CC BY
16
Медицинская Иммунология Medical Immunology (Russia)/Meditsinskaya Immunologiya
«Дни иммунологии в СПб 2017» Immunology Days in St. Petersburg 2017
2-3 = 0,010). Изменение показателей функциональной активности эндотелия, выявленное у новорожденных основных групп, сопровождалось нарушением синтеза про-воспалительных цитокинов, что может быть обусловлено, как проникновением активированных моноцитов матери в кровоток плода, так и развитием фетального воспалительного ответа. Повышение уровня TNFa, наблюдаемое у всех новорожденных от женщин с гипертензивной патологией (48,27 (24,81-49,58), 33,04 (24,2-39,9) против 21,41 (13,97-25,18) пг/мл в 3-й группе, р = 0,0001), сопровождалось при развитии у матери преэклампсии увеличением концентрации IL-1ß - 1,85 (0,93-3,44) против 0,86 (0,671,14) пг/мл, Р1 2 2 3 = 0,010; CRP - 0,23 (0,10-0,25) против 0,10 (0,05-0,11) мг/л, Р1 2 2 3 = 0,010; IL-4 - (1,74 (1,57-3,8) против 1,55 (1,48-4,86) пг/мл, Р12 = 0,010, Р13 = 0,017), IL-10 (4,53 (3,96-9,14) против 4,06 (3,82-4,92) пг/мл, Р23 = 0,010). Полученные результаты указывают на возможный переход цитокинов через плаценту и проникновении в фетальную циркуляцию и наоборот. У детей 1-й группы значимых различий в содержании данных медиаторов не обнаружено. Выявленные у детей от женщин с преэклампсией положительные корреляционные связи между CRP и NO2- — эндогенным, а также эндотели-ном-1, отрицательные корреляции между гомоцистеином и NO2- — общим и NO2- эндогенным, позволяют предположить, что одним из неблагоприятных факторов развития эндотелиопатии у этих детей является оксидативный стресс. Таким образом, повышение артериального давления во время беременности, способствует активации эндотелиальных клеток у плода, более выраженной при наличии у матери преэклампсии, что обуславливает высокую частоту развития перинатальной патологии у новорожденных. Определение уровня гомоцистеина и CRP в пуповинной крови может служить дополнительным прогностическим критерием развития патологических состояний у детей в раннем периоде адаптации.
ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ И ПРОГНОСТИЧЕСКИЕ КРИТЕРИИ ИНФЕКЦИОННО-ВОСПАЛИТЕЛЬНОЙ ПАТОЛОГИИ, ЕЕ СТЕПЕНИ ТЯЖЕСТИ И ИСХОДА У ГЛУБОКОНЕДОНОШЕННЫХ НОВОРОЖДЕННЫХ
Сотникова Н.Ю., Турова А.В., Чаша Т.В.
ФГБУ«Ивановский научно-исследовательский институт материнства и детства им. В.Н. Городкова» Министерства здравоохранения РФ, Иваново, Россия
Введение. Проблема выхаживания глубоко-недоношенных новорожденных во многом определяется неэффективностью реакций врожденного иммунитета.Недо-ношенные дети крайне чувствительны к инфекции, что является важным фактором, определяющим их высокую смертность и заболеваемость. Все это требует разработки-новых критериев оценки состояния иммунной системы ребенка, позволяющих в самые первые дни жизни прогнозировать развитие инфекционно-воспалительной патологии (ИВП), степень ее тяжести и исход.
Цель. Выявить наиболее значимые иммунологические критерии ранней диагностики ИВП, прогностические критерии ее тяжести и исхода заболевания у глубоконедоношенных новорожденных с очень низкой (ОНМТ от 500 до 1000 г) и экстремально-низкой (ЭНМТ менее 500 г) массой тела при рождении.
Материалы и методы. Проводилось обследование 74 недоношенных новорожденных 32 недель гестации
с ОНМТ и ЭНМТ Из них 18 детей не имели ИВП, у 56 детей имели ИВП (27 — легкой/средней степени, 29 тяжелой степени, 50 — с локальной ИВП, 6 — с генерализованной ИВП). Выздоровели 38 детей, 10 детей умерли и у 8 детей развилась бронхо-легочная дисплазия (БЛД).
В 1-2 день жизни определяли: показатели общего анализа крови; сывороточный уровень прокальцитони-на (ПКТ) и С-реактивного белка (СРБ). Методом проточной цитофлуориметрии в периферической крови в нейтрофильном(Нф) (CD14-CD45+) и моноцитарном (Мо) (CD14+CD45+) гейтах определяли относительное содержание TLR2+, TLR4+, CD16+, CD11b+, HLA-DR+ клеток, в макрофагальном гейте (Мф) (CD14+CD45+) фарингеального аспирата — относительное содержание TLR-2+, TLR-4+ клеток.
Результаты. Для всех новорожденных с ИВП независимо от степени тяжести и исхода ИВП было характерным снижение уровня сегменто-ядерных Нф, TLR4+ Мо, TLR+ и TLR4+ Мф, максимально выраженное в группе умерших детей, и не проявляющееся при генерализованной ИВП. В общей группе детей с ИВП отмечалось повышение уровня моноцитов, ПКТ и СРБ в крови, а также снижение содержания CD16+ Нф. При летальном исходе ИВП имелось снижение содержания HLA-DR+ Мо, TLR4+ Мо относительно показателей выздоровевших детей. При развившейся впоследствии БЛД исследуемые показатели в периферической крови в наименьшей степени отличались от таковых в группе без ИВП. При тяжелой степени ИВП отмечались наибольшие средние значения содержания ПКТ и СРБ. Корреляционный анализ показал, что при благоприятном исходе ИВП имелось максимальное количество положительных связей между исследуемыми показателями (22) по сравнению с группой умерших детей (8). ROC-анализ выявил наиболее значимые критерии ранней диагностики ИВП у новорожденных с ОНМТ и ЭНМТ относительное содержание < 75% и TLR4+ < 73% Мф в фарингеальном аспирате (АиС = 0,710 и АиС = 0,704), TLR4+ < 85% Мов крови (АиС = 0,704). К прогностическим критериям неблагоприятного (летального) исхода ИВП следует отнести содержание HLA-DR+ < 75% и TLR4+ < 72% Мо в крови (АиС = 0,946 и АиС = 0,765).
Заключение. Таким образом, низкая патоген-распоз-нающая способность фагоцитов периферической крови и фарингеального аспирата ассоциируется в группе глубоко-недоношенных новорожденных с развитием ИВП, что, вероятно, определяет нарушение каскада инфекционно-воспалительных реакций, направленных на блокирование жизнедеятельности, дезинтеграцию и удаление патогена из организма. Неблагоприятный исход ИВП ассоциируется с максимально выраженным угнетением этой функции периферических и фаринге-альныхфагоцитов.
РЕГУЛЯЦИЯ ПРОЛИФЕРАТИВНОЙ АКТИВНОСТИ КЛЕТОК ЛЕЙОМИОМЫ МАТКИ
Сотникова Н.Ю., Воронин Д.Н., Кирсанов А.Н.
ФГБУ «Ивановский НИИ материнства и детстваим.В.Н. Городкова» Министерства здравоохранения РФ, Иваново, Россия
Введение. Лейомиома матки является одним из наиболее распространённых гинекологических заболеваний. Она представляет собой доброкачественную гормональ-
2017, Т. 19, Специальный выпуск 2017, Vol. 19, Special Issue
Иммунология репродукции Immunology of reproduction
но-зависимую опухоль, которая развивается в результате трансформации клеток миометрия и состоит из гладко-мышечных клеток и большого количества внеклеточного матрикса. Основную роль в механизмах развития и роста миоматозных узлов в настоящее время отводят половым стероидным гормонам, действие которых на клетки опухоли происходит опосредованно через аутокринную/ паракринную индукцию выработки факторов роста, что сопровождается активацией различных внутриклеточных сигнальных путей. Проведение активирующих сигналов от половых стероидных гормонов и факторов роста в клетке происходит преимущественно через PI3K/Akt-mTOR и MAPK/ERK киназы. Однако особенности активации этих киназ в ткани миоматозных узлов различных размеров и с различной интенсивностью клеточной пролиферации не изучены. Особый интерес представляет уточнение характера регуляции активности TGF-ß в ткани опухоли, поскольку этому фактору роста отводят ведущую роль в патогенезе лейомиомы матки.
Цель и задачи. Установить роль внутриклеточных PI3K/AKT и MAPK/ERK сигнальных путей в регуляции пролиферативной активности клеток лейомиомы матки и в синтезе в ткани опухоли трансформирующего фактора роста.
Материалы и методы. Был проведен анализ биоптатов ткани неизмененного миометрия (n = 14) и миоматозных узлов (n = 18), полученных в ходе проведения операции по удалению лейомиомы матки лапароскопическим доступом. Уровень экспрессии мРНК маркера клеточной пролиферации Ki67, Akt, ERK и двух изоформ TGF-ß — TGF-ß1 и TGF-ß2 в ткани миометрия и миоматозных узлов оценивали методом ОТ-ПЦР в режиме реального времени.
Результаты. Было установлено, что в миоматозных узлах усиливался синтез как Akt, так и ERK по сравнению с неизменённым миометрием. Однако при дифференцированном анализе данных в зависимости от размера опухоли и от уровня экспрессии Ki-67 мы не выявили достоверных различий в синтезе Akt. При этом экспрессия мРНК ERK была значительно повышена в миоматозных узлах больших размеров (6см и более) и достигала самых высоких значений в пролиферирующих Ю67-положительных узлах большого размера. Анализ данных, характеризующих синтез TGF-ß в ткани опухоли показал, что в мио-матозных узлах отмечалась лишь выраженная тенденция к усилению экспрессии мРНК как TGF-beta-1, так и TGF-beta-2 изоформ. Причем в узлах больших размеров синтез TGF-beta2 был достоверно повышен по сравнению с таковым в узлах меньших размеров. В тех же случаях, когда лей-омиома характеризовалась усилением пролиферативной активности, мы отмечали повышение экспрессии в ткани опухоли мРНК обеих изученных изоформ TGF-beta. Известно, что трансформирующий фактор роста не только является стимулятором клеточной пролиферации и васку-ляризации в ткани опухоли, но и обладает выраженным иммуносупрессорным действием. Усиление его выработки способствует формированию специфического микроокружения, благоприятного для роста опухолевых клеток. Следует отметить, что направленность синтеза ERK практически всегда совпадала с особенностями синтеза в опухоли TGF-ß. Так, в узлах больших размеров мы наблюдали одновременное усиление экспрессии мРНКERK и TGF-ß2, а в Ki67+ лейомиомах — повышение экспрессии мРНКERK, TGF-ß1 и TGF-ß2. По-видимому, ауто-кринная петля TGF-ß, реализующаяся через активацию MAPK/ERK сигнального пути, делает пролиферирующие
миоматозные узлы менее зависимыми от половых стероидных гормонов.
Заключение. Таким образом, усиление пролиферации клеток лейомиомы матки ассоциировано с активацией внутриклеточного MAPK/ERK сигнального пути и повышением синтеза TGF-P1 и TGF-P2 в ткани опухоли.
Работа поддержана грантом РФФИ 15-04-05042.
НАСТУПЛЕНИЕ БЕРЕМЕННОСТИ ПОСЛЕ ПРЕДГЕСТАЦИОННОЙ АЛЛОИММУНИЗАЦИИ У ЖЕНЩИН С ПРИВЫЧНЫМ ВЫКИДЫШЕМ И ЦИТОКИНОВЫЙ ПРОФИЛЬ КЛЕТОК ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ
Степанова Е.О., Николаева М.А., Голубева Е.Л., Тетруашвили Н.К., Кречетова Л.В.
ФГБУ«Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. В.И. Кулакова» Министерства здравоохранения РФ, Москва, Россия
Иммуноцитотерапия (ИЦТ) — процедура иммунизации женщин лейкоцитами их полового партнера с целью индукции толерантности иммунной системы матери к отцовским антигенам плода — широко применяется как обоснованный и эффективный подход предотвращения потерь беременности у пациенток с привычным выкидышем в анамнезе. Принципиальную роль в развитии иммунологической толерантности играет цитокиновый профиль им-мунокомпетентных клеток. В ряде исследований показано, что физиологическая беременность развивается на фоне противовоспалительных !Ъ2-реакций. Иммуномодули-рующий эффект ИЦТ также связан с !Ь2-поляризацией иммунного ответа. В то же время, согласно современным представлениям, имплантация и ранние стадии первого триместра физиологической беременности протекают на фоне провоспалительных Thl-реакций, а ТЪ2-фон формируется позднее. Поэтому нельзя исключить, что противовоспалительные реакции, формируемые при ИЦТ, могут препятствовать наступлению беременности. В связи с этим особую актуальность приобретает оценка влияния ТЫДЪ2-фона на вероятность наступления беременности при проведении предгестационной ИЦТ Для изучения воздействия различных факторов на имплантацию и ранние стадии беременности широко используется такой показатель, как длительность ожидания наступления планируемой беременности (TTP, time to pregnancy).
Целью настоящего исследования явилась оценка взаимосвязи между сформированным в результате предге-стационной ИЦТ балансом Thl- и ^2-цитокинов, про-дуцируемыхклетками периферической крови женщин, и длительностью ожидания наступления беременности после ИЦТ.
В исследование было включено 37 супружеских пар с диагнозом привычный выкидыш. Всем женщинам перед планируемой беременностью проводилась иммунизация лейкоцитами их полового партнера (ИЦТ). После лечения регистрировали наступление беременности в течение 12 менструальных циклов. Продукцию Thl (IFNy, IL-2, IL-6, IL-8, IL-12, IL-18, TNFa, IL-1P) и Th2 (IL-4, IL-5, IL-10) цитокинов после митогенной активации клеток цельной крови женщин с использованием наборов «Цитокин-Стимул-Бест» («Вектор-Бест») оценивали методом проточной цитофлуорометрии с помощью мультиплексного анализа с применением стандартных наборов FlowCytomix™ (eBioscience). Параметр HP определяли
