CC BY
5
УДК 616.36-002-022:578.891 ] -022.35«5»
М. Р. Зак, А. П. Римку с
ОЦЕНКА РОЛИ ВОДНОГО ФАКТОРА В СЕЗОННОСТИ
ГЕПАТИТА А
НИИ эпидемиологии, микробиологии и гигиены Минздрава Литовской ССР, Вильнюс
»
В литературе описаны различные по масштабу водные эпидемические вспышки гепатита А [1, 2, 6]. Водная вспышка гепатита А зарегистрирована и на территории Литовской ССР [3]. Однако удельный вес заболеваний, связанных с локальными вспышками, в общей многолетней заболеваемости гепатитом А незначителен.
Как правило, общий уровень заболеваемости гепатитом А, ее многолетнюю и годовую динамику повсеместно определяют спорадические случаи заболеваний. В связи с этим исследование закономерностей эпидемического процесса спорадической заболеваемости гепатитом А, особенно в периоды сезонного подъема, имеет важное значенне для разработки мер профилактики этой инфекции.
Изучение иммунологической структуры здорового населения двух городов Литовской ССР (Вильнюса и Алиту-са), проведенное нами с использованием энзимо-иммуно-логического метода в лаборатории гепатита А Института полиомиелита и вирусных энцефалитов АМН СССР, показало, что в обоих городах более 80 % всех в возрасте 20 лет, в анамнезе которых нет указаний на перенесение манифестной формы гепатита, имеют антитела к вирусу гепатита А. Результаты исследований свидетельствуют о наличии скрытой фазы эпидемического процесса и распространенности субклинических форм заболеваний.
Высокая интенсивность циркуляции возбудителя может иметь место лишь при условии легко реализуемого механизма передачи инфекцин: воздушно-капельного и водного.
Многолетние эпидемиологические наблюдения за заболеваемостью гепатитом А на территории Литовской ССР не подтвердили роль воздушно-капельного механизма передачи инфекции.
Возможность широкого распространения вируса гепатита А водным путем в последние годы была обоснована в научном обзоре ВОЗ [5], в котором утверждается, что ряд кишечных вирусов, в том числе вирус гепатита А, может быть выделен из распределительных систем коммунальных водопроводов при обычном обеззараживании воды хлорированием.
Как известно, индикаторным показателем степени антропогенного загрязнения питьевой воды является ее коли-индекс. С целью количественного измерения связи между качеством питьевой воды (среднемесячный процент нестандартных проб по коли-нндексу) и интенсивными пока-
зателями среднемесячной заболеваемости гепатитом А в Вильнюсе, Клайпеде, Тельшяй были рассчитаны коэффициенты линейной корреляции (г) [4].
При их вычислении учитывалась возможность запаздывания времени, после которого проявляется действие фактора (качество питьевой воды) на заболеваемость гепатитом А (инкубационный период и формирование вирулентного штамма). С этой целью осуществлялся сдвиг значений показателей заболеваемости по отношению к времени (1) ухудшения качества воды на 1, 2 и 3 мес.
Высокая степень корреляции между исследованными показателями (¿ = 3 мес) выявлена в Вильнюсе, средняя степень корреляции имела место в Клайпеде (t= 1 мес) и в Тельшяй [t= 1—2 мес). Указанное запаздывание роста заболеваемости гепатитом А после ухудшения качества питьевой воды по саннтарно-бактериологическим показателям укладывается в сроки инкубационного периода заболевания и возможные сроки сохранения жизнеспособности вируса гепатита А в водопроводной сети.
Таким образом, полученные данные свидетельствуют о большой значимости водного фактора в распространении вируса гепатита А и указывают на причины сезонного подъема заболеваемости этой инфекцией в условиях нормально функционирующих систем коммунального водоснабжения.
Литература
1. Дмитриева Р. А., Нечипоренко Н. Г. Методические рекомендации по изучению роли водного фактора в заболеваемости населения вирусным гепатитом А. — М., 1986.
2. Жуматов X. Ж.. Дардик Ф. Г. Инфекционный гепатит. — Алма-Ата, 1962.
3. Зак М. Р., Молибошко И. П.. Лившиц И. /1. // Прибалтийский воен. округ: Воен.-мед. отдел. Сб. науч. работ. — Рига, 1967. — Вып. 3. — С. 279—287.
4. Кузнецов В. К. Статистическая обработка первичной медицинской информации.—М., 1978.
5. Мельник Дж. JI., Герба Ч. П., Уоллис К. // Бюл. ВОЗ, 1978. —Т. 56, № 4.— С. 409—415.
6. Manual of Virology. — Geneva, 1983.
Поступила 16.11.87
УДК 614.777(260):628.1.03: [579.841.114-379.842.16]:579.252.55:615.33
Н. Н. Мойсеенко
РЕЗИСТЕНТНЫЕ К АНТИБИОТИКАМ ШТАММЫ КЛЕБСИЕЛЛ И ПСЕВДОМОНАС АЭРУГИНОЗА В ПРИБРЕЖНОЙ МОРСКОЙ ВОДЕ
Московский НИИ гигиены им. Ф. Ф. Эрисмана
Стремительное распространение и неупорядоченное использование антимикробных препаратов в медицине и ветеринарной практике, пищевой промышленности, животноводстве, рыбных хозяйствах и т. д. привело к появлению и широкой циркуляции в окружающей среде резистентных к лекарственным препаратам микроорганизмов.
Сточные и поверхностные воды, в том числе и морские прибрежные воды, содержат устойчивые бактерии, которые попадают туда с продуктами жизнедеятельности человека и животных. Основным источником приобретенной
лекарственной устойчивости энтеробактерий являются плаз-миды (И-плазмиды), причем наиболее распространены среди энтеробактерий именно конъюгативпые (трансмиссивные) плазмиды, т. е. способные к передаче генов, обеспечивающих резистентность. Таким образом, поверхностные и сточные воды могут рассматриваться в качестве источника всех плазмидных типов, циркулирующих и подвергающихся селекции при соответствующих условиях окружающей среды, и представляют собой естественную среду, з
Таблица 1
Резистентность к антибиотикам штаммов клебсиелл и псевдо-монас аэругиноза, выделенных из морской воды
Число антибиотиков Количество резистентных итаммов, %
клебсиелл псевдомонас аэругиноза
' 1 » 3 . | 2 3
0 27,7 2,6 3,4
1 17,0 6,5 6,9
2 36,2 19,5 24,1
3 17,0 33,8 41,4
4 2,1 20,8 17,2 63,2 5,9
5 5,2 6,9 31,6 5 17,6
6 10,4 5,3 10 64,7
7 1,3 20 5,9
8 50 5,9
9 15
10
Примечание. Здесь и в табл. 2: 1 — Черное море, 2 — Балтийское море, 3 — Кольский залив.
которой может происходить перенос R-плазмнды от одних бактерий к другим.
Нами проводилось изучение распространения таких резистентных к антибиотикам потенциально патогенных микроорганизмов, как клебсиеллы (из семейства энтеробакте-рий) и псевдомонас аэругиноза, роль которых в патологии человека в настоящее время резко возросла, в прибрежной морской воде трех морей: Черного, Балтийского и Баренцева (Кольский залив), в районе крупных населенных пунктов.
Для определения чувствительности выделенных штаммов к антибиотикам использовали посевы суточных культур микроорганизмов репликатором на чашки с мясопеп-тонным агаром, содержащим антибактериальные препараты в следующих концентрациях (в мг/мл): ампициллин (Ар)—0,1. хлорамфеникол—(Cm)—0,05, гентамицин (Gm) — 0,005, кенамицин (Km) — 0,006, стрептомицин (Sm) —0,025, тетрациклин (Тс) —0,03, рифампицин (Rif)—0,1, карбеннцнллин (СЬ)—0,1, налнднксовая кислота (Nal)—0,05, кефзол (Cf)—0,1. Одновременно производился контрольный посев на мясопептонный агар без антибиотика. По наличию роста делали вывод о резистентности того или иного штамма к данному антибиотику. Результаты представлены в табл. 1 и 2.
Количество резистентных и полнрезистентных (устойчи-
Таблица 2 Частота случаев резистентности к антибиотикам
Антибиотик Количество резистентных штаммов, %
клебсиелл псевдомонас аэругиноза
I * 3 I 2 3
Ар 23,4 75,3 82,8 100 100 100
Cm 21,3 80,5 75,9 100 100 100
Gm 1,3 70
Km 6,4 1,3 100 80 82,4
Sm 19,1 33,8 24,1 78,9 100 88,2
Тс 2,1 12,9 3,4 100
Nal 2,1 3,4 36,8 75 100
Rif 2,6
СЬ 12,8 74,0 68,9 30 5,9
Cf 48,9 53,2 17,2 100 100 100
вых к трем и более антибиотикам) штаммов клебсиелл а прибрежной морской воде Балтийского моря и Кольского залива было близким и составило для резистентных штаммов 97,4 и 96,6%, для полирезистентных 71,4 и 65,5%. В прибрежной морской воде Черного моря как резистентных, так и полнрезистентных штаммов клебсиелл было меньше — 72,3 и 19,1 % соответственно. Необходимо отметить, что уровень санитарно-показательных микроорганизмов в воде Черного моря также был значительно ниже^ чем в воде Балтийского моря и Кольском заливе.
Штаммы микроорганизмов, выделенные из различных источников, отличались спектрами резистентности к антибиотикам. Распределение антибиотиков по частоте случаев резистентности к ним было довольно близким у клебсиелл из воды Балтийского моря и Кольского залива: Ар и Cm — антибиотики, к которым была устойчива большая часть всех штаммов, затем следовали карбеницнллин, стрептомицин, кефзол и далее — Тс, Rif, Gm с Km для клебсиелл из Балтийского моря и Тс с Nal—для клебсиелл из Кольского залива. У клебсиелл из прибрежной воды Черного моря на первом месте среди антибиотиков по частоте резистентности к ним стоял Cf, а затем уже следовали Ар, Cm, Sm, Cb, Km, Тс и Nal.
У резистентности к антибиотикам псевдомонас аэругиноза есть свои особенности: эти бактерии имеют высокую степень хромосомной резистентности ко многим антибиотикам, дополнительная приобретенная резистентность (обусловленная R-плазмидамн) является не совсем разрешенной проблемой для этой группы, и есть только единичные литературные данные о наличии трансмиссивных R-плазмид у этих микроорганизмов. Исследованные нами штаммы А псевдомонас аэруглиноза были полирезистентны, все штаммы были устойчивы к Ар, Cm, Cf. Все штаммы псевдомонас аэругиноза, выделенные из Балтийского моря, былн резистентны к Тс, тогда как штаммы этих микроорганизмов из воды Черного моря и Кольского залива к этому антибиотику были чувствительны. Отмечались различия в чувствительности и к другим антибиотикам: все штаммы псевдомонас аэругиноза из воды Кольского залива были резистентны к Nal, из воды Балтийского моря 75 % и иа Черного моря только 36,3%; 70% штаммов псевдомонас аэругиноза, выделенных из воды Балтийского моря, были резистентны к Cm, все штаммы другого происхождения были чувствительны к этому антибиотику.
Выборочно у 38 штаммов полирезистентных клебсиелл» выделенных из воды Кольского залива, определяли наличие конъюгативных R-плазмид методом передачи устойчивости при конъюгации от исследуемых штаммов штамму Е. coli К 12, резистентному к Rif. Конъюгацию проводили общепринятым методом. Исследуемые штаммы выступали в качестве доноров генетического материала, штамм Е. coli ф К 12 — реципиента. Доноры были проверены на чувстви--^ тельность к 0,1 мг/мл Rif.
Ночные культуры донора и реципиента выращивали при 35 °С на мясопептонном бульоне. 0,5 мл культуры донора и 1 мл реципиента помещали в 3 мл стерильного мясопеп-тонного бульона и смесь инкубировали при 35 °С в течение 24 ч в наклонном положении (для улучшения аэрации) . Затем 0,05 мл соответствующих десятичных разведений смеси помещали на селективные чашки с агаром, содержащим 0,1 мг/мл Rif и один из антибиотиков, к которому донорская культура была устойчива. Селективные среды инкубировали при 35 °С в течение 24 ч. Частоту передачи плазмид определяли отношением количества предполагаемых трансконъюгантов, выросших на селективной среде, к первоначальному количеству донорских клеток. У полученных трансконъюгатов определяли чувствительность ко всем антибиотикам, к которым был резистентен реципиент.
Из 38 штаммов клебсиелл 17 (44,7 %) передавали устойчивость всю или частичную. Передача маркеров резистентности от клебсиелл штамму Е. coli К 12 представлена в табл. 3.
Из 17 штаммов, передававших маркеры устойчивости штамму К 12, 6 передавали плазмиды, обеспечивающие устойчивость к трем и более антибиотикам. 3 штамма на->
Таблица 3
Частота передачи детерминантов лекарственной устойчивости от полирезистснтных штаммов клебсиелл, выделенных из воды Кольского залива, штамму Е. coli К 12
Характер устойчивости донора
СслектипиыП антибиотик
Частота передачи
Переданные маркеры
$1р—Sm—Cb—Cf—Cft
Ар—Cf—Cft
Cm—Sm Ap—Cb—Tc
Ap —Cm—Sm —Cb —Tc
I^Sm—Cb—Tc
Ap—Cm—Sm—Cb—Km—Tc
Ap—Cm—Sm—Cb—Km—Tc
Sm—Tc—Cf—Cft
' Ap—Sm—Cb Cm—Sm—Cb— Km
:Sm—Cm—Km Ap—Cb—Cf—Cft
Ap—Cb—Cm—Sm
Ap—Cb—Sm—Cft
Ap 6,3- io-5
Cb —
Sm 2,3-10~8
Cf —
Cft 1,2-10"8
Ap —
Cf —
Cft 6,3-IO-7
Cm —
Sm 7,0-10~7
Ap —
Cb —
Tc 3,0-IO-6
Ap 1,1-10-''
Cm 1,6-10-1
Sm 2.6- 10"r"
Cb 1,4- I0-B
Tc 9,1-10-»
Sm 6,2-10-"'
Cb —
Tc 1,2- IO-'
Ap 4,3- 10-'1
Cm 1,0-IO"1
Sm 4,4- IO-5
Cb 1,8- IO"7
Km 1,8-IO-7
Tc 1,4- 10~7
Ap 1.3-10-2
Cm 1,2- IO"1
Sm 1,8-10~2
Cb 1,4- I0--
Km 1,5-10-'-
Tc 2,3- IO"3
Sm 7,1-10~5
Tc —
Cf —
Cft 9,3-10-'
Ap —
Sm 1,0-10-'
Cb —
Cm 2,4- I0_l
Sm 2,7-10-'
Cb —
Km 6,9-10-a
Sm _
Cm 1,6- IO"3
Km 0,2-10~5
Ap —
Cb —
Cf —
Cft 1,2-10"'
Ap —
Cb —
Cm 4,4- 10-'
Sm —
Ap —
Cb —
Sm 1,8- 10~6
Cfl 0,6-10"5
Ap—Cb—Sm
Sm Cft
Cft Sm
Tc
Ap—Cm—Sm—Cb—Tc Cm Sm
Ap—Cm—Sm—Cb—Tc lac+ Ap—Cm—Sm—Cb—Tc—lac+
Sm—Tc
Sm—Tc Ap—Cm
Cm Sm
Ap—Cm—Sm—Cb—Km—Tc—lac+ Ap—Cm—Cb—Km—Tc—lac+ Ap—Cm—Cb—Km—Tc—lac+
Ap—Cm—Sm—Cb—Km—Tc Cm
Ap—Cm—Sm—Cb—Km—Tc—lac+
Ap—Cm—Sm—Cb—Km—Tc Ap—Cm—Sm—Cb—Km—Tc—lac+ Ap—Cm—Sm—Cb—Km—Tc—lac+
Sm
Cft Sm Cm
Cm—Sm—Km Cm—Sm—Km
Cm Km
Cft Cm
Sm Cft
Продолжение табл. 3
Характер устойчивости донора Селективный антибиотик Частота передачи Переданные маркеры
Ар -СЬ—Тс Ар 3,4- Ю-5 Ар—СЬ—Тс
СЬ з,о- ю-5 Ар—СЬ—Тс
Тс 2,1- Ю-5 Ар—СЬ—Тс А
Ар —Cb—Sm—Km Ар —
СЬ —
Sm 1,4- Ю-5 Sm—Km
Km 0,6- ю-6 Km
ряду с устойчивостью передавали штамму Е. coli К12 способность разлагать лактозу (1ас+). У одного штамма — №8 — отмечалась высокая частота передачи плазмиды, обусловливающей множественную устойчивость, которая составляла 1,5-Ю-2. Высокая частота передачи была характерна для плазмид, определяющих резистентность к Cm (в среднем — 1,0-10_|). Многие штаммы клебсиелл содержали комплексы плазмид, которые, передаваясь раздельно, обусловливали у трансконъюгантов различный фенотип по отношению к антибиотикам.
Таким образом, полученные результаты позволяют говорить о значительном распространении резистентных и полирезистентных штаммов клебсиелл и псевдомонас аэру-гнноза в прибрежной морской воде, соотношение которых меняется в зависимости от объекта. Выявлены различия в распределении антибиотиков по частоте резистентности к ним изучавшихся микроорганизмов в различных климатических зонах. Почти половина из 38 резистентных штаммов клебсиелл обладала конъюгативнымн плазмндами.
Полученные нами сведения о наличии полирезистентных клебсиелл в прибрежной морской воде, подвергнутой влиянию хозяйственно-бытовых стоков, соответствуют данным литературы. Так, Т. D. Fontain и A. VV. Jioadly [4] сообщали о наличии 87,8 % полнрезистентных фекальных колнформ в госпитальном стоке и 42,6 % в бытовых сточных водах. J. В. Bell и соавт. [1] приводят данные о 42,9 % полирезистентвых колиформ в речной воде. Штаммы клебсиелл, выделенные нами из прибрежной морской воды, были устойчивы к тем же антибиотикам, которые использовали J. В. Bell [1] и М. D. Cooke [2], хотя процент микроорганизмов, устойчивых к Cm, наблюдаемый нами, был выше, чем тот, о котором сообщали указанные выше авторы, а также для британских рек — Н. \V. Smith [5] и для акватории залива Мобиля — Т. W. Feary [3] и др. Разумеется, нельзя проводить полной аналогии при сопоставлении результатов, полученных для колиформ и фекальных колнформ, и нашими данными по клебсиеллам, поскольку последние — лишь составляющая часть этой
большой группы микроорганизмов. Но корреляция между процентом резистентных колиформ и процентом резистентных клебсиелл, несомненно, должна быть очень высокой.
Поскольку существующие очистные сооружения не являются препятствием на пути поступления резистентных бактерий в поверхностные воды, в том числе и морские, используемые в соответствующих климатических зонах для рекреации, создается возможность поступления резистентных бактерий в организм человека при купании. Кроме тоге, в естественной водной среде может происходить передача конъюгатнвных R-плазмнд другим бактериям, в том числе и патогенным, хотя существуют и другие, помимо прямой конъюгации, генетические механизмы передачи R-плазмид. Экспериментальные работы по передаче R-плазмид в пределах семейства энтеробактсрий широко из-—. < вестны. В литературе появляются сообщения [3] о воз€ можном приобретении патогенными микроорганизмами (сальмонеллами) R-плазмид путем переноса в речной воде, что подтверждает предположение M. D. Cooke [2] о преимуществе естественной водной среды для селекции бактерий с R-плазмидами. Возникновение же заболеваний, вызванных устойчивыми штаммами, может создать определенные трудности при выборе препаратов для лечения.
Литература
1. Bell J. В., Macrae W. R„ Elliott Y. E. //Appl. environm. Microbiol. — 1980. — Vol. 40. — P. 486—491.
2. Cooke M. D. // N. Z. J. Mar. Freshwater Res.— 1976.— Vol. 10. — P. 391—397.
3. Feary T. U/., Sturtevant А. В., Lankjord /.//Arch, environm. Hlth. — 1972, —Vol. 25.— P. 215—270.
4. Fontaine T. D„ Hoadly A. \V. // Hlth. Lab. Sei. — 1976. — Vol. 13. — P. 238—245. л
5. Smith H. W. II Nature. — 1970. — Vol. 228. — P. 1286-^T 1288.
Поступила 21.10.87
УДК 628.35:(028.38:579
Л. А. Виноградова
ОЦЕНКА ВЛИЯНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ ОЧИЩЕННЫХ СТОЧНЫХ ВОД НА ВЫЖИВАЕМОСТЬ МИКРОФЛОРЫ
Московский НИИ гигиены им. Ф. Ф. Эрисмана
Определение санитарной надежности очистки сточных вод на биологических сооружениях требует изучения поведения и выживаемости микрофлоры, имеющей как санитарное, так и эпидемиологическое значение [1—4].
Исследования проведены на двух станциях аэрации, работающих по одинаковой технологической схеме очистки. В сточных водах, подаваемых на 1-ю станцию аэрации, преобладали производственные трудноокисляемые загрязнения (сток I), на 2-ю — легкоокисляемые органические вещества (сток II). На каждой станции в разные периоды года отбирали среднесуточные пробы биологиче-
ски очищенных сточных вод, которые разбавляли дехлорированной водопроводной водой в емкостях от 5 до 10 л. Во время опыта в модельных водоемах поддерживали температуру 20—22 °С. Процессы самоочищения изучали в течение 20 сут [4].
Во всех пробах воды были обнаружены индикаторные группы бактерий (E. coli, Enterococcus) и потенциально патогенные микроорганизмы (Klebsiella, протеолитические бновары Str. faecalis, Citrobacter, Enterobacter, Pr. vulgaris и Pr. mirabilis, бактерии вида Ps. aeruginosa, Aeromonas, неферментирующие грамотрнцательные бактерии родов
