CC BY
147
Методические рекомендации
РЕКОМЕНДАЦИИ ПО БОРЬБЕ С ОПИСТОРХОЗОМ ПЛОТОЯДНЫХ ЖИВОТНЫХ В УСЛОВИЯХ ЗАПАДНОЙ СИБИРИ
С.К. ШИБИТОВ соискатель Р.Т. САФИУЛЛИН доктор ветеринарных наук
Всероссийский научно-исследовательский институт гельминтологии им. К.И. Скрябина, 117218, г. Москва, ул. Б. Черемушкинская, 28,
e-mail: vigis@ncport. ru (Одобрены секцией «Инвазионные болезни животных РАСХН 25 сентября 2009 г., протокол № 2)
Определение болезни, возбудитель. Описторхоз - биогельминтоз плотоядных и человека, вызываемый трематодой, паразитирующей в желчных протоках печени, желчном пузыре и реже в протоках поджелудочной железы. Возбудитель: трематода Opisthorchis felineus. Описторхоз при длительном течении вызывает хроническое заболевание печени, желчного пузыря и поджелудочной железы, способствует раку печени и желчных протоков. Тело двуустки кошачьей плоское, суженное спереди. Длина 8-14 мм, ширина 1,23,5 мм.
Диагностика. Диагноз на описторхоз ставят на основании клинической картины, эпизоотологических данных и результатов копроскопических исследований.
Паразитологическая диагностика, основанная на выявлении яиц гельминтов в фекалиях, является в настоящее время единственным средством подтверждения диагноза. Для улучшения выявляемости гельминтов применяют провокационные тесты c применением празиквантела. Более распространенными для диагностики описторхоза в ветеринарии являются: метод последовательных промываний (седиментация), нативного мазка (Като-Миура, 1962), комбинированный метод (Котельников, Вареничев, 1992) и по Горячеву (1949).
В современных условиях для диагностики описторхоза плотоядных нами апробирован и предлагается метод с помощью пробоподготовок (пробирок концентраторов) для паразитологических исследований «Parasep».
Метод последовательного промывания. Пробу фекалий массой 3 г кладут в стакан, вливают небольшое количество воды и палочкой размешивают до получения жидкой кашицеобразной массы, затем добавляют воду до объема 50 мл при постоянном размешивании. Смесь фильтруют, пропуская через ситечко в другой стакан и отстаивают 5 мин до образования осадка. Затем верхний слой жидкости сливают до осадка, а к осадку добавляют такое же количество воды и отстаивают еще 5 мин, после чего жидкость сливают до осадка. Такие операции повторяют до тех пор, пока осадок не будет достаточно промыт, т. е. пока надосадочный слой воды не будет прозрачным. Последний слой сливают или отсасывают спринцовкой, осадок поочередно разливают на предметные стекла и исследуют под микроскопом.
Метод флотации. Применяют насыщенный раствор гипосульфита натрия (1750 г на 1 л кипящей воды) по Щербовичу, с нитратом натрия (1 кг на 1 л воды) - по Калантаряну.
Метод Като-Миура (1962). Гидрофильный целлофан нарезают полосками размером 22 на 30 мм и замачивают на сутки в смеси, состоящей из 500 мл 50%-ного глицерина, 500 мл 6%-ного фенола и 6 мл 3%-ного раствора малахитовой зелени. Кусочек фекалий (массой 0,5 г) помещают на предметное
стекло, покрывают вымоченным целлофаном и равномерно раздавливают резиновой пробкой. После 2-часовой экспозиции препараты, приготовленные таким способом, микроскопируют. При этом методе глицерин просветляет толстый слой фекалий, фенол обеззараживает, а малахитовая зелень создает благоприятный фон для глаз.
Комбинированный метод по Котельникову, Вареничеву (1991). Готовят один из флотационных растворов: йодида калия с плотностью 1,71 (1200 г соли на 1 л воды) или цинка хлорида с плотностью 1,78 (из расчета 1500 г соли на 1 л воды). Для этого растворяют в эмалированной (!) посуде хлорид цинка без подогревания, а йодид калия с подогреванием при помешивании. Пробу фекалий массой 3 г от плотоядных помещают в стаканчик на 50 мл, добавляют 0,5-1 г карбоната натрия (для обезжиривания), размешивают стеклянной палочкой. Затем наливают небольшое количество воды и продолжают размешивать. По мере размешивания добавляют воду порциями до 50 мл. После этого взвесь при постоянном помешивании фильтруют через ситечко в другой стаканчик. Из последнего после 3-5 мин отстаивания верхний слой сливают, добавляют воды 50 мл и отстаивают 3-5мин. Если осадок большой, то промывание повторяют еще раз. Затем надосадочную жидкость сливают, оставляя количество воды с осадком в таком объеме, чтобы взвесь вместилась в стандартную центрифужную пробирку (со шлифованными краями). Наполненные взвесью пробирки центрифугируют при частоте вращения 1000 мин-1 1-2 мин, после чего жидкость сливают до уровня осадка, а к последнему добавляют флотационный раствор хлорида цинка или йодида калия, накрывают обезжиренными покровными стеклами и центрифугируют в том же режиме. Затем покровные стекла снимают, переносят на предметные и микроскопируют. Можно брать для микроскопии поверхностную пленку петлей диаметром 6 мм, к 5-6 каплям добавляют раствор глицерина с водой (1:1) и накрывают покровным стеклом.
Метод по Горячеву (1949). В цилиндр диаметром 2,5-3 см и высотой 1820 см наливают 80-100 мл 20-22%-ного раствора нитрата калия или насыщенного раствора хлорида натрия. 0,5 г фекалий тщательно размешивают в 20-25 мл дистиллированной воды. Осторожно процеживают в цилиндр через металлическое сито (или марлю), надетую на воронку, избегая перемешивания взвеси фекалий и раствора (конец воронки можно погружать в раствор соли на глубину 0,25-0,5 см). В результате происходит медленная диффузия солевого раствора и дистиллированной воды и взвешенных частиц фекалий. Яйца гельминтов медленно оседают на дно. Через 2-3 ч верхний слой из цилиндра отсасывают пипеткой. Оставшийся раствор центрифугируют и отстаивают в течение 15-20 ч. Осадок переносят пипеткой на предметное стекло и исследуют под микроскопом.
Метод пробоподготовок (пробирок концентраторов) для паразитологи-ческих исследований «Рагаивр». Основан на концентрировании яиц опистор-хисов методом центрифугирования и фильтрации через специализированный фильтр. Концентраторы представляют собой пластиковые пробирки, состоящие из нескольких компонентов: пробирка для пробы, в которую заливают эфир - формалиновая смесь и тритон, сюда же помещают образец пробы; фильтр; емкость для сбора отфильтрованного материала. Пробу фекалий массой 1 г с помощью специального шпателя, входящего в конструкцию пробирки, помещают в камеру системы «Рага8ер» с буферной смесью (10 % формалин, 1 мл этилацетата, 1 капля сурфактанта) и тщательно перемешивают, используя шпатель. Затем присоединяется камера с образцом к пробирке, которая закручивается до срабатывания замка, предупреждающего проливание содержимого. Пробирку тщательно встряхивают до получения равномерно окрашенной взвеси. В таком виде образец можно хранить до 24 ч при комнатной температуре. Структура и форма исследуемых объектов при этом не
нарушается. Пробирку переворачивают, помещают в центрифугу и центрифугируют при частоте вращения 2200-2500 мин-1 в течение 5 мин, при этом содержимое пробирки распределяется на три слоя: в верхнем - этилацетат с адсорбированными частицами жира, второй слой - формалин и третий - осадок с содержанием яиц описторхисов. Держа пробирку строго вертикально, аккуратно отсоединяют камеру, удаляют пробку из этилацетата и жировых частиц и с помощью пипетки отбирают осадок и микроскопируют; для просветления осадка иногда можно добавлять каплю дистиллированной воды или физраствора.
Яйца описторхисов мелкие, размером 0,01-0,02 х 0,02-0,03 мм, желтоватые, с крышечкой и утолщением скорлупы на одном из концов.
Рыбу исследуют на зараженность метацеркариями. Метацеркарии имеют длину 0,3, ширину 0,24 мм. Пробы для исследований берут из спинных мышц рыбы с помощью острого скальпеля размером 2-3 мм помещают на компрессорий, тщательно раздавливают и исследуют под малым увеличением микроскопа. По упрощенному методу взятые пробы сдавливают между двумя предметными стеклами с 2-3 каплями воды и просматривают под бинокулярной лупой при увеличении х 14-28. С успехом можно использовать метод переваривания мышц в искусственном желудочном соке по Глазкову и др. (1979). При этом мышечную ткань рыбы с подкожной жировой клетчаткой отделяют от костей, тщательно измельчают или перемалывают в мясорубке. Навески по 10 г помещают в чашки с плоским дном и заливают в соотношении 1 : 10 с искусственным желудочным соком (11 мл концентрированной соляной кислоты, 7 г пепсина, 9 г поваренной соли на 1 л воды). Затем помещают в термостат на 3 ч при температуре 36-37 °С, после чего фильтруют в стеклянные цилиндры через металлический фильтр с размером ячеек 1 х 1 мм. Через 15-20 мин верхний слой желудочного сока с переваренной мышечной тканью сливают, а осевших личинок переносят на часовое стекло и подсчитывают под бинокуляром при малом увеличении. Хорошие результаты нами получены при использовании для переваривания мышц рыбы аппарата ВИГИС - АВТЛ-6.
Лечение. Учитывая интенсивность инвазии и тяжесть патологического процесса к лечению описторхоза плотоядных животных следует подходить комплексно. Основу комплексного подхода составляет этиотропное лечение путем назначения антигельминтиков. Согласно инструкции о мероприятиях по предупреждению и ликвидации заболеваний животных гельминтозами для дегельминтизации кошек, собак, песцов, лисиц и соболей применяют полит-рем и празиквантел (азинокс, бильтрицид). Политрем назначают в дозе 150 мг/кг массы однократно в смеси с небольшим количеством мясного или рыбного фарша индивидуально после 12-часового голодания. Празиквантел применяют в дозе 100 мг/кг массы однократно индивидуально собакам в смеси с небольшим количеством мясного фарша после 12-часового голодания, кошкам - через зонд с небольшим количеством воды.
Нами получены хорошие результаты от комбинированного назначения азинокса и политрема при экспериментальном описторхозе хомяков и спонтанной инвазии кошек. Обнадеживающие результаты показало назначение комбинированного препарата фебтал-комбо (альбендазол+азинокс) при экспериментальном описторхозе хомяков и кошек из расчета 4 мл/кг массы однократно.
Одновременно с назначением антигельминтных препаратов следует проводить симптоматическое и патогенетическое лечение, а завершающим является диетотерапия.
Симптоматическое лечение. Это устранение завала кишечника, очистительные клизмы, противорвотные и усиливающее моторику пищеварительного канала, например, метоклопрамид. Необходимо проводить регидратацию
5%-ным раствором глюкозы, 0,9%-ным раствором хлорида натрия, раствором Рингера-Локка из расчета 5-10 мл/кг массы и применять десенсибилизирующие (антигистаминные) препараты.
Патогенетическая терапия. Это прежде всего применение желчегонных (цветки бессмертника, кукурузные рыльца) препаратов, витаминотерапии (витамины группы В, жирорастворимые А, D, Е, К.), противовоспалительных, гепатопротекторных средств, ферментных препаратов, антибиотиков широкого спектра действия и лекарственных средств, профилактирую-щих осложнения.
Диетотерапия. Корма Prescription Diet l/d фирмы Hil"s и Renal фирмы Роял Канин и др. с умеренным содержанием высоко доступных протеинов с добавлением аргинина, витамина К и цинка, содержащих контролируемый уровень меди, железа, натрия и витаминов С и Е, позволяют снизить нагрузку на печень, улучшают ее функции и замедляют дальнейшее повреждение печени. Контроль нутриентов, влияющих на образование амиака и других токсинов, профилактирует развитие гепатоэнцефалопатии. Добавление L-карнитина нормализует метаболизм жиров. Все эти факторы способствуют более быстрому восстановлению печени и других систем организма после перенесенного заболевания.
Профилактика и меры борьбы. Установлено, что животные и человек могут несколько лет быть носителями паразита и выделять с фекалиями яйца гельминта в окружающую среду. Поэтому точная и своевременная диагностика, выявление носителей, адекватное качественное лечение больных, а также охрана и обеззараживание воды водоемов являются важными профилактическими мерами в отношении описторхоза. Однако основное значение в профилактике заражения описторхозом имеет исключение из питания сырой, недостаточно просоленной или недостаточно термически обработанной рыбы. В хозяйствах, питомниках, клубах, расположенных в неблагополучной по описторхозу зоне, осуществляют мероприятия по предупреждению заражения животных: санитарно-эпизоотологические, лечебно-профилактические и санитарно-просветительная работа.
Рыбу из неблагополучных по описторхозу водоемов скармливают животным только в кусках массой не более 100 г, проваренных 30 мин после закипания воды или промороженных при температуре -10 °С в течение четырех недель, при -20 °С - 72 ч, -28 °С - 32, -35 °С - 14, -40 °С - 7 ч. При засоле рыбы температура рассола должна быть 16-20 °С, а рыба должна находиться в нем не менее 14 сут. Для засола на 10 кг рыбы следует использовать 2,7-2,9 кг поваренной соли. Особенно тщательно эти мероприятия следует соблюдать в Западной Сибири в бассейне рек Обь, Иртыш и их притоков. В этих районах из рациона плотоядных животных необходимо полностью исключить не обезвреженную пресноводную рыбу.
Профилактические дегельминтизации взрослых лисиц и песцов проводят за 1 мес до гона и после отсадки приплода, щенков - с 3-месячного возраста; лечебную дегельминтизацию - при наличии показаний. Беременных самок дегельминтизируют не позднее, чем за 1 мес до щенения. Начиная с месячного возраста плотоядных животных приучают к специально приготовленным готовым рационам для мелких животных (сухие, влажные), а также следует переводить взрослых животных на готовые рационы. Необходимо организовать утилизацию трупов плотоядных животных, периодически проводить диагностические исследования пушных зверей, собак, кошек и при необходимости их дегельминтизировать.
