭК, 10ш/л 0,81 0,23 0,17 0,31 -0,74 -0,69 -0,54 -0,78 -0,52 -0,68
Амплитуда агрегации, % 0,16 -0,65 -0,99 -0,77 -0,56 -0,88 -0,33 -0,19 -0,01 -0,37
Время агрегации, мин 0,73 -0,03 -0,66 -0,09 0,18 0,92 0,42 -0,02 0,08 -0,33
Скорость агрегации, %/мин -0,34 -0,83 -0,82 -0,97 -0,88 -0,47 -0,75 -0,26 -0,09 -0,25
Примечание. В таблице представлены значения коэффициента корреляции Спирмена, жирным шрифтом отмечены статистически значимые (р < 0,05) связи.
Тромбоцитарно-нейтрофильные взаимодействия первоначально обеспечивается на тромбоцитах Р-селектином (CD 62), на лейкоцитах - PSGL-1 (P-selectin glycoprotein Ligand) и L-селектином (18). Более прочная связь клеток осуществляется р2-интегрином (CDllb/CD18, МАС-1) нейтрофилов и ICAM-2 тромбоцитов [16]. Кроме этого, имеет значение фибриногеновый «мост» между р2-интег-рином на нейтрофилах и GPIIb/IIIa на тромбоцитах [29]. Ряд авторов также отмечают рост тром-боцитарно-нейтрофильных и тромбоцитарно-мо-ноцитарных, но не тромбоцитарно-лимфоцитар-ных коагрегатов у больных ХПН [12, 26, 27, 30]. Полагают, что такой дуализм может быть обусловлен специфическими лиганд-рецепторными взаимодействиями тромбоцитов с нейтрофилами и моноцитами, но не лимфоцитами.
В то же время, количество тромбоцитарно-лимфоцитарных коагрегатов является чувствительным тестом, отражающим состояние гомеостаза при инфекционных и воспалительных заболеваниях, особенно сопровождающихся вторичными иммунодефицитами и ДВС-синдромом [7]. Снижение количества тромбоцитарно-лимфоцитарных коагрегатов может быть связано с динамическим изменением их содержания в крови: первоначальное увеличение в 2-3 раза сменяется резким снижением, возможно, в связи с уходом в ткани, так как в лимфе при этом обнаруживается большое число лимфоцитов, образующих розетки с тромбоцитами.
Применение ЭПО у больных ХПН приводит к частичному восстановлению количества тромбоцитов, показателей межклеточных взаимодействий в крови и экспрессии тромбоцитарных гликопро-
Осиное М.В., Гоигорьев Т.А., Масленникова Н.П.
активность тромбоцитарно-нейтрофильных и тром-боцитарно-моноцитарных взаимодействий падает по мере снижения содержания конечных стабильных метаболитов оксида азота (II).
Обнаружено, что эритропоэтин обладает выраженным дезинтоксикационным действием, снижает концентрацию ВНиСММ, креатинина и мочевины в плазме (см. табл. 2). Результаты корреляционного анализа у больных ХПН, продемонстрировали благоприятное влияние дезинтоксикаци-онного эффекта эритропоэтина на межклеточные кооперации в крови (см. табл. 3). Прежде всего, это проявилось положительными средней силы корреляциями уровня ВНиСММ, креатинина и мочевины с количеством нейтрофилов, активно взаимодействующих с тромбоцитами, а также отрицательными корреляциями данных показателей с количеством тромбоцитарно-лимфоцитарных и тромбоцитарно-эритроцитарных коагрегатов.
Таким образом, у больных с терминальной стадией ХПН наблюдаются изменения межклеточных взаимодействий в крови: активируются взаимодействия тромбоцитов с клетками фагоцитарного ряда (нейтрофилами и моноцитами) и угнетаются - с лимфоцитами, эритроцитами, а также тромбоцитарно-тромбоцитарные контакты. Применение эритропоэтина в течение двух месяцев в суммарной дозе около 40 ООО МЕ приводит к частичному восстановлению межклеточной кооперации в крови. Установлено, что механизмами цито-протекторного действия эритропоэтина выступают нормализация рецепторного состава мембраны тромбоцитов, включая 0361+ (Ор ПЬ/Ша); СБ41+; СБ42Ь+ (Ор 1Ь/1х), дезинтоксикационный эффект и восстановление нитроксидергических процессов.
Литература
1. Акалаев, Р.Н. Фосфолипидный состав эритроцитов у больных с хронической почечной недостаточностью / Р.Н. Акалаев, А.А. Абидов // Вопросы мед. химии. -1993. - Т. 39, №5. - С. 43-45.
2. Анализ гематологических эффектов эритропоэтина у больных хронической почечной недостаточностью, находящихся на диализе / М.В. Осиков, Л.В. Кривохижина, К.В. Ахматов, В.Ю. Ахматов // Вестник ЮУрГУ. Серия «Образование, здравоохранение, физическая культура». —
2009. -Вып. 19. -№20(153). - С. 79-82.
3. Гланц, С. Медико-биологическая статистика / С. Гланц. — М.: Практика, 1999. - 438 с.
4. Емченко, Н.Л. Универсальный метод определения нитратов в биосредах организма / Н.Л. Емченко, 0.0. Цыганенко, Т.В. Ковалевская// Клин. лаб. диагностика. - 1994. - № 6. - С. 19—20.
5. Захаров, Ю.М. Неэритропоэтические эффекты эритропоэтина / Ю.М. Захаров // Российский физиологический журнал им. И.М. Сеченова. -2007. - Т. 93, № 6. - С. 592-608.
6. Нефрология: руководство для врачей / под ред. И.Е. Тареевой. - М.: Медицина, 2000. -688 с.
7. Кузник, Б. И. Единая клеточно-гуморальная система защиты организма / Б.И. Кузник, Н.Н. Цыбиков, Ю.А. Витковский // Тромбоз, гемостаз и реология. - 2005. -№ 2.- С. 3-16.
8. Оболенский, С.В. Лабораторная диагностика интоксикаций в практике интенсивной терапии: учеб. пособие / С.В. Оболенский, М.Я. Малахова. - СПб.: Изд-во МАПО, 1993. -16 с.
9. Осиков, М.В. Патофизиологический анализ влияния эритропоэтина на психологический статус у больных хронической почечной недостаточностью, находящихся на гемодиализе / М.В. Осиков, К.В. Ахматов, Л.В. Кривохижина // Вестник ЮУрГУ. Серия «Образование, здравоохранение, физическая культура». — 2010. — Вып. 23. -N° 19 (195). - С. 92-96.
10. Осиков, М.В. Реактивные изменения кле-точно-гуморальной системы организма как типовой патологический процесс и его регуляция реактантами острой фазы: дис. ... д-ра мед. наук / М.В. Осиков. - Челябинск, 2008. — 427 с.
11. Реброва, О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA / О.Ю. Реброва. -М.: Медиа Сфера, 2006. —312 с.
12. Ashman, N. Increased platelet-monocyte aggregates and cardiovascular disease in end-stage renal failure patients / N. Ashman, M.G. Masey, S.L. Fan et al. // Nephrol. Dial. Transplant. —2003. — Vol. 18. -P. 2088-2096.
13. Boccardo, P. Platelet dysfunction in renal failure / P. Boccardo, G. Remuzzi, M. Galbusera // Semin. Thromb. Hemost. — 2004. - Vol. 30, N° 5. -P. 579-589.
14. Brzosko, S. Influence of hemodialysis on expression of glycoprotein lb platelets reactivity in patients with the end stage renal failure / S. Brzosko, T. Hryszko, J. Zak et al. // Przegl. Lek. - 2002. -Vol. 59, № 10. - P. 823-825.
15. Byts, N. Erythropoietin: a multimodal neuro-protective agent / N. Byts, A.L. Siren // Exp. Tratisl. Stroke. Med. — 2009. — Vol. 1. —4 p.
16. Ehlers, R. Targeting Platelet-Leukocyte Interactions: Identification of the Integrin Mac-1 Binding Site for the Platelet Counter Receptor Glycoprotein lb / R. Ehlers, V. Ustinov, Z Chen et al. // J. Exper. Med. -2003. - Vol. 198, N° 7. -P. 1077-1088.
17. Epoetin-alpha: preserving kidney Junction via attenuation of polymorphonuclear leukocyte priming / B. Kristal, R. Shurtz-Swirski, O. Tanhilevski et al. // Original Articles. - 2008. - Vol. 10. — P. 266-272.
18. Erythropoietin improves histological and functional outcomes after traumatic brain injury in mice in the absence of the neural erythropoietin receptor / Y. Xiong, A. Mahmood, C. Qu et al. // J. Neurotrauma. -
2010. - Vol. 27, № 1. - P. 205-215.
19. Gawaz, M.P. Impaired function of platelet membrane glycoprotein Hb-IIIa in end-stage renal disease / M.P. Gawaz, G. Dobos, M. Spath et al. // J. Am. Soc. Nephrol. - 1994. — Vol. 5. — P. 36-46.
20. Global brain atrophy after unilateral parietal lesion and its prevention by erythropoietin / A.L. Siren, K. Radyushkin, S. Boretius et al. // Brain. - 2006. — Vol. 129, № 2. - P. 480-489.
21. Gutensohn, K. Binding of activated platelets to WBCs in vivo after transfusion / K. Gutensohn, K. Geidel, M. Brockniann et al. // Transfusion. — 2002. — Vol. 42, № 10. - P. 1373-1380.
22. Horl, W.H. Thrombocytopathy and blood complications in uremia / W.H. Horl // Wien. Klin. Wochenschr. -2006. - Vol. 118, №5-6. -P. 134-150.
23. Impaired expression of glycoproteins on resting and stimulated platelets in uremic patients / V. Moal, P. Brunet, L. Dou et al. // Nephrol. Dial. Transplant. -2003. - Vol. 18.-P. 1834-1841.
24. Noris, M. Uremic bleeding: closing the circle after 30 years of controversies? / M. Noris, G. Remu-zzi//Blood. -1999. - Vol. 94, № 8. - P. 2569-2574.
25. Platelet activation and platelet-erythrocyte aggregates in end-stage renal disease patients on hemodialysis / V. Sirolli, L. Strizzi, S. Di Stante et al. // Thromb. Haemost. — 2001. — Vol. 86, № 3. - P. 834—839.
26. Platelet GPIlb/IIIa is activated and platelet-leukocyte coaggregates formed in vivo during hemodialysis / K. Kawabata, S. Nakai, M. Miwa et al. // Nephron. - 2002. - Vol. 90, № 4. - P. 391-400.
27. Platelet-leukocyte activation during hemodialysis detected with a monoclonal antibody to leukocyte integrin CDllb /M.R. Hernandez, A.M. Galan, M. Lozano et al. // Nephron. — 1998. - Vol. 80, № 2. -P. 197-203.
28. Reduction of platelet glycoprotein lb in uremia / E.M. Sloand, J.A. Sloand, K. Prodouz et al. // Br. J. Haematol.*— 1991. - Vol. 77, Ns 3. -P. 375-381.
29. The platelet glycoprotein llb/llla complex is involved in the adhesion of activated platelets to leukocytes / P. Spangenberg, II. Redlich, I. Bergmann et al. // Thromb. Haemost. — 1993. — Vol. 70, № 3. — P. 514-521.
30. Vickers, J. Measurement of platelet activation and adhesion to leucocytes during haemodialysis / J. Vickers //Hematology. — 1998. — Vol. 9, № 3-4. -P. 261-264.
Поступила в редакцию 12 мая 2010 г.
