CC BY
54
УДК 616-053.2/575.22
Л.И. Колесникова В.В. Долгих Е.В. Беляева В.А. Шенин В.В. Альбот 2, Т.А. Астахова 1
РОЛЬ Л1166С ПОЛИМОРФИЗМА ГЕНА АвТЯ1 В РЕАЛИЗАЦИИ АРТЕРИАЛЬНОЙ ГИПЕРТЕНЗИИ У ДЕТЕЙ С ГЛОМЕРУЛОНЕФРИТОМ
1 Научный центр проблем здоровья семьи и репродукции человека СО РАМН (Иркутск) 2 Иркутская государственная областная детская клиническая больница (Иркутск)
В статье представлены результаты генотипирования образцов крови детей с гломерулонефритом и различным уровнем артериального давления по А1166С полиморфизму гена AGTR1 методом полимеразной цепной реакции. Обнаружено, что в группе детей с гломерулонефритом и артериальной гипертензией наблюдается тенденция преобладания С аллеля, а также гетерозиготного АС, и гомозиготного СС генотипов по гену AGTR1, по сравнению с группой нормотензивных детей с гломерулонефритом. Показан высокий риск формирования артериальной гипертензии для детей с гломерулонефритом и гетерозиготным генотипом AC по renyAGTRl.
Ключевые слова: симптоматическая артериальная гипертензия, ген-рецептор 1-го типа к ангиотензину II (AGTR1)
ROLE OF А1166С POLYMORPHISM OF AGTR1 GENE IN REALISATION OF ARTERIAL GYPERTENSION IN CHILDREN WITH GLOMERULONEPHRITIS
L.I. Kolesnikova 4 V.V. Dolgikh 4 E.V. Belyaeva 4 V.A. Shenin 4 V.V. Albot 2, T.A. Astahova 1
1 Scientific Centre of Family Health Problems and Human Reproduction SB RAMS, Irkutsk
2 Irkutsk State Regional Children's Clinical Hospital, Irkutsk
The paper presents results of typing of blood samples of children with glomerulonephritis and with different level of blood pressure by polymorphism of gene AGTR1 by means of polymerase chain reaction, ft has been discovered that in the group of children with glomerulonephritis and arterial hypertension there is a tendency of prevalence of С allele, and also of heterozygous AC and homozygous CC genotypes by AGTR 1 gene, in comparison with the group of children with normal blood pressure and glomerulonephritis, ft has been shown that there's a high risk of arterial hypertension development in children with glomerulonephritis and heterozygous AC genotype by AGTR1 gene.
Key words: symptomatic arterial hypertension, AGTR1 gene
Артериальная гипертония является одним из наиболее распространенных заболеваний в развитых странах мира, в том числе и в России. При артериальной гипертонии значительно возрастает риск сердечно-сосудистых осложнений, она заметно снижает среднюю продолжительность жизни. Высокое артериальное давление увеличивает риск развития мозгового инсульта, ишемической болезни сердца, сердечной и почечной недостаточности, поэтому артериальная гипертония является важной и актуальной проблемой современного здравоохранения.
Артериальная гипертония в общей популяции составляет приблизительно 20 %, а среди людей в возрасте старше 65 лет — 50 % и более. В настоящее
риальной гипертонии начинается еще в детском и подростковом возрасте [3]. Дети и подростки с высоким уровнем артериального давления имеют наибольший риск развития гипертонии в будущем. Артериальная гипертония в детском возрасте приводит к большему числу осложнений и имеет более тяжелые последствия. Данные о распространенности высокого артериального давления у детей и подростков, по данным российских исследователей, колеблются от 1 % до 29,35 %. Так, в Новосибирской области этот показатель 6,25 %, в Красноярском
Среди всех больных гипертонией пациенты с симптоматической артериальной гипертонией составляют около 5 — 10 %, а по некоторым данным до 15 %. Большая часть из них — пациенты с почечной патологией. Артериальная гипертония, сопровождая любое заболевание почек, осложняет его течение [2, 5], поэтому прогноз развития артериальной гипертонии для пациентов с болезнями почек очень важен.
В настоящее время общепризнано, что артериальная гипертензия является мультифакто-риальным заболеванием [6]. Важную роль в ее возникновении отводят генетическим факторам. Приблизительно у 50 % больных обнаруживается наследственная предрасположенность к эссенци-альной артериальной гипертонии. Установлена высокая положительная корреляция между величинами артериального давления родителей и детей.
Предрасположенность к развитию заболеваний, в том числе и к артериальной гипертонии, ассоциируется с полиморфизмом определенных генов, поэтому перспективным направлением в молекулярной генетике заболеваний, является поиск полиморфных маркеров генов-кандидатов и выявление их ассоциаций с заболеваниями.
Под полиморфизмом понимают существование нескольких вариантов — аллелей одного и того же гена. Полиморфизм гена (генотип) определенным образом, положительно или отрицательно, связан
с клиническим проявлением заболевания (фено-
гормоны, рецепторы, структурные или транспортные белки — предположительно могут участвовать в развитии заболевания, называются генами-кандидатами. Если между геном и заболеванием установлена ассоциативная связь, то становится возможным оценить индивидуальный риск развития заболевания для пациента.
Ренин-ангиотензиновая система является удобной моделью для исследования вклада аллелей соответствующих генов в сердечно-сосудистую патологию [4]. Мы изучили полиморфизм А1166С в гене рецептора 1-го типа к ангиотензину II. Ген AGTR1 локализован на 3-ей хромосоме, полиморфизм этого гена, заключается в замене нуклеотида аденина на цитозин в 1166 положении. Различают аллели гена: А и С и генотипы: АА, АС, СС. Аллель А и генотип АА считаются факторами, защищающими от артериальной гипертонии. Аллель Си генотип СС — считают генетическими факторами риска развития не только артериальной гипертонии, но и различных ее осложнений.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Основную группу нашего исследования составили 47 детей с гломерулонефритом, которые были пациентами отделения нефрологии Областной детской клинической больницы г. Иркутска в
ставлена подгруппами: дети с гломерулонефритом и артериальной гипертензией — 35 человек и дети с гломерулонефритом без артериальной гипертен-зии — 12 человек. Контрольную группу составил 51 практически здоровый ребенок без артериальной гипертензии и без патологии почек. Сравниваемые группы детей сопоставимы по полу и возрасту.
Материалом для исследования полиморфизма AGTR1 гена служила ДНК, выделенная из образцов венозной крови, смешанной с антикоагулянтом. Выделение ДНК проводили сорбентным методом. Амплификацию участков ДНК с последующей рестрикцией проводили методом полимеразной цепной реакции в автоматическом термоциклере «Терцик». Детекцию продуктов амплификации и рестрикции осуществляли в 7 % акриламидном геле.
Математическую обработку полученных данных проводили с использованием пакета прикладных программ STATISTICA 6.1 (StatSoft, USA). Для проверки соответствия фактического распределения частот генотипов теоретически ожидаемому равновесию Харди-Вайнберга использовали критерий х2-Различия считали статистически значимыми при Р< 0,05.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Нами были исследованы частоты аллелей и генотипов гена AGTR1 в группах нормо- и гипер-тензивных детей с гломерулонефритом, а также в группе практически здоровых детей. Было установлено, что распределение частот генотипов в группе гипертензивных детей с гломерулонефритом и в
контрольной группе соответствует равновесию
В группе нормотензивных детей с гломерулонефритом было выявлено отклонение от равновесия Харди — Вайнберга, вызванное отсутствием носителей гомозиготного СС генотипа.
Обнаружено, что во всех группах детей преобладают носители гомозиготного АА генотипа (табл. 1). Носители другого гомозиготного СС генотипа в исследованных группах детей представлены единичными случаями, поэтому в дальнейшем носителей гетерозиготного АС генотипа мы объединили с носителями гомозиготного по мутации СС генотипа. Распределение частот генотипов в исследованных группах детей было следующим. Частота АА генотипа в группе гипертензивных пациентов с гломерулонефритом составила 68,6 %, в группе нормотензивных детей — 91,7%, а в контрольной группе детей — 66,7 %. Все отличия не имели статистической значимости. Совокупная частота носителей гетерозиготного АС и гомозиготного СС генотипов, в которых присутствует му-тантный С аллель, в группе гипертензивных детей с гломерулонефритом составила 31,43 %. Это в 3,7 раза чаще, чем в группе нормотензивных детей с гломерулонефритом, где совокупная частота носителей АС и СС генотипов — 8,33 %. В контрольной группе частота АС, СС генотипов составила 33,33 %. Различия между исследуемыми группами детей по совокупной частоте встречаемости АС и СС генотипов не имеют статистической значимости.
Так как в группе гипертензивных детей с гломерулонефритом по сравнению с группой нормотензивных пациентов наблюдается тенденция преобладания генотипов, в которых присутствует мутантный С аллель, нами был проведен сравнительный анализ частоты встречаемости мутантного аллеля. Статистически значимых различий не было обнаружено, хотя в группе гипертензивных пациентов с гломерулонефритом частота встречаемости мутантного С аллеля в 4 раза выше и составляет 17,1 %, по сравнению с группой нормотензивных детей с гломерулонефритом, в которой частота встречаемости С аллеля составляет 4,2 %.
Для уточнения роли полиморфизма гена АСТЯ1 в реализации артериальной гипертензии у детей с гломерулонефритом была проведена оценка относительного риска (М1) развития патологии у носителей определенного генотипа (рис. 1). Оценку полученных значений проводили исходя из того, что при М1 = 1 и при М1 < 1 отсутствует ассоциация между генотипом и риском развития патологии, при М1> 1 наблюдается положительная ассоциация, т.е. генотип можно считать фактором риска. Для детей с гломерулонефритом был обнаружен риск развития артериальной гипертензии при носительстве гетерозиготного АС генотипа, М1 = 4,4.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Таким образом, одной из возможных причин, влияющих на развитие симптоматической артериальной гипертензии у детей с гломерулонефритом,
Примечание: N - наблюдаемая численность генотипов; у2 -оценкасоответствия наблюдаемого распределения генотипов ожидаемому, исходя из равновесия Харди - Вайнберга.
Таблица 1
Частота генотипов и аллелей гена АСТП1 в группах детей с гломерулонефритом
Частота аллелей Гетерозиготность
Генотип N Частота генотипов A C Наблюдаемая, Ожидаемая, D = (Но-Не) / Не х2 P
Но Не
1. Дети с гломерулонефритом и артериальной гипертензией (n = 35)
AA 24 0,686
AC 10 0,286 0,829 ± 0,04 0,171 ±0,04 0,286 ± 0,07 0,284 ± 0,06 0,006 ±0,17 0,001 > 0,05
CC 1 0,029
AC + CC 11 0,314
2. Дети с гломерулонефритом без артериальной гипертензии (n = 12)
AA 11 0,917
AC 1 0,083 0,958 ± 0,04 0,042 ± 0,04 0,083 ± 0,08 0,080 ± 0,07 0,043 ± 0,38 0,023 < 0,05
CC 0 -
AC + CC 1 0,083
3. Контрольная группа (n = 51)
AA 34 0,667
AC 16 0,314 0,823 ± 0,04 0,176 ±0,04 0,314 ±0,06 0,291 ±0,05 0,079 ±0,14 0,321 > 0,05
CC 1 0,02
AC + CC 17 0,333
может являться полиморфизм гена АСТЯ1. При носительстве гетерозиготного АСгенотипа риск развития артериальной гипертензии для детей с гломерулонефритом в 4,4 раза выше, чем при носительстве других генотипов, преимущественно гомозиготного АА генотипа. Мутантный С аллель и гомозиготный СС генотип, могут быть факторами риска развития артериальной гипертензии у детей с гломерулонефритом. Для подтверждения этой гипотезы нами будет продолжено начатое исследование.
ЛИТЕРАТУРА
1. Баирова Т.А. Клинико-эпидемиологические и генетические особенности и закономерности формирования эссенциальной артериальной гипертензии
возникновением стабильной артериальной гипертензии у детей и полиморфизм генов ренин-ангиотензиновой и кинин-брадикининовой систем
3. Гогин Е.Е. Артериальная гипертония и почки
4. Долгих В.В., КолесниковаЛ.И. Патогенез эссенциальной артериальной гипертензии у детей. —
5. Кутырина И.М. Современные аспекты патогенеза почечной артериальной гипертонии // Не-
6. Мартынов А.И. Многофакторность артериальной гипертонии // Клиническая геронтоло-
Сведения об авторах
Колесникова Любовь Ильинична - член.-корр. РАМН, профессор, директор Научного центра проблем здоровья семьи и репродукции человека СО РАМН (664003, г. Иркутск, ул. Тимирязева, 16, тел.: 8 (3952) 20-76-36, 8 (3952) 20-73-67; e-mail: iphr@sbamsr.irk.ru)
Долгих Владимир Валентинович - доктор медицинских наук, профессор, главный врач Клиники Научного центра проблем здоровья семьи и репродукции человека СО РАМН, заместитель директора по науке (664047, г. Иркутск, ул. Дальневосточная, 67А, тел.: 8 (3952) 24-68-21; e-mail: clinica@irk.ru)
Беляева Елена Владимировна - аспирант, младший научный сотрудник лаборатории генетико-биохимических проблем онтогенеза Научного центра проблем здоровья семьи и репродукции человека СО РАМН (664003, г. Иркутск, ул. Тимирязева, д. 16; тел.: 8 (3952) 20-76-36, 20-73-67; e-mail: belyeva_irk@mail.ru)
Шенин Владимир Анатольевич - доктор биологических наук, руководитель лаборатории генетико-биохимических проблем онтогенеза Научного центра проблем здоровья семьи и репродукции человека СО РАМН (664003, г. Иркутск, ул. Тимирязева, д. 16; тел.: 8 (3952) 20-76-36, 8 (3952) 20-73-67; e-mail: sheninV@mail.ru)
Альбот Вадим Владимирович - кандидат медицинских наук, заведующий отделением нефрологии Иркутской государственной областной детской клинической больницы (664022, г. Иркутск, б. Гагарина, 4; тел.: 8 (3952) 24-32-52; е-mail:sekretari@godkb.ru)
Астахова Татьяна Александровна - кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник лаборатории генетико-биохимических проблем онтогенеза Научного центра проблем здоровья семьи и репродукции человека СО РАМН (664003, г. Иркутск, ул. Тимирязева, 16, тел.: 8 (3952) 20-76-36, 8 (3952) 20-73-67; e-mail: tatjana_astahova@mail.ru)
