CC BY
97
УДК 617.735-073
Тихонович М.В.1, Иойлева Е.Э.2
1Факультет фундаментальной медицины Московского государственного университета
им. М.В. ломоносова 2МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова E-mail: info@fbm.msu.ru
РОЛЬ ЭНДОТЕЛИАЛЬНОГО ФАКТОРА РОСТА СОСУДОВ В ФИЗИОЛОГИИ СЕТЧАТКИ
В данной обзорной статье мы разбираем роль эндотелиального фактора роста сосудов (VEGF) в физиологии сетчатки в норме и при патологии на разных стадиях развития организма. Мы говорим о различных изоформах ростового фактора и о важности их присутствия для правильного развития сосудистого русла сетчатки. Обсуждаем присутствие VEGF и рецепторов к нему в норме в различных клетках сетчатки. Большое внимание в обзоре отведено роли VEGF в ангиогенезе: его действию на эндотелиальные клетки, развитие сосудов глаза в норме и формированию ре-тинальных и субретинальных новообразованных сосудов при ишемии. Подробно рассмотрены факторы, запускающие процесс неоангиогенеза. Существуют взаимодействия между нервной и сосудистой системами, которые в том числе осуществляются через эндотелиальный фактор роста сосудов. Здесь рассмотрены эти влияния. Также упомянуто о нейропротекторных свойствах VEGF, изучению которых посвящено большое количество исследовательских работ последних лет в центральной нервной системе и глаза в частности, и о его действии на ганглионарные клетки, глиальные клетки сетчатки и фоторецепторы.
Ключевые слова: эндотелиальный фактор роста сосудов, сетчатка, ангиогенез, нейропро-текция.
Введение
Актуальность проблемы изучения действия эндотелиального фактора роста сосудов (VEGF) на ткани глаза заключается в широком применении блокаторов данного белка в офтальмологической практике. Их применяют при лечении осложнений сахарного диабета, в лечении различных отеков сетчатки и опухолей глаза. Долгое время считалось, что VEGF появляется в тканях глаза только при их гипоксии и ведет к образованию новых несостоятельных сосудов в поврежденной области, способствует росту новообразований, мембран и развитию ретинопатии у недоношенных детей. Не так давно показали, что для нормального развития сосудистой и нервной системы глаза необходимо постоянное присутствие в различных концентрациях разных изоформ VEGF. Этот ростовой фактор важен не только на ранних стадиях развития глаза, но и во взрослом состоянии организма он поддерживает жизнеспособность сетчатки. При этом он обладает прямым антиапоптоти-ческим действием на фоторецепторы, клетки Мюллера и ганглионарные клетки сетчатки.
Нужно хорошо понимать, что подавляя действие эндотелиального фактора роста сосудов, мы уменьшаем не только его ангиогенные свойства, но и нейропротекторные.
Изоформы VEGF и их функции
в сетчатке
Эндотелиальный фактор роста сосудов (VEGF) в организме человека представлен несколькими изомерами, которые разделили на 5 подгрупп: VEGF-A, VEGF-B, VEGF-С, VEGF-D, и плацентарный фактор роста (PlGF). Последний вместе с VEGF-A являются основными регуляторами как физиологических, так и патологических процессов в кровеносных сосудах. Человеческий VEGF-A состоит из восьми экзонов, соединенных семью интронами. Вариативный сплайсинг 8 экзонов гена VEGF-A дает семь различных изоформ белка VEGF121, VEGF145, VEGF165, который подразделяется на два подтипа VEGF165а и VEGF165b [1], VEGF183, VEGF189, VEGF110 (синтезируется под действием плазмина) и VEGF209 [2]. У мышей все изоформы VEGF короче на одну аминокислоту.
VEGF165 является самой распространенной изоформой, представленной в глазу человека [3], (молекулярной массой 30 кДа) и наиболее важной для ангиогенеза. VEGF165а повышает проницаемость сосудов и стимулирует ангиогенез после эпизодов ишемии, он также обладает антитоксическим действием на нейроны. VEGF165b об -ладает противоположным действием на сосуды [4]. Наличие других изоформ также необходимо для правильного развития ветвления сосудов. На
мышах было показано, что градиент различных изоформ VEGF, экспрессируемые астроцитами сетчатки, управляет уменьшением или увеличением ветвления сосудов. На рисунке 1 (цветная вкладка) показаны фотографии глазного дна новорожденных мышей дикого типа (слева), с экспрессией только VEGF120 (в середине) и VEGF188 (справа). Правильное удлинение и разветвление сосудов определяется пространственным градиентом изоформ VEGF, VEGF188 (красный) связывается с межклеточным веществом в непосредственной близости с клетками-продуцентами VEGF, растворимая форма VEGF120 (зеленый) распространяется наиболее далеко от клеток, экспрессирующих VEGF, и VEGF164 (черный) занимает промежуточное пространственное расположение [5].
У мышей дикого типа наличие градиента различных изоформ VEGF контролирует ветвление крупных сосудов на более мелкие ветви. У VEGF120 мышей нормальный градиент изоформ VEGF заменяется однородным полем VEGF120 -экспрессирующих клеток, в результате чего происходит удлинение сосудов за счет уменьшения их разветвления. В отличие от них, у VEGF188 мышей градиент VEGF заменяется локальными пятнами экспрессии VEGF188, вызывая повышенное ветвление мелких сосудов. Исходя из частоты встречаемости различных изоформ фермента и их участия в патологических процессах, были разработаны блокаторы специфичные только для VEGF165, пан-VEGFA блокаторы, и пан-VEGF блокаторы [6].
Транскрипцию VEGF стимулируют: ^-ф, инсулин-подобный фактор роста, PDGF, ТОТ-а, TGF-а, TGF-1P [8].
Распространение VEGF в глазу
В норме VEGF присутствует в конъюнктиве, сетчатке и хориоидеи [9]. В сетчатке человека и крысы VEGF обнаружен в одних и тех же слоях: в стенке сосудов, в слое ганглионарных клеток и по ходу их отростков, в клетках внутреннего ядерного слоя (особенно в дисталь-ной его части), в синаптических терминалях фоторецепторов в наружном плексиформном слое и в дистальной части по отношению к наружной пограничной мембране фоторецепторов, в базальной части пигментного эпителия сетчатки [10].
Sаint-Geniez М. и соавт. показали, что Мюл-леровы клетки, чьи ядра располагаются во внутреннем ядерном слое, активно синтезируют VEGF и рецепторы к нему [11].
Gerhardmger С. и соавт. считают, что сами фоторецепторы не экспрессируют VEGF в норме, в них не обнаруживают мРНК фермента, но эти клетки способны связываться с VEGF, синтезированным клетками наружного ядерного слоя, и аккумулировать его [3]. Во внутренних сегментах фоторецепторов обнаружили мРНК рецепторов VEGF первого и второго типов [11].
Роль VEGF в неоангиогенезе сетчатки
Заживление ран на коже и в других тканях сопровождается неоваскуляризацией, новообразованные сосуды берут начало от уже существующих сосудов, растут к месту ишемии, где замещают поврежденные сосуды. В сетчатке новообразованные сосуды несостоятельны и вместо того, чтоб улучшить клиническую картину ишемии, они её только ухудшают. Новообразованные сосуды могут вначале разрастаться в слоях сетчатки, но потом они начинают расти в стекловидное тело. Из-за несостоятельности стенки новообразованных сосудов и повышенной их проницаемости, из них начинает просачиваться плазма в окружающие ткани, в том числе в стекловидное тело. Плазма вызывает дегенерацию последнего, фиброзирование, образование тракций и отслойку сетчатки. Также прорастание новообразованных сосудов в стекловидное тело часто сопровождается ге-мофтальмом [12]. Мышиная модель кислород-индуцированной ишемической ретинопатии признана одной из самых используемых для изучения процессов неоваскуляризации сетчатки [13]. Именно на этой модели показали, что использование антагонистов VEGF подавляет образование новых сосудов в сетчатке. Так впервые продемонстрировали, что VEGF стимулирует рост новых сосудов в сетчатке [14]. Дальнейшие работы показали, что VEGF регулирует развитие сосудов сетчатки в норме. Вдыхание воздуха с большим содержанием кислорода во время развития сосудов приводит к уменьшению концентрации VEGF и останавливает васкуляризацию, что приводит к запусте-ванию недавно образованных сосудов и образованию неперфузируемых участков сетчатки
[15]. При возвращении в условия с нормальным содержание кислорода ишемизированные области сетчатки начинают экспрессировать повышенное количество VEGF, что приводит к развитию новообразованных сосудов [16]. Этот процесс составляет основу патогенеза ретинопатии недоношенных.
VEGF стимулирует дифференцировку эндо-телиальных клеток на tip и stalk клетки, их миграцию и пролиферацию. Под действием фактора роста у tip клеток образуется псевдоподии и они приобретают способность двигаться в сторону с наибольшей концентрацией VEGF, а stalk клетки начинают пролиферировать [17]. Тем самым создаются все условия для ангиогенеза.
VEGF стимулирует развитие субретиналь-ной неоваскуляризации как из сосудов сетчатки, приводя к их прорастанию из внутренних слоев в субретинальное пространство [18], так и из сосудов хориоидеи, которые прорастают мембрану Бруха и пигментированный эпителий сетчатки [19]. Это в свою очередь ведет к развитию экссудативной отслойки сетчатки и образованию субретинальных мембран.
Четкой связи между гипоксией и развитием субретинального неоангиогенеза не обнаружено, в отличие от неоангиогенеза сетчатки. Однако было обнаружено, что повреждение мембраны Бруха, например, лазером [20], и внутриглазное воспаление, приводящее к поражению клеток ПЭС, вызывают субретинальную неоваскуляризацию [21].
Считается, что хориоидальные сосуды развиваются по действием пигментного эпителия сетчатки (ПЭС) и их непрерывное ремоделиро-вание в течение всей жизни тоже происходит под действием клеток пигментного эпителия сетчатки [22]. При этом фенестрация сосудов хориоидеи наиболее выражена на стороне, обращенной к ПЭС. VEGF отводится ведущая роль в этих эффектах действия ПЭС на сосуды хориоидеи. Эта гипотеза базируется на нескольких наблюдениях. Во-первых, клетки ПЭС стимулируют формирование трубки из хорио-идальных эндотелиальных клеток в культуре. Этот процесс останавливается при добавлении в культуру клеток ингибиторов VEGF [23]. Во-вторых, ПЭС активно экспрессирует VEGF в момент формирования хориоидальных сосудов (показанно на людях), и экспрессия сохраня-
ется в течение всей жизни (показано на людях и мышах) [24], [25]. В-третьих, исследования культуры клеток ПЭС показывают наличие VEGF именно в базальной части клеток [10]. Это поляризованная локализация соответствует секреции VEGF на базальной стороне ПЭС. В-четвертых, VEGF индуцирует фенестрацию эндотелиальных клеток в других тканях организма [26].
Mameros A.G. и соавт. в своих экспериментах на мышах показали необходимость VEFG в развитии сосудов хориоидеи как таковых. Они использовали трансгенных мышей, у которых отсутствует синтез VEGF в клетках пигментного эпителия сетчатки. У этих мышей не происходит развития сосудов хориоидеи. При этом отсутствие какого-либо другого ангиогенного фактора, например, фактора роста фибробла-стов, не приводит к таким критическим последствиям для развития хориоидеи [27].
Влияние VEGF на нервные клетки
в сетчатке
Кровеносные сосуды также взаимодействуют с нервными клетками в течение васкуляриза-ции центральной нервной системы. Например, в развивающейся сетчатке, астроциты растут цен-тробежно от центра сетчатки к её внешним слоям и тем самым обеспечивают трек для прорастания сосудов. Действительно, на начальном этапе сетчатка аваскулярна и гипоксична, что повышает экспрессию VEGF в астроцитах. Увеличение концентрации VEGF сопровождается ростом кровеносных сосудов [28] и снабжением тканей кислородом, что в свою очередь, подавляет экспрессию VEGF в астроцитах и стимулирует их дифференцировку [29]. Вдобавок к регуляции процессов васкуляризации VEGF отвечает за миграцию нервных клеток в ЦНС [30].
Нейроны и глиальные клетки возникают из нейрональных стволовых клеток. Эндотелиаль-ные клетки влияют на этот процесс. Они через астроциты стимулируют размножение нейро-нальных стволовых клеток путем экспрессии различных факторов роста [31].
VEGF участвует в этом взаимодействии между эндотелиальными клетками и клетками-предшественниками нейронов. VEGF способствует пролиферации нейронов, стимулируя эндотелиальные клетки. Последние в свою
очередь выделяют мозговой нейротрофиче-ский фактор (BDNF), который поддерживает выживание и интеграцию новообразованных нейронов [32].
VEGF обладает нейропротективным эффектом на ганглионарные клетки сетчатки, помимо этого он уменьшает дегенерацию ганглионарных клеток, вызванную гипоксией [33]. В модели ишемии-реперфузии, VEGF индуцирует дозоза-висимое снижение апоптоза нейронов в сетчатке. VEGF повышает приток крови к сетчатке, что частично способствует нейропротекции. Ex vivo Nishijima K. и соавт. на культуре клеток сетчатки показали, что VEGF обладает прямым нейропро-текторным действием на ганглионарные клетки [34]. Ишемическое прекондиционирование за один день до ишемии-реперфузии также увеличивает уровень VEGF в ганглионарных клетках. Защитный эффект прекондиционирования теряется при ингибировании VEGF [34]. В целом эти данные указывают на то, что незначительное повышение экспрессии VEGF оказывает нейро-протекторное действие при ишемии, не влияя на функцию сосудов. Более высокие уровни VEGF, однако, скорее способствую развитию диабети-ческоподобных нарушений сетчатки [35].
Ингибирование VEGF у взрослых мышей на месяц не привело к изменениям в сосудах сетчатки и хориоидеи, никак не повлияло на их проницаемость и строение [11]. Однако ко второй неделе эксперимента это вызвало резкое увеличение количества клеток, вступивших в апоптоз, во внутреннем ядерном слое (в основном это были Мюллеровы и амокриновые клетки) и наружном ядерном слое (фоторецепторы). Через месяц наблюдали выраженное истончение данных слоев. Ex vivo Saint-Geniez M. и соавт. показали прямое антиапоптотическое действие VEGF на культурах клеток Мюллера и фоторецепторов [11].
Foxton R.H. и соавт. в своих исследованиях показали, что ганглионарные клетки сетчатки на своей поверхности содержат оба типа рецепторов к VEGF: VEGFR-1 и VEGFR-2. При этом количество второго типа рецепторов на много выше, чем первого [36]. Эти же авторы в своём исследовании доказали, что VEGF-A, действуя на свой рецептор второго типа, увеличивает
жизнеспособность ганглионарных клеток как при искусственно вызванной их смерти, так и в условиях глаукомы.
Было показано, что VEGF165a обладает ней-ропротекторным действием на нейроны сетчатки, но его проангиогенные свойства, повышение проницаемости сосудов и дилатационный эффект на них снижает вероятность использования этой изоформы VEGF в терапевтических целях. VEGF165b, напротив, очень перспективен в терапии дегенеративных заболеваний сетчатки. Beazley-Long N. и соавт. в своих работах показали, что VEGF165b обладает выраженными нейро-протекторными свойствами на периферические и центральные нейроны как в опытах in vivo, так и in vitro [37]. Он увеличивает выживаемость ганглионарных клеток сетчатки у крыс в модели ишемии-реперфузии. При этом данная изоформа не обладает проангиогенным действием на сосуды, которое присуще VEGF165a.
Из данных литературы можно сделать вывод, что блокирование всех подгрупп VEGF или изоформ VEGF-A может способствовать не только запустеванию новообразованных несостоятельных сосудов, но и вызывать повреждения нейронов сетчатки. В своём исследовании Kurihara Т. и соавт. показали, что отсутствие белков, кодируемых геном Vegfа, у мышей сопровождается полной потерей зрения [38]. Использование Бе-вацизумаба, который является VEGF-A блокато-ром, нейтрализует нейропротекторное действие VEGF на ганглионарные клетки сетчатки [39].
Заключение
Таким образом, эндотелиальный фактор роста сосудов участвует в сложном взаимодействии между различными клетками и тканями глаза. Он важен для нормального развития сосудистой системы сетчатки и хориоидеи в эмбриональном периоде и у новорожденных. Также VEGF участвует в развитии зрительного нерва и нервных клеток сетчатки. Во взрослом организме ростовой фактор проявляет свои нейропротекторные свойства как в норме, так и при ишемических состояниях. В условиях ишемии VEGF способствует росту новообразованных сосудов, что должно увеличивать жизнеспособность поврежденных тканей.
10.09.2015
Работа выполнена при поддержке гранта РФФИ № 14-04-01318 A
Список литературы:
1. Harper S.J., Bates D.O. VEGF-A splicing: the key to anti-angiogenic therapeutics? // Nat. Rev. Cancer. 2008. Vol. 8, № 11. P. 880-887.
2. Ferrara N., Gerber H.-P., LeCouter J. The biology of VEGF and its receptors. // Nat. Med. 2003. Vol. 9, № 6. P. 669-676.
3. Gerhardinger C. et al. Expression of vascular endothelial growth factor in the human retina and in nonproliferative diabetic retinopathy. // Am. J. Pathol. 1998. Vol. 152, № 6. P. 1453-1462.
4. Qiu Y. et al. Overexpression of VEGF165b in podocytes reduces glomerular permeability. // J. Am. Soc. Nephrol. 2010. Vol. 21, № 9. P. 1498-1509.
5. Stalmans I. et al. Arteriolar and venular patterning in retinas of mice selectively expressing VEGF isoforms // J. Clin. Invest. 2002. Vol. 109, № 3. P. 327-336.
6. Stewart M.W. The expanding role of vascular endothelial growth factor inhibitors in ophthalmology // Mayo Clin. Proc. Elsevier Inc., 2012. Vol. 87, № 1. P. 77-88.
7. Carmeliet P., Tessier-Lavigne M. Common mechanisms of nerve and blood vessel wiring. // Nature. 2005. Vol. 436, № 7048. P. 193-200.
8. Pages G., Pouyssegur J. Transcriptional regulation of the Vascular Endothelial Growth Factor gene - A concert of activating factors // Cardiovasc. Res. 2005. Vol. 65, № 3. P. 564-573.
9. Kim I. et al. Constitutive Expression of VEGF, VEGFR-1, and VEGFR-2 in Normal Eyes // Invest Ophthalmol Vis Sci. 1999. Vol. 40. P. 2115-2121.
10. Blaauwgeers H.G. et al. Polarized vascular endothelial growth factor secretion by human retinal pigment epithelium and localization of vascular endothelial growth factor receptors on the inner choriocapillaris. Evidence for a trophic paracrine relation. // Am. J. Pathol. 1999. Vol. 155, № 2. P. 421-428.
11. Saint-Geniez M. et al. Endogenous VEGF is required for visual function: Evidence for a survival role on Muller cells and photoreceptors // PLoS One. 2008. Vol. 3, № 11. P. 1-13.
12. Campochiaro P. a. Ocular neovascularization // Angiogenes. An Integr. Approach From Sci. to Med. 2008. Vol. 91, № 3. P. 517531.
13. Smith L.E.H. et al. Oxygen-induced retinopathy in the mouse // Investig. Ophthalmol. Vis. Sci. 1994. Vol. 35, № 1. P. 101-111.
14. Aiello L.P. et al. Suppression of retinal neovascularization in vivo by inhibition of vascular endothelial growth factor (VEGF) using soluble VEGF-receptor chimeric proteins. // Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 1995. Vol. 92, № 23. P. 10457-10461.
15. Alon T. et al. Vascular endothelial growth factor acts as a survival factor for newly formed retinal vessels and has implications for retinopathy of prematurity. // Nat. Med. 1995. Vol. 1, № 10. P. 1024-1028.
16. Pierce E.A. et al. Vascular endothelial growth factor/vascular permeability factor expression in a mouse model of retinal neovascularization. // Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 1995. Vol. 92, № 3. P. 905-909.
17. Blanco R., Gerhardt H. VEGF and Notch in tip and stalk cell selection // Cold Spring Harb. Perspect. Med. 2013. Vol. 3, № 1. P. 1-19.
18. Tobe T. et al. Evolution of neovascularization in mice with overexpression of vascular endothelial growth factor in photoreceptors // Investig. Ophthalmol. Vis. Sci. 1998. Vol. 39, № 1. P. 180-188.
19. Kwak N. et al. VEGF is major stimulator in model of choroidal neovascularization // Investig. Ophthalmol. Vis. Sci. 2000. Vol. 41, № 10. P. 3158-3164.
20. Lassota N. et al. Natural history of choroidal neovascularization after surgical induction in an animal model // Acta Ophthalmol. 2008. Vol. 86, № 5. P. 495-503.
21. Oshima Y. et al. Increased expression of VEGF in retinal pigmented epithelial cells is not sufficient to cause choroidal neovascularization // J. Cell. Physiol. 2004. Vol. 201, № 3. P. 393-400.
22. Leonard D.S. et al. Clinicopathologic correlation of localized retinal pigment epithelium debridement // Investig. Ophthalmol. Vis. Sci. 1997. Vol. 38, № 6. P. 1094-1109.
23. Sakamoto T. et al. Vessel formation by choroidal endothelial cells in vitro is modulated by retinal pigment epithelial cells // Arch Ophthalmol. 1995. Vol. 113, № 4. P. 512-520.
24. Gogat K. et al. VEGF and KDR gene expression during human embryonic and fetal eye development. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2004. Vol. 45, № 1. P. 7-14.
25. Yi X. et al. Time-course expression of vascular endothelial growth factor as related to the development of the retinochoroidal vasculature in rats. // Exp. Brain Res. 1998. Vol. 118, № 2. P. 155-160.
26. Roberts W.G., Palade G.E. Increased microvascular permeability and endothelial fenestration induced by vascular endothelial growth factor. // J. Cell Sci. 1995. Vol. 108. P. 2369-2379.
27. Marneros A.G. et al. Vascular endothelial growth factor expression in the retinal pigment epithelium is essential for choriocapillaris development and visual function // Am J Pathol. 2005. Vol. 167, № 5. P. 1451-1459.
28. Provis J.M. et al. Development of the human retinal vasculature: cellular relations and VEGF expression. // Exp. Eye Res. 1997. Vol. 65, № 4. P. 555-568.
29. West H., Richardson W.D., Fruttiger M. Stabilization of the retinal vascular network by reciprocal feedback between blood vessels and astrocytes. // Development. 2005. Vol. 132, № 8. P. 1855-1862.
30. Schwarz Q. et al. Vascular endothelial growth factor controls neuronal migration and cooperates with Sema3A to pattern distinct compartments of the facial nerve // Genes Dev. 2004. Vol. 18. P. 2822-2834.
31. Mi H., Haeberle H., Barres B. a. Induction of astrocyte differentiation by endothelial cells. // J. Neurosci. 2001. Vol. 21, № 5. P. 1538-1547.
32. Louissaint A. et al. Coordinated interaction of neurogenesis and angiogenesis in the adult songbird brain // Neuron. 2002. Vol. 34, № 6. P. 945-960.
33. Böcker-Meffert S. et al. Erythropoietin and VEGF promote neural outgrowth from retinal explants in postnatal rats // Investig. Ophthalmol. Vis. Sci. 2002. Vol. 43, № 6. P. 2021-2026.
34. Nishijima K. et al. Vascular endothelial growth factor-A is a survival factor for retinal neurons and a critical neuroprotectant during the adaptive response to ischemic injury. // Am. J. Pathol. 2007. Vol. 171, № 1. P. 53-67.
35. Ruiz de Almodovar C. et al. Role and therapeutic potential of VEGF in the nervous system. // Physiol. Rev. 2009. Vol. 89, № 2. P. 607-648.
36. Foxton R.H. et al. VEGF-A is necessary and sufficient for retinal neuroprotection in models of experimental glaucoma // Am. J. Pathol. American Society for Investigative Pathology, 2013. Vol. 182, № 4. P. 1379-1390.
37. Beazley-Long N. et al. VEGF-A165b is an endogenous neuroprotective splice isoform of vascular endothelial growth factor a in vivo and in vitro // Am. J. Pathol. American Society for Investigative Pathology, 2013. Vol. 183, № 3. P. 918-929.
38. Kurihara T. et al. Targeted deletion of Vegfa in adult mice induces vision loss // J. Clin. Invest. 2012. Vol. 122, № 11. P. 42134217.
39. Brar V.S. et al. Bevacizumab neutralizes the protective effect of vascular endothelial growth factor on retinal ganglion cells. // Mol. Vis. 2010. Vol. 16, № May. P. 1848-1853.
Сведения об авторах:
Тихонович Марина Валерьевна, аспирант кафедры физиологии и общей патологии факультета фундаментальной медицины Московского государственного университета им. М. В. Ломоносова
e-mail: marina.tikhonovich@gmail.com 119192, г Москва, Ломоносовский пр-т., 31, корп. 5, е-mail: info@fbm.msu.ru
Иойлева Елена Эдуардовна, ученый секретарь МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова, доктор медицинских наук, e-mail: elioileva@yahoo.com 127486, г. Москва, Бескудниковский бульвар, 59а, е-mail: info@mntk.ru
