CC BY
78
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1 Т.И. Дмитровская, А.М. Дмитровский Иерсиниозы в Казахстане. - Алма-Ата: Казахстан, 1984. - 186 с.
2 Г.П. Сомов Дальневосточная скарлатиноподобная лихорадка. - М.: Медицина, 1979. - 348 с.
3 В.С. Антонов, Ю.И. Буланьков, К.П. Плотников Псевдотуберкулез и иерсиниоз. - М.: Медицина, 2001. - 296 с.
4 Ю.В. Лобзин Руководство по инфекционным болезням // РАМН. - СПб.: Издательство Фолиант, 2003. - №2. - С. 8894.
1Н.К. Оспанбекова, 1А.М. Дмитровский, 2А.К. Оспанбекова
С.Ж. Асфендияров атындагы К,азац ¥лттыц медицина университету 1Тропикалыц жэне жщпалы аурулар кафедрасы 2ЖТД кафедрасы
АЛМАТЫ КДЛАСЫНДА ИЕРСИНИОЗДЬЩ 1ШЕКТ1К ФОРМАСЫНЬЩ К0РШ1С1
Тушн: Казакстанда иерсиниоздын, асказан - шектж формасы кептеген наукастарда бактериемия жэне токсинемиямен, аурудын, бiрiншi KYнiнен полиорганды бузылыстармен сипатталады жэне осы себептен баска жедел инфекциялык аурулардан ерекшеленедь Асказан-шек жолдарынын, закымдануы гастроэнтерит TYрiнде керiнедi. Ауру узакка созылган немесе созылмалы агымда дамуы MYмкiн. Негiзгi сурак эсiресе жылдын, суык мезгiлiнде дамитын диареянын, этиологиялык магынасын ашу.
ТYЙiндi сездер: церсиниоз, инфекция нысаны - ауру жануарлар, бершу жолы - алиментарлы
1N.K. Ospanbekova, 1A.M. Dmitrovskiy, 2A.K. Ospanbekova
Asfendiyarov Kazakh National medical university, Wepartment of Infectious and Tropical Diseases, 2Department of GP
YERSINIOSES INTESTINAL FORM IN ALMATY
Resume: Yersinioses intestinal form in Kazakhstan takes place in the majority of bacteremia and toxinemiey causing poliofocal defeat from the first days of the disease, which in turn is distinguished from other common acute intestinal infections. Major affected the gastrointestinal tract in the form of gastroenteritis. It is necessary to note the presence of a prolonged or even chronic course of the disease. There is big problem of the etiological verification of diarrhea, especially occurring during the cold season (late autumn - winter - early spring). Keywords: yersinioses, the source of infection - sick animals, transmission-alimentary.
УДК 616.988.25-022.935.4 (574-20:574.52)
1Т.И. Нурмаханов, 1Е.Б. Сансызбаев, 2А.Б. Даниярова, 1З.З. Саякова, 1А.Н. Вилкова, 1О.У. Есходжаев, 1В.П. Садовская, 3Р. Сайлаубекулы, 3М.В. Кулемин
1РГП «КНЦКЗИ им. М. Айкимбаева» г. Алматы, 2КазНУ им. Аль-Фараби г. Аматы, 3РГУ «Шымкентская ПЧС» г. Шымкент
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ РАСПРОСТРАНЕННОСТИ ВИРУСА КРЫМ-КОНГО ГЕМОРРАГИЧЕСКОЙ ЛИХОРАДКИ В ЮЖНО-КАЗАХСТАНСКОЙ ОБЛАСТИ
Для изучения распространенности вируса Крым-Конго геморрагической лихорадки среди переносчиков в очагах ЮжноКазахстанской области были исследованы клещи методами ПЦР и ИФА. В результате проведенных анализов антигены и РНК вируса ККГЛ были обнаружены в клещах Н. апа^Нсит, Н. scupense, Н. asiaticum. Самым многочисленным видом клещей в Южно-Казахстанской области, доминирующим в отловах, были Н. anatolicum 47,3% с индексом инфицированности - 0,542, а самым распространенным и вторым по количеству 26,3% - H. scupense. Клещи этого вида были обнаружены в 11 из 12 обследованных районов с индексом инфицированности - 0,136. Ключевые слова: Крым-Конго геморрагическая лихорадка, Южно-Казахстанская область, иксодовые клещи, ПЦР в режиме реального времени, ИФА.
Введение. Крым-Конго геморрагическая лихорадка (ККГЛ) - зоонозная природно-очаговая арбовирусная инфекционная болезнь с преимущественно трансмиссивным механизмом передачи возбудителя. Возбудителем ККГЛ является РНК-содержащий вирус из семейства Bunyaviridae рода Nairovirus. Впервые данное заболевание описано М. П. Чумаковым в 1944 г. на Крымском полуострове [1, 2].
В Казахстане первые случаи заболевания ККГЛ были зарегистрированы в 1948 г. на территориях Махта-Аральского и Келесского (Сарыагашский) районов Южно-Казахстанской области (ЮКО) [3, 4]. Ретроспективный анализ всех случаев ККГЛ показал, что с 1948 г. по 2016 г. в ЮКО было зарегистрировано 308 случаев ККГЛ. Анализ заболеваемости по районам в период 1991-2016 г. г. выявил, что
наибольшее количество случаев заболеваний приходится на Созакский район - 38%. Основным сдерживающим фактором заболеваемости ККГЛ на современном этапе остаются мероприятия направленные на уничтожение клещей (обработка инсектоакарицидными препаратами домашних животных и территорий обитания клещей). Примером может служить случай снижения объема противоклещевых обработок в 2005 г. в связи с отсутствием финансирования из местного бюджета, которое вызвало рост случаев ККГЛ в ЮжноКазахстанской области, в 2005 - 2 случая, 2006 - 5, 2007 - 10, 2009 г. - 22.
Разнообразие природно-климатических условий ЮКО обеспечивает обитание широкого числа видов иксодовых клещей: Hyalomma asiaticum, H. anatolicum, H. scupense, H. marginatum, Dermacentor niveus, D. marginatus. Haemaphysalis punctata, H. sulcata, Boophilus calcaratus, [5]. Перечисленные виды клещей это только те, которые вовлечены в циркуляцию вируса ККГЛ. Подсчёт клещей на сельскохозяйственных животных в ЮКО, проведенный в 2010 - 2012 гг. Шымкентской ПЧС показал, что количество клещей снятых с животных может достигать 1,5 тысяч взрослых клещей, а количество нимф на одном животном может достигать иногда 2-3 тысяч экземпляров. В основном это были клещи H. asiaticum, H. marginatum, H. anatolicum, Haemaphysalis erinacei и Rhipicephalus schulzei.
Целью работы было определить опасные для населения виды клещей на исследованных территориях, показать их зараженность вирусом ККГЛ, создать карты мест сбора клещей и обнаружения положительных результатов исследования на ККГЛ. Материалы и методы.
Полевой материал - иксодовые клещи. Хранение и доставка материала в лабораторию осуществлялась в течение 5 дней после сбора при температуре +40С, где проводилась видовая идентификация [6, 7]. Клещи объединялись по виду и по местам сбора в пулы. Измельчение клещей проводили в пластиковых пробирках с металлическими шариками (3,2 мм) в гомогенизаторе Mini-Bead Beater (Малайзия) с добавлением 700 мкл питательной среды Игла МЕМ. Полученную суспензию хранили до начала исследования при t -800С.
Иммуноферментный анализ. Исследование клещей проводили комплектом реагентов Вектор Бест-КГЛ-антиген (Россия), считывание результатов - на анализаторе BioTek (США). Анализ проводили
согласно инструкции производителя
диагностического набора,
ПЦР в режиме реального времени (real time qPCR). Выделение РНК из суспензии клещей проводили набором QIAGEN RNaesea MiniKit (Германия). Выделенные пробы РНК хранились при температуре -800С до начала исследования. ПЦР анализ проводили со специфическими праймерами к вирусу ККГЛ (SIGMA).Амплификацию и учет результатов проводили на аппарате Light Cycler 2.0 (Австрия) согласно протоколу, предложенному B. Atkinson с соавторами [8].
Вычисление вирусоформности. Расчет индекса инфицированности проводили по формуле Беклемишева [9]: Х = (lgN - lgn0)*100/0.434*m где: X -процент зараженных эктопаразитов в исследуемой партии; lg N - десятичный логарифм общего числа исследованных проб; lg n0 - десятичный логарифм числа исследованных проб, давших отрицательный результат; m -среднее число эктопаразитов в пробе (пробах).
Картографирование. Полученная информация по клещам была оцифрована посредством создания электронных баз данных в программе Exel, а затем адаптирована для работы в программе ArcMap. Результаты, обсуждение.
Клещи были собраны с домашних животных: крупного рогатого скота (КРС), мелкого рогатого скота (МРС), лошадей и птиц, в местах их обитания в частных дворах и фермах. В природе на открытых стациях клещей собирали на флаги. Отловленных клещей затем помещали в индивидуальные пробирки, с обозначением места сбора, вида животного, даты сбора и количества экземпляров. В период с мая по сентябрь было собрано 2809 экземпляров клещей из 12 районов ЮжноКазахстанской области.
Определена видовая принадлежность 2809 экз. клещей из них было собрано: с КРС - 2039 экз., из скотопомещений - 366 экз., из открытых стаций - 167 экз., с лошадей - 95 экз., из нор больших песчанок - 52 экз., из курятников - 51 экз., с МРС - 33 экз., из гнезд хищных птиц - 6 экз. В результате проведенной идентификации, клещи были отнесены к 12 видам. Основная часть отловленных клещей 97,55% относились к семейству Ixodidaе, и, были представлены родами Hyalomma, Boophilus, Dermacentor, Rhipicephalus. Остальные 2,45% были отнесены к семейству аргасовых клещей (Argasidae) двух родов - Argas и Ornithodoros (таблица 1).
Таблица 1 - Видовое^ распределение собранных клещей в ЮКО
Исследуемые районы ЮКО Hyalomma scupense H. anatolicum H. asiaticum H. marginatum Haemaphysalis punctata H. sulcata Rhipicephalus. turanicus Rh. (Boophilus) annulatus Dermacentor niveus Ornithodoros papillipes Argas persicus Индекс инфицированности по районам
Сайрамский 55/9/0 120/12/4 - - 30/6/0 - - 30/3/0 - 6/1/0 - 1,778
Мактаральский 125/13/1 920/88/3 31/5/0 - - - 13/3/0 316/33/ 0 4/1/0 - 20/3/0 0,284
Созакский 175/20/0 21/2/0 66/7/2 - - - - - - - - 0,791
Байдибекский 65/12/0 - - 5/1/0 - 10/2/0 - - - - - -
Отырарский 149/17/0 - 64/6/0 - 5/1/0 - - - - - - -
Тулькубасский 55/9/0 20/2/0 - - - - - - - - - -
Казыгуртский 70/7/0 30/3/0 - - - - - - - - - -
Арысский - 36/4/0 62/7/0 - - - - - 10/2/0 - 38/5/0 -
Толебийский 10/1/0 - - - 5/1/0 - - - - - - -
Ордабасинский 5/1/0 - - - - - - - - - - -
Сарыагашский - 10/1/0 - - - - 1/1/0 - - - 5/1/0 -
Шардаринский 3/1/0 171/18/0 - - - - 5/1/0 16/4/0 - - - -
г. Туркестан 27/6/0 - - - - - - - - - - -
Итого: 739/96/1 1328/130 /7 223/25/ 2 5 /1/0 40/8/0 10 /2/0 19/5/0 362/40/ 0 14/3/0 6/1/0 63/9/0 -
Индекс инфицированности клещей 0,136 0.542 0,935
Итого (%) 26,3/30/ 1 47,3/40,6 /5,4 7,9/7,8/ 8 0,2/0,3 /° 1,4/2,5 /0 0,4/0,6/ 0 0,7/1,6/ 0 12,9/12, 5/0 0,5/0,9/ 0 0,2/0,3 /0 2,2/2,8/ 0
Самым распространенным видом клещей по результатам отлова в ЮКО оказался Н. scupense (26,3%), который был собран в 11 из 12 районов, далее Н. апа^Нсит (47,3%) несмотря на высокую численность, данный вид был отловлен только в 8 районах, из них большая часть 70% была отловлена в Мактааральском районе. В данном же районе собрано более 87% третьего по численности в выборке вида В. annulatus. Клещи рода Н. asiaticum были сняты с животных в 4 районах, а доля данного вида в общей выборке составила 7,9%. Численность остальных видов была менее 3%.
Всего методами ПЦР и ИФА было исследовано 320 пулов клещей в среднем по 10 экз. в каждой пробе. Всего было выявлено 10 положительных на ККГЛ проб. Для подтверждения результатов ИФА, положительные пробы были исследованы ПЦР «в режиме реального времени». Проведенный ПЦР анализ подтвердил наличие РНК вируса ККГЛ в 10 пробах.
Все положительные на ККГЛ образцы были получены от клещей рода Нуа1отта. Из 252 пулов клещей этого рода самыми зараженными были клещи Н. апа^Нсит - 2,8%. У клещей Н. asiaticum положительными были
2 пробы - 0,79%. Несмотря на широкую представленность клещей H. scupense РНК вируса была обнаружена только в 1 пробе что составило -0,39%. В остальных видах клещей антигены и РНК вируса ККГЛ не были обнаружены. Немаловажное значение имеет оценка инфицированности клещей вирусом ККГЛ, так как трансмиссивная передача вируса ККГЛ через клещей является отличительной чертой представителей рода Nairovirus от других родов семейства Bunyaviridae [10, 11, 12].
Индекс инфицированности клещей в исследованных пробах был самым высоким в клещах H. anatolicum с индексом инфицированности - 0,42%. У H. scupense индекс инфицированности составил - 0,136%; у клещей H. asiaticum индекс инфицированности составил - 0,935%. Общий индекс инфицированности клещей рода Hyalomma составил 0,445%. Самый высокий индекс инфицированности клещей был отмечен в Сайрамском районе - 1,778%, несколько ниже в Созакском - 0,791% и Мактааральском - 0,284%. Результаты проведенных исследований представлены на рисунке 1.
Рисунок 1 - Места сбора клещей и точки обнаружения положительных на ККГЛ клещей методами ИФА и ПЦР на территории ЮКО
Хозяевами-прокормителями имаго иксодовых клещей Hyalomma anatolicum и Н. scupense в населенных пунктах области являются сельскохозяйственные животные, однако жизненный цикл их различается. Н. ат^Ншт является трёххозяинным видом, имаго обнаруживают на животных с апреля по июнь, личинки - в июле-августе, а нимфы - осенью и зимой. Паразиты имеют одну генерацию в течение года. Н. scupense однохозяинный клещ - личинка, нимфа и половозрелые особи питаются на одном и том же животном, на котором происходит их линька [13]. Выводы.
1. Самыми распространенными видами клещей в ЮКО оказались Н. апа^Нсит и Н. scupense, представители этих видов были обнаружены практически во всех районах.
2. Наибольшее количество положительных пулов с антигеном к вирусу ККГЛ было выявлено в Н. апа^Нсит, вирус был обнаружен в 7 пробах из 10 положительных в ИФА, клещи Н. scupense являются
вторыми по численности, но с меньшей инфицированностью 0,136% видами клещей. Наиболее инфицированным видом можно считать Н. ат^Ншт с индексом инфицированности - 0,542%.
3.На основе результатов проведенных исследований мы можем предположить, что Н. asiaticum в ЮКО не является основным переносчиком ККГЛ в населенных пунктах, как это предполагалось ранее, так как инфицированность его низкая по сравнению с Н. апаШкит и Н. scupense.
4.Несмотря на широкое распространение иксодовых клещей на территории ЮКО, инфицированность ККГЛ исследованных нами видов была отмечена только в трех районах ЮКО: в Созакском, Сайрамском и Мактааральском.
Полученные данные позволят скорректировать профилактические противоклещевые мероприятия с учетом фенологии клещей Н. апаШкит и Н. scupense, как наиболее опасных для населения переносчиков вируса ККГЛ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1 Богомолов Л.И. Крымская геморрагическая лихорадка // Опыт советской медицины в Великой Отечественной войне 1941-1945 гг. - М.: 1955. - Т.31. - С. 245-261.
2 Casals J. Antigenic similarity between the virus causing Crimean hemorrhagic fever and Congo virus // Proc. Soc. exp. Biol. - N.Y: 2002. - №131. - P. 233 - 235.
3 Jung- Sun F., Genis D. E. natural foci of hemorrhagic fever tick in the semi-desert area of southern Kazakhstan (preliminary report) // Proc. IPVE AMS USSR - M.: 1965. - №7. - P. 312 - 314.
4 Темирбеков Ж. Т., Добрица П. Г., Контарук Б. И. и др. Исследование крымской геморрагической лихорадки в Чимкентской области Казахской ССР // Тр. ИПВЭ АМН СССР - М.: 1971. - Т. 19. - С. 160 - 166.
5 Кожабаев М. К., Аманжол Р., Тулеуханов А. Распространение иксодовых клещей на юге Казахстана // Теория и практика паразитарных болезней животных. - 2011. - №12. - С.242-244.
6 Галузо, И. Г. Кровососущие клещи Казахстана // Изд-во АН Казахской ССР. - 1947. - Т. 2. - C. 280-286.
7 Филиппова Н.А. Паукообразные. Аргасовые клещи (Argasidae) // Фауна СССР. - 1966. - Вып.3. - C. 256-261.
8 Atkinson, B. et al. Development of a real-time RT-PCR assay for the detection of Crimean-Congo hemorrhagic fever virus. // Vector Borne Zoonotic. - 2012. - №12. - P. 786-793.
9 Беклемишев В. Н. К изучению зараженности клещей переносчиков энцефалита методом биопробы // Вопросы вирусологии. - 1962. - №2. - С. 240-242.
10 Lasecka L., Baron M. D. The molecular biology of nairoviruses, an emerging group of tick-borne arboviruses // ArchVirol. - 2014. - 159(6). - Р. 1249-1265.
11 Gergova I., Kunchev M., Kamarinchev B. Crimean-Congo hemorrhagic fever virus-tick survey in endemic areas in Bulgaria // J MedVirol. - 2012. - 84(4). - Р. 608-614.
12 Anne J. Jaaskelainen, Hannimari Kallio-Kokko, Aykut Ozkul, et all. Development and Evaluation of a Real-Time RT-qPCR for Detection of Crimean-Congo Hemorrhagic Fever Virus Representing Different Genotypes // Vector Borne and Zoonotic Diseases. - 2014. - №14. - Р. 870-872.
13 Gharbi M, Aziz Darghouth M. A review of Hyalomma scupense (Acari, Ixodidae) in the Maghreb region: from biology to control // Parasite. - 2014. - №21. - Р. 42-48.
1Т.И. Нурмаханов, 1Е.Б. Сансызбаев, 2А.Б. Даниярова, 1З.З. Саякова, 1А.Н. Вилкова, 1О.У. Есходжаев, 1В.П. Садовская, 3Р. Сайлаубекулы, 3М.В. Кулемин
ЩАйцымбаев атындагы ЩЗИГО Алматы к,, 2Эл-Фараби атындагы К,аз¥УАматы к., 3Шымкент ОЩС Шымкент к.
OHTYCTIK КАЗАХСТАН ОБЛЫСЫ КЕНЕЛЕР1НДЕ КЦЫРЫМ-КОНГО ГЕМОРРАГИЯЛЫК ЦЫЗБАСЫ
ТАРАЛУЫНЫН, ЗЕРТТЕУ НЭТИЖЕЛЕР1
Тушн: Оцтустж Казакстан облысынын, ошактарында тасымалдаушылардын, шшде Кырым-Конго геморрагиялык кызбасы вирусынынын, таралуын бакылау ушш ПТР мен ИФТ эдiстерiмен кенелер зерттелшдг Журпзшген талдаулардын, нэтижесшде ККГК вирусынын, антиген мен РНК H. anatolicum, H. scupense, H. asiaticum кенелершде аныкталды. Оцтустж Казакстан облысында жиналган кенелердщ шшде басым белт H. anatolicum 47,3% болды, жуктыру керсетк^ - 0,542, ал ен, кеп таралганы мен саны бойынша екiншi кезекте H. scupense 26,3% болып аныкталды. Кенелердщ бул TYрi зерттелшген 12 ауданнын, шшде 11 аныкталды, жуктыру керсетк^ - 0,136. ТYЙiндi сездер: Кырым-Конго геморрагиялык кызбасы, Он^стж Казакстан облысы, шынайы уа;ыт режимi
1T.I. Nurmakhanov, 1E.B. Sansyzbayev, 2A.B. Daniyarova, 1Z.Z. Sayakova, 1A.N. Vilkova, 1O.U. Yeskhojayev,
1V.P. Sadovskaya, 3R. Saylaubekuly, 3M.V. Kulemin
1M. Aikimbayev's Kazakh Scientific Center for Quarantine and Zoonotic Diseases, Almaty 2Al-Farabi Kazakh National University, Almaty 3Shymkent antiplaque station, Shymkent
RESULTS OF RESEARCH OF PREVALENCE OF CRIMEAN-CONGO HEMORRHAGIC FEVER VIRUS IN THE SOUTH KAZAKHSTAN REGION
Resume: To study the prevalence of the virus Crimean-Congo hemorrhagic fever among carriers in the centers of the South Kazakhstan region have been investigated ticks by PCR and ELISA. As a result of analysis of antigens and CCHF virus RNA were detected in ticks H. anatolicum, H. scupense, H. asiaticum. The most abundant species of ticks in the South Kazakhstan region dominate the catches were H. anatolicum 47, 3% with an index of infection - 0, 542, and the most common and second in 26, 3% H. scupense, ticks of this species have been found in 11 of the 12 surveyed areas with an index of infection -0.136.
Keywords: Crimea-Congo hemorrhagic fever, South Kazakhstan region, ixodid mites, real-time PCR, ELISA.
