CC BY
92
и во 2-й группах гистоархитектоника коры головного мозга сохранена, слабо выражен перецеллюлярный, периваскулярный отёк. Однако ядра нейронов гипер-хромные, без просветлений, хроматин ядер гомогенный (рис. 4).
Обсуждение
После выполнения довольно сложных реконструктивно-пластических операций по деривации мочи с использованием различных отделов кишечника возникает опасность усугубления сопутствующих соматических заболеваний из-за нарушения гомеостаза в организме в целом. Причиной этому, вероятно, являются вынужденные хирургические изменения условий функционирования механизмов мочевыделения. Хотя некоторые авторы считают, что контакт мочи потенцирует адаптивную реакцию кишечного эпителия, а всасывающая способность как толстой, так и тонкой кишки не приводит к грубым нарушениям гомеостаза [8, 10]. Однако агрессивная среда в виде мочи, даже несмотря на использование пероральной коррекции слабощелочным раствором соды, влияет на характер почечной фильтрации. Это доказано появлением белковых цилиндров в просвете канальцев. При воздействии физиологического раствора на стенку толстой кишки крыс такой картины не наблюдалось. В литературе описан опыт применения некоторых препаратов ^-ацетилцис-теина, аспирина и ранитидина) для уменьшения количества продуцирования слизи и вязкости мочи [10]. Однако для повышения выживаемости пациентов после кишечной деривации мочи необходимо продолжать поиск более эффективных путей, в том числе разработку новых препаратов, выступающих в роли протекторов не только для кишечной стенки, но и для других жизненно важных органов.
Таким образом, после длительного воздействия мочи на толстую кишку в эксперименте в жизненно важных органах возникают морфоадаптационные изменения различной степени выраженности. Перо-ральная коррекция слабощелочным раствором гидрокарбоната натрия позволяет уменьшить реакцию данных органов. Для повышения выживаемости пациентов после кишечной деривации мочи необходимо продолжать поиск новых и более эффективных путей компенсации.
ЛИТЕРАТУРА
1. Глыбочко П. В., Митряев Ю. И., ПонукалинА. Н., Галкина Н. Г. Уретеросигмостомия с формированием кишечного резервуара по Майнц-Пауч 2 // Высокие технологии в медицине. Медицинский альманах: Материалы научно-практич. конф. - Н. Новгород, 2008. - С. 126.
2. Велиев Е. И., Лоран О. Б. Проблема отведения мочи после радикальной цистэктомии и современные подходы к её решению // Практическая онкология. - Т. 4. - № 4. - 2003. -С. 231-234.
3. Комяков Б. К., Новиков А. И., Гулиев Б. Г. и др. Восстановление мочевыводящих путей различными отделами желудочнокишечного тракта // Урология. - 2005. - № 5. - С. 12-17.
4. Немытин Ю. В., Ситников Н. В., Дронов В. И. и др. Морфофункциональные особенности кишечного мочевого резервуара // Военно-медицинский журнал. - 2004. - № 11. -
С. 20-26.
5. Сидоров В. А., Шаплыгин Л. В., Ситников Н. В. и др. Функция почек после цистэктомии и кишечной пластики при раке мочевого пузыря // Урология. - 2005. - № 2. - С. 32-35.
6. Шаплыгин Л. В., Ситников Н. В., ФурашовД. В., Дронов В. И. и др. Кишечная пластика при раке мочевого пузыря // Онкоурология. - 2006. - № 4. - С. 25-29.
7. Gerharz E. W., Roosen A, Mansson W. Complications and Quality of Life Following Urinary Diversion After Cystectomy // EAU Update Series. - 2005. - № 3. - P. 156-168.
8. Hautmann R. E. Urinary diversion: ileal conduit to neobladder // J. Urol. - 2003. - № 169. - P. 834-842.
9. Mills R. D., Studer U. D. Metabolic consequences of continent urinary diversion // J. Urol. - 1999. - № 161. - Р. 1057-1066.
10. Nagele U., Sievert Karl-Dietrich, Merseburger A. S., Anastasiadis A. G., Stenzl A. Urinary diversion following cystectomy // EAU. Update Series. - 2005. - № 3. - P. 129-137.
11. N'Dow J., Pearson J., Neal D. Mucus production after transposition of intestinal segments into the urinary tract // World J. Urol. - 2004. - № 22. - Р. 178-185.
12. Racioppi M., D'Addessi A., Fanasca A. et al. Acid-base and electrolyte balance in urinary intestinal orthotopic reservoir: ileocaecal neobladder compared with ileal neobladder // Urology. - 1999. -№ 54. - Р. 629-635.
13. Schrier B. Ph., Laguna M. R., Pal F. et. all. Comparison of orthotopic sigmoid and heal neobladders continence and urodynamic parameters // European Urology. - 2005. - № 47. - Р. 679-685.
Поступила 28.05.2009
В. Ю. ЦЕПЕЛЕВ12, М. В. ПОКРОВСКИЙ12, Т. Г. ПОКРОВСКАЯ12, М. В. КОРОКИН12, Е. С. ЧЕРНОМОРЦЕВА2
РОЛЬ АНТИАГРЕГАНТНЫХ ПРЕПАРАТОВ В КОРРЕКЦИИ ЭНДОТЕЛИАЛЬНОМ ДИСФУНКЦИИ
кафедра фармакологии,
2НИИ ЭМ Курского государственного медицинского университета,
Россия, 305041, г. Курск, ул. К. Маркса, 3. E-mail: vtsepelev@rambler.ru
При моделировании дефицита оксида азота введением неселективного ингибитора NO-синтазы L-NAME у лабораторных животных изучались эндотелиопротективные эффекты ацетилсалициловой кислоты и клопидогреля. Использовался расчетный показатель функциональных сосудистых проб - коэффициент эндотелиальной дисфункции. Получены данные, подтверждающие эндотелиопротективные свойства изучаемых препаратов.
Ключевые слова: эндотелиальная дисфункция, ацетилсалициловая кислота, клопидогрел.
Кубанский научный медицинский вестник № 4 (109) 2009 УДК 615.22:547.587.11
Кубанский научный медицинский вестник № 4 (109) 2009
V. Y. TSEPELEV12, M. V. POKROVSKIY12,
T. G. POKROVSKAYA12, M. V. KOROKIN12, E. S. CHERNOMORCEVA2
ANTIPLATELET DRUGS IN CORRECTION OF ENDOTHELIAL DYSFUNCTION
1Pharmacology chair, 2scientific research institute Ecological medicine of Kursk state medical university,
Russia, 305041, Kursk. E-mail: vtsepelev@rambler.ru
At modeling of deficiency of nitric oxide by introduction of non selective inhibitor No-sintazy L-NAME, at laboratory animals were studied endothelioprotective effects of acetylsalicylic acid and clopidogrel. The settlement index of functional vascular assays -quotient of endothelial dysfunction was used. The data confirming endothelioprotective properties of studied drugs are obtained.
Keywords: endothelial dysfunction, acetylsalicylic acid, clopidogrel.
Введение
В настоящее время эндотелиальная дисфункция рассматривается как предиктор целого ряда патологий, в том числе артериальной гипертензии, ишемической болезни сердца, хронической сердечной недостаточности, а также является патогенетическим компонентом органных повреждений при сахарном диабете, гипоэс-трогенных и других состояниях [1]. Эндотелий сосудов представляет собой самый крупный эндокринный орган в организме человека, масса которого колеблется в пределах 1600-1900 г, что больше массы печени, а общая протяженность монослоя эндотелиоцитов достигает 7 км. Клетки эндотелия выделяют большое количество биологически активных веществ, которые можно условно разделить на антикоагулянтные, являющиеся также вазодилататорами и преимущественно синтезирующиеся в условиях нормального функционирования эндотелия, и прокоагулянтные. Повреждение эндотелия и обнажение субэндотелиальных слоев запускают реакции агрегации и свертывания, препятствующие кровопотере, вызывают спазм сосуда, прекращается образование антиагрегантов. При кратковременном действии повреждающих агентов эндотелий продолжает выполнять защитную функцию, но при продолжительном их воздействии начинает играть ключевую роль в патогенезе сердечно-сосудистых заболеваний.
В связи с этим целью нашего исследования явилось изучение эндотелиопротективного действия анти-агрегантных препаратов - ацетилсалициловой кислоты (АСК) и клопидогреля в условиях экспериментальной эндотелиальной дисфункции.
Методика исследования
Опыты проводились на белых крысах-самцах линии массой 250-300 г. ^нитро-Ь-аргининметило-вый эфир (Ь^АМЕ) вводился внутрибрюшинно в дозе 25 мг/кг/сут. (п=10) в течение 7 дней. На 8-й день от начала эксперимента под наркозом (этаминал-натрия 50 мг/кг) вводили катетер в левую сонную артерию для регистрации показателей, болюсное введение фармакологических агентов осуществляли в правую бедренную вену. Показатели кардиогемодинамики - систолическое артериальное давление (САД), диастолическое артериальное давление (ДАД), частоту сердечных сокращений (ЧСС) - измеряли непрерывно посредством аппаратно-программного комплекса «Вюрас». Вазоди-лататорные сосудистые пробы: внутривенное введение ацетилхолина (АХ; 40 мкг/кг) и нитропруссида натрия (НП; 30 мкг/кг).
Для объективизации оценки коррекции эндотелиальной дисфункции, возникающей при моделировании де-
фицита оксида азота (NO) введением L-NAME, нами использован специальный коэффициент эндотелиальной дисфункции (КЭД), предложенный в нашей лаборатории [3], характеризующий степень эндотелиальной дисфункции и отражающий соотношение площади над реакцией восстановления АД в ответ на введение нитропруссида натрия (НП) к площади над реакцией восстановления АД в ответ на введение ацетилхолина (АХ).
Исследуемые группы животных (n=10): 1-я - ин-тактные; 2-я - с введением L-NAME; 3-я - ацетилсалициловая кислота (аспирин-кардио, Bayer) 8,6 мг/кг на фоне введения L-NAME; 4-я - ацетилсалициловая кислота (аспирин-кардио, Bayer) 25,8 мг/кг на фоне введения L-NAME; 5-я - клопидогрел (плавикс, Sanofi-Winthrop Industrie) 6,5 мг/кг на фоне введения L-NAME; 6-я - клопидогрел (плавикс, Sanofi-Winthrop Industrie) 3,3 мг/кг на фоне введения L-NAME. Препараты вводились ежедневно, внутрижелудочно, в течение 7 дней.
При статистической обработке данных рассчитывали среднее значение, величину стандартного отклонения. Различия считали достоверными при p<0,05.
Результаты исследования
Блокада NO-синтазы, вызванная семидневным введением L-NAME, приводила к артериальной гипертензии (САД - 190,3±6,7 мм рт. ст., ДАД - 145,0±3,9 мм рт. ст., СрАД - 160,1±4,6 мм рт. ст.). Введение на фоне L-NAME ацетилсалициловой кислоты и клопидогреля не приводило к достижению целевых показателей АД (рис. 1).
КЭД был рассчитан у каждого животного каждой группы, и после моделирования блокады NO-синтазы получили КЭД, равный 5,4±0,6, в то время как в группе интактных животных КЭД составлял 1,1±0,1. У животных, получавших ацетилсалициловую кислоту в дозе 8,6 мг/кг и 25,8 мг/кг, КЭД составил 2,1±0,3 и 2,1±0,2 соответственно. У животных, получавших клопидогрел в дозе 6,5 мг/кг и 3,3 мг/кг, КЭД составил 2,0±0,2 и 2,0±0,1 соответственно, приближаясь к группе интактных животных (рис. 2).
Полученные данные демонстрируют выраженное эн-дотелиопротективное действие изучаемых препаратов.
Обсуждение
В современном мире лидирующее положение в общей структуре заболеваемости и смертности уже несколько десятилетий занимают заболевания органов кровообращения. По данным ВОЗ, продолжительность жизни людей в развитых странах на 50% определяется наличием сердечно-сосудистых заболеваний, поэтому
П-------------г
Интактные L-NAME
П----------------г
АСК АСК Клопидогрел Клопидогрел
(8,6 мг/кг) (25,8 мг/кг) (6,5 мг/кг) (3,3 мг/кг)
Рис. 1. Влияние препаратов на показатели АД
Примечание: * - р<0,05 в сравнении с группой интактных животных.
Интактные Ь^АМЕ АСК (8,6 мг/кг)
: АСК (25,8 мг/кг) Клопидогрел (6,5 мг/кг) Клопидогрел (3,3 мг/кг)
Рис. 2. Значение КЭД у различных групп животных
Примечание: * - р<0,05 в сравнении с группой интактных;
# - р<0,05 в сравнении с группой Ь^АМЕ.
Кубанский научный медицинский вестник № 4 (109) 2009
Кубанский научный медицинский вестник № 4 (109) 2009
Рис. 3. Влияние АСК на синтез оксида азота
Примечание: ЭК - эндотелиальные клетки,
АСК - ацетилсалициловая кислота, ЦОГ-2 - циклооксигеназа 2,
ЛЕЙ - лейкоциты,
15-ерн1_ХА4 - 15-эпилипоксин А4, eNOS - эндотелиальная NO-синтаза, iNOS - индуцибельная NO-синтаза, N0 - оксид азота.
вопрос их профилактики является одним из основных в современной медицине.
Ацетилсалициловая кислота выпускается уже более ста лет и продолжает оставаться золотым стандартом профилактики осложнений сердечно-сосудистых заболеваний у больных групп повышенного риска. Механизм фармакологического действия данного препарата основан на подавлении агрегации тромбоцитов за счет необратимой блокады в них фермента циклооксиге-назы-1 (ЦОГ-1), обладающего высокой чувствительностью к действию ацетилсалициловой кислоты, при этом влияние на циклооксигеназу-2 (ЦОГ-2) остается минимальным.
Таким образом, блокируя только ЦОГ-1 и оставляя интактной ЦОГ-2, АСК вызывает преимущественное снижение продукции тромбоксана А2, в то время как уровень простациклина, вещества, обладающего мощным вазодилатирующим, антиагрегантным и антиатеросклеротическим действием, сохраняется достаточно высоким. Стоит отметить, что механизм действия простациклина такой же, как и у оксида азота: удаление ионов кальция из гладких мышц, что препятствует спазму сосудов, агрегации тромбоцитов и свертыванию крови.
Однако в последнее время в зарубежной литературе появились новые сведения, дополняющие понимание механизма действия АСК. Было доказано, что ацетилсалициловая кислота не просто ингибирует активность циклооксигеназы, а модифицирует ее ферментатив-
ную активность. Сразу после приема внутрь препарат подвергается воздействию капиллярной сети, где он (в эндотелии и циркулирующих лейкоцитах) ацетилиру-ет циклооксигеназу-2 и инициирует синтез 15К-НЕТЕ, метаболита, который затем фермент 5-липоксигеназа превращает в 15-эпилипоксин А4. А последний, в свою очередь, является стимулятором эндотелиальной (eN0S) и индуцибельной (IN0S) 1\Ю-синтазы, увеличивая продукцию N0 [4, 9] (рис. 3).
Также ацетилсалициловая кислота стимулирует синтез оксида азота тромбоцитами [6, 11] и повышает его биодоступность, снижая уровень оксидативного стресса [10], способствует защите эндотелия от продуктов свободнорадикального окисления, в частности от ОН-радикалов [12], стимулирует продукцию фер-ритина, который связывает свободные ионы железа в крови и тем самым защищает эндотелий от свободных радикалов, возникающих под влиянием свободных ионов железа. В терапевтических концентрациях АСК повышает продукцию ферритина в 5 раз. Такое многообразие механизмов действия ацетилсалициловой кислоты определяет ее выраженное эндотелиопротек-тивное действие.
В ходе исследования не было получено отличий в коэффициенте эндотелиальной дисфункции при применении АСК в дозах 8,6 мг/кг и 25,8 мг/кг, что, по всей видимости, связано с максимальным влиянием низких доз препарата на синтез 15-эпилипоксина и оксида азота.
В отличие от ацетилсалициловой кислоты, которая ингибирует только вторую фазу агрегации тромбоцитов, индуцированную АДФ, клопидогрел ингибирует обе фазы - агрегацию и адгезию, тормозит активацию тромбоцитов, вызванную коллагеном, адреналином, тромбином и серотонином. При этом он не затрагивает метаболизма арахидоновой кислоты и, таким образом, не влияет на синтез простациклина эндотелием сосудов. В основе эндотелиопротективного действия клопидогреля лежит его способность увеличивать биодоступность оксида азота путем уменьшения оксида-тивного стресса. Известно, что тромбоциты представляют собой источник кислородных радикалов, которые уменьшают биодоступность сосудистого N0, приводя к ухудшению эндотелиальной функции. Клопидогрел, блокируя АДФ-рецепторы тромбоцитов, ингибирует высвобождение CD40L - важного тромбоцитарного воспалительного медиатора, который увеличивает эндотелиальную продукцию активных радикалов кислорода, уменьшая биодоступность N0. Также блокада данных рецепторов приводит к увеличению продукции N0 тромбоцитами [5, 7]. В настоящее время доказана способность клопидогреля увеличивать продукцию оксида азота эндотелием коронарных сосудов, что является важным доказательством его эндотелиопротек-тивных эффектов [8].
Известно, что влияние клопидогреля на агрегацию тромбоцитов носит дозозависимый характер. При этом увеличение дозы усиливает его антиагрегационный эффект не только АДФ-зависимой агрегацией, но и вызванной тромбином и коллагеном [2]. Однако в ходе исследования эндотелиопротективных свойств клопидогреля в дозах 6,5 мг/кг и 3,3 мг/кг мы не получили изменения КЭД. Таким образом, коррекция эндотелиальной дисфункции клопидогрелем возможна в дозах, оказывающих минимальное влияние на агрегацию тромбоцитов и количество побочных эффектов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Белоусов Ю. Б. Эндотелиальная дисфункция как причина атеросклеротического поражения артерий при артериальной гипертензии: методы коррекции / Ю. Б. Белоусов, Ж. Н. Намсараев // Фарматека. - 2000. - № 6. - С. 62-72.
2. Клопидогрель (плавикс) - современное антиагрегантное средство: доказанная фармакологическая эффективность / Н. Ф. Маслова, Л. Ф. Суховецкая, Т. В. Бомко // Провизор. - 2007. - № 20. - С. 12-14.
3. Методические подходы для количественной оценки развития эндотелиальной дисфункции при L-NAME-индуцированной модели дефицита оксида азота в эксперименте / М. В. Покровский, В. И. Кочкаров, Т. Г. Покровская и др. // Кубанский научный медицинский вестник. - 2006. - № 10. - С. 72-77.
4. 15-epi-lipoxin A4-mediated induction of nitric oxide explains how aspirin inhibits acute inflammation / M. J. Paul-Clark, T. Van Cao, N. Moradi-Bidhendi // J. Exp. Med. - 2004. - V. 200 (1). - P. 69-78.
5. Clopidogrel improves systemic endothelial nitric oxide bioavailability in patients with coronary artery disease evidence for antioxidant and antiinflammatory effects / T. Heitzer, V. Rudolph, E. Schwedhelm // J. Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. - 2006. -V. 26 (7). - P. 1648-1652.
6. Effect of aspirin on constitutive nitric oxide synthase and the biovailability of NO / M. Madajka, M. Korda, J. White, T. Malinski // J. Thromb. Res. - 2003. - V. 110 (5-6). - P. 317-321.
7. Effect of clopidogrel on the expression of inflammatory markers in rabbit ischemic coronary artery / L. Molero, A. Lopez-Farre, P. J. Mateos-Caceres // British Journal of Pharmacology. - 2005. - V. 146. -P. 419-424.
8. Endothelial action of thienopyridines and thienopyrimidinones in the isolated guinea pig heart / A. Jakubowski, S. Chlopicki, R. Olszanecki // J. Prostaglandins eukot. Essent. Fatty Acids. - 2005. -V. 72 (2). - P. 139-145.
9. Gilroy D. W. New insights into the anti-inflammatory actions of aspirin-induction of nitric oxide through the generation of epi-lipoxins /
D. W. Gilroy // J. Mem. Inst. Oswaldo Cruz. - 2005. - V. 100. -№ 1. - P. 49-54.
10. Heme oxygenase-1 induction may explain the antioxidant profile of aspirin / N. Grosser, A. Abate, S. Oberle // J. Biochem. Biophys. Res. Commun. - 2003. - V. 308 (4). - P. 956-960.
11. Inhibition of human blood platelet aggregation and the stimulation of nitric oxide synthesis by aspirin / K. Chakraborty, G. A. Khan, P. Banerjee et al. // J. Platelets. - 2003. - V. 14 (7-8). -P. 421-427.
12. Oberle S. Aspirin increases ferritin synthesis in endothelial cells. A novel antioxidant pathway // Circ. Res. - 1998. - V. 82. -P. 1016-1020.
Поступила 26.05.2009
Н. Н. ЦЫБИКОВ1, А. А. ЗУЕВА13, Е. Б. ЖИГЖИТОВА2, Е. В. ПРУТКИНА1
УРОВЕНЬ ЭНДОТЕЛИНА-1 И АУТОАНТИТЕЛ К НЕМУ ПРИ АУТОИММУННЫХ ТИРЕОПАТИЯХ
1 Кафедра патофизиологии ГОУ ВПО «Читинская государственная медицинская академия Росздрава»,
Россия, 672090, г. Чита, ул. Горького, 39а;
2кафедра терапии ФПК и ППС, Россия, 672038, г. Чита, ул. Коханского, 7;
3ГУЗ ККБ г.Читы, Россия, 672038, г. Чита, ул. Коханского, 7. E-mail: zuevaaa@yandex.ru
У больных аутоиммунным тиреодитом (АИТ) с различным функциональным состоянием щитовидной железы и диффузным токсическим зобом (ДТЗ) с манифестным тиреотоксикозом исследовали уровень эндотелина и аутоантител к нему. В результате исследования выявлено значительное увеличение концентрации эндотелина у больных АИТ с субклиническим гипотиреозом, при этом уровень эндотелина в остальных исследуемых группах не претерпевал изменений. Содержание аутоантител к эндотелину не менялось в группе пациентов с АИТ субклиническим гипотиреозом и снижалось в группах больных ДТЗ с манифестным тиреотоксикозом, АИТ с эутиреозом и манифестным гипотиреозом.
Ключевые слова: эндотелин, аутоантитела к эндотелину, аутоиммунный тиреоидит, диффузный токсический зоб.
Кубанский научный медицинский вестник № 4 (109) 2009 УДК 616.441-006.5-06:616.441-008.61:612.017.1
