CC BY
44
Результаты открытого рандомизированного сравнительного перекрестного клинического исследования I фазы по оценке безопасности и фармакокинетики препарата Глуразим® (имиглюцераза) в сравнении с референтным препаратом у здоровых добровольцев
С.Б. Фитилёв1, 2, А.В. Возжаев1, И.И. Шкребнева1, 2, д.А. кудлай3, Е.В. Гапченко3, О.А. маркова3, А.Ю. Борозинец3, А.А. казаров4, м.С. Пантюшенко4
1ФГАОУВО «Российский университет дружбы народов»; Россия, 117198 Москва, ул. Миклухо-Маклая, 6; 2ГБУЗ г. Москвы «Городская поликлиника № 2 Департамента здравоохранения г. Москвы»; Россия, 117556 Москва, ул. Фруктовая, 12; 3АО «ГЕНЕРИУМ»; Россия, 123112 Москва, ул. Тестовская, 10; 4ООО «МБЦ«Генериум»; Россия, 601125Владимирская обл., Вольгинский, ул. Владимирская, 14
Контакты: Александр Владимирович Возжаев alex.vozzhaev@gmail.com
Введение. В настоящее время основным методом лечения болезни Гоше является заместительная ферментная терапия. Реком-бинантная глюкоцереброзидаза (имиглюцераза) — первый биотехнологический лекарственный препарат заместительной ферментной терапии с доказанной клинической эффективностью и безопасностью для лечения пациентов различного возраста с болезнью Гоше 1-го и 3-го типов, используемый в клинической практике с 1994 г. В России в рамках Стратегии развития фармацевтической промышленности «Фарма-2020» был разработан препарат Глуразим® — первый биоаналог препарата Церезим® (имиглюцераза). Полученные результаты доклинических исследований стали основанием для проведения рандомизированного сравнительного перекрестного клинического исследования I фазы.
Цель исследования — оценка краткосрочной безопасности и фармакокинетических параметров препарата Глуразим® в сравнении с референтным препаратом Церезим® после однократного внутривенного введения здоровым добровольцам. Материалы и методы. В клиническое исследование, состоявшее из 3 этапов, были включены 23 здоровых добровольца в возрасте 18—45 лет. Исследование в ходе 1-го и 2-го этапов было открытым, рандомизированным, сравнительным, перекрестным. На 1-м этапе добровольцам 1-й группы вводили препарат Глуразим®, 2-й группы — препарат Церезим® в дозах 30 Ед/кг однократно. На 2-м этапе 1-й группе вводили препарат Церезим®, 2-й группе — препарат Глуразим® в дозах 30 Ед/кг однократно. После окончания 1-го и 2-го этапов был проведен 3-й этап для 3-й группы (n = 5) с введением исследуемого препарата в дозе 60 Ед/кг однократно.
Результаты. Для всех изучаемых фармакокинетических параметров после введения исследуемого и референтного препаратов в дозах 30 Ед/кг 90 % доверительный интервал находился в диапазоне от 80 до 125 %, что свидетельствовало о фармакокине-тической эквивалентности сравниваемых препаратов. Всего было зарегистрировано 6 нежелательных явлений легкой и средней степеней тяжести. Из них 4 нежелательных явления отмечались после введения исследуемого препарата и не были связаны с его введением. Сравнительный анализ параметров оценки безопасности в данном исследовании (частота и тяжесть развития нежелательных явлений, данные физикального обследования здоровых добровольцев с оценкой жизненно важных показателей, результаты лабораторных анализов, электрокардиографии) не выявил межгрупповых различий.
Заключение. Установлена фармакокинетическая эквивалентность препарата Глуразим® и референтного препарата в дозе 30 Ед/кг. Выявлена нелинейная зависимость основных фармакокинетических параметров от введенной дозы исследуемого препарата. Показаны безопасность и отсутствие нежелательных реакций после однократного введения исследуемого препарата.
Ключевые слова: заместительная ферментная терапия, имиглюцераза, Глуразим®, безопасность, фармакокинетика, здоровые добровольцы
Для цитирования: Фитилёв С.Б., Возжаев А.В., Шкребнева И.И. и др. Результаты открытого рандомизированного сравнительного перекрестного клинического исследования Iфазы по оценке безопасности и фармакокинетики препарата Глуразим® (имиглюцераза) в сравнении с референтным препаратом у здоровых добровольцев. Онкогематология 2019;14(4):73—83.
сч
4
CS
CV 4
DOI: 10.17650/1818-8346-2019-14-4-73-83
Results of a phase I open randomized comparative crossover clinical trial to assess the safety and pharmacokinetics of Glurazyme® (imiglucerase) in comparison with the reference product in healthy volunteers
S.B. Fitilev1,2, A. V. Vozzhaev1, I.I. Shkrebneva12, D.A. Kudlay3, E. V. Gapchenko3, O.A. Markova3, A. Yu. Borоzinets3, А.А. Kazarov4, М. S. Pantyushenko4
cv
4
CS
cv
Peoples' Friendship University of Russia; 6 Miklukho-Maklaya St., Moscow 117198, Russia 2City Polyclinic No. 2 of the Moscow Department of Health; 12 Fruktovaya St., Moscow 117556 Russia; 3JSC GENERIUM; 10 Testovskaya St., Moscow 123112, Russia; 4International Biotechnological Center "Generium"; 14 Vladimirskaya St., Volginsky, Vladimir Region 601125, Russia
Background. Currently, the main treatment for Gaucher disease is enzyme replacement therapy. Recombinant glucocerebrosidase (imiglu-cerase) is the first biotechnological drug for enzyme replacement therapy with proven clinical efficacy and safety for the treatment of patients of different ages with Gaucher disease type 1 and type 3, used in clinical practice since 1994. In Russia, within the framework of the "Phar-ma 2020" pharmaceutical industry development strategy, the first biosimilar of imiglucerase, the drug Glurazyme®, was developed. The obtained results of preclinical studies became the basis for a phase I randomized comparative crossover clinical trial.
The objective of the study was to assess the short-term safety and pharmacokinetic parameters of Glurazyme® in comparison with the Cerezyme® after a single intravenous administration to healthy volunteers.
Materials and methods. 23 healthy volunteers aged 18—45 years were included in a 3-stage clinical trial. The study during the 1st and 2nd stages was open, randomized, comparative, crossover. At the 1st stage, volunteers from the 1st group received the Glurazyme®, from the 2nd group — the Cerezyme® once in doses of 30 U/kg. At the 2nd stage, Cerezyme® was administered to the 1st group, Glurazyme® - to the 2nd group once at doses of 30 U/kg. After the end of the 1st and 2nd stages, the 3rd stage was carried out for the 3rd group (n = 5) with the administration of the test drug once at a dose of 60 U/kg.
Results. For all studied pharmacokinetic parameters, after administration of the test and reference drugs in doses of 30 U/kg, 90 % confidence interval was in the range from 80 to 125 %, which indicates the pharmacokinetic compared drugs equivalence. A total of 6 adverse events of mild and moderate severity were recorded. Of these, 4 adverse events were noted after administration of the study drug and were not associated with its administration. A comparative analysis of safety assessment parameters in this study (frequency and severity of adverse events, physical examination of healthy volunteers with an assessment of vital signs, laboratory tests, electrocardiography) did not reveal intergroup differences.
^ Conclusion. The pharmacokinetic equivalence of the Glurazyme® and the reference drug in a dose of 30 U/kg has been established. A non-Œ linear dependence of the main pharmacokinetic parameters on studied drug administered dose was revealed. Safety and the absence of ad-i_ verse reactions after a single injection of the study drug are shown.
Key words: enzyme replacement therapy, imiglucerase, Glurazyme®, safety, pharmacokinetics, healthy volunteers
® For citation: Fitilev S.B., Vozzhaev A.V., Shkrebneva I.I. et al. Results of a phase I open randomized comparative crossover clinical trial to i_ assess the safety and pharmacokinetics of Glurazyme® (imiglucerase) in comparison with the reference product in healthy volunteers. Onko-2 gematologiya = Oncohematology 2019;14(4):73—83. (In Russ.).
Введение
Болезнь Гоше (БГ) — наиболее частая форма наследственных ферментопатий, объединенных в группу лизосомных болезней накопления. В основе заболевания лежит наследственный дефицит активности лизосомного фермента кислой р-глюкозидазы ф-глюкоцереброзидазы), участвующего в деградации продуктов клеточного метаболизма, ферментативном внутрилизосомном расщеплении гликосфинголипи-дов, важнейших структурных элементов клеточных мембран. Этот фермент катализирует реакцию гидролиза глюкозилцерамида (глюкоцереброзида), ключевого компонента липидной структуры клеточных мембран, до глюкозы и церамида [1—4].
Болезнь Гоше встречается с частотой от 1:40 000 до 1:60 000 у представителей всех этнических групп, тогда как в популяции евреев ашкенази частота заболевания достигает 1:450—1:1000 [5, 6]. БГ наследуется по аутосомно-рецессивному механизму, в основе заболевания лежат мутации гена глюкоцереброзидазы, локализующегося в регионе q21 на 1-й хромосоме. Присутствие 2 мутантных аллелей гена (аутосомно-ре-цессивное наследование) ассоциируется со снижением (или отсутствием) каталитической активности глюко-
цереброзидазы, что приводит к накоплению неутили-зированных сложных липидов (глюкоцереброзидов) в цитоплазме макрофагов, аутокринной стимуляции моноцитопоэза и увеличению абсолютного числа макрофагов в местах их «физиологического дома», что приводит к спленомегалии, гепатомегалии, инфильтрации костного мозга с цитопеническим синдромом и поражением костно-суставной системы [2, 7, 8].
В настоящее время основным видом лечения БГ является заместительная ферментная терапия (ЗФТ). Для лечения БГ 1-го типа с 1994 г. активно применяется ЗФТ рекомбинантной глюкоцереброзидазой (имиглю-церазой) в виде внутривенных инфузий в стандартном режиме 1 раз в 2 нед. ЗФТ приводит к регрессу цитопе-нии, уменьшению размеров селезенки и печени и предотвращает развитие необратимого поражения костно-суставной системы [2, 4]. Под действием ими-глюцеразы происходит гидролиз глюкоцереброзида до глюкозы и церамида по обычному пути метаболизма мембранных липидов. Доказана эффективность имиглюцеразы в отношении уменьшения частоты костных кризов, костных болей, остеонекрозов, повышения минеральной плотности костей и нормализации роста у детей. Доказанная клиническая эффективность
имиглюцеразы сочетается с хорошей переносимостью и отсутствием выраженных побочных эффектов в лечении пациентов различного возраста с БГ 1-го и 3-го типов [7, 9, 10]. В июне 2009 г. фармацевтическая компания Джензайм Лтд. остановила производство препарата Церезим® (имиглюцераза) из-за вирусного загрязнения биореакторов. Остановка производства привела к серьезной нехватке препарата у пациентов с БГ во всем мире, вызвавшей значительные сложности в их лечении. Данная проблема способствовала разработке и проведению клинических исследований биоаналогов препарата Церезим®, а также новых препаратов для ЗФТ [11-13].
В России в целях стимулирования разработки и производства отечественных инновационных лекарственных средств в 2009 г. была утверждена Стратегия развития фармацевтической промышленности Российской Федерации на период до 2020 года («Фарма-2020»), а в дальнейшем принята государственная программа Российской Федерации «Развитие фармацевтической и медицинской промышленности» на 2013-2020 гг. Реализация программы направлена на увеличение производства и обеспеченности жизненно необходимыми и важнейшими отечественными лекарственными средствами, в том числе для лечения редких заболеваний, включая БГ [13, 14].
В рамках стратегии «Фарма-2020» российской биотехнологической компанией ООО «МБЦ «Генери-ум» в 2011 г. была начата разработка биоаналогичного препарата Глуразим® (имиглюцераза) для лечения БГ 1-го и 3-го типов, которая проводилась в соответствии с международными требованиями [15-17]. В ходе разработки препарата были проведены сравнительные доклинические исследования, результаты которых продемонстрировали сопоставимость препаратов Глу-разим® и Церезим® по показателям качества, физико-химическим и биофармацевтическим свойствам, подтвердили отсутствие токсичности и хорошую переносимость препарата Глуразим® [18, 19]. Полученные результаты доклинических исследований стали основанием для проведения сравнительного клинического исследования I фазы препарата Глуразим® с референтным препаратом (РП) у здоровых добровольцев № КИ-33/14, которое было одобрено Минздравом России (разрешение № 130 от 16.03.2015).
Цель исследования — оценка краткосрочной безопасности и фармакокинетических параметров исследуемого препарата (ИП) Глуразим® в сравнении с препаратом Церезим® после однократного внутривенного введения здоровым добровольцам.
Материалы и методы
На базе центра клинических исследований Городской поликлиники № 2 ДЗМ было проведено открытое рандомизированное сравнительное перекрестное клиническое исследование I фазы по изучению безопасности и фармакокинетики препаратов Глуразим®
и Церезим® в дозах 30 Ед/кг, после однократного внутривенного введения с последующей оценкой безопасности и фармакокинетики препарата Глуразим® в дозе 60 Ед/кг после однократного внутривенного введения у здоровых добровольцев (табл. 1). Схема последовательного двухэтапного перекрестного дизайна является классической при проведении сравнительных исследований для оценки безопасности и биоэквивалентности сравниваемых биологических препаратов у здоровых добровольцев [20].
Рандомизация здоровых добровольцев для сравнительного исследования фармакокинетики была проведена в исследовательском центре в соотношении 1:1 методом конвертов, содержащих номер группы, последовательность была сгенерирована методом случайных чисел с помощью ресурса www.randomization. com. В 1-й группе здоровые добровольцы получали вначале ИП, затем РП. Во 2-й группе здоровые добровольцы получали вначале РП, затем ИП.
В итоге каждому из участвующих в 1-м и 2-м этапах исследования здоровых добровольцев были введены ИП и РП или, наоборот, РП и ИП однократно в виде внутривенной инфузии в дозе 30 Ед/кг.
В ходе 3-го этапа здоровые добровольцы, которые не участвовали в 1-м и 2-м этапах исследования, получали ИП в виде длительной внутривенной инфузии в дозе 60 Ед/кг. Доза 30 Ед/кг является стандартной начальной в лечении пациентов с БГ 1-го типа, тогда как доза 60 Ед/кг считается максимальной и используется у пациентов с БГ 1-го типа с тяжелым течением, а также у пациентов с БГ 3-го типа [2].
Критериями включения в исследовании были:
♦ возраст от 18 до 45 лет;
♦ индекс массы тела в пределах от 18,5 до 30 кг/м2, масса тела от 50 до 100 кг;
♦ верифицированный диагноз «здоров» по данным клинических, лабораторных и инструментальных методов обследования;
♦ наличие письменного согласия добровольца на участие в исследовании согласно действующему законодательству;
♦ отрицательный тест на беременность для женщин и согласие придерживаться адекватных методов контрацепции (двойной барьерный метод).
Основными критериями невключения в исследование явились: гиперчувствительность к ими-глюцеразе, альглюцеразе или к вспомогательным компонентам данных препаратов; отягощенный ал-лергологический анамнез; хронические заболевания внутренних органов, психические заболевания; ин-фицированность вирусом иммунодефицита человека, гепатитами В и С; острые инфекционные заболевания менее чем за 4 нед до начала исследования; прием лекарственных препаратов, оказывающих выраженное влияние на гемодинамику, функции внутренних органов менее чем за 1 мес до начала
CV 4
ев
cv
Таблица 1. Схема этапов исследования Table 1. Study stages diagram
cv
4
CS
Группа добровольцев Volunteer group
Период
1-го введения исследуемого и референтного препаратов The
period of
investigational and reference products first administration
Период наблюдения (2-6-й
дни исследования)
Период 2-го введения исследуемого и референтного препаратов
Период наблюде
ния (8-12-й дни исследова ния)
« Дни
а CV исследования Days of — 14... -1-й -14...-1st 0-й 0th 1-й 1st 5-й 5th 6-й 6th 7-й 7th 12-й 12th -14. -1-й —14.—1st 1-й 1st 6-й 6th
ос study
Визит 1-й 2-й 3-й 4-й 5-й 6-й 1-й 2-й
£ Visit 1st 2nd 3rd 4th 5th 6th 1st 2nd
1-я (n = 9), 2-я (n = 9) 1st (n = 9), 2nd (n = 9)
3-я (n = 5)
3rd (n = 5)
исследования, отклонения от физиологической нормы артериального давления и частоты сердечных сокращений (ЧСС); алкоголизм, наркомания, токсикомания, положительный анализ мочи на содержание сильнодействующих и наркотических препаратов, табакокурение.
Всего в исследовании были скринированы 30 здоровых добровольцев, 3 из которых не соответствовали критериям отбора. Популяцию всех включенных в исследование добровольцев (full analysis set, FAS) составили 27 человек, включая 4 дублеров (рис. 1). Популяцию для анализа безопасности — 23 здоровых добровольца (85,2% от общего числа включенных в исследование добровольцев). Все визиты и процедуры настоящего исследования выполнили 23 здоровых добровольца, включенных в популяцию per-protocol analysis (PP). Все 3 группы были сопоставимы между собой (табл. 2).
В исследовании изучались следующие фармако-кинетические параметры:
♦ AUC (Ед х мин/л) — площадь под кривой зависимости концентрации от времени от нулевого момента до последнего момента измерения с измеренной концентрацией выше предела количественного определения;
♦ Cmax (Ед/л) — максимальная концентрация, которая оценивалась непосредственно по зарегистрированным значениям концентрации;
♦ AUC (Ед х мин/л) — площадь под кривой зависимости концентрация от времени от нулевого момента с экстраполяцией до бесконечности;
♦ C /AUC (мин1) — соотношение максималь-
max' 0—да v '
ной концентрации к площади под фармакоки-нетической кривой;
♦ Tmax (мин) — время первого достижения максимальной концентрации;
♦ Tj (мин) — период полувыведения, относящийся к терминальной фазе;
♦ Kel (мин1) — константа скорости элиминации, относящаяся к терминальной фазе;
♦ Cl (мл/(кг х мин)) — общий клиренс;
♦ V (мл/кг) — объем распределения;
♦ Vss (мл/кг) — кажущийся объем распределения в стационарном состоянии;
♦ MRT (мин) — среднее время удержания препарата.
Все фармакокинетические параметры были рассчитаны индивидуально для каждого здорового добровольца на основании его данных время — концентрация препарата в крови с использованием фактических
f Л
Скрининг/Screening
Не включено в исследование (n = 7)/
Not enrolled in the study (n = 7)
Несоответствие критериям отбора (n = 3)/
Not eligible for selection criteria (n = 3)
Дублеры (n = 4)/Understudies (n = 4)
cv
4
CS
«V 4
3-я группа (n = 5)/3" group (n = 5)
1-й этап - Глуразим" 30 Ед/кг (n = 9)/
Ist stage - Glurazyme" 30 U/kg (n = 9)
2-й этап - Церезим" 30 Ед/кг (n = 9)/
2nd stage - Cerezyme" 30 U/kg (n = 9)
Анализ/Analysis
1-й этап - Церезим" 30 Ед/кг (n 9)/
Ist stage - Cerezyme" 30 U/kg (n = 9)
2-й этап - Глуразим" 30 Ед/кг (n 9)/
2nd stage Glurazyme" 30 U/kg (n = 9)
Включено в анализ (n = 9)/
Included in the analysis (n = 9)
Исключено из анализа (n = 0)/
Excluded from analysis (n = 0)
Включено в анализ (n = 9)/
Included in the analysis (n = 9)
Исключено из анализа (n = 0)/
Excluded from analysis (n = 0)
3-й этап - Глуразим" 60 Ед/кг (n = 5)/ 3rd stage - Glurazyme" 60 U/kg (n = 5)
> i
Включено в анализ (n = 5)/
Included in the analysis (n = 5)
Исключено из анализа (n = 0)/
Excluded from analysis (n = 0)
Рис. 1. Блок-схема исследования (по стандарту CONSORT) Fig. 1. Study flow chart (according to CONSORT standard)
значений времени взятия образцов крови, собранных через 0, 10, 20, 30, 60, 70, 80, 90 мин после введения ИП или РП в исследуемых дозах. Определение концентрации ИП и РП в плазме крови проводили в центральной лаборатории Отдела аналитических методов ООО «МБЦ «Генериум» с помощью ферментативного метода с использованием флуоресцентно меченного субстрата. Предел количественного определения составил 0,2 мЕд/мл.
Оценку фармакокинетической эквивалентности проводили согласно требованиям российских и международных регламентирующих документов, предъявляемым к изучению эквивалентности для воспроизведенных биопрепаратов [16, 21—23].
Оценку безопасности препаратов (количество, тяжесть нежелательных явлений (НЯ), их связь с ИП) проводили по данным клинического (жалобы, результаты физикального осмотра, состояние жизненно
cv 4
ев
cv 4
Таблица 2. Исходная характеристика здоровых добровольцев Table 2. Baseline characteristics of healthy volunteers
2-я группа (n = 9)
3-я группа (n = 5)
2" =9) I "=5)
Дублеры (n = 4)
Пол, n (%): Gender, n (%)
женский female 6 (66,7) 4 (44,4) 0 2 (50,0) 0,147
мужской male 3 (33,3) 5 (55,6) 5 (100) 2 (50,0)
Возраст (M ± SD), лет Age (M ± SD), years 30,6 ± 8,5 30,6 ± 4,9 29,6 ± 9,4 30,8 ± 4,5 0,994
Масса тела (M ± SD), кг Weight (M ± SD), kg 67,5 ± 13,6 69,2 ± 12,7 79,6 ± 9,2 62,5 ± 13,0 0,221
Рост (M ± SD), см Height (M ± SD), cm 170,0 ± 11,0 170,0 ± 11,0 179,6 ± 1,1 165,3 ± 9,8 0,178
Индекс массы тела
(M ± SD), кг/м2 Body mass index (M ± SD), kg/m2 23,19 ± 2,91 23,79 ± 2,28 24,70 ± 2,96 22,78 ± 3,88 0,735
важных функций: ЧСС, систолическое (САД) и диа-столическое (ДАД) артериальное давление, частота дыхания, температура тела; данные электрокардиографии в 12 стандартных отведениях) и лабораторного (клинический анализ крови, биохимический анализ крови, общий анализ мочи, анализ мочи на хориони-ческий гонадотропин человека) мониторинга. В качестве характеризующего показателя безопасности использовалась частота случаев выхода значений клинических и лабораторных показателей из допустимых границ.
Для количественных показателей в каждой группе были рассчитаны основные статистические показатели: максимальные, минимальные и средние величины с указанием интервала стандартной ошибки или про-центилей в зависимости от характера данных. Для категориальных (качественных и ранговых) показателей были рассчитаны частоты и доли встречаемости соответствующих категорий (рангов). Для выявления влияния факторов исследования на количественные показатели состояния здоровых добровольцев применяли методы дисперсионного анализа (ANOVA). Непараметрические методы (метод множественного сравнения Краскела—Уоллиса) использовали как вспомогательные в сомнительных случаях. Для оценки наличия взаимосвязи между качественными показателями использовали анализ таблиц сопряженности (х2-критерий, в случае малых значений наблюдаемых частот — точный критерий Фишера). Соотношение пропорциональности между основными
фармакокинетическими параметрами (AUC, Cmax) и вводимой дозой ИП анализировали на основе степенной функции (power function), y = ax doseb, где a — константа пропорциональности, b — степенной показатель. Представление данных проводили с учетом общепринятых рекомендаций [24].
Результаты
Анализ параметров фармакокинетики. Концентрации препаратов в плазме крови были определены для всех здоровых добровольцев во всех запланированных временных точках, без пропущенных значений. Максимальная концентрация ИП и РП в плазме крови достигалась через 60 мин после начала введения с последующим медленным экспоненциальным снижением концентрации (рис. 2).
В целом средние значения концентрации ИП в плазме крови после однократного введения в дозе 30 Ед/кг были близки во всех измеренных временных точках с таковыми РП после однократного введения в дозе 30 Ед/кг.
После введения препарата Глуразим® в дозе 30 Ед/ кг среднее значение AUC0—t составило 4056,0 ± 818,4 мЕд x мин/мл, после введения РП в дозе 30 Ед/кг - 4610,2 ± 738,0 мЕд x мин/мл; AUC0 - 4111,65 ± 831,93 и 4686,34 ± 752,47 мЕд x
0—да ' ' ' '
мин/мл; Cmax — 84,3 ± 16,9 и 98,0 ± 16,7 мЕд/мл; Cl — 7,6 ± 1,54 и 6,6 ± 1,15 мл/(кг x мин) соответственно. По данным фармакокинетическим параметрам рассчитанный 90% доверительный интервал (ДИ)
для соотношения AUC„ „ AUC„ , C , C /AUC„ ,
0—t' 0—да' max' max' 0—да'
Cl находится в пределах допустимого диапазона 80— 125% (табл. 3). Средние значения периода полувыведения (Tj ) и объема распределения (Vd) для ИП
§ 100
= SS 80
<5 £
Р I 60 £ g
11 40
Глуразим® / Церезим® / " Glurazyme® ' Cerezyme®
10 20 30 40 50 60 Время, мин / Time, min
70
80
90
Рис. 2. Усредненные фармакокинетические кривые после введения исследуемого и референтного препаратов (для здоровых добровольцев 1-й и 2-й групп). Планка погрешностей показывает 95 % доверительный интервал Fig. 2. Averaged pharmacokinetic curves after administration of the investigational and reference products (for healthy volunteers of the 1st and 2nd groups). Error bar shows 95 % confidence interval
составили 7,1 ± 1,0 мин и 76,3 ± 13,8 мл/кг, для РП — 7,4 ± 1,0 мин и 69,7 ± 11,7 мл/кг соответственно. Для 1-й и 2-й групп добровольцев статистически значимых различий между препаратами по показателям Т1/2 и Ке1 не выявлено (р >0,05). Полученные в исследовании результаты по указанным фармакоки-нетическим параметрам согласуются с данными литературы по препарату имиглюцераза [9, 10]. В настоящем исследовании не выявлено статистически значимого (р >0,05) влияния последовательности введения ИП — отсутствует эффект периода введения препарата, а также не отмечено парного взаимодействия период х препарат (см. табл. 3).
По всем исследуемым фармакокинетическим параметрам 90% ДИ для соотношения между ИП и РП укладывается в рекомендуемый диапазон от 80 до 125%, что позволяет сделать вывод о фармакокине-тической эквивалентности данных препаратов (см. рис. 2).
После введения ИП в дозе 60 Ед/кг средние значения АиС0-( составили 12774,3 ± 2646,9 мЕд х мин/мл, АиС0-ю - 13455,8 ± 2948,7 мЕд х мин/мл, Т1/2 - 10,3 ± 1,7 мин, С1 - 4,6 ± 1,0 кг х мин, Ш — 67,4 ± 7,1 мл/кг. Среднее значение максимальной
CV 4
CS
CV 4
Таблица 3. Результаты сравнения различных фармакокинетических параметров исследуемого и референтного препаратов Table 3. Comparison results of investigational and reference products various pharmacokinetic parameter
Фармакокинетический параметр Глуразим®, M ± SD Церезим®, M ± SD p (взаимодействие период x препарат) 90 % доверительный интервал для соотношения параметров 2 препаратов, %
gmrazvme®. M ± SD Cerezyme®, M ± SD p (interaction
Pharmacokinetic parameter period x drug) 90% confidence interval for the ratio of 2 products parameters, %
AUC0 мЕд х мин/мл AUC0 t mU х min/mL 4056,0 ± 818,4 4610,2 ± 38,0 0,902 83,7-92,3
AUC0 » мЕд х мин/мл AUC0 J mU х min/mL 4111,65 ± 831,93 4686,34 ± 752,47 0,942 83,5-92,0
T мин T min 7,1 ± 1,0 7,4 ±1,0 0,160 92,4-98,2
K., мин-1 el' K., min-1 el 0,10 ± 0,02 0,09 ±0,01 0,170 102,0-108,8
C , мЕд/мл max' C , mU/mL max' ' 84,3 ± 16,9 98,0 ±16,7 0,704 80,2-91,8
C /AUC , мин-1 max' 0—»' C /AUC° , min-1 max 0- 0,021 ±0,001 0,021 ±0,001 0,184 96,0-100,2
Cl, мл/(кг х мин) Cl, mL/(kg х min) 7,58 ± 1,54 6,57 ± 1,15 0,843 109,6-121,1
Vd, мл/кг Vd, mL/kg 76,31 ± 13,78 69,72 ± 11,69 0,262 104,6-114,3
Vss, мл/кг Vss, mL/kg 128,50 ± 25,79 120,00 ± 23,76 0,660 100,7-113,5
MRT, мин MRT, min 17,06 ± 1,60 18,20 ± 1,74 0,105 91,3-96,2
20
0
0
концентрации Стах после введения препарата Глура-^ зим® в дозе 60 Ед/кг было достигнуто через 60 мин после начала введения, что соответствовало длитель-1- ности инфузии и составило 270,3 ± 59,6 мЕд/мл. Увеличение среднего значения концентрации ИП в плазме крови при увеличении дозы вводимого препарата было получено при сравнении усредненных фармако-кинетических кривых для различных доз препарата Глуразим® — 30 и 60 Ед/кг (рис. 3).
В исследовании была показана нелинейная зависимость основных фармакокинетических параметров от введенной дозы ИП (30 и 60 Ед/кг), поскольку
CV 4
CS
CV 4
степенной показатель AUC„
, AUC0 и C
0-да п
находил-
ся в интервале от 1,5 до 2,0 (р <0,001).
Оценка безопасности. Всего в исследовании было отмечено 6 НЯ, 4 (66,7%) из них — после введения ИП, 2 — после введения РП. Из 6 зарегистрированных в данном исследовании НЯ 4 (66,7%) имели сомнительную связь с ИП, 2 (33,3%) — возможную связь с РП. Зарегистрированные после введения ИП 3 НЯ были легкой степени тяжести (гиперкалиемия, снижение содержания гемоглобина, диарея) и 1 — умеренной (гиперкалиемия). Зарегистрированные после введения РП 2 НЯ (гипотония и повышение содержания эозинофилов) были легкой степени тяжести. Серьезных и тяжелых НЯ в данном исследовании не отмечено. Большинство НЯ (3 из 4) после введения ИП были лабораторными, что составляет 75% всех НЯ после введения ИП.
Проведенный анализ с помощью точного критерия Фишера не выявил статистически значимой разницы между группами по параметру связи НЯ с приемом ИП и РП (р = 0,067) (табл. 4).
ge 8"
. Глуразим" (30 Ед/кг) / Glurazyme" (30 U/kg) Глуразим" (60 Ед/кг) / Glurazyme" (60 U/kg)
10 20 30 40 50 60 70 Время, мин / Time, min
80 90
Рис. 3. Усредненные фармакокинетические кривые после введения исследуемого препарата в дозах 30 и 60 Ед/кг. Планка погрешностей показывает 95 % доверительный интервал
Fig. 3. Averaged pharmacokinetic curves after administration of the investigational product at doses of 30 and 60 U/kg. Error bar shows 95 % confidence interval
При проведении сравнительного анализа между препаратами по доле здоровых добровольцев с наличием отклонений по показателям клинического и биохимического анализов крови от показателей референс-ных значений статистически значимых различий между препаратами не выявлено (p >0,05). После введения ИП и РП клинически значимых отклонений от референсных значений показателей общего анализа мочи не наблюдалось.
При анализе полученных данных не выявлено статистически значимых различий по показателям САД, ДАД, ЧСС, частоты дыхательных движений и температуры тела у здоровых добровольцев после
Таблица 4. Сравнительная характеристика нежелательных явлений Table 4. Comparative characteristics of adverse events
Глуразим® Церезим®
Нежелательное явление ■ШИШИ ■¡вин
Adverse eve nt n Связь с введением препарата Вид связи с введением n препарата
Гиперкалиемия Hyperkalemia 2 Сомнительная Unlikely 0 0
Снижение уровня гемоглобина Hemoglobin level decreased 1 Сомнительная Unlikely 0 0
Диарея Diarrhea 1 Сомнительная Unlikely 0 0
Артериальная гипотония Arterial hypotension 0 0 1 Возможная Possible
Повышение уровня эозинофилов Eosinophils number increased 0 0 1 Возможная Possible
Всего, n (%) Total, n (%) 4/4 (100) 2/2 (100)
0,067
0
введения ИП и РП. При сравнительной оценке динамики показателей ж изненно важных функций здоровых добровольцев меж ду различными дозами ИП (30 и 60 Ед/кг) были установлены статистически значимые различия по показателям САД (р <0,001), ДАД (р = 0,001) и частоты дыхательных движений (р = 0,031). При этом индивидуальные значения САД в большинстве периодов измерения не превышали 120 мм рт. ст. Индивидуальные значения ДАД после введения препарата Глуразим® в дозах 30 и 60 Ед/кг на всех визитах находились в диапазоне от 60 до 80 мм рт. ст.
Обсуждение
На основании результатов, полученных в ходе данного сравнительного клинического исследования, можно сделать вывод о том, что ИП и РП характеризуются высокой степенью сопоставимости всех фар-макокинетических параметров. Индивидуальные и усредненные профили фармакокинетических кривых ИП и РП сходны во всех измеренных временных точках.
Установлено увеличение среднего значения концентрации ИП в плазме крови при увеличении дозы вводимого препарата при сравнении усредненных фармакокинетических кривых для различных доз препарата Глуразим® - 30 и 60 Ед/кг.
В исследовании была показана нелинейная зависимость основных фармакокинетических параметров от введенной дозы ИП (30 и 60 Ед/кг).
Рассчитанный 90% ДИ для соотношения фарма-кокинетических параметров 2 препаратов находится в пределах допустимого диапазона от 80 до 125% для всех изучаемых в исследовании фармакокинети-ческих параметров.
Для ИП не зарегистрировано НЯ, связанных с применением препарата (нежелательных реакций). Сравнительный анализ параметров оценки безопасности в данном исследовании (частота и тяжесть развития НЯ, данные физикального обследования здоровых добровольцев с оценкой жизненно важных показателей, результаты лабораторных анализов, электрокардиографии) не выявил межгрупповых различий.
Заключение
♦ Результаты проведенного клинического исследования I фазы свидетельствуют о фармакокинети-ческой эквивалентности биоаналогичного препарата Глуразим® и препарата Церезим® в дозе 30 Ед/кг.
♦ Установлена нелинейная зависимость основных фармакокинетических параметров от введенной дозы (30 и 60 Ед/кг) препарата Глуразим®.
♦ Однократное введение препарата Глуразим® в исследуемых дозах является безопасным у здоровых добровольцев и не сопровождается развитием нежелательных реакций. При сравнительном анализе исследуемых параметров оценки безопасности межгрупповые различия не выявлены.
CV 4
CS
CV 4
ЛИТЕРАТУРА/REFERENCES
1. Лукина ЕА. Болезнь Гоше. Практическое руководство. М.: Литтерра, 2014. 56 с. [Lukina E.A. Gaucher disease. Practical guide. Moscow: Litterra, 2014, 56 p. (In Russ.)].
2. Лукина ЕА., Сысоева Е.П., Лукина К.А. и др. Болезнь Гоше у взрослых: диагностика, лечение и мониторинг. В кн.: Алгоритмы диагностики и протоколы лечения заболеваний системы крови. Под ред. В.Г. Савченко. В 2 томах. Том 1. М.: Практика, 2018. C. 411-425.
[Lukina E.A., Sysoeva E.P., Lukina K.A. et al. Gaucher disease in adults: diagnosis, treatment and monitoring. In: Diagnostic algorithms and treatment protocols for blood diseases. Ed.: V.G. Savchenko. In 2 Vol. Vol. 1. Moscow: Praktika, 2018. Pp. 411-425 (In Russ.)].
3. Gaucher disease. A strategic collaborative approach from EMA and FDA. EMA/44410/2014. European Medicines Agency, 2014:9. Available at: https://www. ema.europa.eu/en/documents/regulatory-procedural-guideline/gaucher-disease-strategic-collaborative-approach-european-
medicines-agency-food-drug-administration_en.pdf.
4. Biegstraaten M., Cox T.M., Belmatoug N. et al. Management goals for type 1 Gaucher disease: An expert consensus document from the European working group on Gaucher disease. Blood Cells Mol Dis 2018;68:203-8. DOI: 10.1016/j. bcmd.2016.10.008.
5. Зуб Н.В. Болезнь Гоше: распространенность, семиотика, качество жизни и клинико-экономическое обоснование ферментозаместительной терапии. Автореф. дис. ... канд. мед. наук. М., 2010. [Zub N.V. Gaucher disease: prevalence, semiotics, quality of life, and the clinical and economic rationale for enzyme replacement therapy. Thesis ...
of candidate of medical sciences. Moscow, 2010. (In Russ)].
6. Gaucher Disease. Eds.: A.H. Futerman, A. Zimran. Boca Raton, FL:
Taylor & Francis, 2007.
7. Kaplan P., Baris H., De Meirleir L. et al. Revised recommendations for the management of Gaucher disease in
children. Eur J Pediatr 2013;172(4): 447-58. DOI: 10.1007/s00431-012-1771-z.
8. Лукина E.A. Протокол ведения пациентов с болезнью Гоше. Онкогематология 2009;1:65-71. [Lukina E.A. Gaucher disease management protocol. Onkogematologiya = Oncohematology 2009;1:65-71. (In Russ.)].
9. Serratrice C., Carballo S., Serratrice J., Stirnemann J. Imiglucerase in the management of Gaucher disease type 1: an evidence-based review of its place in therapy. Core Evid 2016;11:37-47. DOI: 10.2147/CE.S93717.
10. Andersson H., Kaplan P., Kacena K., Yee J. Eight-year clinical outcomes of long-term enzyme replacement therapy for 884 children with Gaucher disease type 1. Pediatrics 2008;122(6):1182-90.
DOI: 10.1542/peds.2007-2144.
11. Hollak C.E., Vom Dahl S., Aerts J.M. et al., Force Majeure: therapeutic measures in response to restricted supply of imiglucerase (Cerezyme) for patients with Gaucher disease, Blood Cells Mol Dis 2009 (Oct 3 Electronic publication ahead of print).
cv
4
ев
ev 4
12. Aviezer D., Brill-Almon E., Shaaltiel Y. et al. A plant-derived recombinant human glucocerebrosidase enzyme — a preclinical and phase I investigation. PLoS One 2009;4(3):e4792. DOI: 10.1371/journal. pone.0004792.
13. Приказ Минпромторга России от 23.10.2009 № 965 «Об утверждении Стратегии развития фармацевтической промышленности Российской Федерации на период до 2020 года». Доступно по: http://www.consultant.ru/ cons/cgi/online. [Order of the Ministry of Industry and Trade of Russia dated 10.23.2009 No. 965 "On approval of Pharmaceutical Industry Development Strategy of the Russian Federation for the period until 2020". Available at: http://www.consultant.ru/cons/cgi/ online. (In Russ.)].
14. Государственная программа «Развитие фармацевтической и медицинской промышленности» на 2013—2020 гг. Основные данные по государственной программе «Развитие фармацевтической и медицинской промышленности» на 2013—2020 гг. М.: Минпром-торг России, 2014. Доступно по: http://minpromtorg.gov.ru/common/ upload/files/docs/MinProm_02.06.14. pdf. [State program "Development of the pharmaceutical and medical industry" for 2013—2020. Basic data on the state program "Development of the pharmaceutical and medical industry" for 2013—2020. Moscow: Ministry of Industry and Trade of Russia, 2014. Available at: http://minpromtorg.gov.ru/ common/upload/files/docs/ MinProm_02.06.14.pdf. (In Russ.)].
15. Правила проведения исследований биологических лекарственных средств Евразийского экономического союза. Утверждены решением № 89
от 03.11.2016. 714с. Доступно по: http://docs.cntd.ru/ document/456026116. [Rules for conducting research on biological drugs
of the Eurasian Economic Union. Approved by decision No. 89 of 03/03/2016. 714 p. Available at: http:// docs.cntd.ru/document/ 456026116. (In Russ.)].
16. Committee for Medicinal Products for Human Use (CHMP). Annex to guideline on similar biological medicinal products containing biotechnology-derived proteins as active substance: non-clinical and clinical issues. EMEA/ CHMP/BMWP/42832/2005 Rev1. European Medicines Agency. 2015:13. Available at: https://www.ema.europa.eu/ en/documents/scientific-guideline/ guideline-similar-biological-medicinal-products-containing-biotechnology-derived-proteins-active_en-2.pdf
17. Иванов Р., Секарёва Г., Кравцова О. и др. Правила проведения исследований биоаналоговых лекарственных средств (биоаналогов). Фармакокине-тика и фармакодинамика 2014;1: 21—36. [Ivanov R., Sekareva G., Kravtsova O. et al. The rules for conducting research on bioanalogous medicines (bioanalogs). Farmakokinetika i farmakodinamika = Pharmacokinetics and pharmacodynamics 2014;1:21—36. (In Russ.)].
18. Дегтерев М.Б., Смолов М.А., Вишневский А.Ю., Шукуров Р.Р. Физико-химическая характеризация имиглю-церазы биоаналогичного и референтного препарата масс-спектрометриче-скими методами. В кн.: Биотехнология: состояние и перспективы развития. Материалы международного конгресса, 2019. С. 302—303. [Degterev M.B., Smolov M.A., Vishnevskiy A.Yu., Shukurov R.R. Physico-chemical characterization of imiglucerase bio-analogous and reference preparation by mass spectrometric methods. In: Biotechnology: state and development prospects. Proceedings of the International Congress, 2019.
Pp. 302—303. (In Russ.)].
19. Вассарайс Р.А., Чащинова Д.В., Шамо-нов Н.А. и др. ^временные подходы к обеспечению вирусной безопасности лекарственных препаратов, произведенных по технологии рекомбинант-ной ДНК в клетках млекопитающих.
В кн.: Биотехнология: состояние и перспективы развития. Материалы международного конгресса, 2019. С. 288—289. [Vassarais R.A., Chashchinova D.V., Shamonov N.A. et al. Modern approaches to virus safety of drugs produced by recombinant DNA technology in mammalian cells. In: Biotechnology: state and development prospects. Proceedings of the International Congress, 2019. Pp. 288—289. (In Russ.)].
20. Waller C.F., Bronchud M., Mair S., Challand R. Comparison of the pharmacodynamic profiles of
a biosimilar filgrastim and Amgen filgrastim: results from a randomized, phase I trial. Ann Hematol 2010;89(10):971—8. DOI: 10.1007/ s00277-010-0973-6.
21. Committee for Medicinal Products for Human Use (CHMP) Guideline on the Clinical Investigation of the Pharmacokinetics of Therapeutic Proteins, 2007.
22. Expert committee on biological standardization. Guidelines of evolution of similar biotherapeutic product. Geneva, 2009.
23. Руководство по экспертизе лекарственных средств. Том I. М.: Гриф и К, 2014. 328 с. [Guidance on the examination of medicines. Vol. I. Moscow: Grif i K, 2014. 328 p.
(In Russ.)].
24. Мамаев А.Н., Кудлай Д.А. Визуализация данных в презентациях, отчетах и исследованиях. М.: Практическая медицина, 2011. 39 с. [Mamaev A.N., Kudlay D.A. Data visualization in presentations, reports and studies. Moscow: Practical Medicine, 2011. 39 p. (In Russ.)].
Вклад авторов
C.Б. Фитилёв: разработка дизайна статьи, анализ полученных данных; анализ научного материала;
А.В. Возжаев: получение данных для анализа, анализ полученных данных, анализ научного материала, дополнение текста рукописи; И.И. Шкребнева, А.А. Казаров, М.С. Пантюшенко: получение данных для анализа, анализ полученных данных; Д.А. Кудлай: научное и литературное редактирование статьи, обзор публикаций по теме статьи; Е.В. Гапченко: разработка дизайна исследования, анализ полученных данных;
О.А. Маркова: разработка дизайна исследования, анализ полученных данных, научное редактирование статьи;
А.Ю. Борозинец: анализ научного материала, написание текста рукописи, обзор публикаций по теме статьи, подготовка списка литературы. Authors' contributions
S.B. Fitilev: study design development, analysis of the obtained data, analysis of scientific material;
A.V. Vozzhaev: obtaining data for analysis, analysis of the obtained data, analysis of scientific material, manuscript text supplement; I.I. Shkrebneva, А.А. Kazarov, М^. Pantyushenko: obtaining data for analysis, analysis of the obtained data;
D.A. Kudlay: scientific and literary editing of article, reviewing of publications on the article's topic;
E.V. Gapchenko: study design development, analysis of the obtained data;
O.A. Markova: study design development, analysis of the obtained data, scientific editing of article;
A.Yu. Borazinets: analysis of scientific material, article writing, reviewing of publications on the article's topic, preparation of a list of references.
cv
4
ORCID авторов/ORCID of authors
С.Б. Фитилёв/S.B. Fitilev: https://orcid.org/0000-0001-8395-419X А.В. Возжаев/A.V. Vozzhaev: https://orcid.org/0000-0002-2687-5986 И.И. Шкребнева/I.I. Shkrebneva: https://orcid.org/0000-0002-0070-3115 Д.А. Кудлай/D.A. Kudlay: https://orcid.org/0000-0003-1878-4467 О.А. Маркова/O.A. Markova: https://orcid.org/0000-0002-1179-3881 А.Ю. Борозинец/A.Yu. Borozinets: https://orcid.org/0000-0002-4863-8471 А.А. Казаров/А.А. Kazarov: https://orcid.org/0000-0003-0682-6113
CS
Конфликт интересов. Д.А. Кудлай, Е.В. Гапченко, О.А. Маркова, А.Ю. Борозинец являются сотрудниками АО «ГЕНЕРИУМ», А.А. Казаро-ва, М.С. Пантюшенко являются сотрудниками ООО «МБЦ «Генериум». Остальные авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов. ^ Conflict of interest. D.A. Kudlay, E.V. Gapchenko, O.A. Markova, A.Yu. Borozinets are employees of JSC GENERIUM. A.A. Kazarova and |_ M.S. Pantyushenko are employees of IBC "Generium". Other authors declare no conflict of interest. ^
ш
Финансирование. Исследование проведено при финансовой поддержке ООО «МБЦ «Генериум». s
Financing. The study was conducted with the financial support of IBC "Generium".
U
Информированное согласие. Участие в клиническом исследовании было добровольным. Здоровый доброволец имел право отказаться от е участия в проводимом исследовании на любой его стадии. Согласие здорового добровольца на участие в исследовании подтверждалось _ подписанием Информационного листка здорового добровольца с формой информированного согласия на визите скрининга до выполнения каких-либо процедур, связанных с исследованием.
Informed consent. Participation in the clinical trial was voluntary. A healthy volunteer had the right to refuse to participate in the ongoing research at any о stage. The consent of the healthy volunteer to participate in the study was confirmed by signing the Information sheet of the healthy volunteer with an "" informed consent form at the screening visit before any procedures related to the study were performed. ®
a
cv
4
Статья поступила: 30.08.2019. Принята к публикации: 28.11.2019. Article submitted: 30.08.2019. Accepted for publication: 28.11.2019.
