Научная статья на тему 'РЕКОНСТРУКЦИЯ СТРУКТУРЫ ЭНДОНУКЛЕАЗЫ TURICELLА OTITIDIS - ФАКТОРА ПАТОГЕНЕЗА ГНОЙНЫХ ОТИТОВ'

РЕКОНСТРУКЦИЯ СТРУКТУРЫ ЭНДОНУКЛЕАЗЫ TURICELLА OTITIDIS - ФАКТОРА ПАТОГЕНЕЗА ГНОЙНЫХ ОТИТОВ Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

CC BY
225
15
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Фионова Т.В., Рябинин И.А., Кузьмин Д.М.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Текст научной работы на тему «РЕКОНСТРУКЦИЯ СТРУКТУРЫ ЭНДОНУКЛЕАЗЫ TURICELLА OTITIDIS - ФАКТОРА ПАТОГЕНЕЗА ГНОЙНЫХ ОТИТОВ»

Проблемы медицинской микологии. 2020, Т.22. №3

импульсный лазер на красителе «Sclero Plus» (585 нм), лазер на парах меди «Яхрома-Мед» (578 нм) и Nd:YAG (КТР 532 нм) лазер.

Результаты. На кафедре дерматовенерологии СЗГМУ им. И.И. Мечникова за последние 2 года нами пролечено более 200 пациентов в возрасте от 18 до 93 лет. Группу больных с капиллярными гемангиомами составили 30 человек. Использовали лазер «Яхрома-Мед», мощность - 0,7-0,9 Вт, время экспозиции - 0,2 сек. После однократной лазерной процедуры эффект наступал в 100% случаев.

Группу больных с кавернозными гемангиомами в виде одиночных, опухолевидных сосудистых образований различной величины составили 65 человек. У 39 пациентов в возрасте 30-60 лет наблюдали локализацию в области красной каймы губ. Для лечения этих больных лазеротерапию проводили однократно или многократно, что зависело от размера образования. Применяли лазер «Sclero Plus». Эффективность терапии - 98,8%.

45 человек вошли в группу больных с плоскими гемангиомами. Это были генерализованные флебэктазии. Лечение такой патологии требует несколько сеансов. Использовали лазер «Яхрома-Мед», параметры лазерного воздействия: мощность - 0,85-0,9 Вт, время экспозиции - 0,2 сек. Интервал между процедурами - 2 месяца. Эффект после терапии - выраженный в 97,9% случаев.

Группу больных с артериальными и артерио-венозными гемангиомами в виде выбухающих элементов ярко-красного цвета с четкими границами составили 60 человек. Применяли Nd:YAG (КТР) лазер. У этих пациентов 100% эффект наступил после однократного сеанса лазеротерапии. При динамическом наблюдении после лазеротерапии в течение 1-5 лет случаев рецидивирования сосудистых образований не выявили.

Выводы. Применение лазеров, селективных для лечения сосудистой патологии кожи, наиболее обосновано и эффективно.

РЕКОНСТРУКЦИЯ СТРУКТУРЫ ЭНДОНУКЛЕАЗЫ TURICELLA OTITIDIS - ФАКТОРА ПАТОГЕНЕЗА ГНОЙНЫХ ОТИТОВ

Фионова Т.В. (научные руководители: Рябинин И.А., Кузьмин Д.М.)

Северо-Западный государственный медицинский университет им. И.И. Мечникова, Санкт-Петербург, Россия

STRUCTURE RECONSTRUCTION OF TURICELLA OTITIDIS ENDONUCLEASE AS A FACTOR OF PATHOGENESIS IN PYOGENOUS OTITIS

Fionova T.V. (scientific supervisors: Riabinin I.A., Kuzmin D.M.)

North-Western State Medical University named after I.I. Mechnikov, St. Petersburg, Russia

Цель исследования - реконструкция вторичной и третичной структуры сек-ретируемой эндонуклеазы Turicelа otitidis.

Материалы и методы. Последовательность фермента микроорганизма извлекли с помощью ресурса NCBI, она резервирована под N WP_082245182.1 [Binnenkade L., et al., 1996]. Изучение структурных свойств последовательности выполнили в редакторе Swiss-Model.

Результаты. Из «библиотеки» редактора подобрали 50 кристаллографических моделей, сходных с анализируемым белком, из них в дальнейший анализ включили 6 наиболее близких. Такими оказались: ноктурнин, 2,5-фосфодиэстераза, маннозил-6-фосфатаза, бета-гемолизин и эндонуклеаза-фосфатаза, а также белок, сходный с 6-ой субъединицей транскрипционного комплекса CCR4-NOT. Данные глобулярные белки имеют заметные структурные различия, в связи с этим строение молекулы анализируемого фермента остаётся дискуссионной. Так, эндо-экзонуклеаза/фосфатаза (QMEAN -8,33) содержит 5 бета-листов, 2 участка взаимодействия типа «альфа-бета-альфа», 9 бета-шпилек, 12 бета-выступов, 22 бета-тяжа, 11 альфа-спиралей, 2 участка межспирального взаимодействия, 34 бета-поворота, 4 гамма-поворота, 1 дисульфидную связь. Этот белок связывает глицерин и ионы Zn+2. Молекула ноктурнина (QMEAN -4,80), связывающая Mg+2, включает 3 бета-листа, 2 участка взаимодействия типа «альфа-бета-альфа», 5 бета-шпилек, 6 бета-выступов, 15 бета-тяжей, 8 альфа-спиралей, 5 участков межспирального взаимодействия, 28 бета-поворотов, 3 гамма-поворотов.

Заключение. T. otitidis является важным с клинической точки зрения представителем микробиоты наружного уха. Патогенез инфекционного процесса, вызванного этой бактерией, изучен недостаточно. Для его понимания и разработки новых «таргетных» средств терапии необходим анализ факторов вирулентности возбудителя. Особого внимания заслуживает сходство эндонуклеазы с белками человека и млекопитающих, что, теоретически, может обусловливать аутоиммунный ответ.

ВЛИЯНИЕ ПУТИ ВВЕДЕНИЯ ШТАММА FRANCISELLA TULARENSIS 15/23-1 AIglC sodB recA НА УРОВЕНЬ АКТИВАЦИИ СУБПОПУЛЯЦИЙ ЛИМФОЦИТОВ МЫШЕЙ ЛИНИИ BALB/C

Фирстова В.В., Карцева А.С., Силкина М.В., Калмантаева О.В., Комбарова Т.И., Павлов В.М.

Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии,

Оболенск, Россия

THE INFLUENCE OF THE ROUTES IMMUNIZATION WITH FRANCISELLA TULARENSIS 15/23-1 AIGLC SODB RECA ON THE BALB/C MICE LYMPHOCYTES LEVEL ACTIVATION

Firstova V.V., Kartseva A.S., Silkina M.V., Kalmantaeva O.V., Kombarova T.I., Pavlov V.M.

State Research Center for Applied Microbiology & Biotechnology, Obolensk, Russia

Интрадермальный путь введения вакцин является наиболее распространенным, так как признано, что именно он является наиболее эффективным для формирования протективного иммунного ответа. Однако в случае необходимости формирования мукозального иммунного ответа более эффективным могут оказаться интраназальное или интрагастральное введение вакцины.

Цель исследования - оценить влияние способа введения штамма-кандидата в вакцинные Francisella tularensls 15/23-1 AIglC sodB recA на иммунный ответ мышей линии Balb/c.

Материалы и методы. Мышей иммунизировали однократно, интраназально или внутрижелудочно бактериями F. tularensls 15/23-1 AIglC sodB recA. На 30 сутки после иммунизации получали спленоциты и инкубировали с кислотонерас-творимым комплексом F. tularensls (КНК). Через 4, 18 ч после инкубирования фенотипировали лимфоциты моноклональными антителами CD3 PerCP cy5.5, CD8 PE, CD19 APC, CD69 FITC; CD4 APC, CD107a PE, IFN-yPE. Анализ проводили на проточном цитофлюориметре FACSArla III (Becton Dickinson, США) в программе BD FACSDiva. В качестве контроля выступали клетки, инкубируемые в отсутствии антигена.

Результаты. После внутрижелудочного введения бактерий F. tularensls 15/23-1 AIglC sodB recA в организме мышей формировался пул В- и Т- лимфоцитов, способных активироваться под влиянием КНК In vltro, что косвенно свидетельствует о формировании клеток памяти. Были выявлены как активированные В-лимфоциты (CD19+CD69+) - 57%, Т-хелперы (CD3+CD4+CD69+) - 28%, так и активированные цитотоксические лимфоциты (CD3+CD4-CD107a+) - 15,29 %.

После интраназального введения бактерий F. tularensls 15/23-1 AIglC sodB recA в организме мышей формировался только пул Т-лимфоцитов, способных активироваться под влиянием КНК ln vltro.

При внутрижелудочном или интраназальном введении бактерий формировалась субпопуляция Т-лимфоцитов, способных синтезировать IFN-y в присутствии КНК ln vltro (CD3+CD8+ IFN-Y+) - 19,1% и 24,9%, соответственно.

Выводы. Внутрижелудочный путь введения бактерий F. tularensls 15/231 AIglC sodB recA индуцировал формирование более выраженных специфических иммунных реакций.

Работа выполнена в рамках Отраслевой программы Роспотребнадзора.

ИССЛЕДОВАНИЕ ВЛИЯНИЯ 5-БРОМ-7-ХЛОР-4,4А-ДИГИДРОКСАНТОНА НА СПОСОБНОСТЬ STAPHYLOCOCCUS AUREUS СИНТЕЗИРОВАТЬ ФЕРМЕНТ ПЛАЗМОКОАГУЛАЗУ

Фролова В.В., Гурина С.В., Чернов Н.М., Яковлев И.П.

Санкт-Петербургский государственный химико-фармацевтический университет, Санкт-Петербург, Россия

STUDY OF THE EFFECT OF 5-BROMINE-7-CHLORINE-4,4A-DIHYDROXANTHONE ON THE ABILITY OF STAPHYLOCOCCUS AUREUS TO SYNTHESIZE THE ENZYME PLASMOCOAGULASE

Frolova V.V., Gurina S.V., Chernov N.M., Yakovlev I.P.

St. Petersburg State Chemical-Pharmaceutical University, St. Petersburg, Russia

Цель исследования - определение предполагаемого механизма действия активного в отношении грамположительных бактерий 5-бром-7-хлор-4,4а-дигидроксантона, а именно - воздействия на способность Staphylococcus aureus синтезировать фермент плазмокоагулазу.

Материалы и методы. Для определения действия 5-бром-7-хлор-4,4а-дигидроксантона на активность образования фермента плазмокоагулазы Staphylococcus aureus использовали метод, основанный на свертывании фибрина цитратной плазмы под воздействием фермента (Государственная фармакопея РФ XIV изд., Т. 1). Цитратную плазму разводили 0,9% раствором натрия хлорида в соотношении 1:5, к 0,5 мл полученного раствора добавляли инокулят стафилококка (105 КОЕ/мл) и исследуемое соединение в субстатической (1 мкг/мл) и статической (2 мкг/мл) концентрациях, инкубировали при 37 оС 3 часа и определяли оптическую плотность образовавшегося сгустка фибрина на фотометре «Эксперт-003». Контролем служила плазма с инокулятом без дигидроксантона. Для подсчета выживших клеток при действии разных концентраций исследуемого соединения делали высевы на мясо-пептонный агар (МПА). Определяли удельную активность образования фермента.

Результаты. Интенсивность образования сгустка зависела от концентрации дигидроксантона и количества выживших клеток стафилококка. При концентраци-

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.